目的:探讨分泌模块化钙结合蛋白-1(SMOC1)在人前列腺中的表达差异，以及SMOC1对人前列腺细胞增殖、凋亡和纤维化的影响。方法:基于生物信息学分析，利用公共数据库验证SMOC1在人增生前列腺和正常前列腺中的表达差异；利用小干扰RNA(siRNA)干扰SMOC1的表达后检测细胞增殖、周期、凋亡与纤维化。组间比较采用 t检验。 结果:增生前列腺组织中SMOC1的相对表达量明显高于正常组(6.551±0.201比1.018±0.026， t＝19.035， P<0.001)；si-SMOC1组BPH-1、WPMY-1细胞的增殖明显低于对照组(1.087±0.042比1.787±0.051， t＝－18.348， P<0.001；0.942±0.066比1.315±0.063， t＝－7.097， P<0.01)，G 0/G 1期细胞比例显著高于对照组(68.310±2.501比61.017±1.897， t＝5.411， P<0.01；67.673±2.357比58.350±2.027， t＝5.195， P<0.01)，而早期凋亡和晚期凋亡细胞比例与对照组差异无统计学意义(3.950±0.628比1.623±0.359， t＝12.897， P>0.05；5.040±0.536比3.100±0.478， t＝4.679， P>0.05)。此外，si-SMOC1组细胞周期、纤维化相关标志物蛋白表达水平明显低于对照组，而凋亡相关标志物蛋白表达水平与对照组差异无统计学意义。 结论:SMOC1在增生前列腺组织中表达明显上调，而且能够促进前列腺细胞的增殖以及纤维化。

目的:探讨贝美前列素（BimP）对小鼠背部重构毛囊毛发生长的影响。方法:自1日龄的新生C57BL/6J鼠皮肤分离培养表皮细胞和真皮细胞，用硅胶小室法在Balb/c-nu小鼠背部重构毛囊，术后将18只Balb/c-nu小鼠随机分为BimP组、米诺地尔组和对照组，每组各6只；2周后在小鼠背部的细胞移植区分别外涂0.03% BimP 100 μl、2%的米诺地尔溶液100 μl和生理盐水100 μl，每天涂药1次，连续2周；观察局部毛发生长情况；取小鼠背部移植区皮肤的新生毛发测量其长度；组织学观察新生毛囊的数目与生长周期；用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测Wnt家族分泌蛋白3a（Wnt3a）、淋巴细胞增强因子（LEF1）、β-环连蛋白和Frizzled跨膜受体蛋白7（Frizzled7）mRNA和蛋白表达水平。免疫荧光检测毛囊细胞β-环连蛋白的分布与表达。结果:BimP组毛干长度高于对照组［（0.57±0.07）比（0.36±0.05） cm， P<0.01］，BimP组与米诺地尔组差异无统计学意义；BimP组毛囊细胞Wnt3a （2.73±0.17比1.00±0.14， P<0.01）、LEF1（1.71±0.12比1.00±0.19， P<0.01）、β-环连蛋白（2.37±0.21比1.00±0.11， P<0.01）和Frizzled7（2.62±0.15比1.00±0.18， P<0.01） mRNA表达水平均高于对照组；Western印迹结果相同，BimP组毛囊细胞Wnt3a （1.44±0.21比1.00±0.13， P<0.05）、LEF1 （1.36±0.15比1.00±0.09， P<0.05）、β-环连蛋白 （1.60±0.13比1.00±0.16， P<0.01）和Frizzled7 （1.52±0.15比1.00±0.21， P<0.05）蛋白表达水平均高于对照组。免疫荧光染色发现β-环连蛋白在BimP组和米诺地尔组新生毛囊的毛球细胞和皮脂腺细胞强表达，而对照组几乎未见荧光染色存在。 结论:BimP可通过激活经典Wnt/β-环连蛋白信号通路促进小鼠重构毛囊的毛发生长。

目的:探究肿瘤促进基因NOC2L在上皮-间充质转化（EMT）过程中对前列腺癌细胞迁移的影响及分子机制。方法:采用数据库肿瘤基因组图谱（TCGA）、Cioprotal等分析NOC2L差异表达；Transwell、细胞计数试剂盒（CCK-8）、平板克隆等验证分子功能；蛋白质印迹法（Western blot）、聚合酶链反应（PCR）等探究分子机制。两组间比较采用独立样本 t检验，多组之间的比较采用单因素方差分析。 结果:TCGA：相较于正常前列腺组织，前列腺癌组织中NOC2L基因的表达量相对升高（前列腺癌组织与正常前列腺组织：5.83比5.43， P>0.05）；HPA：高级别前列腺癌中NOC2L含量更高（相对染色评分：高级别6.828±0.669比3.909±0.222， t＝4.15， P<0.05）。敲低NOC2L抑制细胞迁移、增殖能力，敲低NOC2L后克隆形成数低于对照组（PC3：542.00±35.23比254.00±11.55， t＝7.77， P<0.05; RM1：1 406.00±15.34比754.00±75.92， t＝8.41， P<0.05）；CCK-8培养吸光度低于对照组（PC3：1.657±0.028比0.972±0.014， t＝21.86， P<0.05; RM1：1.643±0.007比2.931±0.105， t＝12.20， P<0.05）；细胞迁移明显低于对照组（PC3：704.00±26.12比152.80±6.08， t＝20.55， P<0.05; RM1：704.20±37.56比208.40±7.26， t＝12.96， P<0.05）。过表达ZEB1在转录水平抑制NOC2L表达（PC3：1.001±0.028比0.377±0.018， t＝18.62， P<0.05; RM1：1.000±0.012比0.529±0.011， t＝28.42， P<0.05），NOC2L在ZEB1表达升高情况下功能逆转抑制细胞迁移，与ZEB1组比较，过表达NOC2L后迁移细胞减少（PC3：899.80±31.17比438.00±12.55， t＝13.74， P<0.05; RM1：986.80±65.83比466.40±9.67， t＝7.82， P<0.05）。 结论:NOC2L促进细胞增殖及迁移，在EMT发生时NOC2L抑制CDH1功能减弱，通过抑制VIM和CDH2发挥抑制细胞迁移作用。

目的:探究微小RNA(miRNA，miR)-143通过调控Kras的表达影响前列腺癌PC-3细胞的增殖与迁移的机制。方法:选用购自美国典型培养物保藏中心细胞株PC-3，保持在补充有10%胎牛血清(Hyclone)的F-12培养基(Hyclone)中。细胞在5%CO 2和37 ℃的湿润环境下生长。根据实验需求对细胞进行实验分组，随机分为PC-3转染组、PC-3对照组。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)试剂盒对细胞活力进行测定。通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞中miR-143与Kras mRNA表达；通过蛋白质印迹反应检测各组细胞因子CD133、Oct4、Klf4的蛋白表达情况。组间比较采用单因素方差分析或者重复测量的方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:RT-qPCR分析各组miR-143 mRA和Kras mRNA表达为：miR-143 mRNA PC-3对照组(1.06±0.02)较PC-3转染组(3.17±0.23)降低；Kras mRNA PC-3对照组(2.75±0.11)较PC-3转染组(1.23±0.03)升高，差异有统计学意义( t＝5.167， P<0.05)。蛋白印迹检测发现CD133、Oct4、Klf4的蛋白表达PC-3对照组(2.67±0.11、3.18±0.23、2.84±0.26)较PC-3转染组(1.15±0.03、1.26±0.14、1.18±0.15)升高，差异有统计学意义( t＝4.862， P<0.05)。细胞活力检测发现PC-3对照组(1.62±0.14)较PC-3转染组(0.58±0.02)细胞活力值升高，差异有统计学意义( t＝4.154， P<0.05)。 结论:miR-143可通过抑制Kras的基因表达来控制前列腺PC-3的增殖及迁移状况，miR-143的高表达可有效抑制前列腺癌细胞的增殖及侵袭。

目的:探讨新型前列腺尿道悬吊术(PUL)植入物的生物相容性。方法:人前列腺增生细胞系(BPH-1)分别培养于植入物第一锚钉、第二锚钉及缝线浸提液作为实验组，细胞培养于完全培养基作为对照组，培养1、3、5 d，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力，评估植入物细胞毒性；鬼笔环肽染色，评估植入物对细胞骨架的影响。BPH-1细胞与第一锚钉、第二锚钉共培养5 d，于扫描电子显微镜(SEM)下观察前列腺细胞在植入物上的黏附状态。Sprague Dawley(SD)大鼠20只(8~10周龄，体重210~250 g)，购自湖北省疾病预防控制中心，大鼠背部肌肉分别植入第一锚钉、第二锚钉及缝线，对照组行假手术仅分离肌肉，观察、监测12周大鼠临床反应及体重变化，评估植入物全身毒性。多组间比较采用单因素方差分析。结果:CCK-8细胞毒性实验显示，第一锚钉组第1、3、5天时BPH-1细胞相对存活率分别为94.49%、95.91%、97.55%；第二锚钉组分别为94.76%、95.16%、98.37%；缝线组分别为95.24%、96.99%、98.74%。SEM结果显示，BPH-1细胞在第一锚钉及第二锚钉上正常黏附、生长；鬼笔环肽染色显示，第一锚钉组、第二锚钉组及缝线组细胞骨架阳性表达面积分别为(20.85±3.06)%、(21.06±2.54)%、(21.27±2.63)%与对照组[(21.40±2.21)%]比较差异无统计学意义( F＝0.041， P>0.05)，植入物对细胞骨架分布无影响。全身毒性实验结果显示，大鼠一般状态良好，无异常临床反应，对照组，第一锚钉组、第二锚钉组及缝线组术后12周体重分别为(574.2±31.1)、(567.8±41.6)、(569.2±34.0)、(571.0±31.6) g，组间差异无统计学意义( F＝0.0314， P>0.05)，植入物无大鼠全身毒性作用。 结论:新型PUL植入物是一种无毒性，与前列腺细胞相容性好的材料。

目的 探究下调神经钙黏蛋白(N-cadherin)对前列腺癌细胞药物敏感性、间质转化及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/表皮生长因子受体(EGFR)表达水平的作用机制.方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测正常前列腺细胞及4种前列腺癌细胞系中N-cadherin mRNA表达,选择N-cadherin表达最高的细胞系,将其分为前列腺癌细胞(空白)组、前列腺癌细胞+N-cadherin shRNA-CTR(阴性对照)组、前列腺癌细胞+N-cadherin shRNA(N-cadherin)组,RT-qPCR法检测N-cadherinm RNA表达,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测药物敏感性,Western印迹法检测间质转化相关蛋白及AMPK/EG-FR蛋白表达.结果 前列腺癌细胞系中N-cadherin mRNA表达量均显著高于正常前列腺细胞系LNCaP,其中DU145的N-cadherin mRNA表达量最高(P＜0.05),因此选取DU145作为此次实验细胞;与阴性对照组相比,空白组N-cadherin mRNA表达、细胞对两种药物的敏感性、E-cadherin、AMPK、EGFR蛋白表达无明显差异(P＞0.05);与阴性对照组组相比,N-cadherin组N-cadherin mRNA表达、AMPK、EGFR蛋白表达明显降低(P＜0.05),细胞对两种药物的敏感性、E-cadherin蛋白表达明显升高(P＜0.05).结论 下调N-cadherin可显著提高前列腺癌细胞药物敏感性,抑制其间质转化,并抑制AMPK/EGFR表达水平.

目的 探讨着丝粒相关蛋白(ZWINT)表达水平对前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响.方法 通过生物信息学分析ZWINT在前列腺癌组织中的表达水平以及与预后相关性,并进一步在正常前列腺细胞(RWPE-1)以及前列腺癌细胞系(LNcap、PC3及DU145)中验证其表达差异性.在LNCap及PC3细胞中分别构建ZWINT敲减组(sh-ZWINT),使用CCK-8测定sh-ZWINT组与阴性对照组之间的细胞增殖能力.伤口愈合实验以及Transwell实验用于分析各组细胞迁移能力.结果 相比于癌旁组织及RWPE-1,ZWINT在前列腺癌细胞系中过表达.在LNcap及PC3细胞中,敲减ZWINT可以显著减少其增殖活力以及迁移侵袭数量(P＜0.05).结论 ZWINT在前列腺癌组织中显著上调,敲除ZWINT可以显著抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移侵袭,有望成为前列腺癌预后的潜在生物标志物.

目的 探讨长链非编码RNA(lncR)HOXA-AS3和微小RNA-29a(miR-29a)对前列腺癌(PCa)细胞凋亡、自噬的影响.方法 体外培养人PCa细胞(DU-145、LNCaP、C4-2B)和人正常前列腺细胞RWPE-1,采用RT-qPCR法检测细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达.应用双荧光素酶报告基因实验验证lncR-HOXA-AS3和miR-29a之间的靶向调控关系.取对数生长期LNCaP细胞,分为si-NC组、si-HOXA-AS3 组、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC组和si-HOXA-AS3+ anti-miR-29a 组,利用脂质体转染法分别将 si-NC、si-HOXA-AS3、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC、si-HOXA-AS3+ anti-miR-29a转染至各组LNCaP细胞,应用RT-qPCR法检测各组细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达,应用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,应用Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3及自噬相关蛋白LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、Beclin 1表达.结果 与正常前列腺细胞相比,人PCa细胞中lncR-HOXA-AS3表达均明显升高(P均<0.05),而miR-29a表达均降低(P均<0.05).双荧光素酶报告基因显示lncR-HOXA-AS3能靶向miR-29a抑制荧光素酶活性(P<0.05).与si-NC组比较,si-HOXA-AS3组LNCaP细胞lncR-HOXA-AS3表达降低(P<0.05),miR-29a表达升高(P<0.05),细胞凋亡率升高(P均<0.05),Caspase-3、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及Beclin 1蛋白表达升高(P均<0.05).与si-HOXA-AS3+anti-miR-NC组比较,si-HOXA-AS3+ anti-miR-29a组LNCaP细胞miR-29a表达下降(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Caspase-3、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及Beclin1蛋白表达下降(P均<0.05).结论 抑制lncR-HOXA-AS3表达能靶向调控miR-29a基因促进PCa细胞凋亡和自噬.

目的 探讨miR-130b-5p靶向 E26转录因子 1(E26 transformation specific-1,ETS1)对前列腺癌(prostatic cancer,PCa)细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制.方法 qRT-PCR法测定PCa组织及其癌旁组织、PCa细胞(LNCap、PC-3、DU-145)及正常前列腺细胞(RPWE-1)中miR-130b-5p基因mRNA的转录水平,Western blot法检测PCa细胞中ETS1蛋白的表达水平.生物信息学、双荧光素酶活性测定法、qRT-PCR法及Western blot法预测和验证miR-130b-5p与ETS1的靶向关系.将PC-3细胞分为对照(不作任何处理)、mimic(转染miR-130b-5p模拟物)、mimic+ETS1组(转染miR-130b-5p模拟物+pcDNA-ETS1),采用克隆形成试验和CCK-8法分别检测细胞增殖情况及活力,划痕试验和Transwell小室试验分别检测细胞迁移及侵袭情况,Western blot法检测侵袭相关蛋白及PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达水平.结果 与癌旁组织比较,PCa组织中miR-130b-5p基因mRNA的转录水平明显下降(t=12.450,P＜0.001);与RPWE-1细胞比较,LNCap、PC-3和DU-145细胞中miR-130b-5p基因mRNA的转录水平均明显下降(t分别为4.463、7.103和5.741,P分别为0.0012、＜0.001和＜0.001),ETS 1蛋白表达水平显著升高(t分别为4.850、9.325和7.723,P分别为0.008、＜0.001和0.002).miR-130-5p可以靶向负调控ETS1的表达.与对照组比较,mimic组细胞克隆率、细胞活力、细胞划痕愈合率均明显降低(t分别为11.370、10.640、15.660,P均＜0.001),侵袭细胞数明显减少(t=10.160,P＜0.001),基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9 和波形蛋白(vimentin)表达水平显著下调(t分别为15.120、9.992和12.600,P分别为＜0.001、＜0.001和0.002),钙黏蛋白(E-cadherin)表达显著升高(t=6.928,P＜0.001),磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)磷酸化水平均显著降低(t分别为7.746、8.041和11.510,P分别为0.002、0.002、＜0.001);与mimic组比较,mimic+ETS1组细胞克隆率、细胞活力、细胞划痕愈合率均明显升高(t分别为 6.988、6.642、6.660,P均＜0.001),侵袭细胞数明显增多(t=4.082,P=0.002),MMP-2、MMP-9和vimentin蛋白表达水平显著上调(t分别为10.410、6.754和8.521,P分别为0.002、0.003、0.002),E-cadherin表达水平显著下调(t=4.648,P＜0.01),PI3K、AKT和mTOR磷酸化水平均显著升高(t分别为4.850、4.323和10.840,P分别为0.008、0.008和＜0.001).结论 miR-130b-5p可靶向ETS1抑制PC-3细胞的增殖、迁移及侵袭,可能是通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路实现的.

目的 研究雀儿舌头石油醚提取物的化学成分及其抗肿瘤活性.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱等方法对雀儿舌头石油醚提取物进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构,并采用MTT法对部分单体化合物进行体外抗肿瘤活性研究.结果 从雀儿舌头中分离得到8个化合物,分别为豆甾醇(1),β-谷甾醇(2),白桦酯酸(3),粉蕊黄杨二醇(4),过氧麦角甾醇(5),二羟基蒲公英烷(6),3α-羟基木栓烷-2-酮(7),乌索酸(8).化合物5对人前列腺细胞株PC-3、胃癌细胞株MGC-803、人神经母瘤细胞株SK-N-SH的细胞增殖具有良好的抑制作用.结论 化合物5、6和8为首次从雀儿舌头中分离得到,化合物5具有一定的抗肿瘤活性.