糖尿病心肌病是导致糖尿病患者心力衰竭甚至死亡的重要原因，其发病机制中自噬失调正逐渐引起人们的重视。糖原自噬作为一种选择性自噬，在维持心脏、骨骼肌、肝脏的葡萄糖稳态中发挥重要作用。糖原自噬受多种信号通路的调控，其失调会引起糖原蓄积，是婴儿庞贝病的发病原因。糖原自噬也会通过叉头状转录因子O1信号通路降低心肌细胞对胰岛素的敏感性，加重糖尿病心肌病的损伤。该文就糖原自噬的发生及其在糖尿病心肌病中的研究进展作一综述，以糖原自噬作为靶点可能会为疾病的治疗提供新的策略。

目的:探究吉马酮通过叉头盒蛋白O3(FOXO3)-FOX亚类M1转录因子(FOXM1)信号通路调控人甲状腺癌细胞BCPAP和多柔比星(DOX)耐药BCPAP细胞(BCPAP/DOX)的增殖、迁移和化疗耐药.方法:常规培养BCPAP细胞,用BCPAP细胞构建BCPAP/DOX细胞,用MTT法检测不同浓度吉马酮对BCPAP和BCPAP/DOX细胞增殖的影响.将BCPAP和BCPAP/DOX细胞分为Ctrl组(空白对照)、sh-NC组(转染sh-NC质粒)、低浓度吉马酮组(0.10 mmol/L)、高浓度吉马酮组(0.15 mmol/L)、高浓度吉马酮(0.15 mmol/L)+sh-FOXO3组(转染sh-FOXO3质粒),用转染试剂将sh-NC质粒和sh-FOXO3质粒转至相应的BCPAP和BCPAP/DOX细胞中.用CCK-8法、划痕愈合实验和WB法分别检测各组细胞的增殖、迁移能力,以及FOXO3、FOXM1、BAX、MMP-9和多药耐药-1(MDR-1)蛋白的表达.结果:在BCPAP和BCPAP/DOX细胞中成功地敲减了FOXO3的表达,低浓度和高浓度吉马酮均可显著抑制BCPAP和BCPAP/DOX细胞的增殖、迁移能力,降低细胞中FOMX1、MMP-9或MDR-1(BCPAP/DOX细胞)蛋白的表达,提升FOXO3和BAX蛋白的表达(均P<0.05),与低浓度比较,高浓度吉马酮的作用更为显著(均P<0.05),敲减FOXO3后可部分逆转吉马酮对这两种细胞的作用(均P<0.05).结论:吉马酮可能通过FOXO3/FOXM1信号通路调控BCPAP和BCPAP/DOX细胞的增殖和迁移能力,降低BCPAP/DOX细胞化疗耐药性.

目的:探讨白藜芦醇通过上调1型糖尿病小鼠肾脏自噬水平减轻足细胞损伤的机制。方法:选取健康雄性无特定病原体级昆明小鼠28只，以8只健康昆明小鼠作为正常对照组（NC组），剩余20只小鼠给予链脲佐菌素建立1型糖尿病小鼠模型，将造模成功的18只小鼠随机分为糖尿病组（DM组， n=9）和白藜芦醇干预组（Res组， n=9）。12周末检测24 h尿蛋白、血清肌酐、尿素氮水平，采用实时荧光定量聚合酶链反应、免疫印迹法检测沉默信号调节因子1（SIRT1）、叉头状转录因子O1（FoxO1）、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）、自噬接头蛋白（P62）、裂孔膜蛋白肾病蛋白（nephrin）及足突蛋白（podocin）的表达水平及磷酸化FoxO1（p-FoxO1）/FoxO1。免疫组织化学法观察足细胞nephrin、podocin的表达，应用HE染色及电镜的方法观察肾小球形态及超微结构的变化。多组间比较采用方差分析，组内比较采用LSD- t法。 结果:与NC组相比，DM组肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白升高（ t=-39.57、-28.17、-57.31，均 P<0.05），SIRT1、LC3Ⅱ、nephrin及podocin表达减少，P62表达增多（均 P<0.05），p-FoxO1/FoxO1升高（0.71±0.03比0.32±0.01， t=-38.81， P<0.05），光镜及电镜显示肾小球、基底膜及足细胞结构损伤。Res组与DM组相比，肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白降低（ t=30.89、16.39、49.64，均 P<0.05），SIRT1、LC3Ⅱ、nephrin及podocin表达增高，P62表达减少（均 P<0.05），p-FoxO1/FoxO1降低（0.42±0.01比0.71±0.03， t=27.47， P<0.05），光、电镜显示以上损伤减轻。 结论:白藜芦醇通过激活SIRT1/FoxO1通路提高肾脏自噬水平，对糖尿病小鼠肾脏足细胞起保护作用。

AMP活化蛋白激酶（AMPK）是一种广泛存在于真核细胞生物中且进化上保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。在调控细胞能量代谢方面，AMPK作为能量代谢激酶具有极其重要的作用。当机体处于低能量状态时，AMPK对细胞内腺嘌呤核苷酸水平的变化作出反应，与一磷酸腺苷（AMP）或二磷酸腺苷（ADP）结合后被激活。激活的AMPK可调控各种代谢过程，包括脂质、葡萄糖代谢和细胞自噬。AMPK可通过磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1（mTORC1）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1（ULK1）和Ⅲ型磷脂酰肌醇3-激酶-空泡分选蛋白34（PIK3C3-VPS34）复合物中的自噬相关蛋白直接促进细胞自噬；也可通过调节叉头框蛋白O3（FOXO3）、溶酶体功能的转录因子EB（TFEB）和溴结构域蛋白4（BRD4）等转录因子下游自噬相关基因的表达间接促进细胞自噬；还可调节线粒体自噬，诱导受损的线粒体分裂，促进自噬反应向受损线粒体转移。AMPK另一个功能是调控线粒体健康，可通过刺激线粒体生物发生参与并调控线粒体内稳态的各个方面。本综述讨论了AMPK信号通道作为细胞响应能量应激和调控线粒体的中心，对线粒体生物学和内环境稳态的重要调控作用，重点介绍了AMPK在调节细胞自噬和线粒体自噬过程中的关键作用，以及调控线粒体稳态的研究进展。

目的:基于沉默信息调节因子1/叉头状转录因子O1（Sirt1/FoxO1）通路探讨体外冲击波联合富血小板血浆治疗膝关节骨性关节炎（KOA）大鼠关节软骨损伤的作用机制。方法:15只SD大鼠用于富血小板血浆提取，剩余35只SD大鼠按照随机数字表法分为空白对照组、模型组、体外冲击波组、富血小板血浆组及体外冲击波+富血小板血浆组，每组各7例。干预完成后，关节软骨组织苏木精-伊红（HE）染色观察关节软骨形态变化，Mankin评分进行病理评估，细胞活力检测（CCK-8）法检测关节软骨细胞活力和增殖情况，酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测关节液中炎症因子水平，蛋白质印迹法检测各组关节软骨组织Sirt1、acely-FoxO1/FoxO1表达水平。结果:关节软骨组织HE染色显示，模型组、体外冲击波组、富血小板血浆组及体外冲击波+富血小板血浆组均存在不同程度的病理损伤，其中模型组最为严重，其他3组差异不大。Mankin评分和关节软骨组织acely-FoxO1/FoxO1水平比较，空白对照组<体外冲击波+富血小板血浆组<富血小板血浆组<体外冲击波组<模型组（均 P<0.05）。关节软骨组织Sirt1水平、关节软骨细胞活力和增殖能力比较，模型组<体外冲击波组<富血小板血浆组<体外冲击波+富血小板血浆组<空白对照组（均 P<0.05）；关节液中炎症因子水平比较，空白对照组<体外冲击波+富血小板血浆组<体外冲击波组<富血小板血浆组<模型组（均 P<0.05）。 结论:体外冲击波联合富血小板血浆可通过上调Sirt1表达和下调FoxO1乙酰化水平，促进骨关节炎软骨细胞增殖，减轻KOA大鼠关节炎症反应和关节软骨损伤。

目的:探讨叉头框转录因子O1（FOXO1）表达与弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者临床病理特征和预后的相关性。方法:收集河北省人民医院2012年6月至2020年1月收治的42例初诊DLBCL患者资料。采用免疫组织化学法检测DLBCL组织中FOXO1、磷酸化FOXO1（p-FOXO1）的表达情况。回顾性分析FOXO1表达与DLBCL患者临床病理特征及预后的关系。结果:DLBCL组织中，FOXO1阳性率42.9%（18/42），p-FOXO1阳性率28.6%（12/42）。性别、年龄、Ann Arbor分期、免疫分型、美国东部肿瘤协助组评分、乳酸脱氢酶、国际预后指数、β 2微球蛋白（β 2-MG）、原发部位分层患者间FOXO1和p-FOXO1阳性率差异均无统计学意义（均 P>0.05）；无B症状患者FOXO1阳性率高于有B症状患者[53.6%（15/28）比21.4%（3/14），χ 2=3.938， P=0.047]，有无B症状患者间p-FOXO1阳性率差异无统计学意义（ P>0.05）。FOXO1阳性组2年总生存（OS）率高于阴性组（90.9%比66.7%），p-FOXO1阳性组2年OS率低于阴性组（50.0%比85.0%），但差异均无统计学意义（均 P>0.05）。在无B症状患者中，FOXO1阳性组2年OS率高于FOXO1阴性组（100.0%比50.0%，χ 2=5.486， P=0.019）。原发结内、β 2-MG升高、无B症状患者中p-FOXO1阴性组2年OS率均高于p-FOXO1阳性组（100.0%比50.0%，100.0%比25.0%，91.7%比33.3%），差异均有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:FOXO1可能参与DLBCL的发生、发展，FOXO1阳性表达可能提示DLBCL患者预后良好，p-FOXO1阳性表达可能与预后不良有关。

目的 检测结直肠癌患者外周血及肿瘤组织内程序性死亡分子-1(PD-1)/PD-1配体(PD-L1)、相关免疫细胞表达水平,并分析其临床表达意义.方法 将80例行结直肠癌根治术患者纳为癌变组,同期80例健康体检合格者纳为对照组,采集2组外周静脉血,检测PD-1、PD-L1、CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tregs)标志物叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)表达水平,术中收集结直肠癌患者癌灶及癌旁组织,免疫组化法检测癌灶及癌旁组织内PD-1、PD-L1及Foxp3蛋白表达水平.结果 癌变组患者外周血PD-1、PD-L1及Foxp3水平均高于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05)o癌变组患者术后外周血PD-1、PD-L1及Foxp3水平均较其术前下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).结直肠癌组织中PD-1、PD-L1及Foxp3阳性表达率均高于癌旁组织,差异均存在统计学意义(P＜0.05).癌灶组织内PD-1阳性表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及pTNM分期具有相关性(P＜0.05);癌灶组织内PD-L1阳性表达与肿瘤部位、浸润深度具有相关性(P＜0.05);Foxp3 Treg阳性表达与肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结转移具有相关性(P＜0.05).结论 PD-1、PD-L1及Treg细胞均与结直肠癌肿瘤免疫微环境相关,与结直肠癌发生及发展间均存在联系,三者联合检测可用于评估结直肠癌免疫检查点抑制剂的治疗新指标.

目的 探讨姜黄素(curcumin)调控沉默信息调节因子 1(silent mating-type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)/叉头盒蛋白O1(forkhead box protein O1,FoxO1)信号通路防控非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用及机制.方法 采用脂肪酸诱导HepG2 细胞 24 h建立NAFLD体外模型,油红O染色后光镜下观察细胞内脂肪变性,透射电镜观察细胞内自噬体形成,比色法检测细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)含量,免疫印迹法检测细胞内沉默信息调节因子 1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)、乙酰化叉头盒蛋白O1(acetylated forkhead box protein O1,AC-FoxO1)、微管相关蛋白 1 轻链 3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、选择性自噬接头蛋白 1(sequestosome 1,SQSTM1/P62)、自噬相关蛋白 7(autophagy related protein 7,ATG7)蛋白质表达,免疫荧光观察细胞内SIRT1 和FoxO1 蛋白质共定位.结果 姜黄素可改善细胞内脂肪变性,自噬体增加,显著降低 TC、TG 含量及 AC-FoxO1、P62 蛋白质表达(P＜0.01),显著升高 SIRT1、ATG7 蛋白质表达及 LC3-Ⅱ/LC3-I比值(P＜0.01).干扰 SIRT1 表达显著影响了姜黄素对细胞的保护作用及相关蛋白质的调控(P＜0.05 或P＜0.01);姜黄素通过激活SIRT1,增强细胞中FoxO1 核定位.干扰SIRT1 表达,FoxOl大量迁入细胞质区,SIRT1 和FoxOl共定位减少.结论 姜黄素通过激活SIRT1 促进FoxO1 脱乙酰化,诱导自噬,改善肝细胞脂肪变性.

[目的]探究甲亢激活心肌细胞β-catenin/FoxO1诱导大鼠心室重构的作用和机制.[方法]通过甲状腺激素(T4 0.1 mg/kg/day;腹腔注射)连续给药30 d构建甲亢诱导心室重构大鼠体内模型.利用β-catenin抑制剂MS-AB(14 mg/kg)同时给药30 d,通过Western-blot检测心肌肥厚主要标志物ANP以及β-catenin、FoxO1等蛋白的表达情况;免疫荧光检测β-catenin、FoxO1的核内外表达及分布情况.利用原代培养的乳鼠心肌细胞,使用甲状腺激素(T3 20 nmol/L)处理心肌细胞24 h构建体外甲亢诱导心肌细胞肥厚模型,利用β-cateninsiRNA(30 nmol/L)转染心肌细胞敲低β-catenin,Western-blot和免疫荧光检测抑制β-catenin对甲亢诱导乳鼠心肌细胞肥厚的影响.[结果]Wnt/β-catenin通路激活后β-catenin入核增多并于细胞核内的转录因子结合发挥转录调控作用.β-catenin在甲亢诱导的大鼠心室重构模型心肌细胞核内表达显著增加,而其经典下游转录因子TCF7l2表达无显著差异.我们的结果显示,MSAB抑制β-catenin明显改善甲亢诱导的大鼠心室重构.进一步研究表明甲亢诱导大鼠心肌肥厚过程中心肌细胞β-catenin/FoxO1表达明显增强,抑制心肌细胞β-catenin/FoxO1改善甲亢诱导大鼠心肌肥厚.[结论]甲亢性心肌肥厚心肌细胞β-catenin/FoxO1活化,抑制β-catenin/FoxO1改善甲状腺激素诱导的心肌细胞肥大.

目的 基于沉默信息调节因子1(silence information regulator 1,Sirt1)-叉头状转录因子O1(forkhead transcription factor O1,FoxO1)信号通路研究虎杖苷(polydatin,PD)抑制高糖诱导的心肌细胞焦亡的作用机制.方法 以心肌细胞H9c2为研究对象,使用不同浓度PD处理筛选PD浓度.将细胞分为模型组、PD低、中、高剂量组(PD-L、M、H,20、40、80 μmol/L)、空白对照(control)组、Sirt1 抑制剂[PD-H+sirtinol(10 μmol/L)]组.细胞计数试剂盒(cell counting Kit-8,CCK8)法检测细胞活性;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,Elisa)法检测细胞内乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量、白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)水平;二氯荧光素双醋酸盐(dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;流式细胞术检测细胞焦亡情况;实时荧光定量PCR检测细胞中Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)mRNA、消皮素 D(gasdermin D,GSDMD)mRNA 表达水平;Western blot 检测蛋白表达.结果 与control组比较,模型组细胞活性下降(P＜0.01),经过PD不同浓度处理后,细胞活性逐渐上升(P＜0.01);与control组比较,模型组LDH释放量、IL-1β水平、ROS水平、细胞焦亡率、NLRP3 mRNA、GSDMD mRNA 表达、焦亡蛋白 NLRP3、裂解的半胱氨酸天冬氨酸酶(cleaved-caspase-1,c-caspase-1)、GSDMD、GSDMD-N表达均上升,Sirt1-Foxo1信号通路蛋白表达下降(P＜0.01);与模型组比较,PD各组及PD-H+sirtinol组LDH释放量、IL-1β水平、ROS水平、细胞焦亡率、NLRP3 mRNA、GSDMD mRNA表达、焦亡蛋白NLRP3、c-caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达均下降,Sirt1-FoxO1信号通路蛋白表达上升(P＜0.05).sirtinol可以逆转PD对于高糖诱导的心肌细胞焦亡的保护作用.结论 PD可以通过上调Sirt1-FoxO1信号通路蛋白表达,改善细胞炎症损伤,抑制高糖诱导的心肌细胞焦亡.