目的:评价N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA受体)在七氟烷麻醉致老龄小鼠海马神经元程序性坏死中的作用。方法:清洁级健康雄性C57BL/6小鼠90只，18月龄，体重27~30 g，采用随机数字表法分为3组( n＝30)：对照组(C组)、七氟烷麻醉组(S组)和七氟烷麻醉+NMDA受体拮抗剂盐酸美金刚组(S+M组)。S组和S+M组小鼠连续3 d吸入3%七氟烷2 h，S+M组于每次吸入七氟烷前1 h腹腔注射盐酸美金刚20 mg/kg，C组只吸入纯氧。分别于麻醉前1 d、麻醉后3和7 d时每组随机取10只小鼠行Morris水迷宫实验。Morris水迷宫实验结束后立即处死小鼠取海马，于光镜下观察病理学结果，采用流式细胞术测定神经元程序性坏死率和胞浆游离钙离子浓度([Ca 2+] i)，Wes-tern blot法检测NMDA受体亚型GluN2A、GluN2B和受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)的表达。 结果:与C组比较，S组和S+M组麻醉后各时点逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，海马[Ca 2+] i和神经元程序性坏死率升高，GluN2A、GluN2B和RIP1表达上调( P<0.05)，病理学损伤加重；与S组比较，S+M组麻醉后各时点逃避潜伏期缩短，穿越原平台位置次数增加，海马[Ca 2+] i和神经元程序性坏死率降低，GluN2A、GluN2B和RIP1表达下调( P<0.05)，病理学损伤减轻。 结论:NMDA受体参与了七氟烷麻醉致老龄小鼠认知功能障碍的过程，其机制可能与促进海马神经元程序性坏死有关。

目的:探讨抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor，NMDAR)脑炎患儿外周血T、B、NK淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。方法:选取2017年1月至2019年8月在广州市妇女儿童医疗中心神经内科首次诊断并住院治疗的40例抗NMDAR脑炎患儿为研究对象，同期健康体检儿童20例为对照组。病例组于治疗前、治疗1个月后分别行全血T、B、NK淋巴细胞绝对计数及百分比检测；治疗前血清免疫球蛋白G(immunoglobulin G, IgG)、IgA、IgM测定，病例组血和脑脊液抗NMDAR抗体滴度，比较病例组不同时间点及其与对照组之间的差异，并根据治疗2周的改善情况将病例组分为改善组和无效组，比较两组间治疗前T、B、NK淋巴细胞绝对计数的差异。结果:与对照组相比，病例组患儿治疗前、后血B细胞绝对计数均显著升高，差异有统计学意义( P<0.05)；病例组内B细胞绝对计数治疗前和治疗后比较差异无统计学意义( P>0.05)；治疗后T细胞(包括T抑制细胞与T辅助细胞)较治疗前和对照组均显著升高，差异有统计学意义( P<0.05)；病例组治疗前T细胞和对照组比较差异无统计学意义0.05)；治疗前 B细胞百分比较对照组和治疗后显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)。病例组中治疗2周无效组具有更高的 B、 T细胞水平，与改善组比较差异有统计学意义(P<0.05)；病例组 IgG、 IgA、 IgM水平和对照组比较差异无统计学意义。治疗前病例组 B细胞绝对计数与脑脊液抗 NMDAR抗体水平无明显相关性(r＝0.282，P>0.05)。 结论:抗 NMDAR脑炎患儿血 B细胞显著升高，治疗前 B细胞的水平与治疗起效情况有关， T细胞在治疗后升高。脑脊液抗 NMDAR抗体滴度与血 B细胞水平无明显相关性。

目的:评价七氟烷致老龄小鼠认知功能减退时组蛋白乙酰化与含2B亚基的NMDA受体(NR2B)-环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB)-脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路的关系。方法:SPF级雄性C57BL/6J小鼠48只，22月龄，体重32～40 g，采用随机数字表法分为4组( n＝12)：对照组(C组)、七氟烷组(S组)、二甲基亚砜＋七氟烷组(DS组)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺它(SAHA)＋七氟烷组(SS组)。C组吸入100%氧气2 h，S组、DS组、SS组吸入3.0%七氟烷2 h，七氟烷吸入结束后24 h行Morris水迷宫实验(共6 d)。于七氟烷麻醉前2 h以及每天水迷宫实验前2 h，SS组腹腔注射SAHA 50 mg/kg，DS组腹腔注射等容量二甲基亚砜。水迷宫实验后立即处死小鼠取海马组织，采用Western blot法检测胞核乙酰化-H3以及胞浆NR2B、磷酸化CREB(p-CREB)、BDNF的表达水平。采用RT-PCR法检测NR2B和BDNF的mRNA表达水平。 结果:与C组比较，S组、DS组和SS组逃避潜伏期延长，目标象限停留时间百分比降低，乙酰化-H3、NR2B、p-CREB、BDNF、NR2B mRNA和BDNF mRNA表达下调( P<0.05)；与S组或DS组比较，SS组逃避潜伏期缩短，目标象限停留时间百分比升高，乙酰化-H3、NR2B、p-CREB、BDNF、NR2B mRNA和BDNF mRNA表达上调( P<0.05)；S组与DS组上述指标比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:组蛋白乙酰化可通过调控NR2B-CREB-BDNF信号通路表达，参与七氟烷致老龄小鼠认知功能减退的病理生理机制。

目的:评价海马REV-ERBα在大鼠术后认知功能障碍(POCD)中的作用。方法:SPF级健康雄性SD大鼠32只，体重360~380 g，12~14周龄，采用随机数字表法分为4组( n＝8)：对照组(C组)、手术组(S组)、手术＋二甲基亚砜组(SD组)和手术＋SR9009组(SS组)。S组、SD组和SS组在七氟烷麻醉下进行剖腹探查术；SD组于剖腹探查术前1 h时于海马CA1区注射含0.1%二甲基亚砜的生理盐水，每侧2 μl；S＋SR9009组于剖腹探查术前1 h时于海马CA1区注射REV-ERBα激动剂SR9009(溶于含0.1%二甲基亚砜的生理盐水中)，每侧2 μl。分别于术后1和3 d时行Morris水迷宫实验。术后3 d水迷宫实验结束后1 h时处死大鼠，取海马组织，采用Western blot法检测REV-ERBα、脑和肌肉ARANT样蛋白1(BMAL1)、突触素(SYN)、突触后密度蛋白95(PSD95)和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(GRIN2B)表达水平；采用尼氏染色观察海马神经元及尼氏小体形态，并行存活神经元计数。 结果:与C组比较，S组和SD组术后1和3 d时目标象限停留时间百分比降低，穿越平台次数减少，海马REV-ERBα、BMAL1、PSD95、SYN和GRIN2B表达下调，CA1区存活神经元计数降低( P<0.05)；与S组和SD比较，SS组术后1和3 d时目标象限停留时间百分比升高，穿越平台次数增多，海马REV-ERBα和PSD95表达上调，CA1区存活神经元计数升高( P<0.05)，BMAL1、SYN和GRIN2B表达无统计学意义( P>0.05)。S组和SD组上述各指标比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:REV-ERBα激活可改善大鼠POCD，其机制可能与上调海马PSD95表达，减轻神经元损伤有关。

目的:研究新型氨基修饰的磁性介孔二氧化硅纳米颗粒的生物相容性以及跨膜转运能力，并观察该纳米颗粒的体内代谢分布，以此评价该纳米颗粒在基因或药物载体方面的应用前景。方法:制备新型介孔二氧化硅纳米颗粒，以20 nm Fe 3O 4为核心包裹的二氧化硅颗粒，并且进行修饰使之表面氨基化，对此氨基修饰的磁性介孔二氧化硅纳米颗粒细胞毒性研究，携带N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体NR2B亚单位基因小干扰RNA(siRNA)质粒细胞转染实验，以及白鼠活体注射靶向模拟实验研究其在体内的生物分布。采用单因素方差分析。 结果:该新型氨基修饰的磁性介孔二氧化硅纳米颗粒是一种直径在80～100 nm之间，孔径在2～4 nm之间的均一球体型纳米颗粒。在5～125 μg/ml浓度范围内，介孔二氧化硅纳米颗粒的对于细胞活性影响差异无统计学意义( P>0.05)，始终保持在6%以下。在姜黄素染色的装载有NR2B siRNA质粒的该纳米颗粒转染实验中，可以在荧光显微镜下观察到细胞内的荧光现象。在体外红外测定仪观察红外激发荧光染料标记的纳米颗粒实验中，可见该纳米颗粒在小鼠体内不会有蓄积作用，其最终会通过肾脏随尿液汇聚至膀胱，并最终排出体外。同时在外加磁场的情况下，会有大量荧光颗粒向磁场方向聚集，并且在撤出磁场后不会蓄积，浓度会持续下降。 结论:氨基化磁性介孔二氧化硅颗粒具有较好的装载能力以及生物安全性，可以携带NR2B基因siRNA质粒通过胞吞作用进入细胞，在外加磁场诱导下可靶向到达病灶区域，为靶向基因治疗奠定基础。

目的:评价孕中期大鼠丙泊酚麻醉下手术对子代认知功能及海马组蛋白去乙酰化酶2 (HDAC2)-环腺苷酸效应元件结合蛋白(CREB)-含2B亚基的N-甲基-D-天冬氨酸受体(NR2B)信号通路的影响。方法:孕14 d健康SD大鼠30只，采用随机数字表法分为3组( n＝10)：丙泊酚组(P组)、丙泊酚手术组(S组)和对照组(C组)。S组经尾静脉注射20 mg/kg丙泊酚，继之以20 mg·kg -1·h -1速率连续输注维持麻醉4 h并行剖腹探查术。P组除不行剖腹探查术外，余处理同S组；C组输注等量生理盐水。子鼠出生后30 d，采用Morris水迷宫实验评价子代大鼠学习记忆能力。采用Western blot法检测子代海马组蛋白去乙酰化酶2 (HDAC2)、磷酸化(p-)CREB、NR2B、脑源性神经营养因子(BDNF)和p-酪氨酸激酶B (p-TrkB)表达，TUNEL染色法检测海马神经元凋亡水平。 结果:与C组比较，P组和S组逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，第二象限停留时间缩短，海马HDAC2表达上调，p-CREB、NR2B、BDNF和p-TrkB表达下调，神经元凋亡率增加( P<0.05)；与P组比较，S组逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，第二象限停留时间缩短，海马HDAC2表达上调，p-CREB、NR2B、BDNF和p-TrkB表达下调，神经元凋亡率增加( P<0.05)。 结论:孕中期大鼠丙泊酚麻醉下手术可降低子代认知功能，其机制与调控HDAC2-CREB-NR2B信号通路，促进海马神经元凋亡有关。

目的:探讨创伤性脑损伤(TBI)后羟基积雪草苷(MC)对海马区N-甲基-D-天冬氨酸受体亚单位NR2B (NR2B)表达的调节作用，及其对认知功能的影响。方法:由西安交通大学医学部实验动物中心提供健康雄性SD大鼠116只，按随机数字表法均分为对照组(Con组)、脑创伤组(TBI组)、脑创伤+积雪草苷治疗组(TBI+MC组)、对照+积雪草苷治疗组(Con+MC组)，每组29只。伤后12 h、1 d、3 d、7 d、14 d和21 d，Western blotting检测各组海马区NR2B蛋白表达水平。伤后21 d，免疫组织化学染色观察各组海马区NR2B阳性细胞数量。伤后21～25 d，Morris水迷宫实验检测各组大鼠逃避潜伏期、平台象限游泳时间与穿越平台次数，评估认知功能。正态分布的计量资料采用均数±标准差( Mean± SD)表示，组间比较采用单因素方差和LSD- t分析。 结果:TBI组海马区NR2B蛋白表达量伤后12 h、1 d和3 d分别为3.31±0.28、2.17±0.31和1.96±0.31，三组间差异具有统计学意义( P<0.05)，并且与Con组相比均显著增加( P<0.05)；伤后7 d表达量为0.93±0.13，与Con组相比差异无统计学意义( P>0.05)；伤后14 d和21 d表达量分别为0.45±0.04和0.21±0.04，两组间差异具有统计学意义( P<0.05)，并且与Con组相比均显著降低( P<0.05)。TBI组NR2B免疫组化染色阳性细胞数量(33.26±9.71)个，Con组为(86.62±17.05)个，两组相比差异具有统计学意义( P<0.05)。TBI组大鼠水迷宫逃避潜伏期与Con组相比显著增加，TBI组大鼠穿越平台次数和平台象限游泳时间与Con组相比显著减少，两组差异具有统计学意义( P<0.05)。TBI+MC组海马区NR2B蛋白表达量在伤后12 h、1 d、3 d分别为2.37±0.34、1.38±0.22和1.14±0.16，三组间差异具有统计学意义( P<0.05)，并且与TBI组相比均显著减少( P<0.05)；伤后7 d表达量为0.97±0.06，与TBI组相比差异无统计学意义( P>0.05)；伤后14 d和21 d表达量分别为0.86±0.08和0.52±0.06，两组间差异具有统计学意义( P<0.05)，并且与TBI组相比均显著增加( P<0.05)。TBI+MC组海马区NR2B免疫组化染色阳性细胞数量(69.08±12.24)个，TBI组为(33.26±9.71)个，两组相比差异具有统计学意义( P<0.05)。TBI+MC组大鼠水迷宫潜伏期与TBI组相比显著缩短，TBI+MC组大鼠穿越平台次数和平台象限游泳时间与TBI组相比显著增加，两组间差异具有统计学意义( P<0.05)。 结论:MC对TBI后海马区NR2B表达的具有时程调节作用，即TBI早期MC可抑制海马区NR2B表达异常上调，TBI晚期MC可阻止NR2B表达过度下降，对改善脑创伤后认知功能障碍具有重要作用。

目的:探究D-氨基酸氧化酶（D-amino acid oxidase，DAAO）在砷暴露致仔鼠学习记忆损害中的作用。方法:将18只昆明种妊娠小鼠采用随机数字表法分为未处理组（蒸馏水， n = 6）和染砷组[饮用水中含60 mg/L亚砷酸钠（NaAsO 2）， n = 12]，自由饮水；自妊娠第1天至仔鼠断乳前经母鼠染砷，仔鼠断乳后至实验结束以自由饮水方式染砷。仔鼠出生后6周，根据母鼠的组别，将染砷组仔鼠分为NaAsO 2组和NaAsO 2 + DAAO抑制剂6-氯苯并[d]异恶唑-3-醇（6-chlorobenzo[d]isoxazol-3-ol，CBIO）组，未处理组仔鼠为对照组；对照组和NaAsO 2组仔鼠腹腔注射0.5%羧甲基纤维素钠，NaAsO 2 + CBIO组仔鼠腹腔注射60 mg/kg CBIO，连续干预2周。干预结束后，采用Y迷宫实验测定仔鼠空间学习记忆能力；仔鼠经心脏灌流后取脑组织，并分离海马，经苏木素-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色观察仔鼠海马组织神经细胞形态；超高效液相串联三重四级杆质谱法测定D-丝氨酸含量；实时荧光定量PCR测定突触素（synaptophysin，SYP），突触小体相关蛋白25（synaptosomal-associated protein 25，SNAP25），突触后致密物95（postsynaptic density 95，PSD95），DAAO和N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartate receptor，NMDAR）亚基NR1、NR2A、NR2B mRNA水平。 结果:对照组、NaAsO 2组、NaAsO 2 + CBIO组仔鼠Y迷宫实验交替反应率[（58.06 ± 3.78）%、（48.61 ± 5.75）%、（56.25 ± 6.76）%]比较，差异有统计学意义（ F = 4.87， P = 0.023），且NaAsO 2组明显低于对照组和NaAsO 2 + CBIO组（均 P < 0.05）。HE染色结果显示，对照组仔鼠海马组织CA1、CA3区神经细胞数量较多，状态良好；NaAsO 2组神经细胞数量较少，形态不规则，细胞形态轮廓不清晰；NaAsO 2 + CBIO组神经细胞数量较多，细胞轮廓有所改善，组织损伤减轻。对照组、NaAsO 2组、NaAsO 2 + CBIO组仔鼠海马D-丝氨酸含量及SYP、SNAP25、PSD95、DAAO、NR1、NR2A、NR2B mRNA水平比较，差异均有统计学意义（ F = 5.41、4.41、10.16、7.60、6.98、5.63、6.53、4.33， P = 0.017、0.031、0.002、0.005、0.007、0.015、0.009、0.033）；其中，NaAsO 2组仔鼠海马D-丝氨酸含量和SYP、SNAP25、PSD95、NR1、NR2B mRNA水平均明显低于对照组和NaAsO 2 + CBIO组，NR2A mRNA水平明显低于对照组，DAAO mRNA水平明显高于对照组和NaAsO 2 + CBIO组（均 P < 0.05）。 结论:砷暴露能够损害仔鼠学习记忆能力，降低海马D-丝氨酸含量以及NMDAR亚基和突触相关基因转录水平，上调DAAO转录水平；而抑制DAAO可使D-丝氨酸含量以及NMDAR亚基和突触相关基因转录水平升高，改善砷暴露所致的仔鼠学习记忆能力损害。

目的:探讨左旋肉碱(L-carnitine，LCAR)对慢性脑低灌注大鼠认知功能障碍的保护作用和机制。方法:90只3~4月龄雄性SPF级SD大鼠按照随机数字表法分为4组：假手术对照组(SHAM组， n＝15)、假手术左旋肉碱组(LCAR组， n＝25)、双侧颈总动脉结扎组(2VO组， n＝25)、双侧颈总动脉结扎+左旋肉碱组(2VO+LCAR组， n＝25)。采用双侧颈总动脉结扎法建立慢性脑低灌注模型，假手术组只分离血管，不结扎；LCAR组和2VO+LCAR组在手术后按照300 mg·kg -1·d -1的剂量连续给予左旋肉碱腹腔注射给药，共注射30 d。左旋肉碱干预30 d后，用Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习和记忆能力，用化学发光法检测海马组织ATP水平，通过透射电镜观察海马神经元的线粒体结构和突触结构，对线粒体损伤程度进行评分，计数和测算囊泡密度，用Western blot法检测海马组织的N-甲基-D-天冬氨酸受体功能亚单位(N-methyl-D-aspartate receptor subunit 2A or 2B，NR2A/B)、突触后致密蛋白95(postsynaptic density 95，PSD95)水平，用免疫荧光观察转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding protein，CREB)在脑组织中的分布和表达水平。采用SPSS 16.0软件进行统计分析，大鼠水迷宫7 d重复学习训练的逃避潜伏期数据采用重复测量方差分析，其他多组间数据比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用Dunnett's t检验。 结果:(1)Morris水迷宫实验结果显示，4组大鼠逃避潜伏期的分组与时间的交互作用不显著( F＝1.4， P>0.05)，但时间主效应和组别主效应均显著( F＝21.6，15.2，均 P<0.05)。在第3~7天的平台位置学习训练中，2VO组大鼠逃避潜伏期长于SHAM组和2VO+LCAR组(均 P<0.05)。大鼠短期记忆检测结果显示，2VO组大鼠逃避潜伏期长于SHAM组和2VO+LCAR组(均 P<0.05)；2VO大鼠的平台区域穿梭次数和滞留时间均少于SHAM组和2VO+LCAR组(均 P<0.05)。(2)海马组织ATP水平结果显示，4组大鼠海马组织的ATP绝对水平和相对水平均差异有统计学意义( F＝14.6，13.2，均 P<0.05)。2VO组大鼠海马组织ATP水平低于SHAM组和2VO+LCAR组(均 P<0.05)。电镜观察线粒体形态显示，2VO组大鼠海马组织线粒体损伤的Flameng评分[(2.82±0.17)分]高于SHAM组[(0.25±0.07)分]和2VO+LCAR组[(1.76±0.09)分](均 P<0.05)。(3)2VO组大鼠海马神经元突触囊泡密度[(289.09±22.41)个/μm 2]显著低于SHAM组[(497.49±28.89)个/μm 2]和2VO+LCAR组[(401.23±45.09)个/μm 2](均 P<0.01)。Western blot结果显示，2VO海马组织突触蛋白NR2A/B、PSD95和CREB相对水平低于SHAM组和2VO+LCAR组(均 P<0.05)。免疫荧光结果显示，2VO海马亚区和皮质CREB表达相对水平低于SHAM组和2VO+LCAR组(均 P<0.01)。 结论:左旋肉碱治疗能够改善慢性脑低灌注大鼠空间学习和记忆功能障碍，可能与促进ATP生成和保护线粒体形态，以及促进突触囊泡合成和突触蛋白表达有关。

[目的]分析六味安神胶囊联合氨氯地平贝那普利治疗老年原发性高血压(essential hypertension,EH)伴焦虑抑郁障碍患者的临床疗效及对N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)蛋白表达的干预作用.[方法]选取该院老年科2020年12月至2022年12月就诊的138例老年原发性高血压伴焦虑抑郁障碍痰热壅盛证患者进行回顾性研究,根据治疗方案的不同将患者分为观察组和对照组,每组各69例.对照组给予氨氯地平贝那普利及常规心理治疗,观察组在对照组的基础上给予六味安神胶囊治疗,疗程为1个月.观察2组患者治疗前后血压指标[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)]、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评分、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)-17项评分、NR2B蛋白表达量、单胺类神经递质[多巴胺(DA)、肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)]的变化情况,并比较2组患者的临床疗效和不良反应总发生率.[结果](1)治疗1个月后,观察组的总有效率为95.65%(66/69),对照组为75.36%(52/69),组间比较(χ2检验),观察组的疗效明显优于对照组(P＜0.01).(2)治疗后,2组患者的SBP、DBP均较治疗前明显降低(P＜0.05),且观察组对SBP、DBP的降低作用均明显优于对照组(P＜0.01).(3)治疗后,2组患者的HAMA评分和HAMD-17项评分均较治疗前明显降低(P＜0.05),且观察组对HAMA评分和HAMD-17项评分的降低作用均明显优于对照组(P＜0.01).(4)治疗后,2组患者的NR2B蛋白表达量均较治疗前明显降低(P＜0.05),且观察组对NR2B蛋白表达量的降低作用明显优于对照组(P＜0.01).(5)治疗后,2组患者的血清DA、NE、5-HT水平均较治疗前明显降低(P＜0.05),且观察组对血清DA、NE、5-HT水平的降低作用均明显优于对照组(P＜0.01).(6)观察组的不良反应总发生率为2.90%(2/69),对照组为5.80%(4/69),组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]六味安神胶囊联合氨氯地平贝那普利可有效减轻老年原发性高血压伴焦虑抑郁障碍痰热壅盛证患者的不良情绪,降低血压,抑制NR2B蛋白过度表达,纠正单胺类神经递质紊乱,且联合治疗未引发严重不良反应,安全有效.