目的:对67个中原地区DMD家系的产前诊断结果进行分析，探讨DMD产前诊断的策略。方法:收集67例DMD产前诊断家系病例，综合应用多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA)、二代测序(next generation sequencing，NGS)和Sanger测序技术明确家系先证者和孕妇的基因诊断，并对胎儿进行产前诊断，产前诊断结果用短串联重复序列(short tandem repeat，STR)验证。结果:67个DMD家系中， DMD基因大片段缺失、重复、微小变异分别为73.13%(49/67)、10.45%(7/67)和16.42%(11/67)，其中缺失热点区域为第45~52外显子。11例微小变异中，4例变异未见报道过。67位先证者母亲中28位未携带 DMD基因变异，新发变异率为41.80%，其中27例为大片段缺失新发变异。37例携带者孕妇的产前诊断中，10例胎儿为男性患者，7例胎儿为女性携带者。 结论:在DMD的产前诊断中，除检测家系中已知致病变异外，还应排除胎儿 DMD基因大片段缺失可能。未携带 DMD基因变异的先证者母亲也应进行产前诊断以排除生殖腺嵌合体可能。

目的:报告1例由罕见变异导致的重型血友病A(hemophilia A，HA)，并探讨大片段重复变异的致病机制。方法:先后进行 F8基因第22内含子及第1内含子倒位检测、Sanger测序以及多重连接探针扩增(multiple ligation-dependent probe amplification，MLPA)检测。检索HA基因变异数据库并分析患者的临床特征。 结果:先证者FⅧ活性(FⅧ∶C)为0.3%，为重型HA，抑制物检测为阴性。倒位检测及Sanger测序均未发现变异，MLPA检测提示先证者存在Ex 1_22 dup(2 copies)半合变异；其母亲FⅧ∶C 60%，为携带者[Ex 1_22 dup (3 copies)]。HA基因变异数据库所收录的24例大片段重复变异均表现为重型HA，仅1例为抑制物阳性史。结论:大片段重复变异可导致重型HA。MLPA能够有效提高HA患者基因变异的检出率。

目的:探讨高通量测序技术对于除21、18、13等常见的染色体非整倍体异常外染色体拷贝数变异检测的临床意义。方法:选取自愿参与无创产前检测(non-invasive prenatal test，NIPT)的孕妇37 306例，对NIPT结果提示存在基因组拷贝数变异(copy number variation，CNV)并愿意接受产前诊断的52例孕妇进行羊水穿刺，进行羊水细胞染色体核型分析及染色体微阵列芯片分析(chromosomal microarray analysis ，CMA)，并对所有NIPT提示存在CNV的病例进行随访。结果:在37 306份NIPT样本中共检测到CNV 78例，阳性率为2.09‰。其中52例孕妇行进一步产前诊断，共检出与NIPT结果较一致的拷贝数变异15例，阳性率达28.85%。此外，对未进行诊断的26例孕妇进行了随访，其中自然流产2例，超声提示胎儿结构畸形后选择引产2例，新生儿多发畸形1例(CMA检测结果与NIPT较为一致)，异常率高达19.23%，明显高于正常活产儿的异常率。结论:NIPT提示胎儿拷贝数缺失或重复是胎儿染色体异常的高危指征，联合应用染色体核型分析及CMA技术，可以简便、特异地检出大片段染色体结构异常及CNVs，提高染色体疾病的检出率，为遗传咨询和生育指导提供依据。

目的:采用全基因组测序对南京"5.7" 192Ir源事故患者外周血及组织进行照后第2 047天(5年7个月零7天)基因变异分析，探讨其电离辐射引起的体细胞变异情况，为明确电离辐射引起的远后效应提供理论依据。 方法:收集南京"5.7" 192Ir源事故患者王某照后第2 047天的背部正常皮肤组织、受照射范围内的骨及软组织、外周血3种样本，分别提取DNA后采用全基因组测序技术对样本进行高通量测序，并通过生物信息学对原始测序数据进行分析。以背部正常皮肤组织为对照，开展受照射范围内的骨及软组织、外周血的基因变异检测分析。 结果:与背部正常皮肤组织相比，受照射范围内的骨及软组织和外周血的基因组出现了多种基因变异，包括碱基置换(碱基转换、碱基颠换)、小片段插入、小片段缺失、拷贝数变异(拷贝数增加、拷贝数减少)以及结构变异(大片段缺失、大片段重复、倒位、染色体内易位以及染色体间易位)，受照射范围内的骨及软组织出现10 666个基因变异，外周血出现11 233个基因变异，变异DNA涉及上万个基因。这些基因变异存在于外显子、内含子、3'UTR(3'untranslated region，3'端非编码区)、5'UTR(5'untranslated region，5'端非编码区)、剪切位点附近、转录起始位点上游5 kb区域以内、转录终止位点下游5 kb区域以内、非编码RNA以及基因间隔区域，且所有染色体都存在基因变异。结论:南京"5.7" 192Ir源放射事故患者照后第2 047天受照射范围内的骨及软组织和外周血中存在大量的基因变异，可能影响机体的功能及电离辐射诱发的远后效应。

目的:分析52例结节性硬化症患儿的临床表型及 TSC1/ TSC2基因变异情况。 方法:收集2017年1月至2022年10月就诊于临沂市人民医院的59例结节性硬化症患儿的临床资料，对其主要家系成员进行 TSC1及 TSC2基因检测，分析致病性，并将基因检测阳性患儿分为 TSC1基因变异组和 TSC2基因变异组，比较两组的临床特征差异性。 结果:59例患儿中有52例检出 TSC1或 TSC2基因变异（包括 TSC1基因变异17例， TSC2基因变异35例）。52例患儿中男性28例（53.8%），女性24例（46.2%）；家族性病例17例（32.7%，包括 TSC1基因变异10例， TCS2基因变异7例），散发病例35例（67.3%）；皮肤色素脱失斑46例（88.5%），面部血管纤维瘤13例（25.0%），鲨革斑5例（9.6%），室管膜下结节/钙化49例（94.2%），皮质结节47例（90.4.%），室管膜下巨细胞星型细胞瘤2例（3.8%），智力障碍/发育迟缓39例（75.0%），癫痫发作49例（94.2%），心脏横纹肌瘤8例（15.4%），肾血管平滑肌脂肪瘤9例（17.3%），视网膜错构瘤4例（7.7%）。基因检测共检出49种变异，4种为大片段缺失/重复变异，45种为点变异。其中致病性变异41种，可能致病性变异7种，意义未明确1种。共发现国内外尚未见报道的变异位点16种、重复大片段1种。3个高频变异位点为p.Arg692 *、p.Arg228 *和p.Arg1200Try。 TSC1基因变异组和 TSC2基因变异组患儿在阳性家族史占比［10/17比7/35（20%）， χ2=7.838， P=0.005］、癫痫起病月龄［38.0（0.5~134.0）个月比8.0（0.1~63.0）个月， Z=3.506 ，P<0.001］及智力障碍/发育迟缓发生率［8/17比31/35（88.6%）， χadj2=8.423， P=0.004］上差异具有统计学意义。 结论:TSC临床表型谱广泛，可累及全身各个系统，主要为皮肤及神经系统。致病基因为 TSC1/TSC2。TSC1基因变异患儿多有家族遗传， TSC2基因变异患儿癫痫起病年龄更早且智力障碍/发育迟缓发生率更高。本研究发现了未见报道的变异位点16种、重复大片段1种，热点变异3种，扩展了结节性硬化症的基因谱。

目的:鉴定先天性无痛无汗症（CIPA）家系的致病突变，为先证者家庭提供遗传咨询和产前基因诊断。方法:收集2017年12月至2021年7月中国医学科学院募集的CIPA先证者19例及其母亲再次妊娠时的胎儿20例。通过靶基因Panel测序和Sanger测序的方法鉴定先证者的致病突变，针对先证者致病突变，通过聚合酶链反应（PCR）和Sanger测序的方法对先证者父母及家系中的高风险胎儿进行基因型鉴定；基因型与先证者相同的胎儿为患儿。结果:19例CIPA先证者的基因型中，NTRK1双等位基因突变的复合杂合子14例，NTRK1基因突变的纯合子3例，母源单亲二体（UPD）2例。19例CIPA先证者中共检测出22种NTRK1基因变异，其中9种错义突变，1种无义突变，4种微缺失或微重复介导的移码突变，7种内含子变异导致的剪接异常，以及1种NTRK1基因的大片段缺失变异。19个CIPA家系的20例CIPA高风险胎儿中，检出正常基因型胎儿4例，致病突变携带者11例，NTRK1双等位基因突变复合杂合子患儿5例。2例先证者为母源NTRK1突变等位基因UPD的家系中，患儿的父母再次生育时，胎儿均为NTRK1基因突变携带者，未见母源UPD再次发生。结论:本研究为CIPA家系提供了精准的遗传咨询和产前基因诊断，为CIPA家系的健康生育提供了重要保障。

目的:探讨先天性泌尿系统畸形（congenital anomalies of the kidney and urinary tract，CAKUT）胎儿中拷贝数变异（copy number variation，CNV）的检出情况。方法:本研究为回顾性研究。研究对象为广东省妇幼保健院2016年1月至2020年7月产前超声发现胎儿泌尿系统畸形并行染色体微阵列分析（chromosome microarray analysis，CMA）病例1 929例。根据产前超声表现，将这些病例分为孤立性CAKUT组（1 567例）、CAKUT合并软指标异常组（269例）和CAKUT合并其他系统畸形组（93例）。分析致病性CNV的检出情况。采用 χ2检验（或Fisher精确概率法）比较3组CNV检出率的差异。 结果:（1）研究对象的CNV总检出率为6.5%（125/1 929），其中致病性CNV的检出率为4.8%（93/1 929）。CAKUT合并其他系统畸形组CNV总检出率、有临床意义的CNV检出率和大片段染色体结构变异的检出率［31.2%（29/93）、18.3%（17/93）和9.7%（9/93）］分别高于CAKUT合并软指标异常组［11.5%（31/269）、9.0%（24/269）和2.2%（6/269）］和孤立性CAKUT组［4.2%（65/1 567）、3.6%（56/1 567）和0.3%（4/1 567）， χ2=119.002、49.677和42.727， P值均<0.001］。CAKUT合并其他系统畸形组致病性CNV检出率（18.3%，17/93）高于CAKUT合并软指标异常组（8.6%，23/269）和孤立性CAKUT组（3.4%，53/1 567）（ χ2=51.932， P<0.001）。（2）93例致病性CNV中，胎儿肾脏回声增强的致病性CNV检出率最高（14.7%，23/156），其后依次为肾脏增大（8.2%，5/61）、肾发育不良（5.0%，13/261）、多囊性肾发育不良（5.0%，13/261）和肾积水（4.8%，20/413）等。CAKUT合并其他系统畸形组多囊性肾发育不良、肾缺如、融合肾和肾积水的致病性CNV检出率高于孤立性CAKUT组［分别为3/9与3.5%（8/230）、2/17与1.3%（3/237）、1/8与0.0%（0/59）和3/18与3.4%（12/344）， P值均<0.017］，肾脏回声增强的致病性CNV检出率高于CAKUT合并软指标异常组［4/8与12.8%（5/39）， P<0.017］。（3）93例致病性CNV中，微缺失/微重复综合征前3位依次为17q12微缺失综合征（36.6%，34/93）、22q11.2微缺失综合征（23.7%，22/93）和16p11.2微缺失综合征（7.5%，7/93）。 结论:孤立性CAKUT、CAKUT合并软指标异常及CAKUT合并其他系统畸形的胎儿发生CNV的风险依次升高。对于产前超声提示胎儿肾积水、肾脏回声增强、肾脏增大、肾发育不良或多囊性肾发育不良者，建议选择CMA进行检测，以提高CNV的检出率。

目的:探讨43个苯丙酮尿症(PKU)家系苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase， PAH)基因的变异特点及其产前诊断方法。 方法:选择2019年至2021年郑州大学第一附属医院确诊的43个PKU家系作为研究对象，通过高通量测序对其先证者进行 PAH基因的变异筛查，并用Sanger测序法对候选变异进行家系验证。对未明确变异的先证者用多重连接探针扩增(MLPA)技术检测 PAH基因的大片段缺失或重复。对风险妊娠联合使用Sanger测序、MLPA和多态性连锁分析进行产前诊断。 结果:43例先证者的86个等位基因经检测共发现了78个变异和3个大片段缺失，检出率分别为90.70%和3.49%。共检出21种错义变异、5种剪接变异、4种无义变异、2种微小缺失、1种插入和2种大片段缺失。常见的变异包括p.Arg243Gln(23.26%)、p.Arg111Ter(8.14%)、EX6-96A>G(6.98%)、p.Val399Val(5.81%)和p.Arg413Pro(4.65%)。变异热点包括第7、11、3、6和12外显子。产前诊断在43个家系中共确诊PKU受累胎儿9例(20.45%)、杂合变异携带者20例(45.45%)、未携带相同变异者15例(34.09%)。胎儿出生后随访至6个月，产前诊断的准确率为100%。结论:联合高通量测序、Sanger测序、MLPA和多态性连锁性分析可以提高PKU患者的诊断率，并准确进行产前诊断。

目的:探索拷贝数变异测序(copy number variation sequencing，CNV-seq)和核型分析在平衡易位携带者产前诊断中的应用价值。方法:收集2018年5月至2019年12月在郑州大学第一附属医院同时行CNV-seq检测和核型分析的135例平衡易位携带者单胎羊水样本的病案资料，对两组数据进行对比分析。仅将明确导致出生缺陷的结果定为异常，包括染色体数目异常、大片段缺失/重复、致病性拷贝数变异(pathogenic copy number variations，pCNVs)。结果:核型分析的异常检出率为4.44%(6/135)。CNV-seq的异常检出率为5.93%(8/135)，较核型分析高1.48%(2/135)。核型分析平衡易位检出率为50.37%(68/135)。结论:对于平衡易位携带者，建议行羊膜腔穿刺取样后同时进行CNV-seq和核型分析检测，有利于胎儿染色体异常的全面检出及出生后的生育咨询。

目的:对2005年至2019年15年来中国单中心的2042个无亲缘关系的杜氏/贝氏肌营养不良(Duchenne/Becker muscular dystrophy, DMD/BMD)家系进行 DMD基因突变回顾性分析，探讨 DMD基因突变在中国汉族人群中的结构特点及相应的期望治疗方案。 方法:收集2005年1月至2019年8月于本中心就诊的2042个无亲缘关系的DMD/BMD家系，联合应用多重连接探针扩增、二代测序、Sanger测序技术进行 DMD基因突变的检测分析。 结果:2042个中国汉族DMD/BMD家系中，1986个家系检出突变，56个家系未检出变异，检出率为97.26%(1986/2042)。DMD和BMD分别占78.60%和21.40%，其中包括33名女性先证者。大片段缺失、重复和小突变分别占71.85%，8.76%和19.39%。其中，最常见的外显子缺失和重复类型分别是第45～50外显子缺失和第2外显子重复，在小突变中未发现热点。调查了1595个家庭的DMD家族史，遗传率为58.62%(935/1595)，新发突变率为41.38%(660/1595)。在本研究中，可以通过已有的基因治疗方法缓解症状的患者比例为34.28%(700/2042)。结论:本研究为单中心大样本量的DMD家系突变研究，为97.26%的DMD患者提供了明确分子诊断，为患者家庭的再次生育提供了有效的遗传咨询或产前诊断，丰富了 DMD基因的突变谱，为研究 DMD基因突变机制及探索DMD的治疗奠定了基础。