目的:寻找三阴性乳腺癌（TNBC）研究与治疗的可能靶点，并采用生物信息学对影响TNBC预后的基因进行分析预测。方法:检索The National Center for Biotechnology Information（NCBI）数据库，分析不同组间差异基因后提交至Enrichr网站进行通路富集，最后进行TNBC患者的生存分析。结果:去整合素金属蛋白酶9（ADAM9）基因与TNBC患者的预后不良有相关性（ P<0.05），且其仅与TNBC患者预后有关，与其他分型乳腺癌无关。 结论:ADAM9基因被证明与TNBC患者的不良预后有关，可将其视为导致TNBC患者淋巴结转移，最终预后不良的可能关键基因。

目的 探讨血清肌红蛋白(Mb)、生长分化因子-15(GDF-15)、去整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)与35岁以下急性心肌梗死(AMI)发生及心源性死亡的关系.方法 选取2016年1月至2023年1月内蒙古自治区人民医院收治的115例AMI患者作为AMI组,并根据观察期内(随访6个月)心源性死亡情况分为死亡组与存活组,另选同期60名健康体检者作为对照组.记录死亡组与存活组临床资料及入院时血清Mb、GDF-15、ADAM9水平并进行比较,采用Logistic回归方程分析35岁以下AMI患者心源性死亡发生的影响因子,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清Mb、GDF-15、ADAM9单独或联合对35岁以下AMI患者6个月内心源性死亡发生的预测价值.结果 AMI组患者的血清Mb、GDF-15、ADAM9水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);AMI组患者观察期内共发生心源性死亡30例,发生率26.07％;死亡组患者高血压占比及血清Mb、GDF-15、ADAM9水平明显高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析显示,血清Mb、GDF-15、ADAM9水平升高是35岁以下AMI患者心源性死亡发生的危险因子(P<0.05);35岁以下AMI患者血清Mb、GDF-15、ADAM9两两正相关(P<0.05);血清Mb、GDF-15、ADAM9联合预测35岁以下AMI患者发生心源性死亡的AUC为0.877,高于三者单独预测的0.752、0.762、0.720(P<0.05).结论 35岁以下AMI患者血清Mb、GDF-15、ADAM9明显升高,联合检测此三项指标对35岁以下AMI患者6个月内心源性死亡发生有较好的预测价值.

目的 基于微小RNA-126(miR-126)/解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)信号通路研究五脏温阳化瘀汤抗大鼠动脉粥样硬化的作用.方法 取SPF级SD雄性大鼠38只,随机选择6只大鼠设为空白组,剩余32只大鼠通过腹腔注射维生素D3注射液联合高脂饲料喂养方法制备动脉粥样硬化模型.造模6周后将造模成功的大鼠随机分为模型组,阿托伐他汀组及五脏温阳化瘀方低、中、高剂量组,每组6只.空白组和模型组给予生理盐水灌胃,阿托伐他汀组给予阿托伐他汀钙片27.3mg/(kg·d)灌胃,五脏温阳化瘀方低、中、高剂量组分别给予五脏温阳化瘀汤1.25 g/(kg·d)、2.5 g/(kg·d)、5 g/(kg·d)灌胃,均1次/d,连续灌胃12周.灌胃结束后,采用ELISA法检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,HE染色观察主动脉病理形态,qRT-PCR法检测主动脉组织中miR 126及ADAM9 mRNA表达情况,Western blot法检测主动脉组织中ADAM9蛋白表达情况.结果 与空白组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-1β水平和主动脉组织中ADAM9 mRNA及蛋白相对表达量均明显升高(P均＜0.05),血清HDL-C水平和主动脉组织中miR-126相对表达量均明显降低(P均＜0.05);与模型组比较,各药物组大鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-1β水平和主动脉组织中ADAM9 mRNA及蛋白相对表达量均明显降低(P均＜0.05),血清HDL-C水平和主动脉组织中miR-126相对表达量均明显升高(P均＜0.05);与五脏温阳化瘀方低、中剂量组比较,阿托伐他汀组与五脏温阳化瘀方高剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-1β水平和主动脉组织中ADAM9 mRNA及蛋白相对表达量均更低(P均＜0.05),血清HDL-C水平和主动脉组织中miR-126相对表达量均更高(P均＜0.05),五脏温阳化瘀方高剂量组与阿托伐他汀组各指标比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).模型组大鼠主动脉血管内皮缺损、内膜增厚,大量泡沫细胞聚集和炎细胞浸润;各药物组大鼠主动脉病理改变较模型组轻,泡沫细胞及炎性细胞浸润少.结论 五脏温阳化瘀方可以通过激活miR-126/ADAM9信号通路,降低炎症因子水平,减轻动脉粥样硬化大鼠炎症反应,从而发挥抗动脉粥样硬化作用.

目的:配对盒基因6(paired box gene 6,PAX6)主要在胚胎发育中发挥调控作用,其异常表达与多种肿瘤的发生、发展有关,在不同肿瘤中可发挥促癌或抑癌的作用.本研究旨在观察过表达PAX6对肝癌细胞生长及自然杀伤(natural killer,NK)细胞对肝癌细胞杀伤能力的影响及其分子机制.方法:采用ELISA技术检测68例肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者和10例健康人外周血的PAX6、可溶性主要组织相容性复合体I类样蛋白A(soluble major histocompatibility complex class I-like protein A,sMICA)和可溶性UL16结合蛋白2(soluble UL16 binding protein 2,sULBP2)的表达水平;体外培养肝癌细胞HepG2和LM3及人正常肝细胞LO2,将PAX6过表达质粒(PAX6-OE)和空载体(NC)转入HepG2和LM3细胞中构建稳定细胞株,分别采用real-time PCR、蛋白质印迹法、免疫荧光等方法检测HepG2和LM3细胞中PAX6的表达水平;在HepG2和LM3细胞中过表达PAX6,采用CCK-8法和细胞划痕实验检测细胞生长和迁移能力,ELISA法检测其上清液中sMICA和sULBP2的分泌水平,蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、去整合素样金属蛋白酶10(disintegrin and metalloproteinase 10,ADAM10)的蛋白质表达水平;采用流式细胞术检测NK细胞对2种肝癌细胞的杀伤能力.结果:与健康人相比较,HCC患者血清中PAX6表达水平显著降低(P=0.002),而sMICA和sULBP2的表达水平显著增高(P=0.004和P<0.001).Real-time PCR、蛋白质印迹法结果显示:与正常肝细胞LO2相比,HepG2和LM3细胞PAX6的mRNA和蛋白质表达水平均显著降低(均P<0.05).免疫荧光结果亦可见肝癌细胞HepG2和LM3中PAX6的表达均低于正常肝细胞LO2.与NC组比较,PAX6-OE组肝癌细胞HepG2和LM3的增殖及迁移能力下降(均P<0.05);PAX6-OE组的HepG2和LM3细胞中MMP2、MMP9、ADAM10的蛋白质表达水平均显著降低(均P<0.05),且PAX6-OE组的HepG2和LM3细胞上清液中sMICA和sULBP2的分泌水平均显著低于NC组(均P<0.05).流式细胞术显示:与NC组比较,PAX6-OE组NK细胞对HepG2和LM3细胞的杀伤率显著增高(均P<0.05).结论:PAX6在HCC患者血清及肝癌细胞系中表达降低,过表达PAX6可抑制肝癌细胞生长,增强NK细胞对肝癌细胞的杀伤效率,其机制与PAX6抑制金属蛋白酶的表达、降低sMICA和sULBP2的分泌水平有关.

目的:探讨超声弹性成像(UE)联合血清促甲状腺激素(TSH)、胸苷激酶1(TK1)、Lemur-酪氨酸激酶3(LMTK3)对甲状腺乳头状癌(PTC)的诊断价值及与肿瘤侵袭和增殖的关系.方法:选取2020年1月-2022年12月海军军医大学第二附属医院收治的91例PTC患者作为观察组.另选取本院同期90例甲状腺良性肿瘤患者作为对照组.对所有患者开展UE检查,对比两组UE参数,同时检测并对比两组血清TSH、TK1、LMTK3水平以及组织标本中侵袭基因、增殖基因的信使核糖核酸(mRNA)表达水平.Pearson法分析UE参数、血清TSH、TK1、LMTK3与侵袭基因、增殖基因mRNA表达水平的相关性.受试者工作特征(ROC)曲线分析UE联合血清TSH、TK1、LMTK3对PTC的诊断效能.结果:观察组超声弹性评分(ES)、弹性系数(SR)均高于对照组(均P＜0.05).观察组血清TSH、TK1、LMTK3水平均高于对照组(均P＜0.05).观察组去整合素-金属蛋白酶9(ADAM-9)、BCL6共抑制因子样蛋白1(BCORL1)、Xklp2靶蛋白(TPX2)及Twist1 mRNA表达水平均高于对照组(均P＜0.05).Pearson法分析结果显示,ES、SR及血清 TSH、TK1、LMTK3 均和 ADAM9、BCORL1、TPX2、Twist1 mRNA 表达水平均呈正相关(均 P＜0.05).ES、SR 及血清 TSH、TK1、LMTK3联合检测对PTC诊断的灵敏度为91.52％,特异度为87.34％,曲线下面积(AUC)为0.894,联合诊断的效能均优于上述五项指标单独检测.结论:UE联合血清TSH、TK1、LMTK3对PTC具有较高的诊断价值.上述指标异常升高与PTC肿瘤侵袭、增殖有关.

目的:探讨carvacrol对口腔鳞状细胞癌中ADAM9表达的影响.方法:蛋白印记法分析carvacrol处理的口腔鳞状细胞癌中的去整合素金属蛋白酶9(ADAM9)蛋白表达.另外,提取40μmol/L carvacrol处理24小时的UM-SCC-23细胞系和Tca8113细胞系中总RNA进行反转录,利用实时定量PCR(real-time PCR)扩增检测ADAM9基因表达.结果:Carvacrol明显降低UM-SCC-23细胞系和Tca8113细胞系ADAM9的蛋白和基因表达.结论:研究揭示了carvacrol的重要机制,可能为口腔鳞状细胞癌治疗提供新的理论依据.

目的观察T2DM大鼠早期认知功能改变及海马磷酸化N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基 (p-NR2B)、Wnt3a和去整合素金属蛋白酶10(ADAM10)的表达变化.方法将40只健康雄性SD大 鼠采用随机数字表法分为对照组(Con,n=20),糖尿病组(DM,n=20).Con组以普通饲料喂养8周后单 次空腹腹腔注射柠檬酸缓冲液.DM组以高脂高糖喂养8周诱导IR后腹腔小剂量注射STZ 35 mg/kg, 3 d后测血糖,血糖≥16. 7 mmol/L确诊T2DM.造模成功后10、20 d分别通过Y迷宫、八臂迷宫检测认 知功能改变,17、21、28 d取大鼠海马,Western blot测定海马p-NR2B、Wnt3a和ADAM10的表达.结 果与Con组比较,DM组在Y迷宫自发活动次数为(6. 9±3. 2)次,自主选择率(SA％)为(42. 2± 29. 5)％,差异有统计学意义(P<0. 05);DM组在八臂迷宫的1、3、6 d测试时间分别为(459. 2±143. 5)s、 (357. 3±131. 7)s、(274. 0±145. 1)s,较 Con组延长(P<0. 05),记忆错误(WME)、参考记忆错误(RME) 和总记忆错误(TE)比较,差异无统计学意义(P>0. 05).与Con组比较,DM组各时间点海马中 p-NR2B、Wnt3a和 ADAM10的表达降低(P<0. 05).结论 T2DM大鼠海马中 p-NR2B、Wnt3a 和 ADAM10的表达减少可能参与其早期认知功能的下降.

目的 研究刺五加提取液对衰老模型小鼠学习记忆障碍和淀粉样前体蛋白(APP)酶解通路的影响及作用机制.方法 70只2月龄雄性昆明种小鼠随机分为正常对照、衰老模型、衰老+刺五加低剂量、衰老+刺五加中剂量、衰老+刺五加高剂量、刺五加高剂量、衰老+维生素E组,共7组.连续55 d颈后皮下注射D-半乳糖(200 mg/kg)建立衰老模型,运用Morris水迷宫及行为学测量方法,观察小鼠学习记忆能力.采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测脑组织中 α、β、γ-分泌酶、β淀粉样蛋白(Aβ)1～42及可溶性APP(sAPP)α 含量;Western印迹法检测脑组织中去整合素-金属蛋白酶(ADAM)10、β-分泌酶(BACE)1、衰老蛋白(PS)1、糖原合成酶激酶(GSK)-3β、磷酸化(Phospho)-GSK-3β(Ser9)表达水平.结果 行为学显示,随着刺五加提取液浓度的提高,小鼠的学习记忆能力得到一定的巩固和强化,衰老小鼠的记忆障碍得到了一定改善.生化学显示,与衰老组比较,刺五加提取液可以增强 α-分泌酶活性,抑制 β、γ-分泌酶的活性,增加组织内的sAPPα 含量及有效抑制Aβ1～42产生.Western印迹法检测显示,与正常对照组比较,衰老模型组GSK-3β、BACE1蛋白表达水平上调;ADAM10、Phos-pho-GSK-3β(Ser9)蛋白表达水平下降;与衰老模型组比较,刺五加组ADAM10、Phospho-GSK-3β(Ser9)蛋白表达水平明显升高,GSK-3β、BACE1、PS1蛋白表达水平明显降低(均P<0.05).结论 刺五加通过增加 α-分泌酶活性,抑制 β、γ-分泌酶活性,增加sAPPα 生成,减少Aβ1～42产生,降低BACE1蛋白表达水平,可能对APP酶解通路起到一定作用,改善小鼠学习记忆障碍,对阿尔茨海默病的发病及进展有一定预防保护作用.

目的 探讨miR-140-5p靶向去整合素金属蛋白酶9(ADAM9)抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移.方法 采用RT-PCR测定检测乳腺癌癌组织、癌旁组织和乳腺癌细胞中miR-140-5p表达.将BT549细胞分为mimic组、miR-140-5p组、pLV-ADAM9组和pLV-ADAM9+miR-140-5p组,荧光素实验验证miR-140-5p和ADAM9靶向关系.检测各组细胞侵袭、迁移、细胞层粘连蛋白1(laminin1)、血管内皮生长因子(VEGF)、E钙黏附素(Ecadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达.结果 与癌旁组织相比,癌组织中miR-140-5p表达下调(P<0.01),乳腺癌BT549细胞中miR-140-5p表达量最低;miR-140-5p可以靶向负调控ADAM9的表达,抑制细胞侵袭、迁移(P<0.05),上调Ecadherin蛋白表达(P<0.05),下调Laminin1、VEGF和MMP-2蛋白表达(P<0.05).结论 miR-140-5p可以靶向负调控ADAM9的表达,抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移.

目的:探讨甲状腺乳头状癌(PTC)超声弹性成像(UE)参数与微血管密度(MVD)、癌细胞恶性生物学行为的相关性及其在淋巴结转移评估中的价值.方法:选取医院收治的100例PTC患者,将其纳入PTC组,同期选取100例甲状腺良性肿瘤患者纳入良性组.两组均采取UE检查,对比两组与有无淋巴结转移PTC患者UE参数(弹性比值、蓝色面积比值),对两组肿瘤组织标本采取CD34免疫组化染色后获取MVD计数,并测定两组肿瘤组织标本中自噬基因[第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)、微管相关蛋白轻链3(PLC3)]、侵袭基因[去整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)、BCL6共抑制因子样蛋白1(BCORL1)]以及增殖基因[Xklp2靶蛋白(TPX2)、碱性螺旋-环-螺旋转录因子1(Twist1)]表达量,应用Pearson相关分析探讨PTC的UE参数与MVD计数、自噬、侵袭及增殖有关基因表达的关联性,应用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评价UE参数对PTC患者淋巴结转移的诊断价值.结果:PTC组弹性比值、蓝色面积比值均高于良性组(t=8.577,t=5.438;P<0.05),而每个高倍视野中MVD计数低于良性组(t=11.498,P<0.05),肿瘤组织标本中PTEN、LC3 mRNA表达量低于良性组,ADAM9、BCORL1、TPX2及Twist1 mRNA表达量高于良性组(t=13.587,t=24.321,t=15.139,t=9.537,t=17.437,t=14.978;P<0.05).PTC患者UE的弹性比值、蓝色面积比值与MVD计数、PTEN、LC3 mRNA表达量呈显著负相关(r=-0.599、r=-0.412,r=-0.543,r=-0.520,r=-0.574,r=-0.439;P<0.05),与ADAM9、BCORL1、TPX2及Twist1 mRNA表达量呈显著正相关(r=0.582,r=0.492,r=0.522,r=0.496,r=0.615,r=0.491,r=0.585,r=0.564;P<0.05);有淋巴结转移PTC患者弹性比值、蓝色面积比值高于无淋巴结转移患者(t=6.234,t=2.311;P<0.05);诊断PTC患者淋巴结转移的AUC:弹性比值+蓝色面积比值的AUC为0.883,弹性比值的AUC为0.792,蓝色面积比值的AUC为0.741.结论:UE参数弹性比值、蓝色面积比值与PTC患者肿瘤MVD、癌细胞恶性生物学行为显著相关,并能诊断淋巴结转移,可为临床决策、干预提供重要的参考信息.