探讨不同液体复苏对脓毒性休克大鼠肾功能及糖萼的影响。按随机数字法将大鼠分成健康对照组、生理盐水复苏组、乳酸林格液复苏组和琥珀酰明胶复苏组，每组6只。制作脓毒性休克大鼠模型，根据不同的液体进行复苏，监测4组大鼠复苏前后不同时间点的平均动脉压、心率、血肌酐、尿素氮、肾脏血流评分、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子α、糖萼水平、肾组织病理变化、复苏过程中复苏时间及所用去甲肾上腺素量。在休克复苏过程中，3个复苏组大鼠所用去甲肾上腺素剂量差异无统计学意义（ P>0.05），琥珀酰明胶复苏组复苏时间最短，与其他2个复苏组比差异有统计学意义（ P<0.05）。休克后，3个复苏组大鼠肾脏血流明显降低，血肌酐、尿素氮、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子α水平均明显升高（ P<0.05）。复苏后，3个复苏组大鼠肾脏血流恢复至正常，乳酸林格液复苏组血肌酐、尿素氮水平恢复正常，乳酸林格液复苏组糖萼成分低于其他2个复苏组（ P<0.05）。肾组织病理可见，经过液体复苏后出现肾小管水肿，管腔变小，少许炎性细胞浸润，未见明显坏死，但乳酸林格液复苏组肾脏病变较其他2个复苏组轻。乳酸林格液可减少脓毒性休克大鼠肾功能和糖萼损伤。

目的:构建具有良好组织相容性的CD31抗体耦联脾脏脱细胞支架，经内皮细胞再种植实现支架脉管系统预血管化。方法:经脾动脉灌注1%曲拉通X-100(Triton X-100)/0.1%氨水制备大鼠脾脏脱细胞支架，苏木精-伊红(HE)染色和糖胺多糖(GAG)含量检测评价脱细胞效率， t检验分析脱细胞后DNA去除的效果。利用(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)将CD31抗体耦联到脾脏脱细胞支架，再种植人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。继续培养3 d后，免疫荧光检测评价细胞黏附。体内移植2周后，经HE染色、免疫组织化学染色，评价支架体内血管生长及组织相容性。 结果:脾脏脱细胞支架HE染色未见明显细胞残留，脱细胞支架DNA含量[(43.26±5.14) ng/mg]较正常脾脏组织DNA含量[(5 896.00±393.90) ng/mg]明显减少( t＝14.860， P<0.05)。脱细胞支架GAG含量[(30.92±1.70) ng/mg]较正常脾脏组织GAG含量[(42.37±1.77) ng/mg]保留了70%以上。免疫荧光结果显示CD31成功结合到脱细胞支架中，且HUVECs定植于支架血管腔内，血管性血友病因子(vWF)呈阳性表达。支架体内移植2周后，HE染色、免疫组织化学结果显示CD31修饰脾脏脱细胞支架组血管生成数目明显多于未修饰组，且具有良好的组织相容性。 结论:大鼠脾脏脱细胞支架保留了基本的脉管结构及细胞外基质成分，CD31耦联修饰的脾脏脱细胞支架支持HUVECs的定植生长，且体内具有促血管生成作用，具有良好的组织相容性。

随着质谱技术、组学技术、抗体技术等鉴定技术的不断发展,翻译后修饰(PTM)在医学领域的研究潜力日益凸显.PTM作为一种新型的化学修饰方式,为科研人员提供了研究疾病的新视角,其中琥珀酰化修饰作为一种备受关注的新型修饰方式,已经引起了越来越多研究者的兴趣.目前,针对琥珀酰化修饰的研究主要集中在一种名为沉默信息调节蛋白5的去琥珀酰化酶上,这种酶在修饰领域中具有重要的作用,且已经对其在心血管领域的作用进行了初步探索.本文将归纳整理琥珀酰化修饰的影响因素、调控作用以及与其他PTM之间的联系,并总结目前在心血管疾病的研究成果,以期深入认识这种修饰的重要作用,为心血管疾病的研究带来新的思考和启示.

目的 确定生地黄Rehmanniae Radix的性味功效物质基础,阐明生地黄及其拆分组分的寒热药性归属以及中药药性的内部精细结构.方法 采用水煎煮法、水提醇沉法和色谱分离技术,对生地黄的主要化学成分进行拆分.在建立寒证大鼠模型的基础上,测定与能量代谢,和物质代谢密切相关的生理生化指标.同时,对大鼠尿液进行代谢组学分析,筛选出各给药组大鼠尿液中的差异代谢物,从而确定潜在的生物标志物和代谢通路.结果 水煎液、多糖、环烯醚萜苷对寒证模型大鼠呈现相同的药性作用倾向,均能降低肝组织Na+,K+-三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)酶活性和血浆中三碘甲状腺原氨酸(3,5,3'-triiodothyronine,T3)、甲状腺素(thyroxine,T4)、丙酮酸(pyruvic acid,PA)、多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的水平及琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)活性,升高血浆中乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)活性.低聚糖对寒证模型大鼠呈现相反的药性作用倾向,能升高大鼠肝组织Na+,K+-ATP酶活性和血浆中T3、T4、PA、DA、NE的水平及SDH活性,降低血浆中AchE活性.结论 水煎液、多糖、环烯醚萜苷抑制能量代谢和物质代谢,具有寒凉性;低聚糖促进能量代谢和物质代谢,具有温热性.

恶性高热(malignant hyperthermia,MH)较为罕见,是目前所知的唯一可由常规麻醉用药引起围手术期死亡的遗传性疾病[1].其是一种亚临床肌肉病,即患者平时无异常表现,多表现为吸入强效全身麻醉药及去极化肌松药琥珀酰胆碱后诱发的骨骼肌高代谢综合征,术前不易诊断,在无特异性治疗药物的情况下,可致患者死亡,病死率极高.儿童发病率为1/30~50万,成人为1/5~10万.本院1例特发性脊柱侧弯患者,在全身麻醉下(七氟烷)行脊柱侧弯矫形内固定术,术中发生MH,并出现检验危急值,最终救治成功.现报道如下.

长寿因子5 (Sirtuin 5),也叫SIRT5,是长寿因子(Sirtuins)家族成员之一.除具有去乙酰化酶活性外,还具有很强的去琥珀酰化、去丙二酰基化及去戊二酰基化活性.现已明确的SIRT5的底物仅有十余种,通过对不同底物发挥相同的酶活性,或对同一底物发挥不同的酶活性,参与调控葡萄糖氧化、脂肪酸氧化、氨解毒等物质代谢和活性氧自由基(ROS)清除、抗凋亡、炎性反应等多种生命活动.SIRT5表达异常与肿瘤的发生及发展密切相关,但其作用尚无定论.SIRT5可促进肿瘤增殖、转移、耐药及代谢重编程,发挥促癌基因作用;也可抑制肿瘤细胞生长和凋亡,发挥抑癌基因作用.此外,SIRT5异常还与肥厚性心肌病和心肌梗塞等心血管疾病,及帕金森病和阿尔兹海默症等神经代谢性疾病密切相关.本文将从SIRT5的结构与调控、酶活性与生物学功能、及SIRT5与疾病的关系等方面进行综述,以全面了解SIRT5的研究现状.

目的:探讨制备核酸适配体AS411靶向液态内核的纳米超声造影剂的方法,评价该靶向纳米超声造影剂体外显影能力和寻靶能力.方法:将自合成的膜材料聚乳酸-羟基乙酸共聚物-聚乙二醇(PLGA-PEG-COOH)和全氟辛溴烷(perfluoroctylbromide,PFOB),采用乳化溶剂挥发法,制备液态内核的纳米颗粒(nanoparticles,NP).然后用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)催化法将AS1411连接到NP表面,制成靶向液态内核的纳米颗粒(NP-AS1411).用透射电镜检查NP-AS 1411的形态.比较NP-AS1411和NP的大小、表面电荷、包封率、生物相容性、体外显影能力和稳定性.用凝胶电泳检查AS1411是否连于NP表面.用荧光显微镜和流式细胞仪检测NP-AS1411的靶向能力.结果:NP-AS1411在电镜下呈壳-核结构,直径为(245.4±16.5) nm,大于NP的直径(P=0.05).NP-AS1411和NP在表面电荷和包封率上差异无统计学意义(P＞0.05).高浓度(25.0mg/mL)NP-AS1411与MCF-7细胞孵育24h后,细胞的活力(89％)和对照组相比明显下降(P=0.04).NP-AS1411体外相对灰阶值为86.1+6.7,明显高于脱气去离子水(P＜0.05),与和NP的体外相对灰阶值相当(P＞0.05).常温保存24h后,NP-AS1411的相对灰阶值为80.1±9.2,与24 h前相比差异无统计学意义(P＞0.05).NP-AS 1411的大小在放置24 h后也无明显变化(P＞0.05).凝胶电泳证实当NP和AS1411的摩尔比为40∶1时,连接到NP的AS1411最多.MCF-7细胞分别与载有荧光香豆素6的NP-AS1411,NP孵育后,NP-AS1411在荧光显微镜下能够产生更强的绿色荧光.流式细胞仪证实NP和NP-AS1411与MCF-7细胞均有结合,但是NP-AS1411和MCF-7细胞结合后产生的荧光更强烈.结论:采用乳化溶剂挥发法和EDC/NHS催化法可以成功制备适配体靶向液态内核纳米超声造影剂.该靶向液态内核纳米超声造影剂的体外显影能力好,也同时具有良好的稳定性和特异性.

目的 研究兔膀胱脱细胞基质(BAMG)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖及分化能力的影响,并探讨其构建膀胱修复材料的可行性.方法 采用正常人骨髓体外分离培养原代hBMSCs.用兔膀胱构建BAMG,制备BAMG浸泡液培养基,并以BAMG浸泡液培养基为基础配制成骨、成脂、成平滑肌分化的诱导剂.将hBMSCs分别用正常培养液、正常诱导液、BAMG浸泡液及BAMG诱导液培养.采用苏木素-伊红(HE)与Masson三色染色法进行组织形态鉴定.采用流式细胞术及活细胞荧光染料羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记法检测BAMG浸泡液培养基对hBMSCs的生长毒性;分别观察以BAMG浸泡液为基础的诱导剂对hBMSCs成骨、成脂、成平滑肌的分化能力的影响.结果 成功构建BAMG标本,与未处理的膀胱组织相比,已去除绝大多数细胞核,组织结构更加疏松、多孔.BAMG浸泡液与正常培养基对hBMSCs增殖无差异.诱导后的hBMSCs仍能高效分化为成骨、成脂、成平滑肌细胞.结论 BAMG不影响hBMSCs的增殖和分化能力,可作为支架材料,应用于膀胱组织工程中.

目的 研究TAT-RGD (Arg-Gly-Asp)-超小超顺磁性氧化铁纳米粒子(USPIO)复合物对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的生物学作用,为肿瘤靶向治疗提供实验基础.方法 以经典1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐-N-羟基琥珀酰亚胺(EDC-NHS)偶联法合成TAT-RGD-USPIO粒子,以RGD-USPIO作为对照,将不同质量浓度2种粒子(5、10、50、100、500 μg/mL)与HUVEC孵育后,观察细胞的活性、细胞内铁颗粒沉积和细胞超微结构改变.结果 TAT-RGD-USPIO核心粒径大小为(12.4±0.9) nm,水合粒径为(36.2±0.5) nm.HUVEC存活率随孵育氧化铁粒子质量浓度增高而逐渐下降,具有明显的浓度依赖关系.孵育6h后,TAT-RGD-USPIO在质量浓度太于50 μg/mL时,比RGD-US-PIO显示出对HUVEC增殖有更强的抑制作用(P＜ 0.001).以50μg/mL质量浓度孵育24h后,细胞存活率降低到50％以下.TAT-RGD-USPIO组,胞浆内可见大量密集蓝色铁颗粒,同时细胞数目减少,形态皱缩,失去贴壁极性;电子显微镜下胞浆内见弥散纳米铁颗粒存在,还可见到大量内含USPIO的空泡样结构及细胞膜出泡现象.结论 以TAT-RGD修饰USPIO粒子,可以调控纳米材料进入细胞的效率,诱导细胞自噬,提高对肿瘤血管内皮细胞的特异性杀伤作用,有望进一步实现肿瘤靶向治疗.

恶性高热(MH)是一种具有家族遗传性的肌肉病,是主要由挥发性吸入麻醉药和去极化肌松药-琥珀酰胆碱所触发的骨骼肌异常高代谢状态.MH易感者一旦发病,病情进展迅速,表现为全身肌肉痉挛、体温急剧持续升高、耗氧量急速增加、CO2大量生成,产生呼吸性和代谢性酸中毒,在没有特异性治疗药物的情况下,一般的临床降温及治疗措施难以控制病情进展,最终患者可因多器官功能衰竭而死亡[1-5].