目的:探讨孕期和哺乳期壬基酚(nonylphenol，NP)暴露对后代小鼠脑组织Th17/Treg细胞平衡的影响及其相关机制研究。方法:30只C57BL/6孕鼠随机分为3组：对照组(饮用蒸馏水)和NP处理组(饮用0.2 μg/ml或2.0 μg/ml NP水溶液)。使用ELISA试剂盒测量仔鼠血清中的TNF-α、IFN-γ和IL-17水平，流式细胞术分析仔鼠脾脏Treg、Th17细胞频率，定量RT-PCR分析仔鼠脑组织中RORγt、Foxp3 mRNA表达，Western blot分析仔鼠脑组织中RORγt、Foxp3和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白质表达，免疫荧光分析仔鼠脑组织中离子钙结合衔接分子1(Iba1)表达情况。结果:与对照组相比，NP暴露增加了雄性后代小鼠的血清IL-17、TNF-α水平( P<0.05)，降低了IFN-γ水平( P<0.05)。流式细胞术分析显示，NP暴露(0.2 μg/ml或2.0 μg/ml)的雄性后代小鼠脾脏中Th17细胞的百分比较对照组显著增加，而Tregs细胞的百分比降低。与对照组相比，NP暴露(0.2 μg/ml或2.0 μg/ml)的雄性后代小鼠脑组织中Foxp3蛋白质水平显著降低，RORγt蛋白质水平显著升高( P<0.05)。在qRT-PCR分析中也观察到类似的mRNA表达结果。在孕期和哺乳期暴露于剂量增加的NP期间，雄性后代小鼠脑组织中mTOR(p-mTOR)及其上游相关调节因子[PI3K、p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)]的蛋白质表达水平均升高( P<0.05)。免疫荧光分析显示，与对照组相比，NP暴露(0.2 μg/ml或2.0 μg/ml)的雄性后代小鼠脑组织中Iba1阳性细胞的数量显著增加( P<0.05)。 结论:孕期和哺乳期小鼠暴露于NP可能通过神经免疫轴影响后代神经元的发育/功能，增加后代神经发育障碍的风险。

目的:分析壬基酚对人结肠癌SW480细胞活性及跨膜G蛋白偶联雌激素膜受体30（GPR30）表达的影响。方法:采用实验研究方法。通过体外培养人结肠癌SW480细胞，采用细胞增殖、周期及凋亡检测以及基因和蛋白检测实验，分析壬基酚影响人结肠癌SW480细胞增殖、细胞周期、凋亡以及GPR30表达的情况。细胞分组：SW480细胞加入培养基设为对照组，加入培养基+1×10 ?8 mol/L雌二醇设为雌二醇组，加入培养基+1×10 -8 mol/L壬基酚设为壬基酚组，加入培养基+1×10 -8 mol/L壬基酚+1×10 -7 mol/L GPR30特异性拮抗剂G15设为壬基酚+G15组。观察指标：（1）4组人结肠癌SW480细胞增殖指数。（2）4组人结肠癌SW480细胞的周期占比。（3）4组人结肠癌SW480细胞的凋亡指数。（4）4组人结肠癌SW480细胞GPR30信使RNA（mRNA）表达情况。（5）4组人结肠癌SW480细胞GPR30蛋白表达情况。正态分布的计量资料以 x±s表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用最小显著差异法检验。 结果:（1）4组人结肠癌SW480细胞增殖指数。细胞增殖实验结果显示：对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞的增殖指数分别为100.00±0.00、89.19±4.86、148.96±6.04、120.40±3.39，4组比较，差异有统计学意义（ F=21.45， P<0.05）；壬基酚组与对照组比较，差异有统计学意义（ P<0.05）；雌二醇组、壬基酚+G15组分别与对照组比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）。（2）4组人结肠癌SW480细胞的周期占比。细胞周期实验结果显示：对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞的S期细胞占比分别为39.96%±2.02%、36.67%±0.62%、43.85%±1.02%、38.29%±1.42%，4组比较，差异有统计学意义（ F=10.08， P<0.05）；雌二醇组、壬基酚组分别与对照组比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；壬基酚+G15组与对照组比较，差异无统计学意义（ P>0.05）。（3）4组人结肠癌SW480细胞的凋亡指数。细胞凋亡实验结果显示：对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞的凋亡指数分别为1.67±0.18、4.80±0.31、0.75±0.11、2.20±0.19，4组比较，差异有统计学意义（ F=136.79， P<0.05）；雌二醇组、壬基酚组分别与对照组比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；壬基酚+G15组与对照组比较，差异无统计学意义（ P>0.05）。（4）4组人结肠癌SW480细胞GPR30 mRNA表达情况。实时荧光定量聚合酶链式反应检测结果显示：对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞GPR30 mRNA相对表达率分别为1.00±0.00、0.86±0.05、1.89±0.27、0.64±0.12，4组比较，差异有统计学意义（ F=26.61， P<0.05）；壬基酚组、壬基酚+G15组分别与对照组比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；雌二醇组与对照组比较，差异无统计学意义（ P>0.05）。（5）4组人结肠癌SW480细胞GPR30蛋白表达情况。Western blot检测结果显示：对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞GPR30蛋白相对表达率分别为1.83±0.16、1.68±0.15、3.10±0.30、1.26±0.11，4组比较，差异有统计学意义（ F=34.05， P<0.05）；壬基酚组、壬基酚+G15组分别与对照组比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；雌二醇组与对照组比较，差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:低剂量壬基酚可增加人结肠癌SW480细胞增殖指数与S期细胞占比，降低细胞凋亡指数，并促进GPR30 mRNA和蛋白表达。

[背景]壬基酚(NP)为典型的酚类内分泌干扰物,不同区域、不同类型水质中NP浓度存在差异.[目的]探究湖北省江河型、湖泊型和水库型 3种类型饮用水水源地NP的浓度,评估其生态风险和人群健康风险.[方法]在 4个江河型水源地(凉亭山水厂水源地、白沙洲水厂水源地、堤角水厂水源地、宗关水厂水源地)、1个湖泊型水源地(梁子湖水源地)和 1个水库型水源地(富水水库水源地)设置15个水样采样点,分别于2019年6月(丰水期)、2019年10月(平水期)和2019年12月(枯水期)进行采样.采用超高效液相色谱-串联质谱法检测水样NP质量浓度(浓度),采用方差分析方法比较各组间NP浓度差异;分别采用风险商(RQ)法和非致癌风险指数(NCRI)法评价NP的生态风险和对人群的健康风险.[结果]各水样中NP检出率为 100%,平均浓度为(18.10±15.00)ng·L-1(5.45～92.71 ng·L-1).平水期、丰水期和枯水期全部水样NP平均浓度分别为(11.52±5.31)ng·L-1、(23.86±22.08)ng·L-1和(18.93±9.51)ng·L-1,最大浓度值分别为 24.62 ng·L-1、92.71 ng·L-1 和 42.38 ng·L-1.方差分析结果表明,江河、湖泊和水库水源地的不同时期之间水质NP浓度差异均无统计学意义(P>0.05).仅宗关水厂水源地丰水期水样RQ值大于0.1(0.19),为中风险,其余14个采样点平水期、丰水期及枯水期水样和宗关水厂水源地平水期及枯水期水样的RQ值均小于 0.1,整体生态风险水平较低;平水期、丰水期和枯水期NCRI值最高分别为 0.1459、0.5492和0.2511,均小于1,均处在可接受范围内.[结论]湖北省 3种类型饮用水水源地水质中NP浓度处于较低水平,对人群健康风险处于可接受水平.

神经系统是机体内对生理功能活动的调节起主导作用的系统,当神经系统受损后,受损部分所负责的生理功能也会受到影响.研究表明,环境内分泌干扰物可对神经元正常结构和功能造成影响,从而导致神经功能改变.本文综述了几种有代表性的环境内分泌干扰物[双酚A、壬基酚、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯、马拉硫磷]造成神经损伤的机制、与神经功能改变关系,以及多种环境内分泌干扰物混合物对神经系统复合作用,为维持神经功能稳定提供参考依据.

[目的]评估上海市0～36月龄婴幼儿配方乳粉壬基酚膳食暴露的健康风险.[方法]于2022年开展上海市市售婴幼儿配方乳粉中壬基酚污染的风险监测,共监测90件样品,样品分别来自上海市的母婴店、超市以及网店.结合每日婴幼儿配方乳粉的消费数据,采用点评估法对婴幼儿配方乳粉中壬基酚进行膳食暴露评估.[结果]上海市售婴幼儿配方乳粉中壬基酚检出率为95.6%(86/90),壬基酚含量范围为未检出～22.70 μg·kg-1,含量均值为8.47 μg·kg-1,P50为7.77 μg·kg-1.上海市0～6月龄、7～12月龄以及13～36月龄的婴幼儿每日通过配方乳粉摄入壬基酚的平均暴露量(按体质量计)分别为0.091、0.068和0.054 μg·kg-1,P95每日暴露量(按体质量计)分别为0.228、0.152和0.119 μg·kg-1,均远低于壬基酚每日耐受摄入量(按体质量计5 μg·kg-1).[结论]上海市0～36月龄婴幼儿每日通过婴幼儿配方乳粉摄入壬基酚造成的健康风险较低.

目的:探究孕期壬基酚(NP)暴露对大鼠子代生长发育和神经行为的影响.方法:采用NP对妊娠SD大鼠进行全孕期染毒,设置阴性对照组(玉米油)、NP低剂量组(50mg/kg)、NP中剂量组(100mg/kg)、NP高剂量组(200mg/kg)和阳性对照组(己烯雌酚,Des,30 μg/kg).观察子鼠生长发育情况.用旷场实验检测子鼠自主活动与焦虑行为,强迫游泳实验检测子鼠抑郁情况,Morris水迷宫实验检测子鼠学习记忆能力.结果:与阴性对照组相比,NP中剂量组和阳性对照组子鼠出生后第0天(PND 0)体重降低,NP高剂量组和阳性对照组子鼠出生后第23天(PND 23)体重和甲状腺重量降低,NP中剂量组肝脏系数降低,NP中、高剂量组和阳性对照组睾丸重量降低(均P＜0.05).旷场实验中,与阴性对照组相比,NP中、高剂量组和阳性对照组总移动距离显著减小,NP高剂量组、阳性对照组中央区停留时间显著缩短,NP低剂量组、阳性对照组中央区距离占比显著降低,NP中、高剂量组和阳性对照组总移动格数减少(P＜0.05).抑郁样行为检测结果显示,与阴性对照组相比,NP低剂量组在第4天逃避潜伏期显著延长,平均游泳距离延长;NP中剂量组在第5天逃避潜伏期延长,平均游泳距离延长(均P＜0.05);Morris水迷宫结果显示,NP低剂量组、阳性对照组第3象限时间百分比低于阴性对照组,NP中剂量组平均速度小于阴性对照组(均P＜0.05).结论:NP孕期暴露可使子代生长发育迟缓,产生抑郁、焦虑、学习记忆能力下降等神经行为损害,导致生长发育和神经发育近、远期不良影响.

目的 壬基酚(nolyphenol,NP)是环境雌激素典型代表,其发挥的拟雌激素作用与人类多种癌症的发生关系密切.本研究通过观察NP灌胃暴露对雄性大鼠体内血清E2及盲肠黏膜ERβ表达的影响,初步探讨NP与大肠黏膜恶变可能存在的关系.方法 60只SD雄性大鼠随机分为5组:即空白对照组(玉米油);阳性对照组[E2,30 mg/(kg·d)]NP低、中、高剂量组[NP灌胃浓度分别为50、100、200 mg/(kg·d)].连续灌胃NP 60 d后,腹主动脉取血及采集盲肠黏膜组织.直接化学发光法检测大鼠血清中E2水平;荧光定量PCR检测盲肠黏膜组织中ERβ mRNA相对表达量;免疫组化检测黏膜组织中ERβ蛋白的表达水平.结果 与空白对照组(23.25±3.44) ρmol/L比较,NP低(28.08±4.89) ρmol/L、中(36.53±2.73) ρmol/L、高剂量组(47.18±3.04) ρmol/L血清E2浓度均升高,且随NP灌胃剂量增大,E2水平升高越明显,P＜0.05;NP低、中、高剂量组ERβ mRNA相对表达量分别为(1.23±0.06)、(1.08±0.19)和(1.04±0.11),较空白对照组(1.37±0.01)、阳性对照组(1.80±0.02)比较均下调,且随NP灌胃剂量增加ERβ mRNA表达下调更明显,P＜0.05;NP低、中、高剂量组盲肠黏膜中ERβ蛋白表达的光密度值分别为(1 669.7±144.0)、(1 740.0±53.5)和(1 647.7±140.2),较阳性对照组(2 080.0±188.8)表达降低,且随NP灌胃剂量升高而下降越明显,P＜0.05.结论 NP可减低大鼠血清中原有E2水平,但是由于NP具有拟雌激素活性,可能通过竞争抑制作用使大鼠血清E2水平表现为增高,而ERβ的基因和蛋白在肠黏膜表达则下调,由于E2及ERβ对大肠黏膜具有保护作用,说明NP使E2及ERβ对肠黏膜保护作用降低,从而可能增加结肠黏膜恶变的风险.

为探讨壬基酚(NP)对雌性小鼠卵巢的氧化损伤效应,将40只健康SPF级雌性昆明小鼠随机分为4组,分别为对照(玉米油)组和25、50、100 mg/kg NP染毒组,每组10只.采用灌胃方式进行染毒,染毒容量为0.01 ml/g,每天1次,每周连续染毒5d,连续染毒8周.测定小鼠卵巢总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,并观察卵巢内总卵泡数、初级卵泡数及成熟卵泡数.结果显示,与对照组比较,50、100 mg/kg NP染毒组小鼠卵巢T-AOC活力及100 mg/kg NP染毒组小鼠卵巢SOD的活力和GSH的含量均显著降低;而各剂量NP染毒组小鼠卵巢MDA的含量均较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着NP染毒剂量的升高,小鼠卵巢SOD的活力和GSH的含量均呈下降趋势,而MDA含量呈上升趋势,T-AOC呈先上升后下降趋势.与对照组比较,50、100 mg/kg NP染毒组小鼠卵巢内总卵泡数及25 mg/kg NP染毒组小鼠卵巢内初级卵泡数均较高,而100 mg/kg NP染毒组小鼠卵巢内成熟卵泡较低,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着NP染毒剂量的升高,小鼠卵巢内的总卵泡数呈上升趋势,而初级卵泡数和成熟卵泡数均呈先上升后下降的趋势.提示NP可导致小鼠卵巢组织发生明显的氧化损伤.

为探讨壬基酚(NP)对小鼠子宫的氧化损伤效应,将32只健康SPF级雌性昆明小鼠按体重随机分为4组,分别为对照(玉米油)组和25、50、100 mg/kg NP染毒组,每组8只.采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,每周连续染毒5d,共染毒8周.测定子宫总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量.结果显示,与对照组比较,50、100 mg/kg NP染毒组小鼠子宫的T-AOC、SOD活力均降低,而MDA含量均升高(均P＜0.05);而25 mg/kg NP染毒组小鼠子宫的T-AOC、SOD活力和MDA含量均无明显变化.且随着NP染毒剂量的升高,小鼠子宫的T-AOC、SOD活力均呈下降趋势,而MDA含量呈上升趋势.提示NP染毒可致小鼠子宫发生氧化损伤.

目的 探讨围产期暴露壬基酚对子代大鼠脂肪组织的形成以及对大鼠脂肪组织中ERα表达的影响.方法 雌性大鼠从妊娠期(GD)第6d至分娩后21d分别给予壬基酚(5、25、125 μg/kg),另设一对照组,每天灌胃1次.子代出生后(PND)21 d时,处死部分幼鼠,收集血清;剩余部分幼鼠按性别分笼喂养,给予普通饲料至实验结束.23周后,断头处死,收集血液,并迅速取出肾周和性腺周围脂肪组织.结果 与对照组[雄性(384±43)g、雌性(231±8)g]比较,5、25、125 μg/kg壬基酚组子代大鼠体重[雄性分别为(453±51)、(475±57)、(509±29)g,雌性分别为(260±13)、(260±12)、(284±3)g]均升高(均P＜ 0.05);与对照组比较,各计量壬基酚组子代大鼠血清中瘦素的水平均升高(均P＜ 0.05);与对照组[雄性(6 307±312),μ,m2、雌性(5 915±287)μm2]比较,5、25、125 μg/kg壬基酚组子代大鼠脂肪细胞面积[雄性分别为(10 142±9 209)、(17 465±9 830)、(33 854±2 620)μm2,雌性分别为(10 100±9 095)、(15 134土965)、(31 280±4 654)μm2]均增加(均P＜0.05);与对照组比较,各剂量任基酚组子代大鼠脂肪分化和增殖基因表达均增加,子代大鼠脂肪组织中ERα基因和蛋白表达水平均降低(均P＜0.05).结论 围产期暴露壬基酚可以导致子代大鼠肥胖,脂肪组织中ERα基因和蛋白表达的降低可能是壬基酚的作用机制之一.