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六味安消胶囊的指纹图谱及含量测定
编辑人员丨1周前
目的 采用超高效液相色谱法,建立六味安消胶囊的超高效液相(Ultra High Performance Liquid Phase,UPLC)指纹图谱及10 种有效成分(没食子酸、鞣花酸、芦荟大黄素、大黄酸、山奈素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、土木香内酯、异土木香内酯)的含量测定方法.方法 采用超高效液相色谱法,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3 柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm),流动相为乙腈-体积分数 0.2%的磷酸溶液,梯度洗脱,流速为 0.2 mL·min-1,柱温为 30℃,检测波长为254 nm(指纹图谱)和194 nm,进样量为2 μL.结果 建立了六味安消胶囊的UPLC指纹图谱,以芦荟大黄素为参照峰,标定了20 个共有峰,相似度均大于0.995,并指认了没食子酸、鞣花酸、芦荟大黄素、大黄酸、山奈素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚8 个共有峰,聚类分析将10 批六味安消胶囊样品聚为2 类.定量分析条件方法学考察结果良好,结果显示,没食子酸、鞣花酸、芦荟大黄素、大黄酸、山奈素、大黄素、异土木香内酯、土木香内酯、大黄酚、大黄素甲醚的质量浓度分别在 0~180.5 μg·mL-1(r=1.000 0)、0~173.5 μg·mL-1(r=0.999 9)、0~48.5 μg·mL-1(r=1.000 0)、0~55.0 μg·mL-1(r=1.000 0)、0~188.0 μg·mL-1(r=1.000 0)、0~62.0 μg·mL-1(r=1.000 0)、0~65.5 μg·mL-1(r=1.000 0)、0~131.0 μg·mL-1(r=0.999 9)、0~91.5 μg·mL-1(r=0.999 9)、0~31.0 μg·mL-1(r=0.999 9)内与峰面积成良好的线性关系.平均回收率分别为 101.38%、96.07%、98.62%、93.21%、93.58%、97.67%、96.50%、97.68%、96.95%、98.72%,RSD 分别为3.21%、3.05%、3.96%、1.03%、2.22%、3.52%、3.72%、3.29%、3.07%、3.60%.结论 建立了六味安消胶囊UPLC指纹图谱及同时测定 10 种有效成分含量的方法,操作简便,准确可靠,为六味安消胶囊的质量控制与评价提供了理论依据.
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编辑人员丨1周前
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土木香内酯对急性髓系白血病THP-1细胞增殖和凋亡的影响
编辑人员丨1周前
目的:探讨土木香内酯对急性髓系白血病(AML)细胞株THP-1细胞增殖、凋亡的影响及其相关机制。方法:取对数生长期THP-1细胞,对照组加入等体积含10%胎牛血清的培养液,实验组分别加入0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μmol/L土木香内酯,各组细胞培养72 h,CCK-8法检测细胞增殖情况。另取对照组细胞,实验组分别加入2.0、4.0 μmol/L土木香内酯,各组细胞培养72 h,流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测NF-κB通路相关蛋白表达情况。结果:0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μmol/L土木香内酯作用THP-1细胞72 h后,增殖抑制率分别为(9.4±1.4)%、(27.7±4.0)%、(45.1±2.5)%、(66.9±2.9)%、(87.0±1.2)%、(91.7±1.0)%、(94.4±0.8)%,呈剂量依赖性,对照组为(0.4±0.1)%,差异具有统计学意义( F=241.87, P<0.01)。2.0、4.0 μmol/L土木香内酯作用于THP-1细胞72 h后,细胞凋亡率分别为(26.1±4.2)%和(37.8±5.6)%,对照组为(8.5±1.4)%,差异具有统计学意义( F=43.04, P<0.05),土木香内酯能够下调bcl-2、p65表达水平,上调bax、剪切的caspase-3及剪切的PARP表达水平。 结论:土木香内酯能够通过抑制NF-κB通路诱导AML THP-1细胞凋亡,从而抑制其增殖。
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编辑人员丨1周前
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土木香内酯抗病毒作用的体内外研究
编辑人员丨2024/6/15
目的 探索土木香内酯体内外的抗病毒作用,并基于Ⅰ型干扰素(type Ⅰ interferon,IFN-Ⅰ)通路探究其抗病毒作用机制.方法 CCK-8法检测土木香内酯对A549细胞活力的影响;利用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus expressing green fluorescent protein,VSV-GFP)感染细胞模型,结合流式细胞术检测土木香内酯对病毒复制的影响;qRT-PCR检测土木香内酯对甲型流感病毒(influenza A virus,H1N1)、脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)复制的影响;Western blotting检测土木香内酯对VSV病毒G蛋白和H1N1病毒NP蛋白表达的影响;利用生物信息学初步分析土木香内酯的抗病毒分子机制;qRT-PCR检测药物处理后干扰素α1(interferon α1,Ifna1)、干扰素β1(interferonβ1,Ifnb1)、干扰素诱导蛋白1(interferon-induced protein with tetratricopeptide repeats 1,Ifit1)、干扰素刺激基因 15(interferon stimulated gene 15,Isg15)的mRNA表达变化;流式细胞术和qRT-PCR检测 Ⅰ型干扰素受体1(type Ⅰ interferon receptor 1,IFNAR1)敲除(Ifnar1-/-)细胞中,土木香内酯的抗病毒作用与干扰素信号通路的关系;构建小鼠H1N1病毒滴鼻感染模型探究土木香内酯的体内抗病毒作用.结果 土木香内酯体外抑制VSV、H1N1和EMCV病毒复制;土木香内酯激活IFN-Ⅰ信号通路;在Ifnar1-/-细胞中土木香内酯抗病毒作用被削弱;土木香内酯提高H1N1感染小鼠的存活率,降低脏器H1N1病毒载量.结论 土木香内酯激活基于IFN-I信号通路的抗病毒天然免疫反应,发挥抵抗多种病毒复制的作用.
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编辑人员丨2024/6/15
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异土木香内酯体外抗病毒作用与机制研究
编辑人员丨2024/5/11
目的 研究异土木香内酯的体外抗病毒作用及机制.方法 CCK-8法检测0.125、0.500、1.000、2.000、4.000、8.000、16.000、32.000、64.000 μmol·L-1的异土木香内酯处理24h对人非小细胞肺癌细胞系(A549)细胞活力的影响;表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV-eGFP)以0.02的感染复数(MO1)感染A549细胞制备模型,流式细胞术检测共同孵育12h的异土木香内酯5、10、20μmol·L-1对GFP阳性细胞率的影响;VSV感染(MOI=0.1)A549细胞,Western blotting检测异土木香内酯处理16h对VSV病毒G蛋白表达的影响;分别使用甲型流感病毒(H1N1,MOI=0.1)、脑心肌炎病毒(EMCV,MOI=0.1)感染A549细胞,同时给药共同孵育8h后,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测土木香内酯对病毒RNA表达的影响;异土木香内酯分别以预处理12 h、病毒吸附过程中给药2 h、病毒吸附后给药10h3种不同方式给药,通过流式细胞术检测其对VSV-eGFP在A549细胞中复制的影响;异土木香内酯20 μmol·L-1处理胚胎成纤维(MEF)细胞12h,进行转录组测序分析;异土木香内酯5、10、20μmol·L-1处理MEF细胞12 h,qRT-PCR检测干扰素α1(Ifna1)、干扰素β1(Ifnb1)、干扰素诱导蛋白44(Ifi44)、干扰素刺激基因15(Isg15)的mRNA表达.结果 异土木香内酯对A549细胞的半数抑制浓度(IC50)为51.01μmol·L-1;与模型组比较,流式结果显示异土木香内酯显著减少VSV-eGFP阳性细胞率(P<0.001),但对病毒的吸附过程没有影响,药物预处理及吸附后给药显著抑制VSV病毒复制(P<0.01、0.001);qRT-PCR结果显示异土木香内酯显著降低H1N1、EMCV病毒的mRNA水平(P<0.001);Western blotting结果显示异土木香内酯显著抑制VSV的G蛋白表达(P<0.001);转录组测序分析和qRT-PCR结果表明,异土木香内酯促进Ⅰ型干扰素通路的激活,并诱导Ifnia1、Ifnb1、Ifi44、Isg15(P<0.001)表达.结论 异土木香内酯通过促进基于干扰素通路的抗病毒天然免疫激活,发挥抑制病毒复制的作用.
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编辑人员丨2024/5/11
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土木香内酯上调miR-3178抑制胆管癌QBC939细胞增殖、迁移和侵袭
编辑人员丨2024/1/20
目的 探讨土木香内酯调控微小RNA(miR)-3178 对胆管癌QBC939 细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 不同浓度的土木香内酯作用于QBC939 细胞 48 h,细胞计数试剂盒(CCK-8)和平板克隆实验检测细胞增殖,划痕愈合实验、Tr-answell实验检测细胞迁移和侵袭.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测QBC939 细胞、胆管癌组织中miR-3178 的相对水平.转染miR-3178 模拟物至 QBC939 细胞,检测过表达对 QBC939 细胞增殖、迁移和侵袭的影响.转染 miR-3178 抑制物至QBC939 细胞,检测抑制miR-3178 表达联合土木香内酯对QBC939 细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结果 土木香内酯显著增加QBC939 细胞抑制率、凋亡率、miR-3178 的相对水平(P<0.05),降低克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数(P<0.05),呈剂量依赖性.与癌旁组织比较,胆管癌组织中miR-3178 表达水平显著降低(P<0.05).过表达miR-3178 显著增加QBC939 细胞抑制率和凋亡率(P<0.05),降低克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数(P<0.05).抑制 miR-3178 表达部分逆转了土木香内酯对QBC939 细胞增殖、迁移和侵袭的影响(P<0.05).结论 土木香内酯通过上调miR-3178 表达抑制胆管癌QBC939 细胞增殖、迁移和侵袭.
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编辑人员丨2024/1/20
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市售香砂养胃丸质量评价
编辑人员丨2023/11/18
目的 评价香砂养胃丸(水丸、浓缩丸、大蜜丸)的整体质量.方法 采用超高效液相色谱(UPLC)法,色谱柱为Acquity UPLC? HSS T3 柱(150 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为 0.3 mL/min,检测波长为 275 nm(0~13 min)、284 nm(13~25 min)、254 nm(25~35 min)、225 nm(35~60 min),柱温为 30℃,进样量为 2μL.建立 46 家生产企业香砂养胃丸(水丸、浓缩丸、大蜜丸)样品的UPLC指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012 版)软件进行相似度评价,并对市售55 批样品进行木香掺伪检查.结果 46 家生产企业样品UPLC指纹图谱,水丸和大蜜丸分别确定 23 个共有峰,浓缩丸确定 21 个共有峰.共指认 11 个成分,分别为紫丁香苷、维采宁Ⅱ、甘草苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、甘草酸铵、川陈皮素、和厚朴酚、木香烃内酯、去氢木香内酯、厚朴酚.浓缩丸的相似度与水丸和大蜜丸相比更低,相似度低于 0.90 的水丸样品占 8.57%,浓缩丸占 55.56%,大蜜丸样品占 50.00%.55 批样品均未混用藏木香或土木香;4 批水丸和 2 批浓缩丸(涉及 6 个厂家)的木香烃内酯与去氢木香内酯峰面积比值低于 0.6,可能混有川木香.结论 所建立的UPLC指纹图谱,能同时鉴别木香及其易混品,可用于香砂养胃丸的质量控制.
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编辑人员丨2023/11/18
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中药单体调控PI3K/Akt信号通路干预胰腺癌的研究进展
编辑人员丨2023/10/28
胰腺癌是最具破坏性的恶性肿瘤之一,其发病机制复杂,与遗传易感性、慢性胰腺炎、信号通路基因突变等因素密切相关.磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路是经典的癌症信号通路,在胰腺癌细胞中被异常激活.近年来研究发现,中药单体在胰腺癌治疗中表现出特殊活性,是治疗胰腺癌的潜在药物.本文基于PI3K/Akt信号通路总结中药单体干预胰腺癌的作用机制发现,生物碱类(如青藤碱、白鲜碱、蝙蝠葛碱等)、萜类(如柴胡皂苷A、乌药内酯、异土木香内酯等)、酚类(如6-姜酮酚、姜黄素、紫檀芪等)、黄酮类(如非瑟酮、山柰酚、槲皮素等)、醌酮类(β-羟基异戊酰紫草素、大黄酸、赤芝酮等)中药单体,可通过抑制PI3K/Akt信号通路,抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移,调节自噬和凋亡,进而抑制胰腺癌的病理进程.
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编辑人员丨2023/10/28
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蒙药土木香的化学成分研究
编辑人员丨2023/9/23
研究蒙药土木香的化学成分,采用RP-HPLC、硝酸银硅胶色谱等方法分离纯化,应用NMR、MS等波谱技术鉴定化合物结构,共分离鉴定了 22 个单体化合物,分别为 5α,6α-dihydroxy-eudesma-11(13)-dien-12,8β-olide(1)、4α-hy-droxy-5-methoxy-5,8α-dimethyl-3-methylenedecahydronaphtho[2,3-b]furan-2-one(2)、木香烯内酯(3)、土木香内酯(4)、异土木香内酯(5)、11,13-二氢土木香内酯(6)、alloalantolactone(7)、4α,5β-环氧-1(10),11(13)-吉玛烷-12,8α-交酯(8)、septuplinolide(9)、8-epi-ivangustin(10)、santamarine(11)、racemosalactone A(12)、3-oxo-eudesma-4(11)-dien-12,8β-olide(13)、telekin(14)、igalane(15)、macrophyllilactone E(16)、4α,15-环氧异土木香内酯(17)、11,13-dihydroxy-alantolactone(18)、1(2),4(15),11(3)-eudesma-trien-12,8β-olide(19)、亚麻酸(20)、亚油酸(21)、油酸(22).化合物1是新倍半萜内酯类化合物,化合物2、3、9~14、17、19~22为首次从该属植物中分离得到,化合物4~8、15、16、18为土木香药材中已报道的化合物.
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编辑人员丨2023/9/23
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藏骨宝胶囊的质量标准研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 建立藏骨宝胶囊的质量标准.方法 采用TLC法鉴别制剂中的土木香内酯和齐墩果酸;建立HPLC法测定制剂中秦皮甲素和秦皮乙素的含量.色谱柱为Kromasi1 C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-1 mL·L-1磷酸溶液(12:88);检测波长:334 nm;流速:1.0 mL·min-1;柱温:25℃;进样量:20μL.结果 土木香内酯和齐墩果酸的T LC图斑点清晰、分离良好,阴性样品无干扰.秦皮甲素质量浓度在5.42~54.2μg·m L-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9993),其平均加样回收率为100.06%,RSD值为1.14%(n=9);秦皮乙素的质量浓度在3.28~32.8μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9995),其平均加样回收率为100.80%,RSD值为1.68%(n=9).结论 该方法操作简便、快速、准确,可作为藏骨宝胶囊质量控制的方法.
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编辑人员丨2023/8/6
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HPLC法同时测定康妇软膏中异土木香内酯、土木香内酯、花椒毒酚、氧化前胡素、欧前胡素和蛇床子素
编辑人员丨2023/8/6
目的:建立HPLC梯度洗脱法同时测定康妇软膏中异土木香内酯、土木香内酯、花椒毒酚、氧化前胡素、欧前胡素和蛇床子素的含量.方法:以Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.9 ml·min-1,检测波长分别为220 nm和300 nm,柱温35 ℃.结果:异土木香内酯、土木香内酯、花椒毒酚、氧化前胡素、欧前胡素和蛇床子素分别在6.16~123.20 μg·ml-1、3.78~75.60 μg·ml-1、1.87~37.40 μg·ml-1、4.06~81.20 μg·ml-1、9.27~185.40 μg·ml-1、13.89~277.80 μg·ml-1范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9994,0.9998,0.9996,0.9995, 0.9999和0.9997;平均加样回收率分别为98.04%(RSD =1.06%),97.10%(RSD =1.53%),96.73%(RSD =0.90%), 98.92%(RSD=1.36%),99.12%(RSD=0.83%)和100.27%(RSD=0.58%).结论:该方法简便、准确,可用于康妇软膏质量标准的提高.
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编辑人员丨2023/8/6
