肠道微生物群在宿主免疫系统的建立和成熟中发挥重要作用。近年来研究发现肠道微生态的失调与儿童过敏性疾病的发生和发展有关。益生菌具有改善肠道微生态失调的作用，其与防治过敏性疾病的关系是目前的研究热点。该文综述了肠道微生物群与儿童过敏性疾病、益生菌再平衡肠道微生态的免疫调节作用机制以及副干酪乳杆菌与过敏性疾病(如特应性皮炎、变应性鼻炎、支气管哮喘)的研究进展。

目的 应用静息态功能磁共振成像(rs-fMRI)-低频波动振幅(ALFF)技术分析失眠障碍(ID)患者应用益生菌干预前后局部脑区神经活动的强度变化,探讨益生菌对ID患者睡眠、情绪的改善作用.方法 2022年12月-2023年12月河南省人民医院诊治ID患者32例,随机分为观察组20例和对照组12例.观察组给予多菌种益生菌(由瑞士乳杆菌、副干酪乳杆菌、嗜热链球菌组成),对照组给予包装及规格与多菌种益生菌相同的安慰剂,均每日晚饭后温水冲服或直接口服,6 g/d,连续4周.比较2组干预前、干预4周后匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、失眠严重程度指数(ISI)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分;采集2组干预前、干预4周后rs-fMRI数据进行ALFF分析,计算ALFF 值.结果 干预前观察组 PSQI[(14.400±2.872)分]、ISI[(15.950±5.083)分]、HAMA[(10.200±8.575)分]、HAMD[(12.150±7.842 分)]评分与对照组[(13.250±2.340)、(13.917±4.316)、(14.167±9.331)、(11.833±4.529)分]比较差异均无统计学意义(t=0.492,P=0.488;t=1.484,P=0.233;t=0.746,P=0.359;t=1.856,P=0.183).观察组干预后 PSQI[(9.200±2.984)分]、ISI[(10.750±5.693)分]、HAMA[(9.465±7.300)分]、HAMD[(8.350±7.205)分]评分均低于干预前(t=7.984,P＜0.001;t=4.690,P=0.001;t=2.610,P=0.017;t=2.916,P=0.009);对照组干预后 HAMA 评分[(11.167±7.481)分]低于干预前(t=2.324,P=0.040),PSQI[(12.667±2.535)分]、ISI[(13.250±5.561)分]、HAMD[(12.250±5.011)分]评分与干预前比较差异均无统计学意义(t=1.541,P=0.152;t=0.842,P=0.417;t=-0.392,P=0.702).干预后观察组 PSQI 评分低于对照组(t=-3.358,P=0.002),ISI、HAMA、HAMD评分与对照组比较差异均无统计学意义(t=-1.213,P=0.235;t=-1.205,P=0.238;t=-1.646,P=0.110).观察组干预后右侧颞上回ALFF值低于干预前(GRF校正,体素水平P＜0.01,团块水平P＜0.05);对照组未发现干预前后ALFF值差异有统计学意义的脑区.结论 ID患者应用多菌种益生菌后睡眠质量改善,焦虑、抑郁情绪缓解,可能与多菌种益生菌改变了睡眠、情绪相关脑区神经活动的强度有关;rs-fMRI-ALFF技术可客观评估干预前后脑功能变化.

目的 探究热灭活副干酪乳酪杆菌 N1115 对原代培养的海马神经细胞发育的影响.方法 出生 24 h 内Wistar 乳鼠经断头后剥离海马组织,立即进行原代海马神经细胞分离培养.培养 7 d 后的原代海马神经细胞被随机分为空白对照组(C组)、热灭活副干酪乳杆菌N1115 干预组(N组),C组不做干预,仅加入DMEM高糖培养液,N组加入经热灭活处理的N1115 菌悬液,两组细胞于 37℃,5%CO2 的细胞孵箱分别培养 6、24 h,培养结束后MTT法检测海马神经细胞活力,RT-PCR 和 Western blot 测定原代海马神经细胞的脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、γ-氨基丁酸 A 型受体α1 亚型(γ-aminobutyric acid type A receptor α1,GABAAα1)、γ-氨基丁酸 B 型受体 1 亚型(γ-aminobutyric acid type B receptor 1,GABAb1)和 5-羟色胺受体 1A(HTR1-A-5-hydroxytryptamine receptor 1A Gene,5HT1A)的mRNA及蛋白表达情况.结果 与C组相比,干预 6、24 h时,原代海马神经细胞的细胞活率明显上升(P＜0.05);干预 6 h时BDNF基因表达量升高(P＜0.01),GABAb1 的基因表达量降低(P＜0.01).干预 6、24 h时,BDNF、5HT1A的蛋白表达量均升高(P＜0.05),GABAAα1、GABAb1 的蛋白表达量均降低(P＜0.01).结论 热灭活副干酪乳酪杆菌N1115 可以显著提高海马神经细胞的活率,增加BDNF的分泌和 5HT1A的表达,并抑制GABAAα1、GABAb1 的表达,展现出调控神经细胞发育和神经递质功能表达的潜力.

目的 对副干酪乳杆菌(L.paracasei TK1501)发酵大豆产物中的后生元进行分离提取和体内外抑菌活性进行研究,评估该后生元在治疗幽门螺旋杆菌(Hp)感染的作用.方法 L.paracasei TK1501在无氧密闭的环境内以37℃、固态发酵参数中料水比1∶1.5,接种量5×107 CFU/mL,培养发酵32 h后,通过大孔树脂XAD-16N吸附法、阳离子交换色谱法、高效液相色谱法分离纯化,对L.paracasei TK1501后生元进行稳定性及抗菌效果分析.将50只C57雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阴性对照组、低剂量组(0.02 mL/只)和高剂量组(0.1 mL/只),10只/组,连续灌胃4周.取血清观察胃部炎症因子TNF-α、IL-1β表达水平变化,取小鼠胃组织进行HE染色.结果 L.paracasei TK1501后生元易被蛋白酶降解,热稳定性好,对酸碱、有机溶剂等不利因素有较好的耐受性(P<0.05);在体外试验中,对金黄色葡萄球菌、Hp等均有较好的杀灭作用;在动物实验中,与模型组相比,L.paracasei TK1501后生元高剂量组明显改善Hp感染(P<0.05),胃部炎症因子TNF-α、IL-1β表达水平变化明显下降(P<0.05).结论 L.paracasei TK1501后生元对Hp、金黄色葡萄球菌等具有较好的抑制和杀灭效果,而在相同条件下对肠道中的正常菌群则无明显影响.

副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei是重要的益生菌之一.从贵州酸菜中分离得到的11株副干酪乳杆菌中筛选得到一株编号为GZ0613的菌株,体外表型研究显示,该菌株不溶血,对四环素等4种抗生素均表现为敏感,具有较好的耐酸耐盐能力和动物胃肠环境适应能力,对结肠癌细胞HT-29具有较强的黏附能力,对多种常见动物肠道致病菌有较强的生长抑制活性.通过葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立小鼠结肠炎模型,比较空白对照组、DSS模型组与益生菌处理组小鼠炎症因子水平和炎症浸润程度、解剖学特征及肠道菌群结构之间的差异,结果表明,益生菌处理组小鼠血清中4个炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α指标明显降低,脏器指数、结直肠长度及肠道菌群丰度和多样性更趋近于正常小鼠,说明该菌对DSS诱导的小鼠结肠炎有预防缓解作用,具有益生潜力,在动物功能性食品中具有应用前景.

聚合度 2?6 的可溶性纤维寡糖是一种具有多种生物功能的低聚糖,它能够促进双歧杆菌(Bifidobacteria)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracei)等肠道益生菌的增殖,因此对人体肠道微生态具有调节作用.本研究通过在大肠杆菌中表达纤维寡糖磷酸化酶(cellodextrin phosphorylase,CDP),构建Cc 01 菌株,并与之前构建的COS 01 菌株联合使用,建立了基于COS 01、Cc 01 的三酶级联反应催化底物葡萄糖和蔗糖合成纤维寡糖反应体系.经过优化后,最终可溶性纤维寡糖的产量达到97 g/L,纯度约为 97%,其中含有纤维二糖(16.8 wt%)、纤维三糖(49.8 wt%)、纤维四糖(16.4 wt%)、纤维五糖(11.5 wt%)和纤维六糖(5.5 wt%).在纤维寡糖对益生菌株生长促进作用的测试中,以菊粉、低聚木糖、低聚果糖为基准,干酪乳杆菌(WSH 004)、副干酪乳杆菌(WSH 005)以及嗜酸乳杆菌(WSH 006)利用纤维寡糖(聚合度2?6)为碳源进行生长后,益生菌的生物量(OD600)相比对照增加约 2 倍.该研究证明了三酶级联反应能够高效合成纤维寡糖,并表明聚合度 2?6 的纤维寡糖是一类具有促进肠道微生物增殖的功能性碳水化合物.

目的 评估益生菌粉(副干酪乳酪杆菌207-27)的毒理学安全性,为其应用提供依据.方法 通过大鼠急性经口毒性试验、细菌回复突变试验、小鼠红细胞微核试验、小鼠精母细胞染色体畸变试验及大鼠28d经口毒性试验研究益生菌粉(副干酪乳酪杆菌207-27)的安全性.结果 大鼠急性经口毒性试验结果 显示,益生菌粉(副干酪乳酪杆菌207-27)对大鼠的经口急性毒性LD50均大于15.00 g/(kg·BW),根据急性毒性分级标准属实际无毒.细菌回复突变试验、小鼠红细胞微核试验及小鼠精母细胞染色体畸变试验结果 均显示阴性.大鼠28d经口毒性试验结果表明,实验组大鼠体质量、摄食量、食物利用率、眼部状况、血液学指标、血液生化指标、脏器指数、大体及病理学检查结果 与对照组相比差异均无统计学意义.结论 益生菌粉(副干酪乳酪杆菌207-27)具有良好的毒理学安全性.

目的 在8株乳酸菌中筛选能够抗幽门螺杆菌感染的乳酸菌菌株,为后续研发治疗幽门螺杆菌感染的益生菌制剂提供依据.方法 在8株乳酸菌菌株中,通过对幽门螺杆菌抑菌率的检测及构建人胃腺癌细胞感染模型检测8株乳酸菌对幽门螺杆菌的抑制作用,以及对尿素酶活性的检测判断8株菌的抗幽门螺杆菌的能力.结果 在抑菌试验中,植物乳植杆菌HCS03-001(t=2.938,P=0.008)和副干酪乳酪杆菌HCS17-040(t=3.864,P=0.006)上清液的抑菌作用较强;植物乳植杆菌HCS03-001、罗伊氏粘液乳杆菌RH02100、副干酪乳酪杆菌HCS17-040能够降低幽门螺杆菌对AGS细胞的黏附能力;通过幽门螺杆菌菌悬液与乳酸菌菌悬液共培养,发现植物乳植杆菌HCS03-001(t=6.257,P＜0.001)、副干酪乳酪杆菌HCS17-040(t=5.873,P=0.005)抑制尿素酶活性的作用更强.结论 植物乳植杆菌HCS03-001和副干酪乳酪杆菌HCS17-040具有抗幽门螺杆菌感染的能力.

[背景]次氯酸水具有杀菌性,当其作为饮用水可能会对畜禽肠道内有益菌造成负面影响.[目的]筛选出具有耐受微酸性次氯酸水(slightly acidic hypochlorous acid water,SAHW)能力的乳酸菌并研究其益生特性.[方法]从内蒙古地区传统自然发酵制品中分离筛选出 8 株乳酸菌菌株,经 16S rRNA基因测序进行鉴定.进一步通过耐受SAHW、耐酸、耐胆盐、疏水性及自凝聚能力试验进行耐受特性和益生特性研究.[结果]菌株 MBH3-2 为副干酪乳杆菌,其经过质量浓度为20 mg/L的SAHW处理 2 h,菌落对数值仅下降 0.3 lg(CFU/mL),存活率为 50.10%;而且在酸性(pH 2.0、2.5 和 3.0)、胆盐环境下均可存活;疏水率达 62.12%,属于高度疏水性;自凝聚能力在 2 h达到 97.29%.[结论]最终确定一株具有优良耐受SAHW及基本满足作为微生态制剂要求的菌株,MBH3-2 具有作为新型微生态制剂菌株的潜力.

目的 探讨3株乳杆菌(植物乳植杆菌、罗伊氏粘液乳杆菌和副干酪乳酪杆菌)对小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的缓解作用及机制.方法 采用葡聚糖硫酸钠(DSS)法构建C57BL/6J小鼠急性UC模型,并在造模前后均给予乳杆菌干预治疗;测量各组小鼠体质量、结肠长度;采用蛋白免疫印迹技术检测小鼠结肠上皮紧密连接蛋白表达水平;HE染色观察分析小鼠结肠组织病理变化;16SrDNA高通量测序分析小鼠肠道菌群组成情况;转录组测序分析小鼠结肠组织基因表达差异.结果 与DSS模型组相比,植物乳植杆菌干预组(t=2.285,P=0.045)和副干酪乳酪杆菌干预组(t=2.360,P=0.040)小鼠体质量增加显著;植物乳植杆菌干预组(t=2.335,P=0.042)结肠长度显著增加;植物乳植杆菌干预组(ZO-1:t=4.975,P=0.003;Occludin:t=2.629,P=0.034)和罗伊氏粘液乳杆菌干预组(ZO-1:t=3.523,P=0.013;Occludin:t=2.525,P=0.040)紧密连接蛋白表达水平显著上调.乳杆菌干预组结肠黏膜组织病理损伤得以缓解,肠道菌群丰度及多样性降低得以改善.植物乳植杆菌干预组vsDSS模型组共有69个差异表达基因,KEGG pathway分析提示差异基因富集于免疫调节、内分泌与消化系统相关疾病等通路上.结论 3株乳杆菌对UC小鼠展现出较好的缓解作用,其作用机制与修复肠道屏障、调节肠道微生物群结构和降低肠道炎症水平相关.