CRISPR/Cas是原核生物在进化过程中获得的一种免疫防御系统,用于抵抗外来遗传物质的入侵,近年来被开发成为高效的基因编辑、基因调控以及分子诊断工具.其可编程靶向机制揭开了利用该系统进行基因组操作的序幕,并允许在活性范围内实现动态调节和控制基因表达.作为现有基因修饰手段中灵活性最强和成本最低的技术之一,已被广泛应用于临床疾病治疗、工农业生产、可持续染料开发和化学品加工等领域.随着对CRISPR/Cas系统的不断深入挖掘和探索,大量研究报道了 gRNA工程改造及优化方法,包括改变间隔序列长度、调节恒定区和可变区的结构、向末端或中间延伸添加额外功能序列及化学合成修饰等,以期降低脱靶突变率,提高作用效率,充分激发CRISPR基因操纵工具在生物医学方面的潜力.基于此,本综述将介绍CRISPR/Cas9和CRISPR/Cas12系统中gRNA工程化设计方法及应用研究的最新进展,分析探讨了当前工程化gRNA技术面临的机遇和挑战,旨在为获得性能更加优异的gRNA提供思路和方向,从而提高利用CRISPR/Cas系统探测人类细胞基因组的能力,进一步为可编程生物学带来更多可能性.

抑郁症是致残的主要原因之一,通常始于青春期.青少年抑郁症常导致学业失败、同伴关系不佳、行为问题、家庭及社会关系冲突,甚至自杀等不良后果,早期预防和积极有效的治疗至关重要.磁共振扩散张量成像技术能定量评价脑白质微结构,构建结构网络,可用于分析青少年抑郁症患者脑白质异常与症状、年龄、性别等临床变量的相关性.青少年抑郁症扩散张量成像研究显示,青少年抑郁症患者存在胼胝体、扣带束及钩状束等多个白质纤维束微结构异常,前额叶-纹状体环路、前额叶-边缘系统神经环路受损,且与记忆、情绪调节、奖励处理、认知加工等密切相关,与成人抑郁症中的发现一致.本研究对扩散张量成像的成像原理、数据处理方法及在青少年抑郁症中的应用进展进行简要综述,为今后的研究提供新思路.

目的:研究中药黄芩的主要代谢产物在其根部切片中的空间分布.方法:通过构建基于激光解吸等离子体电离的大气压质谱成像技术,对黄芩切片中的代谢物进行质谱成像分析.结果:蒽醌类产物分布相似,它们大部分集中在根表皮,也有一部分集中在维管柱边缘.黄芩的主要活性成分黄芩素几乎分布于整个切片中.结论:本研究证明质谱成像技术能够实现对中药材切片中内源性分子的空间分布分析,为中药材种植和加工提供了新的研究技术.

摘 要[目的]高加索三叶草是优良的蜜源植物,了解其花蜜腺形态特征、组织结构及其发育规律对认识其小花糖分变化规律和合理利用该植物资源具有重要意义.[方法]取5个发育时期的高加索三叶草小花,石蜡切片观察细胞组织结构,毛细管法和生理试剂盒测定花蜜量和糖分含量.[结果](1)单个小花的花蜜量为(0.394±0.095)μL,每1 m2草地花蜜量为(4536.93±1319.34)μL.(2)蜜腺位于9枚合生雄蕊的花丝内侧基部,为雄蕊蜜腺.蜜腺组织在整个泌蜜过程中淀粉粒分布有明显的动态变化,属于淀粉型蜜腺.(3)可溶性糖含量在盛花期最高,为7.978 mg/g;可溶性糖各组分中果糖占比最大,超过50％,在小花的整个发育过程中呈逐渐下降趋势;淀粉占全糖含量的81％～82％,其中盛花期最高,为35.173 mg/g.[结论]高加索三叶草花蜜腺属于雄蕊蜜腺,由分泌表皮和泌蜜组织构成.原蜜由花托维管束提供,经泌蜜组织加工成蜜汁,后由表皮的气孔泌出.小花的可溶性糖含量在盛花期最高,其中果糖占比最大.

目的:研究孤独症谱系障碍患儿父母的感知觉特征及其与孤独症广泛表型(broad autism phenotype，BAP)核心特征之间的相关性。方法:选取156名育有至少一名孤独症谱系障碍患儿的父母(ASDp组)为研究对象，同时选取98名性别、年龄及受教育水平相匹配的正常儿童的父母为对照组(TDp组)。使用自编一般情况调查表、青少年/成人感觉史量表(adolescent/adult sensory profile，AASP)以及孤独症广泛表型问卷(broad autism phenotype questionnaire，BAPQ)分别评估两组被试的感知觉及BAP核心特征。采用SPSS 24.0统计软件进行数据分析。使用多元方差分析(MANOVA)比较两组被试AASP量表总分及分量表分间的差异，然后对ASDp组的AASP量表总分、分量表分与BAPQ量表分进行Pearson相关分析。结果:ASDp组AASP总分为(133.67±26.10)分，BAPQ总分为(97.26±21.07)分；TDp组AASP总分为(142.09±27.67)分。与TDp组相比，ASDp组的AASP量表总分( F＝6.852， P＝0.009)以及感觉敏感( F＝7.163， P＝0.008)、感觉回避( F＝12.624， P<0.001)和低陆录量( F＝7.710， P＝0.006)三个分量表的得分较低，差异具有统计学意义。ASDp组中，AASP总分与BAPQ总分、刻板、冷漠以及实用语言缺陷分量表分均呈正相关( r＝0.557、0.531、0.333、0.571， P<0.05)。 结论:孤独症谱系障碍患儿父母感知觉特征与正常儿童父母之间存在差异，且其感知觉特征与已知的BAP核心特征之间存在显著相关性。

目的:观测飞行员在经历黑洞错觉时的注意加工特点，了解飞行成绩高分飞行员的眼动模式，为开展眼动注视点引导的飞行模拟训练提供量化数据参考。方法:采用整群抽样法选取参与改装训练的飞行员作为受试者，将原始飞行成绩转换成百分等级，以飞行成绩的前10名为高分组，后10名为低分组，记录其在飞行错觉模拟器上完成夜间进场着陆任务时的眼动数据，分析模拟任务中眼动数据和飞行成绩的关系，并比较不同飞行成绩飞行员的眼动模式差异。结果:选取有效受试者36人。共计12个眼动指标与飞行成绩相关（ r=0.334~0.398， P均<0.05），其中平显地平信息区的扫视脱离速度、平显速度信息区的注视总时长占任务总时长的百分比、地平仪完全注视的平均时间3个眼动指标可与飞行成绩建立线性回归模型（ R2=0.422， F=7.77， P<0.001）。高分组飞行员对平显中的速度显示信息的完全注视总时长占任务总时长的百分比［（4.38±3.48）%］高于低分组［（1.72±1.32）%］，差异有统计学意义（ t=2.25， P=0.045）；高分组飞行员从平显地平信息区的扫视平均脱离速度［（358.85±171.40）°/s］高于低分组［（221.14±92.60）°/s］，差异有统计学意义（ t=2.24， P=0.038）。 结论:夜间进场着陆任务中的眼动指标可作为飞行员在黑洞错觉模拟体验任务中的注意能力评估指标。

目的:探讨心理一致感在职业紧张与抑郁间的调节效应。方法:于2018年6—9月，采用立意抽样的方式，在上海市主城区（以写字楼、商场、理发店或饭店等服务企业为主）和郊区企业（类型涉及微电子、互联网、服装加工及艺术设计等工厂）抽取非上海户籍流动工人为研究对象进行问卷调查，收集研究对象的人口学特征。共调查了3 034名研究对象，回收有效问卷2 573份。采用患者健康量表（PHQ）、心理一致感量表（SOC）和工作内容问卷（JCQ）对抑郁、心理一致感和职业紧张水平进行评定。采用层次回归分析初步分析心理一致感在职业紧张与抑郁间的调节效应关系，并探讨心理一致感的调节效应。结果:2 573名研究对象年龄为（28.24±7.33）岁，男性1 281名（49.79 %），抑郁、职业紧张和心理一致感得分分别为6.67±4.74、28.45±4.38和62.02±10.89。抑郁水平与职业紧张正相关（ r=0.33, P=0.007），与心理一致感负相关（ r=-0.53, P=0.003）。层次回归分析显示，职业紧张与心理一致感的交互作用与抑郁症有关（β=-0.07, P=0.001）；Bootstrap分析显示，当心理一致感水平较高时，抑郁症状和职业紧张关联无统计学意义（β=0.04，95% CI=-0.01~0.10），在心理一致感水平较低时，二者关联有统计学意义（β=0.19，95% CI=0.14~0.23）。 结论:高水平心理一致感在职业紧张与抑郁间具有调节效应，低水平的心理一致感不具有该效应。

目的:探讨负性认知加工偏向在大学生病理性自恋与人际冲突之间的中介作用。方法:采用极简版病理性自恋问卷(super brief-PNI，SB-PNI)、负性认知加工偏向问卷(negative cognitive processing bias questionnaire)及关系质量问卷(NRI-relationship quality version，PQV)调查540名大学生的病理性自恋、负性认知加工偏向及人际冲突情况。采用SPSS 27.0进行描述性分析、相关分析和问卷信度检验，采用Amos 23.0进行结构方程建模，并基于偏差矫正的非参数百分位Bootstrap法进行中介效应检验。结果:病理性自恋得分为(3.33±0.86)分，负性认知加工偏向得分为(2.41±0.60)分，人际冲突得分为(2.34±0.77)分。大学生病理性自恋、负性认知加工偏向和人际冲突之间均呈正相关( r＝0.38~0.94，均 P<0.01)。负性认知加工偏向在大学生病理性自恋与人际冲突间起完全中介作用。完全中介模型拟合良好( χ2/ df＝2.63，CFI ＝0.99，NFI＝0.98，IFI＝0.99，TLI＝0.98，RMSEA＝0.05)。路径分析及中介效应检验表明，病理性自恋对大学生人际冲突总效应的预测作用显著( β＝0.52， P<0.001)；病理性自恋对负性认知加工偏向的预测效应显著( β＝0.64， P<0.001)；负性认知加工偏向对人际冲突的预测效应显著( β＝0.76， P<0.001)；病理性自恋对大学生人际冲突的直接效应的预测作用不显著( β＝0.03， P>0.05)。 结论:病理性自恋对大学生人际冲突具有正向预测作用，负性认知加工偏向在病理性自恋与人际冲突间起完全中介作用。

目的:利用听觉事件相关电位评估语前聋儿童人工耳蜗（cochlear implant，CI）植入者对元音、辅音和声调的早期听觉加工能力。方法:2021年2月到2024年2月期间招募19例语前聋CI儿童（男12例、女7例，年龄3~8岁，平均6.0岁）和19例听力正常（normal hearing，NH）儿童（男12例、女7例，年龄4~9岁，平均6.8岁）。使用单音节/ta1/作为标准刺激，/tu1/，/te1/，/da1/，/ra1/，/ta4/和/ta2/作为偏差刺激，构建多偏差oddball范式。记录并分析两组儿童由元音、辅音和声调变化诱发的事件相关电位。应用SPSS 24.0软件对数据进行统计学分析。结果:NH儿童对元音、辅音和声调变化均表现出显著的失匹配负波（mismatch negativity，MMN）（ P<0.05），而CI儿童对元音和辅音变化仅表现出正向失匹配反应（positive mismatch response，pMMR）（ P<0.05）和P3a反应（ P<0.05），且未对声调变化表现出任何事件相关电位（ P>0.05）。与NH儿童相比，CI儿童的pMMR和P3a潜伏期更长（ P<0.01），两组间幅值差异无统计学意义（ P>0.05）。时频分析显示，CI儿童的θ频段神经振荡同步性较NH儿童低（ P<0.05）。相关性分析显示，CI儿童的CI使用时间与听觉能力分级量表（Categories of Auditory Performance，CAP）（ P=0.004）、言语可懂度分级量表（Speech Intelligibility Rate，SIR）（ P=0.044）和有意义听觉整合量表（Meaningful Auditory Integration Scale，MAIS）（ P=0.001）得分呈正相关。 结论:语前聋CI儿童对元音和辅音具备一定的早期听觉加工能力，但与同龄NH儿童相比，语前聋CI儿童对语音尤其是声调的加工能力仍不成熟。事件相关电位可作为反映CI儿童听觉言语功能成熟度的客观电生理指标。坚持长期佩戴CI有助于语前聋儿童听觉言语能力的提高。

目的:调查长期移居高原大学生正性、负性情绪的主观体验和加工特征。方法:采用SPSS 22.0进行统计分析，采用独立样本 t检验比较高原组(成年后移居海拔3 658 m地区满2年的58名本科生)与平原组(从未到过高原的58名本科生)状态焦虑量表(state anxiety inventory，SAI)、抑郁自评量表(self-rating depression scale，SDS)、正性负性情绪量表(positive and negative affect schedule，PANAS)评分以及对正性、中性和负性三类情绪图片效价、唤醒度评价的差异。两组状态焦虑、抑郁阳性检出率进行 χ2检验，SAI、SDS和PANAS得分进行Pearson相关分析。 结果:高原组状态焦虑、抑郁阳性检出率(67.24%，56.90%)及得分[(44.45±8.57)分，(50.12±10.11)分]皆高于平原组[46.55%，32.76%，(40.19±9.58)分，(44.64±9.17)分， χ2＝5.06，8.12， t＝2.52，3.06，均 P<0.05]。高原组正性情绪得分[(28.16±5.39)分]有低于平原组[(30.28±6.51)分]的趋势，但差异无统计学意义( t＝-1.91， P＝0.059)。SAI，SDS，PANAS得分两两呈中度相关( r＝0.69，-0.52，0.67，-0.62，0.53，均 P<0.01)。正性情绪与负性情绪轻度负相关( r＝-0.27， P<0.01)。正性情绪与抑郁相关度( r＝-0.62)大于与状态焦虑的相关度( r＝-0.52， t＝2.57， P<0.05)，负性情绪与状态焦虑的相关度( r＝0.67)大于与抑郁的相关度( r＝0.53， t＝1.71， P<0.05)。高原组对中性图片的效价评分[(3.06±0.20)分]高于平原组[(2.99±0.20)分， t＝2.01， P＝0.047]。 结论:长期移居高原的大学生易产生状态焦虑和抑郁，以抑郁为主、焦虑次之，并表现出对中性刺激加工的正性偏向。