近年来,国内网络药理学的研究成井喷之势,特别是聚焦在中药复方的网络药理学研究,这类研究大多是通过整合中药成分与靶点数据库的信息,从"成分-靶点-作用通路"的框架去预测中药复方治疗疾病的药效物质基础及作用机制.由于这类研究后续大多缺乏严谨的药理学实验验证,加上其研究对象仅限于特定方剂作用于特定疾病,导致其研究结论可信度较低,缺乏实际科学价值,研究结果与阐明中医理论的现代科学内涵相距甚远.笔者从事网络药理学研究多年,结合自己的研究方向,针对网络药理学未来发展趋势,提出以下两点个人的建议.(一)聚焦中医药理论的现代科学内涵阐释.中医通过辨证论治治疗疾病,比如清热解毒法是中医抗癌的重要法则,补肾法是中医抗老年痴呆的普遍治法.这意味着具有清热解毒、或具有补肾疗效的中药与复方,能够普遍地作用于西医肿瘤及老年痴呆.即清热解毒法、补肾法分别与西医肿瘤及阿尔茨海默病(AD)之间具有共同的生物学基础.而这些具体的生物学基础是什么,可以通过网络药理学的研究方法来预测与指导.笔者结合前期的网络药理学研究基础,提出基于网络距离法探讨补肾法调控内质网应激防治AD的科学假说,获得了国家自然基金面上资助(82074278).近期本团队从基于网络药理学方面预测了补肾方剂补肾益智方中两个天然产物蛇床子素及五味子醇甲B具有协同抗AD的作用,其作用机制与调控内质网应激相关,预测结果在APP/PS1转基因动物模型上得到了验证(Phyto-medicine,2023,已录用).笔者呼吁更多的网络药理学从业者能够聚焦于更具普适性的中医药理论防治疾病的现代科学内涵阐释,及其对中药发掘的指导价值研究.(二)拓展网络药理学应用领域,关注老药新用.国际上对网络药理学的关注一直是聚焦在药物重定位领域,但是基于网络药理学方法的药物重定位研究在国内并未引起足够的重视.笔者2020年受邀Med Res Rev杂志撰写了网络药理学方法在AD药物重定位方面的长篇综述,提出了整合网络药理学方法结合临床电子病历深度挖掘的老年痴呆药物发现框架,即通过网络药理学预测已上市药物潜在的抗老年痴呆活性,并基于大规模电子病历的队列回顾性研究验证预测药物与AD发病率之间的关系[Med Res Rev,2020,40(6):2386-2426].该研究框架已在多个研究案例中成功实现[Nat Aging,2021,1(12):1175-1188;Alzheimers Res Ther,2022,14(1):7].2022年,笔者整合了大规模的AD全基因组关联研究结果,进一步发展人工智能框架预测AD的风险基因,并基于这些潜在靶标开展AD药物重定位研究,网络距离法预测结合大规模电子病历回顾性队列分析发现抗2型糖尿病老药吡格列酮(pioglitazone)与AD疾病风险降低有关,网络分析结合体外人源小胶质细胞模型验证了吡格列酮的抗AD分子机制[Alzheimers Res Ther,2022,14(1):7].该研究思路通过进一步的学科交叉,将网络药理学的预测结果在大规模的临床数据中寻找证据,进一步提高了预测结果的可信度,也加速了药物的发现进程.

目的 根据“动物法则”验证鼠疫疫苗临床有效性免疫学指标为F1抗体效价和V抗体效价,为疫苗的临床有效性评价提供依据.方法 将BALB/c小鼠随机分为6组,每组10只.其中5组用含有不同效价的F1抗体和V抗体的鼠疫疫苗Ⅱa期临床人血清腹腔被动免疫小鼠,另外1组为对照;3h后各实验组分别以6 MLD鼠疫耶尔森菌标准强毒菌株141株(简称鼠疫强毒菌)攻击,对照组以2MLD鼠疫强毒菌攻击,观察期14 d,详细记录14 d内的动物死亡时间,并对攻击小鼠的存活数据进行Kaplan-Meier生存分析和Spearman相关性分析.结果 鼠疫疫苗Ⅱa期临床人血清被动保护小鼠结果显示,对照组小鼠在2 MLD强毒菌攻击下的存活率为0.0％,平均存活时间为6.5 d;实验组临床人血清被动免疫小鼠在6 MLD强毒菌攻击下的存活率分别为10.0％、0.0％、40.0％、40.0％、90.0％,小鼠平均存活时间分别提高到9.1d、9.9d、11.2d、11.4 d、13.9d.F1抗体效价与小鼠平均存活时间具有显著相关性(P=0.000、r=1.000);V抗体效价与小鼠平均存活时间具有显著相关性(P=0.014、r=0.949).F1抗体效价与小鼠存活率具有显著相关性(P=0.000、r=1.000);V抗体效价与小鼠存活率具有显著相关性(P=0.014、r=0.949).结论 鼠疫疫苗Ⅱa期临床人血清可对小鼠提供被动保护,且保护力水平与F1抗体效价和V抗体效价具有显著相关性.

托法是中医外科内治三大法则之一,广泛运用于外科浅部化脓性疾病、内脏化脓性疾病及其他疾病,明确其作用机理是发扬光大托法,更好服务临床的重要任务.文章结合托法及代表方的文献理论、临床研究与动物实验以及组方药物药理,详细探讨了其今后作用机理实验研究的思路,包括选择实验类型、研究方向、可行性研究内容及所用研究方法.

20世纪50年代可谓是“基因元年”,发现了DNA双螺旋结构并提出遗传学中心法则.传统意义上的中心法则指的是遗传信息从DNA经由RNA流向蛋白质.该法则在一个时代里成为了细胞生物学最重要的基本法则,然而,过去10年对长短链非编码RNA (non-coding RNA,ncRNA)的广泛研究极大地补充和改变了该法则,提出RNA可以直接作为功能分子参与调控生命活动.基因组中非编码序列在真核生物细胞中所占的比例随着生物进化的程度而不断上升,在人类基因组中达到97％以上,而其中90％以上的非蛋白编码DNA可转录出缺乏蛋白质翻译功能的ncRNA.这些ncRNA曾经被认为是进化垃圾或转录噪声,近年却发现是许多生理和病理过程中的重要调节因子.由于ncRNA种类极为丰富,因而极大地增加了生命活动调控的复杂性,为整个基因、信号调控网络增加了一个全新的调控层次,使哺乳动物基因、信号调控研究进入了一个崭新的时代.

滋肾阴、温肾阳颗粒是在补肾益精法则和病症结合原则指导下治疗原发性骨质疏松症(POP)的中药小复方,通过系统分析施杞教授治疗POP的处方创制而成.POP临床研究证明,滋肾阴颗粒能明显提高患者的骨密度,改善肾阴虚证候;温肾阳颗粒能改善肾阳虚证候和生活质量.进一步研究还证明蛇床子一女贞子药对能够延缓去卵巢大鼠导致的骨丢失;上述中药有效组分通过调控BMP/Smad、Wnt/β-catenin、RANKL/RANK/OPG、Notch信号转导通路调控骨重建,体现了滋肾阴、温肾阳颗粒发挥双重调控的效果.本研究以中医基础理论为指导,运用临床试验研究、动物模型、细胞培养、分子生物学等方法开展药物的研究,成为中医药临床转化的成功案例.

时间针灸的相关研究取得了一定的成绩,同时在研究中也存在一些问题与不足,主要表现在以下几点:理论研究数量相对较少,且缺少从医学与文化角度对时间针灸的形成、发展脉络与理论内涵的深入研究;临床研究方面对子午流注、灵龟八法关注较多,对飞腾八法与养子时刻注穴法则极少涉及;研究者对时间针灸的概念、方法不清,导致应用上的不规范甚至是错误;临床研究选取的样本量过少、缺少对照组或对照组设置不合理,以及随机对照实验的设计不够规范和严谨,不同研究者对同一疾病采取的疗效评价标准不尽统一;有关实验研究仅限于对人与动物理化指标的观察,较少涉及深层次的机制研究.今后应进一步开展理论研究、规律总结,并探索时间针灸的临床应用,总结时间针灸的应用经验,并进行更深层次的机制研究,为时间针灸理论和临床应用提供依据.

[目的]温度是变温动物最重要的环境因子,影响了所有的生活史特性.本研究旨在探明亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis 生活史特性随温度变异的特点.[方法]在恒温20,22,24,26,28,30和32℃,光周期16L∶ 8D 室内条件下,测定了亚洲玉米螟南昌种群从卵孵化到化蛹和化蛹到成虫羽化的时间,以及蛹和成虫的体重.[结果]亚洲玉米螟幼虫和蛹的历期及总发育历期随温度的升高显著缩短.雄性幼虫历期和总发育历期显著短于雌性,显示了雄性先熟现象.生长速率与温度呈正相关.雌性生长速率在较低温度下显著低于雄性,但在高温下显著高于雄性.体重和温度之间的相关性没有遵循温度-体型大小法则,雌雄个体在高温下体重更重,雌性个体显著大于雄性,显示了雌性偏向的性体型二型性(sex size dimorphism,SSD).与任希法则相反,亚洲玉米螟的SSD 指数和体重随温度升高趋于增大.雄蛹在变态中比雌蛹丢失了更多的重量,导致成虫期的SSD 指数大于蛹期.[结论]高温不仅显著缩短了亚洲玉米螟发育历期,而且导致了其在成熟时体重更大.亚洲玉米螟雌雄间的生活史特性存在较大差异.

皮肤像人类其他器官一样,随时间而衰老.但又不同于其他器官,影响皮肤衰老的一项重要的环境因素是紫外线辐射.随着大气臭氧空洞的增加、环境光污染的加重及人们生活水平的提高,大家越来越注重皮肤因光损伤导致的红斑、皱纹、色沉、弹性减弱等问题.对光老化皮肤的治疗方法则更是目前的研究热点,但因自然光老化是一个十分漫长的过程,所以有关光老化的实验大多建立在光老化实验动物模型的基础上.因此,建立一个可靠的更接近于人类皮肤自然光老化的模型具有重要意义.本文就当前光老化的发生机制、光老化模型造模方法、检测标准进展归纳总结如下.

介绍了"动物法则"的产生背景和内容,以及美国FDA根据"动物法则"进行炭疽等不能在人体进行临床试验的疾病防治药物和生物制品审批时的相关要求.从产品特性、动物有效性实验结果及使用时的注意事项等方面对近年来美国食品药品监督管理局根据"动物法则"批准上市的一些产品进行简述.综述表明,"动物法则"对产品开发者提出严格要求的同时,建议开发者在开发前后的一系列过程中都要时刻保持与FDA的密切交流,设计研发出解决实际问题的产品.

目的 应用巢式PCR和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测啮齿动物中伯氏疏螺旋体的带菌率,对2种方法在莱姆病宿主动物监测中的应用效果进行评价.方法 2017年7-9月,在新疆维吾尔自治区(新疆)古尔图地区野外放置鼠夹,采集啮齿动物,并鉴别种类;采用巢式PCR和qRT-PCR 2种方法检测标本携带伯氏疏螺旋体情况,并对2种方法的检测结果进行统计学分析.对巢式PCR检测的阳性标本进行测序和序列比对分析,以初步确定伯氏疏螺旋体的基因型别.结果 共检测啮齿动物标本134份,巢式PCR和qRT-PCR检测阳性率分别为13.43％和12.69％,差异无统计学意义(x2=0.000,P=1.000);阳性标本均为长尾黄鼠,总阳性率为20.15％,其中8份标本经2种方法检测结果均为阳性;10份巢式PCR检测为阳性的标本经qRT-PCR检测为阴性,9份qRT-PCR检测为阳性的标本经巢式PCR检测为阴性.采用qRT-PCR方法共检出伯氏疏螺旋体阳性17份,阳性样本Ct值为33.49～37.89.结论 2种方法均可用于啮齿动物的伯氏疏螺旋体检测,同时使用2种方法可提高伯氏疏螺旋体的检出率.巢式PCR方法检测可以了解新疆古尔图地区啮齿动物感染伯氏疏螺旋体的基因型别;而qRT-PCR方法则可对标本中的细菌载量进行定量分析.