目的:探讨中国汉族人群中白细胞介素2受体α（IL2RA）基因单核苷酸多态性（SNP）的分布特征及其与经典1型糖尿病（T1DM）的关系。方法:收集2008年1月至2014年12月于南京医科大学第一附属医院和南京医科大学附属儿童医院就诊的T1DM患者和健康对照者。记录患者的血清C肽、锌转运体8抗体（ZnT8A）、谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体（IA-2A）、IL2RA基因rs3118470和rs2104286位点的基因分型等检测结果。采用 t检验、 χ2检验和Kruskal-Wallis H检验比较T1DM组和健康对照组的一般资料以及各基因型T1DM患者的临床特征。采用logistic回归比较T1DM患者组和对照组之间等位基因及基因型的频率分布，并校正潜在混杂因素（如年龄和性别）。采用单因素logistic回归分析法分析不同模型（显性、隐性、超显性和加性模型）下各位点多态性与T1DM易感性的关联。 结果:IL2RA rs3118470位点次要等位基因C为T1DM的风险等位基因（ P=0.026），在显性遗传和加性遗传模型下，IL2RA rs3118470位点多态性与T1DM易感性相关［OR（95%CI）分别为0.807（0.666~0.978）和0.880（0.783~0.989），均 P<0.05］，但其不同基因型组间T1DM患者临床特征差异均无统计学意义（均 P>0.05）。IL2RA rs2104286位点不同基因型组间T1DM患者ZnT8A阳性率的差异有统计学意义（ P=0.035）。 结论:IL2RA rs3118470位点多态性与中国汉族人群T1DM易感性相关，其次要等位基因C是T1DM的风险等位基因，IL2RA rs2104286位点多态性与患者ZnT8A阳性率有关。

目的:研究L-T4凝胶剂联合二甲双胍对甲状腺功能减退（简称：甲减）模型大鼠海马乙酰胆碱（acetylcholine，Ach）和单羧酸转运蛋白8（monocarboxylate reansporter 8，MCT8）含量的影响。方法:应用随机数字表法将40只大鼠随机分为5组，正常对照组（CON组）、甲减组（Hypo组）、L-T4替代治疗组（L-T4组）、二甲双胍治疗组（MET组）、联合治疗组（L-T4+MET组）。CON组大鼠进行正常饮水，其余4组大鼠饮用含有0.05%丙硫氧嘧啶的饮用水，进行6周甲减造模。在造模第5周时，MET组大鼠进行灌胃1ml/100g二甲双胍溶液，L-T4组大鼠应用L-T4凝胶剂涂抹背部脱毛处，涂抹剂量为0.1g/100g，L-T4+MET组大鼠进行L-T4凝胶剂涂抹和二甲双胍溶液（1ml/100g）灌胃治疗。6周造模结束后，收集腹主动脉血液，在冰台上将大脑海马组织快速分离，同时将气管和甲状腺剪下拍照纪录大小，且将其储存在-80℃冰箱中或浸泡在4%多聚甲醛固定，用于免疫组化染色。使用 t检验确认各组数据之间的差异性，多组间均数比较应用单因素方差分析，当计数资料以百分率表示时使用 χ 2。以 P<0.05表示差异具有统计学意义。 结果:尼氏染色结果显示，Hypo组的光密度值低于CON组（ t=8.944， P<0.001），MET组大鼠光密度较Hypo组高（ t=4.472， P<0.001），L-T4组大鼠光密度值较Hypo组大鼠高（ t=4.472， P<0.001），联合治疗组大鼠光密度值较Hypo组大鼠高（ t=8.944， P<0.001），且恢复至CON组水平（ P=1.000）。经过2周治疗后，Hypo组的总甲状腺素水平（total thyroxine level，TT4）水平低于CON组（ t=14.536， P<0.001），MET组大鼠TT 4水平较Hypo组高（ t=6.924， P<0.001），L-T4组TT 4水平较Hypo组大鼠高（ t=4.892， P<0.001），联合治疗组大鼠TT 4水平较Hypo组大鼠高（ t=12.890， P<0.05），且恢复至CON组水平（ t=0.494， P=0.647）。研究结束后，收集各组大鼠的甲状腺组织，Hypo组大鼠甲状腺组织重量高于CON组（ t=7.906， P<0.001），MET组和L-T4组大鼠甲状腺组织重量低于Hypo组（MET: t=2.000， P<0.001; L-T4: t=3.000， P<0.001），但高于CON组（MET: t=3.000， P<0.001; L-T4: t=2.000， P<0.001），L-T4+MET组大鼠甲状腺重量与CON组相似（ P=0.610）。经过HE染色显示，联合治疗组甲状腺滤泡出现大小不等，胶质数量和吸收空泡数量基本恢复与CON相似。经治疗后，Hypo组的Ach水平低于CON组（ t=3.618， P<0.001），MET组大鼠Ach水平较Hypo组高（ t=3.121， P=0.016），L-T4组Ach水平较Hypo组大鼠高（ t=3.321， P=0.027），联合治疗组大鼠Ach水平较Hypo组大鼠高（ t=3.202， P=0.001），且恢复至CON组水平（ t=3.362， P=0.605）。经过治疗后，Hypo组的MCT8水平高于CON组（ t=11.254， P<0.001），MET组大鼠MCT8水平较Hypo组低（ t=5.679， P<0.001），L-T4组MCT8水平较Hypo组大鼠低（ t=5.813， P<0.001），联合治疗组大鼠MCT8水平较Hypo组大鼠低（ t=8.624， P<0.001），且恢复至CON组水平（ P=0.477）。 结论:L-T4凝胶剂联合二甲双胍对甲减有良好治疗作用，其能升高海马Ach水平，降低海马MCT8水平。

Allan-Herndon-Dudley综合征(AHDS)是因甲状腺激素(TH)转运体基因 SLC16A2突变，致其编码单羧酸转运蛋白8(MCT8)功能失活，不能介导TH进入靶细胞引起的内分泌罕见病。主要临床表现为脑甲状腺功能减退(甲减)所致的严重神经运动发育异常，TH分泌代谢异常所致血清学(高T 3、低T 4、正常或轻度升高的促甲状腺激素)改变及外周组织甲状腺毒症。基因检测证实 SLC16A2基因变异可确诊。有效的治疗应以改善脑甲减和外周甲状腺毒症以及恢复蛋白功能为目标。相比于激素替代治疗，T 3类似物三碘甲状腺乙酸可以不依赖MCT8进入细胞，激活TH受体而发挥TH样作用，在改善患者外周甲状腺功能亢进症状上疗效显著，对神经表型可能也有效，是目前治疗AHDS较好的方法；旨在恢复MCT8功能的基因替代和伴侣分子治疗仍处于研究阶段。

目的:探讨靶向抑制3型脱碘酶（Dio3）对脓毒症骨骼肌线粒体的保护作用及其机制。方法:①体内实验：通过盲肠结扎穿孔术（CLP）构建脓毒症大鼠模型；利用腺相关病毒靶向干扰大鼠胫骨前肌Dio3的表达。按随机数字表法将雄性SD大鼠分为阴性敲除假手术组（shNC+Sham组）、阳性敲除假手术组（shD3+Sham组）、阴性敲除CLP组（shNC+CLP组）和阳性敲除CLP组（shD3+CLP组），每组8只。制模后取胫骨前肌，用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测Dio3、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（PGC1α）、沉默信息调节因子1（SIRT1）等蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测甲状腺激素受体（THRα、THRβ）、单羧酸转运蛋白10（MCT10）等T3调控基因，线粒体DNA（mtDNA），线粒体生物合成相关基因PGC1α的mRNA表达；透射电镜下观察线粒体形态。②体外实验：体外培养小鼠成肌样细胞C2C12，利用慢病毒干扰Dio3表达，并用脂多糖（LPS）构建内毒素细胞模型，并分为shNC组、shD3组、shNC+LPS组和shD3+LPS组。免疫荧光染色分析PGC1α胞内分布。免疫共沉淀联合Western blotting检测PGC1α乙酰化水平。结果:①体内实验：与shNC+Sham组相比，shNC+CLP组骨骼肌内Dio3蛋白表达明显升高（Dio3/β-Tubulin：3.32±0.70比1.00±0.49， P<0.05），而shD3+Sham组无差异；shD3+CLP组Dio3蛋白表达较shNC+CLP组明显降低（Dio3/β-Tubulin：1.42±0.54比3.32±0.70， P<0.05）。与shNC+CLP组相比，shD3+CLP组T3调控基因的表达明显上调〔THRα mRNA（2 -ΔΔCt）：0.67±0.05比0.33±0.01，THRβ mRNA（2 -ΔΔCt）：0.94±0.05比0.67±0.02，MCT10 mRNA（2 -ΔΔCt）：0.65±0.03比0.57±0.02，均 P<0.05〕。电镜结果提示，shNC+CLP组骨骼肌线粒体损伤明显，而shD3+CLP组线粒体形态保持完整；与shNC+Sham组相比，shNC+CLP组线粒体数量明显减少（个/HP：10.375±1.375比13.750±2.063， P<0.05），而shD3+CLP组线粒体数量较shNC+CLP组明显增多（个/HP：11.250±2.063比10.375±1.375， P<0.05）；shNC+CLP组mtDNA表达较shNC+Sham组明显降低（拷贝数：0.842±0.035比1.002±0.064， P<0.05），而shD3+CLP组mtDNA表达与shNC+CLP组无差异，但明显高于shD3+Sham组（拷贝数：0.758±0.035比0.474±0.050， P<0.05）。与shNC+CLP组相比，shD3+CLP组PGC1α的转录及蛋白水平均明显改善〔PGC1α mRNA（2 -ΔΔCt）：1.49±0.13比0.68±0.06，PGC1α蛋白相对表达量（PGC1α/β-Tubulin）：0.76±0.02比0.62±0.04，均 P<0.05〕。②体外实验：LPS干预24 h后，shNC+LPS组PGC1α胞内定位弥散；干扰Dio3表达后促使PGC1α向核周及核内移位。与shNC+LPS组比较，shD3+LPS组PGC1α的乙酰化水平明显降低（乙酰化PGC1α/β-Tubulin：0.59±0.01比1.24±0.01， P<0.05），而介导蛋白去乙酰化的主要蛋白SIRT1的表达明显升高（SIRT1/β-Tubulin：1.04±0.04比0.58±0.03， P<0.05）。利用EX527抑制SIRT1活性后，shD3+LPS+EX527组PGC1α蛋白表达较shD3+LPS组明显降低（PGC1α/β-Tubulin：0.92±0.03比1.58±0.03， P<0.05）。 结论:抑制骨骼肌Dio3表达可以通过激活SIRT1减轻PGC1α的乙酰化修饰，促使PGC1α向核内移位，从而对脓毒症导致的骨骼肌线粒体损伤起到保护作用。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-342-3p靶向调节单羧酸转运蛋白1(MCT1)对肝癌细胞增殖、周期核迁移的影响。方法:选取2019年9月至2021年9月黄淮学院附属驻马店市中心医院和河南省人民医院收治的100例肝癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量PCR分析肝癌组织和癌旁组织中miR-342-3p表达水平。人肝癌细胞系HepG2分为对照组和miR-342-3p组，分别采用对照miRNA和miR-342-3p慢病毒感染，建立稳定细胞系。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、EdU染色、流式细胞术、划痕实验和Transwell分析两组细胞增殖、周期和迁移水平。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-342-3p靶基因；蛋白质免疫印迹分析肿瘤组织和细胞系靶基因表达水平。组间比较采用 t检验。 结果:肝癌组织中miR-342-3p表达水平(0.51±0.14)明显低于癌旁组织(1.22±0.22)，差异有统计学意义( t＝27.800， P<0.05)。对照组细胞吸光度( A)值(1.98±0.13)明显高于miR-342-3p组(1.29±0.12)，差异有统计学意义( t＝9.384， P<0.05)。对照组细胞EdU阳性率[(88.01±5.41)%]明显高于miR-342-3p组[(76.13±6.01)%]，差异有统计学意义( t＝3.598， P<0.05)。对照组细胞G0/G1期百分比[(35.50±3.56)%]明显低于miR-342-3p组细胞[(42.17±2.64)%]，差异有统计学意义( t＝3.682， P<0.05)。对照组细胞S期百分比[(31.33±2.58)%]明显高于miR-342-3p组细胞[(24.33±3.01)%]，差异有统计学意义( t＝4.323， P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(134.50±18.35)个]高于miR-342-3p组细胞[(105.83±5.56)个]比较，差异有统计学意义( t＝3.662， P<0.05)。MCT1是miR-342-3p的靶基因。肝癌组织中MCT1蛋白表达水平(1.48±0.23)明显高于癌旁组织(1.01±0.17)，差异有统计学意义( t＝17.010， P<0.05)。对照组细胞MCT1蛋白表达水平(1.13±0.17)高于miR-342-3p组细胞(0.63±0.07)，差异有统计学意义( t＝6.687， P<0.05)。 结论:miR-342-3p在肝癌组织中呈低表达，过表达miR-342-3p抑制肝癌细胞增殖、周期和迁移，可能与其靶向调节MCT1有关。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-205靶向调控单羧酸转运蛋白1(MCT1)对结直肠癌细胞乳酸水平和增殖能力的影响。方法:选取2017年6月至2019年6月新乡市中心医院收集的280例结直肠癌和对应癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-205和MCT1表达水平；采用慢病毒介导对照miRNA和miR-205感染SW480结直肠癌细胞系，构建miRNA对照组和miR-205组细胞系，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖能力；采用比色法测定肿瘤组织和两组细胞胞内乳酸水平；采用碘化丙锭测定两组细胞周期；采用双荧光素酶报告基因分析miR-205靶基因；采用Western blot分析两组细胞增殖和周期相关蛋白的表达水平。应用SPSS 17.0统计学软件分析，符合正态分布的以均数±标准差表示，组间比较采用 t检验。 结果:癌旁组织miR-205表达水平(1.22±0.19)明显高于结直肠癌组织(0.51±0.11)，差异有统计学意义( t＝4.991， P<0.05)。癌旁组织MCT1蛋白相对表达水平(0.87±0.17)明显低于结直肠癌组织(2.72±0.23)，差异有统计学意义( t＝5.198， P<0.05)。癌旁组织乳酸水平[(1.97±0.24) mmol/L]明显低于结直肠癌组织[(4.71±0.87) mmol/L]，差异有统计学意义( t＝3.718， P<0.05)。miRNA对照组细胞乳酸水平[(2.76±0.82) mmol/L]明显高于miR-205组[(1.20±0.18) mmol/L]，差异有统计学意义( t＝3.338， P<0.05)。miRNA对照组细胞吸光度值[(1.86±0.64)]明显高于miR-205组[(1.23±0.39)]，差异有统计学意义( t＝3.011， P<0.05)。miRNA对照组细胞G 0+G 1期比例[(32.73±3.09)%]明显低于miR-205组[(43.19±3.12)%]，差异有统计学意义( t＝2.810， P<0.05)。miRNA对照组细胞S期比例[(34.22±4.17)%]明显高于miR-205组[(24.44±2.95)%]，差异有统计学意义( t＝2.422， P<0.05)。生物信息学分析结果显示MCT1是miR-205的靶基因。miRNA对照组细胞MCT1相对表达水平(1.09±0.12)明显高于miR-205组(0.48±0.10)，差异有统计学意义( t＝2.864， P<0.05)。 结论:miR-205通过调控MCT1表达水平，调节细胞内乳酸水平，进而促进了肿瘤细胞增殖。

目的 研究5-羟色胺转运体(5-HTT)敲除对小鼠大脑皮层谷氨酸(Glu)能和γ-氨基丁酸(GABA)能系统的影响,为探索抑郁发生发展提供科学依据.方法 根据基因分型将5-HTT敲除的雄性实验小鼠分为5-HTT-/-(纯合子)、5-HTT+/-(杂合子)及5-HTT+/+(野生型)3个实验组,每组8只.采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测小鼠大脑皮层谷氨酸能系统N-甲基-D-天门冬氨酸受体1(GluNl)、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体1(GluR1)、兴奋性氨基酸转运体1(EAAT1)、兴奋性氨基酸转运体2(EAAT2)和GABA能系统谷氨酸脱羧酶67(GAD67)、囊泡 γ-氨基丁酸转运体(VGAT)和γ-氨基丁酸转运体1(GAT1)mRNA水平,采用蛋白免疫印迹法检测上述分子蛋白水平.采用SPSS 26.0软件进行单因素方差分析和LSD检验.结果 将5-HTT+/+组mRNA和蛋白表达量标准化为1,小鼠大脑皮层谷氨酸能系统相关分子变化为,与5-HTT+/+组相比,5-HTT-/-组GluR1、EAAT1、EAAT2mRNA水平较高(相对表达量分别为1.48±0.57、1.73±0.52和1.41±0.20),差异均有统计学意义(P＜0.05);与5-HTT+/+组和5-HTT+/-组(5-HTT+/-组EAAT1蛋白相对表达量为1.13± 0.28)比较,5-HTT-/-组EAAT1蛋白水平较高(相对表达量为1.62±0.38),差异均有统计学意义(P＜0.05).GABA能系统相关分子变化为,与5-HTT+/+组相比,5-HTT-/-组VGAT和GAT1 mRNA水平较高(相对表达量为1.36±0.44、1.47±0.35),差异均有统计学意义(P＜0.05);与5-HTT+/+组和5-HTT+/-组(5-HTT+/-组VGAT蛋白相对表达量为1.02±0.13)比较,5-HTT-/-组VGAT蛋白水平较低(相对表达量为0.74±0.16),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 5-HTT基因缺失可能激活皮层谷氨酸能系统并且抑制GABA系统,导致谷氨酸和γ-氨基丁酸失衡,可能与抑郁的发生发展有关.

目的 探讨联合检测谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、蛋白质酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)、锌转运体8抗体(ZnT8A)和胰岛特异的葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基相关蛋白抗体(IGRPA)对1型糖尿病患者诊断的意义.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)对45例1型糖尿病患者、50例2型糖尿病患者及50例正常对照者血清进行GADA、IA-2A、ZnT8A及IGRPA自身抗体的检测.结果 IA-2A、GADA、ZnT8A和IGRPA在1型糖尿病患者中检出率分别为28.89％、53.33％、71.11％和77.78％.4种自身抗体的阳性率在1型糖尿病患者中高于2型糖尿病组及正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).自身抗体联合检测敏感度均高于单项组,GADA/IA-2A/ZnT8A/IGRPA 4项联合检测敏感度及曲线下面积(AUC)均为最高,分别为95.56％和0.988.结论 GADA、IA-2A、ZnT8A和IGRPA抗体的联合检测可以显著提高1型糖尿病的检出率,对1型糖尿病的诊断具有重要意义.

目的 探讨β-羟基丁酸(BHB)对SD大鼠神经元细胞缺氧损伤的保护作用及其机制.方法 原代培养SD大鼠神经元细胞,不同浓度(2 mM、5 mM、10 mM、20 mM和50 mM)BHB预处理24 h,三气培养箱糖氧剥夺培养2h,线粒体超氧化物探针检测细胞线粒体氧化应激状态,CCK8检测细胞活力变化,QPCR测Na+偶联单羧酸转运体1(SMCT1)、caspae3和Cytochrome C的mRNA表达,Western Blot测SMCT1、caspase3、细胞色素C(Cytochrome C)、ERK1/2和p-ERK1/2(T202/204)蛋白表达.结果 2 mM、5 mM和10 mM浓度BHB对神经元细胞活力无显著影响(P＞0.05),20 mM和50mM浓度BHB可致神经元活力显著降低(P＜0.05).神经元缺氧培养后,活力降低(P＜0.05),线粒体氧化应激反应增强(P＜0.05),SMCT1的mRNA水平和蛋白水平显著降低(P＜0.05),caspase3与Cytochrome C的mRNA水平和蛋白水平明显增强(P＜0.05),ERK1/2的蛋白磷酸化水平降低(P＜0.05).BHB预处理缺氧神经元,低浓度对细胞无明显影响(P＞0.05);浓度增至10 mM,相比单纯缺氧组,神经元活力显著改善(P＜0.05),线粒体氧化应激状态降低(P＜0.05),SMCT1的mRNA水平和蛋白水平显著增加(P＜0.05),caspase3与Cytochrome C的mRNA水平和蛋白水平明显降低(P＜0.05),ERK1/2的蛋白磷酸化水平升高(P＜0.05).结论 高浓度(＞20 mM)BHB对神经元细胞有毒性作用;低浓度(＜5 mM) BHB对糖氧剥夺的神经元细胞无明显作用;10 mM浓度的BHB预处理可增加SMCT1转运体的表达,通过启动ERK1/2信号通路,降低神经元线粒体的氧化应激,减少凋亡,从而对糖氧剥夺的原代神经元细胞发挥保护作用.

目的 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯[di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]对胎盘转运甲状腺素(thyroid hormones,THs)影响胎鼠神经发育的作用.方法 在胎鼠神经管闭合(孕第9.5天,E9.5 d)至开始合成THs(E15.5 d)期间,用DEHP(0、10、50、200 mg/kg)对受孕小鼠经口灌胃染毒(每组10只),每天1次.E14d皮下注射BrdU 50 mg/kg.E15.5d麻醉下每组剖杀7只孕鼠,直接化学发光法检测孕鼠血清、羊水THs[游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)、三碘甲状腺原氨酸(triiodothyronine,T3)、甲状腺素(thyuroxine,T4)]水平.蛋白免疫印迹法检测雄性胎鼠胎盘单羧酸转运体8 (monocarboxylate transporter 8,MCT8)、有机阴离子转运多肽1C1(organicanion transporting polypeptide 1C1,OATP1C1)、Ⅱ型和Ⅲ型脱碘酶(deiodinase Ⅱ & Ⅲ,DIO2,DIO3).于E18d麻醉下剖杀每组剩余3只孕鼠,取雄性胎鼠脑,BrdU免疫组化检测胎脑皮层神经细胞增殖与迁移情况.结果 各处理组孕鼠进食饮水、体重及一般活动情况未见异常,各组胎鼠体重、脑重、脑体比等也无差异.各组孕鼠血清T3、T4、FF3、FT4和羊水FT4的差异均无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,DEHP 50、200 mg/kg组羊水FT3水平明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,DEHP 50、200 mg/kg组雄性胎鼠胎盘MCT8、DIO2蛋白水平下降,200 mg/kg组OATP1C1蛋白水平下降,差异有统计学意义(P＜0.05),各组间DIO3蛋白水平差异均无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,DEHP 200 mg/kg组雄性胎鼠大脑皮层单位面积BrdU阳性细胞数减少,56.5％分布于VZ-SVZ层,而50 mg/kg组IZ层的BrdU阳性细胞比例升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 孕中期染毒DEHP 50、200 mg/kg可影响发育中大脑神经细胞增殖和迁移,可能与其干扰THs经胎盘转运有关.