目的 建立α1A-肾上腺素能受体(α1A-AR)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的活化T细胞核因子2(NFAT2)稳定共表达细胞.方法 ① 将pcDNA3.1-α1A-AR-3×FLAG重组质粒转染至U2OS-EGFP-NFAT2细胞,经潮霉素B(Hygro-B)200 mg·L-1 压力筛选后加入α1A-AR激动剂去甲肾上腺素(NE,10 μmol·L-1)孵育30 min,通过高内涵筛选系统检测细胞核内绿色荧光强度,验证EGFP-NFAT2 核转位,筛选得到稳定表达α1A-AR的U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞.②采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western印迹法检测该细胞和对照细胞U2OS-EGFP-NFAT2中α1A-AR mRNA和蛋白的表达水平.③将U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞接种于96孔板,分别加入NE(10-8～10-5 mol·L-1)或α2-AR激动剂右美托咪定(DMED,10-8.8～10-5 mol·L-1)孵育30 min,通过高内涵筛选系统检测EGFP-NFAT2 核转位.④将U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞分为溶剂对照组、α1-AR拮抗剂萘派地尔(1 μmol·L-1)组、NE(1 μmol·L-1)组、萘派地尔+NE(各1 μmol·L-1共孵育)组、α2-AR拮抗剂阿替美唑(0.1 μmol·L-1)组、DMED(0.1 μmol·L-1)组、阿替美唑+DMED(各0.1 μmol·L-1 共孵育)组和萘派地尔+DMED(萘派地尔1 μmol·L-1 与 DMED 0.1 μmol·L-1共孵育)组,药物孵育时间均为30 min,通过高内涵筛选系统检测EGFP-NFAT2核转位,验证该细胞α1A-AR功能的特异性.结果 ①Hygro-B压力筛选得到58株U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞,NE 10 μmol·L-1孵育后,其中50号细胞核内绿色荧光强度最强,故选定其为稳定共表达α1A-AR和EGFP-NFAT2的U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞.②Western印迹法结果显示,U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞可明显表达α1A-AR蛋白,而对照细胞U2OS-EGFP-NFAT2中未见α1A-AR蛋白表达.RT-qPCR结果显示,该细胞在传代5～20代内α1A-AR mRNA均稳定表达,其表达水平为对照细胞的500～800倍.③NE或DMED使U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞中EGFP-NFAT2核转位明显增加,半数有效浓度(EC50)分别为5.94×10-7和6.15×10-8 mol·L-1.④与溶剂对照组和萘派地尔组比较,NE组U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞EGFP-NFAT2核转位明显增强(P<0.01),而萘派地尔+NE组EGFP-NFAT2核转位较NE组明显减弱(P<0.01).与溶剂对照组和阿替美唑组比较,DMED组EGFP-NFAT2核转位明显增强(P<0.01),阿替美唑+DMED组EGFP-NFAT2核转位与DMED组比较无明显差别,而萘派地尔+DMED组EGFP-NFAT2核转位较DMED组明显减弱(P<0.01).结论 成功构建稳定共表达α1A-AR和EGFP-NFAT2的U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞,可用于靶向α1A-AR化合物筛选和受体分子机制研究.

目的 筛选养心草抗肺癌活性部位.方法 运用系统溶剂法制备养心草各提取部位;体外培养肝癌A549细胞,采用MTT法检测细胞株半数抑制浓度(IC50),以IC50作为评价指标,初步筛选出养心草抗肿瘤的有效部位.同时,建立肺癌LLC细胞移植瘤小鼠模型,通过观察肿瘤体积、小鼠体质量、脏器指数及瘤体质量的变化,对养心草的抗肿瘤效果进行评价养心草石油醚部位及乙酸乙酯部位的体内抗肺癌作用.结果 MTT实验结果表明养心草不同提取部位中石油醚部位和乙酸乙酯部位对肺癌A549细胞的增殖显示较强的抑制作用;体内小鼠肺癌LLC细胞移植瘤实验表明石油醚部位和乙酸乙酯部位可明显抑制小鼠肿瘤的生长(P＜0.05),且具有剂量依赖性,并对鼠体质量及脏器指数未产生显著影响(P＞0.05).结论 养心草的石油醚部位和乙酸乙酯部位是其抗肺癌的有效部位.

目的:确定复合右美托咪定时瑞芬太尼抑制甲状腺手术患者无肌松气管插管反应的半数有效剂量(ED 50)和95%有效剂量(ED 95)。 方法:择期行术中神经监测下甲状腺手术患者，性别不限，年龄18～64岁，ASA分级Ⅰ或Ⅱ级，体重指数18～28 kg/m 2。麻醉诱导前10 min时静脉注射右美托咪定负荷剂量0.8 μg/kg。麻醉诱导：静脉注射咪达唑仑0.1 mg/kg、依托咪酯0.4 mg/kg和预定剂量瑞芬太尼。采用Dixon序贯法确定瑞芬太尼剂量，初始剂量为3.7 μg/kg，根据气管插管反应确定下一例瑞芬太尼剂量，相邻剂量的比为1.1，采用Probit法计算ED 50、ED 95及其95%可信区间。 结果:复合右美托咪定麻醉诱导时，瑞芬太尼行无肌松插管反应的ED 50及其95%可信区间分别为3.39(3.29～3.50) μg/kg，ED 95及其95%可信区间分别为3.52(3.48～3.64) μg/kg。 结论:复合右美托咪定时，瑞芬太尼抑制甲状腺手术患者无肌松气管插管反应的ED 50为3.39 μg/kg，ED 95为3.52 μg/kg。

目的:评价性别因素对羟考酮抑制患者喉罩置入反应效力的影响。方法:拟行喉罩全身麻醉下择期手术患者，年龄18～59岁，ASA分级Ⅰ或Ⅱ级，BMI 18～28 kg/m 2，根据性别分为男性组(M组)和女性组(F组)。采用改良Dixon序贯法进行研究，每组首例患者静脉注射羟考酮0.10 mg/kg，同时靶控输注丙泊酚血浆靶浓度3 μg/ml，效应室浓度与血浆浓度平衡后，脑电双频指数(BIS) ≤ 60时静脉注射顺式阿曲库铵0.2 mg/kg，3 min后置入喉罩。若喉罩置入反应阳性，则下一例患者羟考酮用量增加1个阶梯剂量，否则降低1个阶梯剂量，相邻剂量比值1.1，重复此过程，直到出现第7个转折点。喉罩置入反应阳性标准：喉罩置入后2 min内心率最大值或平均动脉压最大值的升高幅度超过置入即刻水平的20%。采用probit法确定羟考酮抑制喉罩置入反应的半数有效剂量(ED 50)。 结果:M组最终纳入28例，F组25例。M组ED 50(95%可信区间)为0.105(0.091～0.115) mg/kg，F组ED 50(95%可信区间)为0.087(0.082～0.094) mg/kg。M组ED 50高于F组( P<0.01)。 结论:羟考酮抑制患者喉罩置入诱发伤害性刺激的效应与性别因素有关，对女性的效力增强。

目的:确定纳布啡预防胃肠镜检查术患儿丙泊酚中长链脂肪乳注射痛的量效关系。方法:选择胃肠镜检查术患儿，年龄3～8岁，ASA分级Ⅰ或Ⅱ。采用改良序贯法进行试验，第1例患儿静脉注射纳布啡0.2 mg/kg，5 min后静脉注射丙泊酚中长链脂肪乳2.5 mg/kg。采用Ambesh 4分法评价丙泊酚注射痛，注射痛预防无效，则下一例增加纳布啡剂量，否则降低一个剂量，相邻剂量相差0.01 mg/kg，重复此过程，直至出现第7个交折点。采用Probit法计算半数有效剂量(ED 50)和95%有效剂量(ED 95)及其95%可信区间(CI)。 结果:纳布啡预防丙泊酚中长链脂肪乳注射痛的ED 50和ED 95及其95%CI分别为：1.57(1.50～1.62)和1.71(1.64～2.05) mg/kg。 结论:纳布啡预防胃肠镜检查术患儿丙泊酚中长链脂肪乳注射痛的ED 50和ED 95分别为1.57和1.71 mg/kg。

目的:了解我国围手术期镇痛药使用和管理现状。方法:自行设计调查问卷，问卷内容包括接受调查者（受调者）的基本信息、围手术期镇痛药管理、围手术期镇痛医疗行为和镇痛药相关知识知晓情况等4个维度共55个问题（4个维度分别为8、10、22和15个问题）。通过中国药理学会药源性疾病专业委员会和中华医学会麻醉学分会的委员以微信发送问卷星链接形式发放调查问卷，麻醉医师、外科医师/护士和临床药师自愿参与调研，以无记名形式直接提交问卷。调查时间为2020年8月1—31日。结果:收到有效问卷204份，来自全国19个省市的45家医院，其中三级医院43家（95.6%），二级医院2家（4.4%）。204位受调者中外科医师46人（22.5%），麻醉医师80人（39.2%），临床药师32人（15.7%），外科护士46人（22.5%）。受调者所在的45家医院中，35家（77.8%）建立了围手术期疼痛管理的定期沟通机制，22家（48.9%）有临床药师辅助临床科室医师的工作。204位受调者中每年接受1~2次镇痛药相关知识培训者占76.5%（156人）。60.3%的受调者（123/204）在日常工作中发现过围手术期镇痛药使用的不合理问题，排在前3位的问题为药物选择[74.0%（91/123）]、用法用量[69.1%（85/123）]和药物相互作用[46.3%（57/123）]。37.3%的受调者（76/204）发现过镇痛泵不合理使用的问题，排在前3位的问题为用法用量[69.7%（53/76）]、药物选择[67.1%（51/76）]和禁忌证[36.8%（28/76）]。受调者镇痛药相关知识知晓情况调查的成绩≥120分（满分为150分）者仅占13.7%（28/204），53.9%（110/204）的受调者成绩<90分[外科医师、麻醉医师、临床药师、外科护士中<90分者占比分别为50.0%（23/46）、43.8%（35/80）、46.9%（15/32）和80.4%（37/46）]；15个问题中仅有4个问题的回答正确率>50%。结论:接受调查的医院多数已建立围手术期疼痛管理的相关机制，但仍存在围手术期镇痛药和镇痛泵使用不合理的问题；约半数外科医师、麻醉医师、临床药师和大多数外科护士对镇痛药相关知识知晓程度较低。

目的:评价瑞马唑仑用于冠状动脉旁路移植术(CABG)患者麻醉诱导时意识消失的量效关系。方法:择期拟行CABG患者，年龄55～64岁，BMI 21～26 kg/m 2，ASA分级Ⅲ或Ⅳ级。采用改良Dixon序贯法进行试验，瑞马唑仑初始剂量为0.225 mg/kg，意识消失则下一例患者升高一个浓度梯度，否则降低一个浓度梯度，浓度梯度为0.025 mg/kg。意识消失的标准：给药后3 min内改良警觉/镇静评分≤1分。采用probit法计算瑞马唑仑用于CABG患者麻醉诱导时意识消失的半数有效剂量(ED 50)和95%有效剂量(ED 95)及其95%可信区间( CI)。 结果:瑞马唑仑用于CABG患者麻醉诱导时意识消失的ED 50为0.175 mg/kg，95% CI为0.163～0.185 mg/kg，ED 95为0.211 mg/kg，95% CI为0.197～0.255 mg/kg。 结论:瑞马唑仑用于CABG患者麻醉诱导时意识消失的ED 50为0.175 mg/kg，ED 95为0.211 mg/kg。

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)甲磺酸普依司他(PM)对套细胞淋巴瘤(MCL)细胞系的抗增殖活性，以及对MCL皮下移植瘤小鼠模型的抗肿瘤效果。方法:选择MCL细胞系Jeko-1和Granta-519，以及非肥胖糖尿病/重度联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠为研究对象，采用不同浓度梯度PM原料药(PMF，终浓度分别为0.1、0.3、0.5、1.0、2.0、4.0 nmol/L)和同浓度帕比司他(LBH589)分别处理Jeko-1，采用不同浓度梯度PMF(终浓度分别为0.4、0.8、1.6、3.1、6.3、12.5 nmol/L)和同浓度LBH589分别处理Granta-519。加药孵育120 h后，采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测细胞增殖活性并计算半数抑制浓度(IC50)值。建立Jeko-1 NOD/SCID小鼠皮下移植瘤模型，按照给药种类和剂量将其分为PM 2.5 mg/kg组( n＝7)、PM 5 mg/kg组( n＝7)、PM 10 mg/kg组( n＝7)、LBH589 10 mg/kg组( n＝6)和溶剂对照组( n＝7)。于给药第21天时，观察各组小鼠的相对肿瘤抑制率(T/C)、瘤重及肿瘤生长抑制率。不同组别间瘤重比较，采用单因素方差分析。同浓度PMF和LBH589的细胞增殖抑制率比较，采用双因素方差分析。动物实验方案的设计获得了四川大学华西医院动物实验中心伦理委员会的批准，符合国际通行的实验动物使用规范。 结果:①加药孵育120 h后，PMF和LBH589以剂量依赖性方式抑制Jeko-1和Granta-519的细胞增殖。除终浓度为0.1、0.3 nmol/L的PMF与同浓度LBH589相比外，其余各终浓度PMF对Jeko-1的细胞增殖抑制率均高于同浓度LBH589，并且差异有统计学意义(终浓度为0.5、1.0、2.0、4.0 nmol/L PMF比同浓度LBH589： F＝311.4、39 470.4、1 232.7、4 575.4， P＝0.03、<0.000 1、＝0.001、<0.000 1)。Jeko-1中PMF的IC50值为(366.8±3.4)pmol/L，低于LBH589的(1 570.0±51.6)pmol/L，并且差异有统计学意义( F＝2 367.4， P<0.000 1)。不同终浓度PMF对Granta-519的细胞增殖抑制率均高于同浓度LBH589，并且差异均有统计学意义(终浓度为0.4 、0.8、1.6、3.1、6.3、12.5 nmol/L PMF比同浓度LBH589： F＝15.8、190.0、172.1、314.5、741.5、236.8， P＝0.028、＝0.001、＝0.001、<0.000 1、<0.000 1、＝0.001)。Granta-519中PMF的IC50值为(2.9±0.1)nmol/L，低于LBH589的(7.4±0.4)nmol/L，并且差异有统计学意义( F＝686.4， P<0.000 1)。② PM 2.5、5、10 mg/kg和LBH589 10 mg/kg组小鼠d21(给药9次)时，T/C值分别为58.6%、26.0%、16.6%、24.1%，治疗有效。③ d21(给药9次)时，PM 2.5、5、10 mg/kg和LBH589 10 mg/kg组小鼠的瘤重分别为(2.1±0.4)g、(0.9±0.2)g、(0.9±0.2)g、(1.4±0.4)g，均低于溶剂对照组的(3.7±0.7)g，并且差异均有统计学意义( F＝16.2、78.1、83.4、36.7， P<0.002、0.000 1、0.000 1、0.000 1)，PM 5、10 mg/kg组小鼠瘤重均低于LBH589 10 mg/kg组，并且差异亦有统计学意义( F＝8.3、10.3， P＝0.015、0.008)。除PM 2.5 mg/kg组(38.0%)外，PM 5、10 mg/kg和LBH589 10 mg/kg组小鼠的肿瘤生长抑制率分别为73.8%、74.4%、58.0%，均治疗有效。 结论:PM作为一种新型高选择性HDACi，在MCL细胞系的抗细胞增殖作用明显，并优于已上市的LBH589，其在皮下移植瘤模型小鼠体内也表现出显著的抗肿瘤效果。

喉罩作为一种声门上的通气工具，对机体刺激性小，已广泛应用于短小手术麻醉 [1]。该手术多采用短效麻醉药物诱导，可快速达到麻醉效果，且麻醉时间短，患者苏醒快。阿片类药物复合依托咪酯麻醉诱导可以提供良好的喉罩置入条件，并维持血流动力学稳定 [2,3]。阿芬太尼是合成的作用于μ阿片受体的芬太尼衍生物，是临床常用的短效镇痛药，具有起效快、代谢快、不良反应少等优点 [4]。本研究旨在确定复合依托咪酯时阿芬太尼抑制喉罩置入心血管反应的半数有效剂量(ED 50)，为临床用药提供参考。

目的:评价复合丙泊酚时阿芬太尼抑制无痛胃镜检查术老年患者吞咽反射的量效关系。方法:拟行无痛胃镜检查术患者，性别不限，年龄≥60岁，ASA分级Ⅰ或Ⅱ级。所有患者均给予丙泊酚1.5 mg/kg复合阿芬太尼静脉麻醉，采用Dixon序贯法进行试验，阿芬太尼初始剂量5 μg/kg，根据吞咽反射发生情况，确定下一例患者阿芬太尼剂量，相邻剂量比为1.1，采用序贯法公式计算复合丙泊酚时阿芬太尼抑制无痛胃镜检查术老年患者吞咽反射的半数有效剂量(ED 50)及其95%可信区间。 结果:复合丙泊酚1.5 mg/kg时，阿芬太尼抑制无痛胃镜检查术老年患者吞咽反射的ED 50及其95%可信区间为2.8(2.4～3.2) μg/kg。 结论:复合丙泊酚1.5 mg/kg时，阿芬太尼抑制无痛胃镜检查术老年患者吞咽反射的ED 50为2.8 μg/kg。