目的:评估自固定自脱型胰肠吻合引流支架应用于胰肠吻合术的安全性和有效性。方法:本研究为动物实验研究。基于胰肠吻合“瘘管愈合”学说创建的洪氏胰肠吻合技术研制自固定自脱型胰肠吻合引流支架，动物实验前已完成10项生物相容性体外试验。实验于2022年2—9月完成。取25只普通级巴马小型猪，采用丝线双重结扎胰腺颈部，使结扎远端主胰管扩张建模。将建模成功的23只巴马小型猪采用分层随机法分为三组，即支架组（11只）、手工缝合组（8只）、假手术组（4只）。比较支架组和手工缝合组的胰肠吻合时间、术后腹腔引流液淀粉酶浓度及胰肠吻合口承受的压力值。通过腹部X线片观察自固定自脱型胰肠吻合引流支架脱落时间。通过术后病理学检查观察胰肠吻合口愈合时间、愈合方式和狭窄率。采用独立样本 t检验分析定量资料；采用Fisher确切概率法分析分类资料。 结果:支架组和手工缝合组的胰管直径和胰腺质地、胰肠吻合时间、术后腹腔引流液淀粉酶浓度和胰肠吻合口承受压力值的差异均无统计学意义（ P值均>0.05）。腹部X线检查结果显示，引流支架组术后21 d胰肠吻合引流支架逐渐脱落排除体外，术后3个月后支架均脱落。大体和镜下病理学检查结果显示，支架组术后7 d吻合口愈合；手工缝合组术后14 d吻合口愈合。支架组和手工缝合组术后35 d内的吻合口狭窄率分别为2/8和6/8（Fisher确切概率法： P=0.132）。 结论:自固定自脱型胰肠吻合引流支架可安全有效地用于巴马小型猪的胰肠吻合术中，与手工缝合法胰肠吻合技术相比，吻合口愈合时间可能更早，狭窄率可能更低。

目的:观察静脉淤血皮瓣的微循环功能变化。方法:2019年5月至6月，取8周龄无特定病原体(SPF)级Wistar大鼠12只(中国医学科学院整形外科医院动物实验中心提供)，采用简单随机化分组方法分为对照组和模型组，每组6只。对照组构建以腹壁浅血管为蒂的轴形皮瓣，模型组构建同样的轴形皮瓣并结扎腹壁浅静脉。应用moorFLPI-2激光散斑血流成像系统检测皮瓣微循环血流灌注量，moorVMS-LDF2激光多普勒血流监测系统检测皮瓣细胞聚集度和血流速度并计算微血管自律运动。应用 t检验比较两组间各指标的差异。 结果:对照组皮瓣术后72 h的皮瓣血流灌注量、细胞聚集度及血流速度分别为100.4、174.2、31.2 PU，模型组则分别为10.5、81.5、13.5 PU，两组之间各指标的差异均有统计学意义( t血流灌注量＝26.214， t细胞聚集度＝20.923， t血流速度＝10.492， P<0.05)。对照组术后72 h微血管自律运动的频率和振幅分别为163 Hz，35.2 PU。模型组大鼠血流灌注水平失去正常节律，术后72 h微血管自律运动的频率及振幅分别为28 Hz，4.5 PU，显著低于对照组( t频率＝29.382， t振幅＝33.816， P<0.05)，差异有统计学意义。 结论:皮瓣静脉淤血导致微循环血流灌注、细胞聚集度和血流速度显著降低，微血管自律运动受损可能是皮瓣淤血的关键环节。

目的:利用小型猪房间隔缺损模型探讨新型国产房间隔外科生物补片的安全性和有效性。方法:2018年6月至2019年4月，26只健康中华小型猪随机分为实验组（15只）和对照组（11只），通过传统外科方法建立房间隔缺损动物模型，实验组和对照组分别采用待评价的和已上市的内径10 mm 圆形生物补片修补房间隔缺损。记录两组术前和术后7、30、90、180 d的超声心动图和血液学检查结果；于术后90和180 d处死抵达实验终点的动物，对心脏及主要器官进行大体和组织病理学检查。重复测量资料采用重复测量方差分析，组间数据比较采用独立样本 t检验或秩和检验。 结果:共23只动物到达实验终点，术后90 d时实验组6只，对照组4只，术后180 d时实验组8只，对照组5只。其余3只动物（实验组1只，对照组2只）分别因手术导致房室结损伤引发心律失常、全心功能不全、右心功能不全死亡，病理学检查结果显示死因与实验材料无关。超声心动图显示，所有动物未发生补片漏，术后7、30、90、180 d两组超声心动图和血液学检查结果的差异无统计学意义（ P值均>0.05）。病理学检查结果显示，所有动物无补片漏，补片生物相容性良好；实验组术后90和180 d时内皮化率与对照组相比差异无统计学意义［（80.8±29.1）%比（82.5±23.6）%， t=0.095， P=0.927；（78.8±36.4）%比（82.0±19.2）%， t=0.182， P=0.859］，补片钙化评分组间差异无统计学意义［1.00（1.25）比2.00（0.75）， Z=6.500， P=0.214；0（0.75）比1.00（2.00）， Z=12.000， P=0.139］。 结论:新型国产房间隔外科生物补片在小型猪房间隔缺损动物模型中具有与已上市生物补片相似的安全性和有效性。

组织工程和再生医学的发展为器官移植提供了新的解决方案。皮肤首先通过组织工程实现组织重建，应用于烧伤、手术瘢痕和整形外科治疗。自2013年欧盟禁止化妆品动物实验后，体外重建皮肤模型也更多应用于化妆品和药物研究中活性成分的功效及毒理评价。

本刊主要刊登与临床神经病学有关的临床与基础研究,如生化、解剖、病理、心理、电生理、免疫、神经影像、流行病、药理、动物实验、分子生物学,WHO及国外医学信息等内容.设有论著、论著报道、进展、讲座、实验方法、疾病的新认识和新治疗、教育·思考·分析等栏目,内容新颖、编排规范,栏目众多,信息面广.内容中神经科学研究和神经临床研究并重.主要读者对象为神经内、外科临床医生,医学院校、科研院所从事神经基础学科的教学和科研人员、研究生和高年级学生.

目的:探讨情景案例式教学在外科动物实验课中的应用效果。方法:以内蒙古医科大学2016级临床医学专业教改班五年制学生为研究对象。教改一班为对照组，教改二班为试验组，每组36名学生。对照组采用传统教学，试验组引入情景案例式教学。课程中期进行考核，包括理论考核和外科技能操作考核；另对两组学生进行课程满意度问卷调查。应用SPSS 22.0进行 t检验和卡方检验。 结果:试验组理论成绩（72.44±7.91）高于对照组（60.49±8.23），外科技能操作成绩（77.69±7.13）高于对照组（60.58±8.91）；试验组课程满意度高于对照组。结论:引入情景案例式教学能明显改善外科动物实验课堂教学效果，有利于医学生对外科基本技能及相关临床医学总论理论知识的掌握。

目的:探讨低剂量光动力对人脂肪间充质干细胞（ADSC）的增殖、调节及分泌功能的作用及其相关机制，以期为慢性创面的修复探索新方法。方法:采用实验研究方法。取2021年2—4月于陆军军医大学（第三军医大学）第一附属医院皮肤科行皮肤外科手术的10例患者（5例男性、5例女性，23~47岁）捐献的术后废弃脂肪组织，提取细胞并鉴定表型。取3批ADSC，各批细胞均分为仅行常规培养的正常对照组，行海姆泊芬处理后常规培养的单纯光敏剂组，行红光照射处理后常规培养的单纯光照组，行海姆泊芬和红光照射处理后再常规培养的光敏剂+光照组，样本数均为3。第1和2批细胞于处理完成后培养24 h，分别采用脱氧尿嘧啶核苷染色法检测ADSC增殖水平，Transwell实验检测与ADSC共培养的HaCaT细胞迁移比例；第3批细胞于处理完成后培养7 d，采用免疫荧光法检测ADSC的细胞外基质蛋白表达。取ADSC分为光动力后0 min组、光动力后15 min组、光动力后30 min组、光动力后60 min组，每组3孔，分别于行光动力处理后相应时间点采用蛋白质印迹法检测并计算磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、磷酸化p70核糖体蛋白S6激酶（p-p70 S6K）/p70核糖体蛋白S6激酶（p70 S6K）比值。取2批ADSC，各批细胞均分为正常对照组、单纯光动力组及光动力+雷帕霉素组，每组3孔，并行相应处理。第1批细胞于处理完成后培养15 min，同前检测并计算p-mTOR/mTOR、p-p70 S6K/p70 S6K比值；第2批细胞于处理完成后培养7 d，同前检测细胞外基质蛋白表达。对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果:培养12 d后，细胞鉴定为ADSC。处理完成后培养24 h，单纯光敏剂组和单纯光照组ADSC增殖水平［分别为（4.0±1.0）%、（4.1±0.4）%］和HaCaT细胞迁移比例（分别为1.17±0.14、1.13±0.12）均与正常对照组［分别为（3.7±0.6）%、1.00±0.16］相近（ P>0.05），且均明显低于光敏剂+光照组［分别为（34.2±7.0）%、2.55±0.13， P<0.01］。处理完成后培养7 d，与正常对照组相比，单纯光敏剂组ADSC的Ⅲ型胶原表达增加（ P<0.05），单纯光照组ADSC的Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原表达均明显增加（ P<0.01）；与单纯光敏剂组和单纯光照组相比，光敏剂+光照组ADSC的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原与纤维连接蛋白表达均明显增加（ P<0.01）。与光动力后0 min组相比，光动力后15 min组ADSC的p-mTOR/mTOR与p-p70 S6K/p70 S6K比值均明显增加（ P<0.01），光动力后30 min组、光动力后60 min组ADSC的p-p70 S6K/p70 S6K比值均明显增加（ P<0.01）。处理完成后培养15 min，与正常对照组相比，单纯光动力组ADSC的p-mTOR/mTOR与p-p70 S6K/p70 S6K比值均明显增加（ P<0.05或 P<0.01）；与单纯光动力组相比，光动力+雷帕霉素组ADSC的p-mTOR/mTOR与p-p70 S6K/p70 S6K比值均明显减少（ P<0.05）。处理完成后培养7 d，与正常对照组相比，单纯光动力组ADSC的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原与纤维连接蛋白表达均明显增加（ P<0.01）；与单纯光动力组相比，光动力+雷帕霉素组ADSC的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原与纤维连接蛋白表达均明显减少（ P<0.01）。 结论:低剂量光动力可以促进ADSC的增殖、提高ADSC调节HaCaT细胞迁移的能力，并通过快速激活mTOR信号通路增强细胞外基质蛋白的分泌。

目的:探索膀胱平滑肌细胞在外力牵拉作用下功能改变过程中关键基因和通路的作用。方法:运用生物信息学的方法，包括不同表达分析(DEA)、基因本体(GO)/京都基因与基因组百科全书(KEGG)、激酶和转录因子富集分析、基因富集分析(GSEA)、蛋白互作网络(PPI)等，对编号为GSE1595的基因芯片进行分析筛选出相应的关键基因，随后通过构建小鼠膀胱出口梗阻(BOO)及膀胱出口梗阻解除模型和膀胱平滑肌细胞牵拉实验，通过抽签法将小鼠分为对照组，牵拉组和牵拉+释放组，每组8只C57小鼠，提取相应RNA后进行反转录，随后进一步进行运用独立样本 t检验及曼-惠特尼 U检验进行分析验证。 结果:通过DEA分析共筛选出321个目的基因，其中有180个上调基因和141个下调基因，GO分析显示上调基因主要富集在蛋白去甲基化，调控其他基因表达和代谢过程，而下调基因主要富集在多细胞生物发育、细胞分化和Notch信号通路等。并最终筛选出乳腺癌易感基因1(BRCA1)，周期蛋白依赖激酶抑制因子1B(CDKN1B)，拟南芥驱动蛋白2B基因(KAT2B)，前列腺素内过氧化物酶2(PTGS2)，S期激酶相关蛋白1(SKP1)这五个关键基因。并且发现在细胞实验中发现与对照组比较，牵拉膀胱细胞组BRCA1，KAT2B，PTGS2以及SKP1表达高于对照组(BRCA1为1.336比1.000， t＝4.221， P<0.05；PTGS2为1.338比1.000, t＝4.222， P<0.05)；KAT2B为1.581比1.000， t＝2.863， P<0.05；SKP1为1.466比1.000， t＝4.300， P<0.05)，差异均有统计学意义。在小鼠动物模型中，通过进行外科手术操作，成功造模膀胱梗阻模型，使小鼠膀胱持续充盈牵拉，并随后解除梗阻。进一步检验发现，牵拉组BRCA1，KAT2B以及PTGS2表达高于对照组(BRCA1为1.332比1.000， t＝9.421， P<0.05；KAT2B为1.363比1.000， t＝2.478， P<0.05；PTGS2为2.211比1.000， t＝3.403， P<0.05)，差异均有统计学意义，牵拉组CDKN1B和SKP1表达低于对照组(CDKN1B为0.856比1.000， t＝2.451， P<0.05；SKP1为0.669比1.000， t＝6.814， P<0.05)，差异均有统计学意义。而解除梗阻后，解除梗阻组BRCA1，CDKN1，BKAT2B以及PTGS2表达低于牵拉组(BRCA1为0.625比1.332, t＝11.710， P<0.05；CDKN1B为0.598比0.856, t＝3.397， P<0.05；KAT2B为0.928比1.363, t＝2.943， P<0.05；PTGS2为0.511比2.211， t＝4.735， P<0.05)，差异均有统计学意义。 结论:外力牵拉会导致膀胱平滑肌细胞出现相应的基因改变，另发现一系列可能参与BOO过程的目的基因。

目的:探索使用新型冻存剂进行人源脂肪组织冻存及移植的有效性。方法:标本来源于2022年1至3月在北京大学第三医院成形外科进行吸脂术的健康成年女性，将获得的脂肪组织离心后随机分为9组，分别采用不同的冻存液[A组、B组、二甲基亚砜(DMSO)组]及冻存时长(1、2、3个月组)于液氮中冻存。A组冻存液组分为右旋糖苷40(DEX)＋氨基酸＋维生素＋无机盐，B组冻存液组分为DMSO＋DEX，DMSO组采用传统冻存液，组分及配比为10% DMSO＋20%胎牛血清(FBS)＋70% DMEM-12。采用5 ml冻存管，脂肪∶冻存液＝3∶2，每组冻存6管。脂肪组织复温后，采用HE染色观察组织学形态，采用免疫组化染色进行脂滴包被蛋白(Perilipin)定量分析，通过阳性细胞数量与总细胞数量的比值计算Perilipin阳性率；采用CCK-8法测定脂肪细胞活性。选择健康无特定病原体级裸鼠38只，根据移植脂肪使用不同的冻存保护剂(A组、B组、DMSO组)分为3组，每组各12只，另外2只作为day 0对照组，各组脂肪冻存时间均为3个月。裸鼠腹腔麻醉后，每侧背部注射复温后的冻存脂肪各0.9 ml，分别于移植后1、2、3个月通过MRI扫描及三维软件计算脂肪组织存留率并进行组间比较；小鼠处死后取移植的脂肪组织，采用HE染色和免疫组化染色进行组织形态学观察及Perilipin定量分析。采用GraphPad Prism 8.0软件对数据进行统计学分析，符合正态分布的计量资料以 ± s表示，整体多组间比较采用重复测量资料的方差分析，同一时间点组间数据比较采用Tukey多重检验。 结果:在液氮中冻存1～3个月后不同冻存液组的脂肪组织形态接近正常新鲜脂肪组织，各组Perilipin阳性率差异无统计学意义( P>0.05)；CCK-8法提示冻存1个月和3个月时DMSO组脂肪细胞活性优于A组和B组( P<0.01)，冻存2个月时DMSO组和B组脂肪细胞活性优于A组( P<0.01)。动物实验中冻存脂肪移植后1～3个月体积存留率各组之间差异无统计学意义( P>0.05)，移植1～3个月后各组脂肪组织出现不同程度局部坏死伴炎症反应，Perilipin阳性率各组之间差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:使用新型冻存液冻存脂肪组织的效果与传统冻存液相比未见显著差异，且避免了使用DMSO或FBS作为冻存剂对人体潜在的不良作用，理论上更加安全。

目的:明确年龄因素对人脂肪来源干细胞(ASCs)生物学特性的影响，比较不同年龄人ASCs辅助脂肪移植于裸鼠皮下的效果。方法:收集2018年10月至2019年12月就诊于中国医学科学院整形外科医院乳房整形美容中心，行腹部脂肪抽吸术的60例健康女性的剩余脂肪组织，年龄18～65岁。按供体年龄分为3组，每组20例，A组18～29岁，B组30～49岁，C组50～65岁。各年龄组的脂肪采用胶原酶分离获得血管基质成分(SVF)，应用Muse细胞分析仪检测各组脂肪中SVF的产量和活力；体外培养获得第2代ASCs，采用流式细胞仪检测各年龄组ASCs干细胞表面标志物表达水平；通过CCK-8法检测各年龄组ASCs的增殖能力，细胞划痕法检测各组细胞的迁移能力，体外成脂诱导分析各年龄组ASCs成脂分化潜能，通过RT-PCR检测成脂关键基因 PPAR-γ和 CEBP-α的表达水平。建立体内细胞辅助脂肪移植动物模型：应用随机数字表法将40只6周龄雌性BALB/c裸鼠随机分为4组，每组10只，包括3个实验组和1个空白对照组。实验组：分别将3个不同年龄组的1×10 6个ASCs和0.3 ml的脂肪颗粒混合后，注射于裸鼠背部脊柱两侧皮下；空白对照组：注射10 μl PBS与脂肪颗粒混合物。移植后3个月取材，比较各组脂肪移植物的重量和体积，HE染色评估脂肪细胞的完整性和坏死组织所占比例，通过围脂滴蛋白(perilipin)免疫荧光染色分析移植物内脂肪细胞的存活情况，通过CD31免疫组织化学染色评价脂肪移植后新生血管密度。使用SPSS 21.0软件进行数据分析，多组间样本比较应用one-way ANOVA， P<0.05为差异有统计学意义。 结果:Muse细胞分析仪结果显示，A、B、C 3组SVF计数分别为(7.06±1.28)×10 5/ml、(6.90±0.32)×10 5/ml、(6.40±0.62)×10 5/ml，活力分别为82.46%±2.81%、82.01%±3.85%、77.82%±3.45%，各年龄组SVF的含量未见差异，SVF细胞活力随年龄增长呈下降趋势，组间比较差异有统计学意义( F＝5.671， P＝0.008)。各组ASCs的间充质干细胞阳性表面标志物CD90、CD44、CD105、CD73表达均在95%以上，阴性表面标志物表达均在2%以下。ASCs细胞增殖能力和迁移能力随年龄增长，逐渐减缓。体外成脂分化诱导结果：油红O染色显示A、B、C 3组的吸光度值无差异，并且成脂相关基因 PPARγ和 CEBPα表达水平无明显差异。ASCs辅助脂肪移植于裸鼠皮下后3个月，A、B、C 3组移植物重量分别为(0.18±0.02) g、(0.17±0.02) g、(0.15±0.01) g，均大于空白对照组的(0.13±0.03) g，差异有统计学意义( F＝9.274， P<0.001)。A、B、C 3组移植物剩余体积分别为(262.88±17.69) mm 3、(263.83±25.96) mm 3、(240.06±25.08) mm 3，均大于空白组的(201.81±31.48) mm 3，差异有统计学意义( F＝12.95， P<0.001)。不同年龄组间移植物重量和剩余体积分别相比较，差异有统计学意义( F＝5.231、 P＝0.012， F＝3.364、 P＝0.049)。HE染色结果显示，移植后3个月，与空白对照组相比，各年龄组ASCs辅助移植脂肪可见脂肪细胞分布均匀，纤维结缔组织及坏死组织较少，各组间脂肪细胞完整性和坏死组织比例比较，差异有统计学意义( F＝3.434、 P＝0.027， F＝9.314、 P<0.001)；不同年龄组间移植物内的脂肪细胞完整性和坏死组织占比差异无统计学意义( F＝0.282、 P＝0.756， F＝0.421、 P＝0.661)；免疫荧光染色结果显示，与空白对照组相比，不同年龄ASCs辅助脂肪移植组均可观察到较多的perilipin阳性脂肪细胞，分布均匀。CD31免疫组织化学染色结果显示：A组新生血管数为(15.70±4.16)个/mm 2，B组(17.03±8.30)个/mm 2，C组(16.68±6.71)个/mm 2，空白对照组(11.50±4.04)个/mm 2，组间比较差异有统计学意义( F＝3.523、 P＝0.019)。各年龄组新生血管密度相近，差异无统计学意义( F＝0.218、 P＝0.805)。 结论:人ASCs的增殖和迁移能力随年龄的增长出现下降趋势，但年龄因素不影响ASCs的成脂分化潜能。人不同年龄ASCs均有效地提高了裸鼠移植脂肪的存活率，年轻人群ASCs辅助脂肪移植的效果优于老年人群。