目的 鉴定九味肝泰胶囊的化学成分,同时测定制剂中 10 种指标成分的含量.方法 查阅TCMSP、ChemSpider、中国知网、PubMed等数据库中的相关文献,收集制剂的核心化学成分 181 个,采用Agilent"formula-database generator"软件建立化学成分数据库,采用高效液相色谱-飞行时间质谱联用法鉴定制剂的化学成分;采用超高效液相色谱串联质谱法测定制剂中 10种指标成分的含量.结果 共鉴定出 45种化学成分.姜黄素在 1～50 ng/mL,大黄酚、大黄素、吉马酮、五味子醇甲、五味子甲素在 200～10000 ng/mL,尿囊素、黄芩苷、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1 在 1 000～50 000 ng/mL质量浓度范围内与待测成分和内标峰面积比值线性关系良好(r均大于 0.999 0),定量限分别为 0.05,10,0.5,10,0.05,0.05,0.05,0.5,0.5,10 ng/mL,检测限分别为 0.01,1,0.25,1,0.01,0.01,0.01,0.1,0.1,1 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于 5.0%;平均加样回收率为 98.13%～102.64%,RSD为 0.54%～4.10%(n=6).结论 该方法快速简便,可用于九味肝泰胶囊的化学成分鉴定和指标成分含量测定.

目的 探讨吉马酮抑制蛋白酪氨酸激酶2(Janus kinase 2,JAK2)/信号转导子与激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路对食管癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法 甲基噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同浓度(0、10、20、40、80、160和320 μmol/L)的吉马酮分别处理人食管癌细胞Eca109和KYSE450以及人食管上皮细胞Het-1A后的细胞存活率.将Eca109细胞分为对照组(常规培养)、吉马酮低剂量组(40μmol/L吉马酮干预24 h)、吉马酮中剂量组(80 μmol/L吉马酮干预24 h)、吉马酮高剂量组(160 μmol/L吉马酮干预24 h)、Coumermycin A1 组(10 μmol/L JAK2 激活剂 coumermycin A1+160 μmol/L 吉马酮干预 24 h)和 AG490 组(50 μmol/L JAK2 抑制剂AG490+160 μmol/L吉马酮干预24 h).Transwell检测细胞迁移和侵袭能力.平板克隆实验检测细胞克隆能力.流式细胞术检测细胞凋亡和周期.Western blot 检测 JAK2、磷酸化 JAK2(phos-JAK2,p-JAK2)、STAT3、p-STAT3、Ki-67、Bax、Bcl-2和p53表达情况.结果 与0μmol/L比较,10、20、40、80、160和320μmol/L的吉马酮处理下,Eca109和KYSE450细胞存活率均呈浓度依赖性降低(均P＜0.05),半抑制浓度(half-inhibitory concentration,IC50)分别为(98.18±2.12)μmol/L和(154.77±2.32)μmol/L,而Het-1A细胞存活率差异无统计学意义(均P＞0.05).由于吉马酮对Eea109细胞效果更明显,后续选择Eea109细胞并采用40、80和160 μmol/L吉马酮浓度进行作用机制研究.与对照组比较,吉马酮低、中和高剂量组Eca109细胞迁移、侵袭、克隆个数以及p-JAK2、p-STAT3、Ki-67和Bcl-2蛋白表达均降低(均P＜0.05),Eca109细胞G0/G1期比例、早期凋亡率和总凋亡率以及Bax和p53表达均升高(均P＜0.05).与吉马酮高剂量组比较,Coumermycin A1组Eca109细胞迁移、侵袭、克隆个数以及p-JAK2、p-STAT3、Ki-67和Bcl-2蛋白表达均增加,Eca109细胞G0/G1期比例、早期凋亡率和总凋亡率以及Bax和p53表达均降低(均P＜0.05);AG490组Eca109细胞迁移、侵袭、克隆个数以及p-JAK2、p-STAT3、Ki-67和Bcl-2表达均降低,Eca109细胞G0/G1期比例、早期凋亡率和总凋亡率以及Bax和p53表达均升高(均P＜0.05).结论 吉马酮可通过抑制JAK2/STAT3通路抑制食管癌细胞的增殖和侵袭能力,并促进细胞凋亡.

目的:验证温郁金、温莪术和醋莪术的寒热药性,探究3 者挥发油中7 种挥发性成分与其寒热药性的相关性.方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油并对其含有的7 种挥发性成分的含量通过气相色谱法(GC法)进行测定,给予SD雄性大鼠灌服寒凉药构建胃寒实证模型,再分别给予热性药、寒性药、生莪术、醋莪术、生郁金的水煎液治疗.通过观测比较大鼠在造模和给药的全过程中体质量、肛温、进食量、大便粒数和质地的变化,比较温郁金、温莪术和醋莪术的寒热药性.结果:温莪术醋制前后7 种挥发性成分的含量差异不明显;温莪术挥发油中1,8-桉叶素、樟脑、龙脑、吉马酮、莪术二酮的含量明显高于温郁金上述成分的含量(P<0.01).温莪术的生品、醋制品对胃寒导致的腹泻治疗效果弱于热性药的治疗效果,温莪术的生品、醋制品表现为脾胃温性,温郁金的生品会加重腹泻,但致泻效果较寒性药致泻效果弱,温郁金表现为脾胃弱寒性.结论:1,8-桉叶素、樟脑、吉马酮、莪术二酮4 种挥发性成分的药理作用与温热药作用一致,且其含量高低与温郁金、温莪术和醋莪术寒热药性变化一致,推测这4 种挥发性成分可能是其发挥寒热药性的重要物质基础.

目的 研究仁术健胃颗粒放大工艺验证过程.方法 仁术健胃颗粒放大生产 3 批,关键过程节点取样,建立HPLC-ELSD、HPLC-PDA法测定黄芪甲苷、黄芩苷、甘油三油酸酯、吉马酮的含量,并研究饮片-中间体-成品指标成分转移率.结果 4 种成分在各自范围内线性关系良好(R2≥0.999 8),平均加样回收率 88.18%～101.30%,RSD 1.56%～2.76%.黄芪甲苷从饮片到颗粒转移率为48.23%～64.31%,各个环节转移率均高于70%;黄芩苷从饮片到颗粒转移率为 46.16%～54.85%,各个环节转移率均高于 60%;甘油三油酸酯从饮片到颗粒转移率为 44.65%～50.61%,各个环节转移率均高于 45%;吉马酮从饮片到颗粒转移率为 20.65%～24.24%,各个环节转移率均高于 40%.结论 该方法具有准确度高、重复性好的优点,可用于仁术健胃颗粒的质量控制,建立的生产全过程转移率能为仁术健胃颗粒大生产提供数据参考.

目的 探讨吉马酮(GMC)调节局部黏着斑激酶(FAK)/Yes相关蛋白(YAP)通路对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞顺铂(DDP)耐药性的影响.方法 将A549/DDP细胞分为CK组、低剂量GMC组(GMC-L组,5μmol/L)、中剂量GMC组(GMC-M组,10μmol/L)、高剂量GMC组(GMC-H组,20μmol/L)、GMC-H+pcDNA组(20μmol/L+转染pcDNA)、GMC-H+pcDNA-FAK组(20μmol/L+转染pcDNA-FAK).检测各组细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭情况;检测多药耐药基因1(MDR1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、磷酸化的FAK(p-FAK)、YAP蛋白表达情况.结果 与CK组比较,GMC-L组、GMC-M组、GMC-H组A549/DDP细胞OD450值、克隆形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数、MDR1、PCNA、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、p-FAK蛋白及核YAP蛋白表达降低,细胞凋亡率升高,且呈浓度依赖性(P＜0.05);与GMC-H组、GMC-H+pcDNA组比较,GMC-H+pcDNA-FAK组A549/DDP细胞OD450值、克隆形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数、MDR1、PCNA、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、p-FAK蛋白及核YAP蛋白表达升高,细胞凋亡率降低(P＜0.05).结论 GMC可能通过抑制FAK/YAP信号通路减弱NSCLC细胞DDP耐药性.

目的:建立黄丝郁金、醋黄丝郁金HPLC指纹图谱,并结合化学计量学探讨黄丝郁金醋炙前后化学成分的差异及潜在质量差异标志物.方法:收集15批四川产黄丝郁金药材并制备醋炙品,建立指纹图谱,进行相似度评价,采用SIMCA-P 14.1软件进行聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析.结果:建立了黄丝郁金、醋黄丝郁金指纹图谱,均确定了 20个共有峰,并指认出2号峰为Bisacurone、3号峰为Bisacurone B、6号峰为双去甲氧基姜黄素、7号峰为去甲氧基姜黄素、8号峰为姜黄素、9号峰为莪术二酮、14号峰为芳姜黄酮、15号峰为吉马酮.相似度均≥0.939.聚类分析和主成分分析可基本上区分黄丝郁金、醋黄丝郁金,正交偏最小二乘判别分析共筛选出黄丝郁金醋炙前后7个质量差异标志物.结论:该研究建立的黄丝郁金、醋黄丝郁金HPLC指纹图谱结合化学计量学方法可用于探索黄丝郁金醋炙前后潜在质量标志物.

原发性肝癌为我国高发恶性肿瘤,中医认为肝癌的主要病因是"气虚血瘀",其治法以"益气活血"为主.黄芪-莪术为益气活血法代表性药对,已有研究表明该药对及其活性成分具有明确的抗肝癌作用.通过对黄芪-莪术药对及其活性成分抗肝癌作用机制相关文献进行梳理,从抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、抑制细胞迁移和侵袭、抑制新血管生成、改善免疫微环境、逆转多药耐药等角度对其抗肝癌作用机制进行综述,为黄芪-莪术药对的临床用药和抗肝癌中药新药研发提供依据.

目的 测定蓬莪术炮制过程中pH值及7种成分(双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素、莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯)量的动态变化,从而对其所含的姜黄素类和挥发油类成分在醋制过程中受水、热、酸等外界因素的作用而发生的化学成分量变化进行研究.方法 分别以蒸馏水、9°米醋、9％醋酸水溶液对蓬莪术进行炮制,并对特定时间点的水液pH值进行测定,用SPSS软件对所得数据进行分析;采用HPLC方法同时测定生品组、空白组、醋制组和参照组蓬莪术样品中7种成分的量,并对其量的变化进行分析.结果 与空白组相比,醋制组和参照组最终的pH值偏低且无显著差异;与空白组和参照组相比,醋制组中测定的3种姜黄素类成分量均增加[双去甲氧基姜黄素质量分数为(0.002 320±0.000 344) mg/g、去甲氧基姜黄素质量分数为(0.059 65±0.015 64) mg/g、姜黄素质量分数为(0.272 5±0.125 2)mg/g],而测定的挥发油类成分有不同程度地降低.结论 在炮制过程中,药用辅料9°米醋中的主要有效成分可能是醋酸;米醋中的醋酸及其他少量有机成分可能通过调节pH值来保护蓬莪术药材中化学成分不被水、热、酸破坏;通过对不同成分保护程度的差异来调节蓬莪术醋制前后毒效成分的减加,不仅体现了9°米醋作为药用辅料的科学性,也为进一步研究蓬莪术醋制“减毒增效”物质基础提供了新思路.

目的:通过研究黄芪和莪术共煎中化学成分的相互作用及其变化特点,揭示两药配伍协同增效的化学物质基础.方法:采用高效液相色谱法(HPLC)分析黄芪单煎、莪术单煎、单煎后合并及共煎时有效成分含量的变化,定量相关成分的含量,归属黄芪、莪术主要色谱峰的来源.结果:黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、毛蕊异黄酮、芒柄花素、莪术醇、莪术二酮、吉马酮在共煎液中的含量均高于单煎及合并液.结论:黄芪、莪术配伍的物质基础和黄芪、莪术单用的物质基础有异同,其共煎液有效成分含量高于单煎及合并液,为进一步的临床研究提供了一些实验依据.

目的:找到复方莪术油脂质体凝胶(zedoary turmeric oil compound liposomes gel,ZTOC-LG)的最佳制备工艺并进行体外透皮性能研究及其稳定性考察.方法:采用乙醇注入法制备复方莪术油脂质体(zedoary turmeric oil compound liposomes,ZTOC-L),再以卡波姆-940为基质制备脂质体凝胶剂,通过单因素实验和正交实验,以脂质体凝胶剂的成型性、光泽度、均匀度、黏度、pH、涂展性、稳定性等组成的综合评分为评价指标,优选ZTOC-LG的制备工艺.采用Franz扩散池比较ZTOC-LG和普通凝胶的指标物质经皮渗透性和皮肤滞留量.通过温度、光照、湿度实验对ZTOC-LG的稳定性进行了考察.结果:最优基质处方为卡波姆0.2g,甘油3.5g,三乙醇胺0.1g.体外透皮实验表明,ZTOC-LG中的吉马酮和维A酸的24 h累积渗透量和渗透速率均小于普通凝胶,皮肤滞留量均大于普通凝胶.稳定性实验表明ZTOC-LG对温度和光照敏感,对湿度不敏感.结论:该脂质体凝胶剂的制备工艺简单可行,质量可控,且能提高药物在局部皮肤中的滞留量从而达到长效缓释的作用.