目的:探讨十二指肠结扎对大鼠胃食管反流及博莱霉素肺纤维化的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为对照（Ctrl）组、十二指肠结扎（GER）组、博莱霉素（BLM）组和十二指肠结扎+博莱霉素（BLM+GER）组。于d0，GER组和BLM+GER组开腹后在幽门下方1.0 cm处将十二指肠结扎30%；Ctrl组和BLM组行假手术。于d14，BLM组和BLM+GER组经气管滴入BLM 5 mg/kg，Ctrl组和GER组滴入生理盐水。d28和d42处死动物，肺组织行HE、Masson和TUNEL染色，碱水解法检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量，硫代巴比妥酸比色法检测肺泡灌洗液（BALF）丙二醛（MDA）含量，ELISA法检测BALF细胞因子和胃蛋白酶原含量，蛋白印迹法和RT-PCR法分别检测肺组织蛋白和mRNA表达。结果:GER组肺组织轻度炎性细胞浸润。BLM组表现为明显的肺泡炎和纤维化，而BLM+GER组肺泡炎和纤维化较之更为严重。Ctrl组、GER组、BLM组和BLM+GER组d28平均每个200倍视野下肺组织凋亡细胞数分别为（5.6±3.0）、（6.4±5.3）、（15.4±5.3）、（18.4±9.1）（ P=0.008）。d42时肺组织Masson蓝染区域比例（%）分别为（21.5±2.8）、（23.4±2.5）、（34.0±5.8）、（41.3±2.9） （ P<0.05），HYP（μg/ml）分别为（0.77±0.01）、（1.26±0.01）、（2.02±0.01）、（2.39±0.01） （ P<0.01），MDA（μmol/L）分别为（0.51±0.09）、（0.87±0.12）、（1.40±0.31）、（1.71±0.12） （ F=23.448， P<0.01），Ctrl或GER组与BLM组或BLM+GER组相比，d42这三项指标差异均有统计学意义（均 P<0.05）。与Ctrl组相比，GER组d28 和d42时胃蛋白酶、pH、白细胞介素（IL）-1β、转化生长因子（TGF）-β1、MDA、HYP的差异均有统计学意义（均 P<0.05）。与BLM组相比，BLM+GER组d42时BALF的胃蛋白酶及pH值以及d28和d42时TGF-β1、HYP、磷酸化细胞信号转导分子3（p-Smad3）、波形蛋白、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶（p-ERK1/2）、活化caspase-3表达差异有统计学意义（均 P<0.05）。BLM与Ctrl组相比、BLM+GER组与GER组相比，d28和d42时胃蛋白酶和pH的差异均有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:结扎十二指肠引起胃食管反流，活化肺部炎症和纤维化信号，显著加重BLM肺损伤和纤维化。同时，肺纤维化也可能诱发或加重反流。

目的:探讨黄芩素通过调控Sirtuin（Sirt）抑制成纤维样滑膜细胞（fibroblast-like synoviocytes，FLS）衰老，缓解骨关节炎的机制。方法:提取非骨关节炎患者（3例）及骨关节炎患者（3例）滑膜中的FLS，通过Western blot、β-半乳糖苷酶染色和免疫荧光等方法评估骨关节炎患者FLS的衰老程度，并检测FLS中Sirt家族蛋白和mRNA的变化水平。通过转染Sirt1 siRNA敲低FLS中Sirt1的相对表达水平，分析FLS抗氧化能力及衰老程度。将软骨细胞与FLS共培养，通过Western blot检测软骨细胞功能变化。使用博莱霉素（Bleomycin，BLM）诱导FLS衰老后予以不同浓度黄芩素处理，检测Sirt1、p16、p21蛋白表达水平，并检测细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）表达水平。敲低FLS中Sirt1的表达水平并予以BLM和黄芩素处理，采用Western blot和ROS检测Sirt1和ROS相对表达量。BLM诱导FLS衰老后加入黄芩素和Compound C，通过Western blot、ROS检测磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（phosphorylated AMP protein-activated kinase，pAMPK）、核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，NRF2）、p16、p21和ROS相对表达量。结果:骨关节组FLS的p16和p21相对表达量为3.66±0.38和3.55±0.34，高于非骨关节炎组的1.00±0.07、1.00±0.09（ t=11.860， P<0.001； t=12.520， P<0.001）。骨关节炎组FLS中Sirt1和Sirt6的相对表达水平为0.30±0.04和0.16±0.01，小于正常组的1.00±0.03和1.00±0.04（ t=23.840， P<0.001； t=34.130， P<0.001）。黄芩素处理后，BLM组、BLM+Bai组和对照组的ROS相对表达量分别为2.58±0.28、1.65±0.14和1.00±0.24，组间差异有统计学意义（ F=35.700， P<0.001），其中BLM组和BLM+Bai组均大于对照组，BLM+Bai组低于BLM组（ P<0.05）。Compound C+黄芩素处理后，pAMPK及NRF2相对表达为0.28±0.02和0.38±0.09，低于BLM+Bai组的0.56±0.07和0.60±0.08（ P<0.05）。ROS相对表达量由1.75±0.16升高至3.45±0.12（ P<0.001）。BLM+Bai+Compound C组、BLM+Bai组和对照组β-半乳糖苷酶阳性比例分别为47.30%±4.29%、18.18%±3.89%和7.70%±3.53%（ F=109.700， P<0.001），其中BLM+Bai+Compound C组高于BLM+Bai组（ P<0.05）。 结论:骨关节炎患者Sirt1表达下调导致FLS衰老，加速骨关节炎进展。黄芩素可通过激活Sirt1/AMPK/NRF2通路抑制FLS衰老，可能延缓骨关节炎进展，进而改善软骨细胞功能。

目的:通过体内实验和体外实验探讨地高辛对博莱霉素诱导肺纤维化小鼠的作用及其可能机制。方法:①体内实验：将60只C57/BL6J小鼠按随机数字表法分为对照组、肺纤维化模型组（模型组）、吡非尼酮（300 mg/kg）组及地高辛1.0 mg/kg、0.2 mg/kg组，每组12只。一次性气管内滴注博莱霉素5 mg/kg制备小鼠肺纤维化模型；对照组给予等量无菌生理盐水。制模后次日起各组灌胃相应药物，每日1次，持续28 d；对照组及模型组给予等量生理盐水。处死小鼠取肺组织，检测肺系数；苏木素-伊红（HE）及Masson染色后，光镜下观察肺组织形态学和胶原变化；采用免疫组化法检测肺组织中肌成纤维细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及细胞外基质（ECM）胶原蛋白（COL-Ⅰ、COL-Ⅲ）阳性表达；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测肺组织中ECM纤维连接蛋白（FN）、转化生长因子-β（TGF-β）及磷酸化Smad3（p-Smad3）的蛋白表达。②体外实验：体外培养人胚肺成纤维细胞（HFL-1），当细胞密度达到70%~90%时分为空白对照组、细胞活化模型组（模型组）、吡非尼酮（2.5 mmol/L）组及地高辛100 nmol/L、50 nmol/L组。给予相应药物处理3 h后，除空白对照组外，其余各组加入诱导剂TGF-β处理48 h制备细胞活化模型。Western blotting检测细胞中α-SMA、FN、p-Smad3蛋白表达及磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（PI3K/Akt）通路蛋白PI3K、Akt的磷酸化（p-PI3K、p-Akt）水平。结果:①体内实验结果：与对照组比较，模型组小鼠肺泡结构破坏明显，大量炎症细胞浸润，肺间质内胶原沉积，且肺组织中ECM沉积增加，α-SMA、FN、TGF-β、p-Smad3的蛋白表达水平均显著升高，说明博莱霉素诱导小鼠肺纤维化模型制备成功。与模型组比较，地高辛可以显著抑制气道炎症、胶原纤维沉积，减少ECM沉积，降低α-SMA、FN、TGF-β、p-Smad3的蛋白表达，且效果优于吡非尼酮组，除FN外以地高辛1.0 mg/kg组效果更好〔α-SMA（ A值）：5.37±1.10比9.51±1.66，TGF-β蛋白（TGF-β/GAPDH）：0.09±0.04比0.33±0.23，p-Smad3蛋白（p-Smad3/GAPDH）：0.05±0.01比0.20±0.07，均 P<0.01〕。②体外实验结果：与空白对照组比较，模型组细胞FN、α-SMA、p-Smad3及PI3K/Akt信号蛋白表达均增加，表明TGF-β诱导的成纤维细胞活化模型建立成功。与模型组比较，地高辛可以显著抑制成纤维细胞活化，明显降低FN、α-SMA、p-Smad3及PI3K/Akt通路蛋白表达，且效果优于吡非尼酮组，其中以地高辛100 nmo/L组FN、α-SMA及p-Akt表达降低更为明显〔FN蛋白（FN/GAPDH）：0.21±0.15比0.88±0.22，α-SMA蛋白（α-SMA/GAPDH）：0.20±0.01比0.50±0.08，p-Akt蛋白（p-Akt/GAPDH）：0.30±0.01比0.65±0.10，均 P<0.01〕。 结论:地高辛对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化具有保护作用，其机制可能与调节PI3K/Akt信号通路抑制成纤维细胞活化有关，并呈一定剂量依赖性。

目的:研究艾拉莫德是否能够抑制TGF-β 1诱导的人肺成纤维细胞（HLFs）活化及胶原分泌。 方法:在体内，建立小鼠肺纤维化模型，分为3组：正常对照组、博莱霉素组和博莱霉素+艾拉莫德组，苏木精-伊红（HE）染色观察肺形态，马松染色观察肺内胶原积累程度，组织免疫荧光检测肺内肌成纤维细胞标志蛋白纤维连接蛋白（fibronectin）和平滑肌22蛋白（SM22），氯胺-T法检测肺组织羟脯氨酸含量。在体外，用原代人肺成纤维细胞（pHLFs）进行细胞实验评估艾拉莫德对TGF-β 1刺激的影响，分为4组：正常对照组、艾拉莫德组、TGF-β 1组、TGF-β 1+艾拉莫德组，流式细胞术检测细胞的凋亡情况，实时荧光定量（qRT）-PCR检测细胞Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的mRNA表达水平，蛋白质印迹法和细胞免疫荧光检测细胞α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、fibronectin、p-Smad2和p-Smad3以及转录辅助激活因子p300的蛋白水平。数据均采用单因素方差分析，两两比较用LSD- t检验或Kruskal-Wallis检验。 结果:羟脯氨酸含量：正常对照组为（0.552±0.075）μg/mg，博莱霉素组为（1.293±0.081）μg/mg，博莱霉素+艾拉莫德组（0.833±0.053）μg/mg （ F=169.672， P<0.01），艾拉莫德降低了小鼠肺组织羟脯氨酸含量，减少了肺内胶原积累，从而降低了博莱霉素诱导的肺纤维化程度，改善了小鼠肺部病理改变。在细胞实验中，艾拉莫德对细胞凋亡比例差异无统计学意义（ F=0.83， P=0.54）；Ⅰ型胶原蛋白mRNA相对表达量：正常对照组为（100.4±1.2），TGF-β 1组为（299.0±13.0），TGF-β 1+艾拉莫德组（202.5±7.0）（ F=468.7， P<0.01）；Ⅲ型胶原蛋白mRNA相对表达量：正常对照组为（99.8±1.9），TGF-β 1组为（350.6±8.0），TGF-β 1+艾拉莫德组（220.3±9.9）（ F=468.7， P<0.01）；α-SMA蛋白相对表达量：正常对照组为（0.193±0.038），TGF-β 1组为（0.530±0.061），TGF-β 1+艾拉莫德组为（0.410±0.065）（ F=35.620， P<0.01）；Fibronectin蛋白相对表达量：正常对照组为（0.200±0.020），TGF-β 1组为（0.700±0.020），TGF-β 1+艾拉莫德组为（0.410±0.066）（ F=123.326， P<0.01）；p-Smad3蛋白相对表达量：正常对照组为（0.120±0.020），TGF-β 1组为（0.573±0.586），TGF-β 1+艾拉莫德组为（0.327±0.252）（ F=92.987， P<0.01）；p300蛋白相对表达量：正常对照组为（0.180±0.055），TGF-β 1组为（0.923±0.025），TGF-β 1+艾拉莫德组（0.650±0.050）（ F=207.676， P<0.01）。艾拉莫德显著降低TGF-β 1诱导的Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的mRNA表达水平，抑制α-SMA、Fibronectin、p300蛋白表达，以及Smad2、Smad3蛋白的磷酸化。 结论:艾拉莫德能够经Smad3/p300通路抑制TGF-β 1介导的人肺成纤维细胞活化及胶原分泌，它可能作为一种有效的抗纤维化药物用于延缓PF的进展。

目的 观察TACE联合普萘洛尔治疗巨大婴儿肝血管瘤(IHH)的有效性及安全性.方法 回顾性分析10例接受TACE联合普萘洛尔治疗的巨大IHH婴儿,记录技术成功率、并发症及复发情况;根据TACE前、后 6个月临床症状及IHH体积变化评价治疗效果.结果 对10例成功完成15次TACE,技术成功率100%;对其中3例予博莱霉素+碘化油乳剂+聚乙烯醇颗粒(PVA)+弹簧圈栓塞、7例予博莱霉素+碘化油乳剂+PVA栓塞.并发症包括 1例穿刺点皮下血肿、2例TACE后 24 h内一过性低热,经对症治疗后均好转;未见其他并发症.末次TACE后 6个月,9例(9/10,90.00%)获得显效、1例(1/10,10.00%)有效,治疗总有效率 100%.随访期间未见胆囊坏死、肝坏死、死亡等严重并发症;亦未见肝动脉瘤复发.结论 TACE联合普萘洛尔治疗巨大IHH有效且安全.

药品名称:错误(正确)二磷酸腺苷(腺苷二磷酸),消炎痛(吲哚美辛),阿斯匹林(阿司匹林),维甲酸(维A酸),双磷酸盐(双膦酸盐),甲氨喋呤(甲氨蝶呤),博莱霉素(博来霉素),开浦兰(左乙拉西坦),雷公多苷(雷公藤多苷),非那根(异丙嗪),四乙铵(四乙胺),洗必泰(氯已定),美息律(美西律),大环内脂类(大环内酯类),川穹(川芎),酒精(乙醇),头胞哌酮(头孢哌酮).

目的:建立博莱霉素制备肺纤维化小鼠模型，分析大蒜素对肺纤维化的改善作用。方法:选择C57BL/6小鼠24只，分成4组，每组6只，分别为正常对照组、正常给药组、模型组和模型给药组。模型组和模型给药组小鼠气道内单次滴注100 μl博莱霉素(浓度5 mg·kg)诱导小鼠肺纤维化。7 d后正常给药组和模型给药组每日给予100 μl大蒜素(浓度5 mg·kg)治疗，正常对照组和模型组每日给予等量生理盐水，3周后小鼠行安乐死，取肺组织备用。取部分新鲜肺组织包埋切片，HE、Masson染色，比较各组小鼠肺组织病理变化，检测肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline, HYP)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase, T-SOD)及丙二醛(malondialdehyde, MDA)。结果:小鼠1 d、7 d、14 d、28 d体质量：正常对照组(20.49±0.55)、(22.09±0.51)、(23.76±0.57)、(25.08±0.64)g；正常给药组(20.55±0.65)、(21.79±0.70)、(23.12±0.57)、(24.64±0.49)g；模型组(20.56±0.74)、(19.78±0.77)、(18.70±0.86)、(17.67±1.11)g；模型给药组(20.78±0.77)、(21.49±0.81)、(22.45±0.86)、(23.81±0.72)g。大蒜素治疗后小鼠肺泡炎减轻，肺纤维化程度改善。肺组织中HYP含量：正常对照组(0.87±0.09)μg/ml，正常给药组(0.86±0.03)μg/ml，模型组(1.54±0.24)μg/ml，模型给药组(0.90±0.09)μg/ml；T-SOD活性水平：正常对照组(24.20±0.11)U/mg，正常给药组(24.29±0.14)U/mg，模型组(14.75±0.64)U/mg，模型给药组(19.25±0.69)U/mg；MDA含量：正常对照组(1.21±0.08)nmol/mg，正常给药组(1.18±0.13)nmol/mg，模型组(3.23±0.07)nmol/mg，模型给药组(2.42±0.05)nmol/mg。结论:大蒜素通过降低肺组织中HYP、MDA含量，升高T-SOD活性，对小鼠肺纤维化具有改善作用。

通过大鼠体内实验探讨培土益肺颗粒抑制特发性肺纤维化(IPF)的作用机制.将50只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为空白组与造模组,造模组大鼠通过经气管滴注5 mg·kg-1博莱霉素(BLM)法制备IPF大鼠模型后随机分为模型组,吡非尼酮组,培土益肺颗粒高、中、低剂量组.造模24 h后,培土益肺颗粒治疗组和阳性药组分别灌胃给药,模型组以等体积生理盐水灌胃,给药21 d后取材.苏木素-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色观察肺组织病理形态变化,蛋白免疫印迹(WB)法检测蛋白激酶B(Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及二者磷酸化蛋白和螯合体1(p62)等蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测苄氯素1(Beclin-1)、微管相关蛋白1A/1B轻链3B(LC3B)、p62的mRNA表达,免疫组化法检测Bec-lin-1、LC3B蛋白的表达.结果显示空白组大鼠肺组织结构正常,胶原沉积不明显,模型组大鼠肺组织肺泡间隔增厚,有明显的炎性改变和胶原沉积;与模型组相比,培土益肺颗粒组和吡非尼酮组大鼠肺组织结构明显改善,炎症及胶原沉积明显减轻.与空白组比较,模型组肺组织中p62及其mRNA、p-Akt、p-mTOR蛋白表达显著升高,Beclin-1、LC3B及二者mRNA水平显著降低;与模型组比较,吡非尼酮组和培土益肺颗粒高、中剂量组肺组织中p62及其mRNA、p-Akt、p-mTOR表达显著降低,Beclin-1、LC3B及二者mRNA表达均显著升高.以上说明培土益肺颗粒可以通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路提高肺组织内自噬水平延缓IPF疾病的发展.

目的:通过观察橙皮苷对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的保护作用,并从依托泊诱导蛋白2.4(EI24)基因和Th1/Th1 平衡方面探讨其相关机制.方法:将60 只大鼠随机分成6 组:假手术组、模型组、吡非尼酮组(阳性对照,0.12g/kg 吡非尼酮)、低剂量橙皮苷组(12mg/kg)、中剂量橙皮苷组(24mg/kg)和高剂量橙皮苷组(36mg/kg),每组10 只.采用气管内注射博莱霉素建立肺纤维化大鼠模型.采用小动物呼吸机检测大鼠的肺功能指标用力肺活量(FVC)、第 1 秒用力呼气容积(FEV1)、呼气流量峰值(PEF).采用苏木精伊红染色和Masson染色进行病理组织学评估.2023 年 2 月采用酶联免疫吸附实验检测大鼠肺组织细胞因子水平.2023 年 2 月采用流式细胞术分析大鼠肺组织中辅助 T 细胞(Th)亚群的占比情况.2023 年2 月采用蛋白免疫印迹检测肺组织中 EI24 蛋白的表达.结果:与模型组相比,橙皮苷处理组大鼠的FVC、FEV1、PEF均明显升高,且肺指数明显降低(P<0.05).相较于模型组,橙皮苷处理组大鼠肺组织损伤、炎症浸润、肺纤维化和胶原沉积明显减少,且肺组织中 TGF-β1、Col I、HYP、IL-6 和TNF-α含量均明显降低(P<0.05).与假手术组相比,模型组EI24 mRNA和蛋白表达显著降低;与模型组相比,中剂量橙皮苷组和高剂量橙皮苷组中 EI24 mRNA 和蛋白表达显著增加(P<0.05).此外,与模型组相比,中剂量橙皮苷组和高剂量橙皮苷组大鼠肺组织中 Th1 细胞亚群占比明显升高,而Th2 细胞亚群占比明显降低(P<0.05).同时,中剂量橙皮苷组和高剂量橙皮苷组肺组织中IFN-γ水平显著升高,而IL-13 和IL-4 水平显著降低(P<0.05).结论:橙皮苷能够减弱博莱霉素诱导的炎症细胞浸润、促炎细胞因子释放和ECM过度沉积,从而改善大鼠肺纤维化进程,其机制可能是通过调控EI24 和Th1/Th2 免疫细胞平衡来实现.

药品名称:错误(正确)二磷酸腺苷(腺苷二磷酸),消炎痛(吲哚美辛),阿斯匹林(阿司匹林),维甲酸(维A酸),双磷酸盐(双膦酸盐),甲氨喋呤(甲氨蝶呤),博莱霉素(博来霉素),开浦兰(左乙拉西坦),雷公多苷(雷公藤多苷),非那根(异丙嗪),四乙铵(四乙胺),洗必泰(氯已定),美息律(美西律),大环内脂类(大环内酯类),川穹(川芎),酒精(乙醇),头胞哌酮(头孢哌酮).