目的:探讨p16和人乳头瘤病毒（HPV）分型联合检测在子宫颈上皮内瘤变（CIN）诊断中的应用价值。方法:选择2019年2月至2020年2月于陕西省宝鸡市中心医院就诊的患者8 346例，年龄25~65岁；其中经阴道镜活组织病理检查确诊存在子宫颈病变共2 882例。按照年龄段分组，分析各年龄段HPV感染情况；以活组织病理检查为金标准，按照病理分级结果，分析p16、HPV分型的检出率及其单项或联合检测对CIN的诊断效能。结果:p16和HPV阳性率最高的年龄段均为31~40岁[分别为47.42%（1 014/2 427）和36.84%（894/2 427）]，其次为41~50岁[分别为30.15%（907/2 942）和28.11%（827/2 942）]，各年龄段间p16和HPV阳性率差异均有统计学意义（均 P<0.05）。病理检查存在子宫颈病变的2 882例患者中，p16阳性2 572例（89.24%），HPV阳性2 169例（75.26%），随着病变进展，p16和HPV阳性率逐渐增高，其中炎症、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、子宫颈鳞状细胞癌（SCC）p16阳性率分别为11.68%（23/197）、94.85%（1 105/1 165）、93.57%（771/824）、96.76%（538/556）、96.43%（135/140）；HPV阳性率分别为17.77%（35/197）、77.60%（904/1 165）、80.22%（661/824）、80.40%（447/556）、87.14%（122/140），且随着CIN病程进展，HPV感染逐渐以16/18型为主。HPV诊断CIN的灵敏度为75.26%，特异度为81.13%，阳性预测值为67.78%，阴性预测值为86.14%；p16诊断CIN的灵敏度为89.24%，特异度为84.74%，阳性预测值为75.51%，阴性预测值为93.72%；p16诊断效能高于HPV，差异有统计学意义（ P<0.05）；二者联合诊断CIN的灵敏度为94.10%，特异度为91.33%，阳性预测值为85.12%，阴性预测值为96.71%，均高于单项检测，差异均具有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:HPV感染的发生以31~40岁女性为主，41~50岁次之，发病有年轻化的趋势。p16诊断CIN效能、优于HPV；p16和HPV联合检测可提高CIN诊断的灵敏度和特异度，降低漏诊率，对CIN的早期诊断和治疗有重要的临床价值。

目的:评价核酸分型定量法HPV检测（BMRT-HPV）用于子宫颈癌筛查的临床价值。方法:采用巢式抽样法，在2016年9月—2018年1月中国子宫颈癌筛查多中心研究（CHIMUST）项目5个筛查点的8 856例妇女中，选取其中医生取样或自取样标本中任一检测方法HPV阳性或HPV阴性但细胞学结果≥低级别鳞状上皮内病变（LSIL）者共1 495例行BMRT-HPV检测，同时按照1∶2比例抽取年龄和参加筛查时间相匹配的HPV与细胞学结果均为阴性的2 990例为对照。CHIMUST项目中对任一HPV阳性妇女回叫行阴道镜下子宫颈病灶四象限定点活检+随机活检+子宫颈管搔刮术方案子宫颈活检，以医生取样标本的基于实时PCR技术的Cobas 4800 HPV检测（Cobas-HPV）、基于第2代基因测序技术的HPV分型检测（SEQ-HPV）为对照，以子宫颈活检病理诊断为“金标准”，分析BMRT-HPV检测的高危型HPV（HR-HPV）亚型与Cobas-HPV、SEQ-HPV检测的一致性，并比较3种HPV检测方法对子宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅱ及以上级别病变（CIN Ⅱ +）、CIN Ⅲ及以上级别病变（CIN Ⅲ +）的筛查效率。 结果:（1）BMRT-HPV检测方法分别与Cobas-HPV、SEQ-HPV检测方法比较，检测HR-HPV亚型整体的一致性分别为94.8%、94.4%，Kappa值分别为0.827、0.814。（2）BMRT-HPV、Cobas-HPV、SEQ-HPV 3种方法对CINⅡ +筛查的敏感度分别为92.62%、94.26%、93.44%，两两比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）；特异度分别为84.67%、83.25%、82.76%，BMRT-HPV检测对CINⅡ +筛查的特异度显著高于Cobas-HPV、SEQ-HPV检测（ P<0.01）。3种HPV检测方法对CIN Ⅲ +筛查的敏感度均达到100.00%，BMRT-HPV检测对CIN Ⅲ +筛查的特异度也显著高于Cobas-HPV、SEQ-HPV检测（分别为83.40%、81.95%、81.50%， P<0.01）。检出1例CINⅡ +或CIN Ⅲ +所需要行阴道镜下子宫颈活检病理检查的患者数，BMRT-HPV检测显著少于Cobas-HPV和SEQ-HPV检测（ P<0.01）。Cobas-HPV、SEQ-HPV、BMRT-HPV检测初筛阳性者分别以HPV 16和（或）18型（HPV 16/18型）阳性联合细胞学结果≥未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞（ASCUS；即为方案一、二、三）进行二次分流，3种筛查方案对CIN Ⅱ +、CIN Ⅲ +筛查的敏感度分别比较均无显著差异（ P>0.05），但方案三（即BMRT-HPV初筛阳性者）筛查CIN Ⅱ +、CIN Ⅲ +的特异度显著高于方案一（即Cobas-HPV初筛阳性者）和方案二（即SEQ-HPV初筛阳性者； P<0.05），而且阴道镜转诊率方案三也显著低于方案一、二（ P<0.05）。 结论:BMRT-HPV检测筛查子宫颈癌具有与Cobas-HPV、SEQ-HPV检测相似的敏感度，但特异度更高，可作为子宫颈癌的初筛方法，值得临床推广使用。

目的:探讨高危型人乳头状瘤病毒（HPV）E6/E7 mRNA原位杂交技术在宫颈上皮内瘤变（CIN）分级诊断中的应用价值。方法:收集四川大学华西第二医院2019年7月至2020年6月组织病理诊断为CIN与宫颈鳞状细胞癌的病例共261例，其中CIN1级60例、CIN2级41例、CIN3级51例、鳞癌72例和形态学正常的宫颈对照组织37例（HPV阴性10例、阳性27例）。将所有病理组织制成组织芯片，分别进行HE染色、HPV E6/E7 mRNA原位杂交检测及p16免疫组织化学染色，在光镜下完成染色判读，并统计分析其阳性率及阳性模式。结果:HPV mRNA原位杂交在CIN1级中主要表现为鳞状上皮基底至中层细胞核与质的点状染色（≤BME）及伴表层细胞内弥散整个核的片状染色（supD），即≤BME+supD模式；在CIN2级中主要表现为基底直至中层之上但未达上皮全层的细胞核与质的点状染色模式（>BME）和部分伴supD染色的模式，即>BME+SupD模式；CIN3级主要表现为>BME模式，且点状染色分布于上皮全层。在CIN1级、2级和3级中，上述3种染色模式差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:HPV mRNA原位杂交技术有助于CIN的准确诊断与分级，且有着比p16免疫组织化学染色更佳的特异性。

目的:探讨p16 INK4a免疫细胞化学染色（p16 INK4a染色）作为新一代子宫颈细胞学检查技术在人群子宫颈癌初筛与辅助常规细胞学检查及高危型（HR）-HPV初筛后的二次筛查中的价值。 方法:募集2016—2018年深圳及周边地区25~65岁有性生活的非妊娠期妇女5 747例，采用HR-HPV联合子宫颈液基细胞学检查（LCT）进行子宫颈癌初筛；并行p16 INK4a染色，其中902例在初筛的同时进行p16 INK4a染色，其余4 845例为HR-HPV与LCT初筛阳性回叫行阴道镜检查时取样进行p16 INK4a染色。将具有完整LCT检查、HR-HPV检测、p16 INK4a染色及子宫颈活检后病理诊断结果者纳入本研究。以组织学病理诊断为“金标准”，评价p16 INK4a染色作为子宫颈癌初筛、辅助LCT检查及HR-HPV初筛后的二次分流方案检出子宫颈病变［即高级别鳞状上皮内病变（HSIL）］，包括HSIL［子宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅱ］及以上级别病变［HSIL（CIN Ⅱ） +］、HSIL（CIN Ⅲ）及以上级别病变［HSIL（CIN Ⅲ） +］的筛查效率。 结果:（1）具有完整LCT检查、HR-HPV检测、p16 INK4a染色及子宫颈活检病理诊断结果者共1 097例，纳入本研究。病理诊断：正常子宫颈995例，低级别鳞状上内病变（LSIL）37例、HSIL 64例及子宫颈癌1例，其中HSIL（CIN Ⅱ） + 65例，HSIL（CIN Ⅲ） + 34例。HSIL（CIN Ⅱ） +患者的p16 INK4a阳性率（89.2%，58/65）显著高于CINⅠ或正常子宫颈者（10.2%，105/1 032； P<0.01）。（2）p16 INK4a染色作为初筛方案：与HR-HPV检测比较，p16 INK4a染色检出HSIL（CIN Ⅱ） +、HSIL（CIN Ⅲ） +的敏感度均无显著差异（95.4%与89.2%，94.1%与94.1%； P>0.05），但其特异度均显著增高（82.5%与89.8%，80.2%与87.7%； P<0.05）；而与LCT结果≥LSIL比较，p16 INK4a染色检出HSIL（CIN Ⅱ） +、HSIL（CIN Ⅲ） +的敏感度、特异度均无显著差异（ P>0.05）。（3）p16 INK4a染色辅助LCT检查：与单独LCT检查或HR-HPV检测辅助LCT检查比较，p16 INK4a染色辅助LCT检查检出HSIL（CIN Ⅱ） +、HSIL（CIN Ⅲ） +的特异度均显著增高（ P<0.01），而敏感度均无显著差异（ P>0.05）。（4）p16 INK4a染色作为二次分流方案：HR-HPV初筛后以p16 INK4a阳性作为二次分流指标与LCT结果≥ASCUS作为二次分流指标比较，检出HSIL（CIN Ⅱ） +、HSIL（CIN Ⅲ） +的敏感度均无显著差异（84.6%与90.8%，88.2%与91.2%； P>0.05），而特异度均有显著差异（94.1%与89.7%，91.9%与87.4%； P<0.01）；作为二次分流方案，HPV 16和（或）18型（HPV 16/18型）阳性与p16 INK4a阳性序贯的方案，HPV 16/18型阳性与LCT结果≥ASCUS序贯的方案，两种方案比较，检出HSIL（CIN Ⅲ） +的敏感度无显著差异（分别为88.2%、94.1%， P=0.500），而前者的特异度显著增高（分别为88.3%、83.0%， P<0.01），且前者的阴道镜转诊率显著降低（分别为14.0%、19.4%， P=0.005）。 结论:p16 INK4a染色作为子宫颈癌初筛方案检出子宫颈病变的敏感度与HR-HPV检测相当、特异度与LCT检查相当；且在HR-HPV阳性患者的二次分流中具有优势，并可辅助LCT检查进行诊断分级，提高了子宫颈细胞学筛查的准确率。

目的:探讨外周血肿瘤异常蛋白（TAP）、C反应蛋白（CRP）检测在人乳头瘤病毒（HPV）感染及宫颈病变预判中的价值。方法:采用横断面研究，选取单县中心医院2019年6月至2021年5月收治的宫颈病变患者216例，根据HPV检查结果，将患者分为高危型HPV感染组（122例）、低危型HPV感染组（76例）及未感染HPV组（18例），检测患者外周血TAP、CRP水平并进行分析。结果:高危型HPV感染组TAP、CRP分别为（243.29±19.43）μm 2、（37.49±10.50）mg/L，分别为低危型HPV感染组分别为（125.46±10.37）μm 2、（26.27±7.28）mg/L、未感染HPV组分别为（74.51±9.29）μm 2、（74.51±9.29）mg/L，三组差异有统计学意义（ F=12.40、6.34，均 P < 0.001）；低危型HPV感染组TAP、CRP水平较未感染HPV组显著升高，差异均有统计学意义（ t=4.02、3.26，均 P < 0.05）。慢性宫颈炎组患者外周血TAP、CRP分别为（63.25±5.80）μm 2、（13.37±5.29）mg/L，与宫颈上皮内瘤变（CIN）、宫颈癌组差异有统计学意义（ F=21.35、8.26，均 P < 0.05），其中CINⅡ和CIN Ⅲ患者外周血TAP、CRP较CINⅠ明显升高，而宫颈癌组外周血TAP、CRP高于CIN各亚组，差异均有统计学意义（均 P < 0.05）。Pearson相关性分析结果显示，高危型人乳头瘤病毒-去氧核糖核酸（HPV-DNA）负荷量与血TAP、CRP均呈正相关（ r=0.64、0.24，均 P < 0.001）；外周血TAP、CRP联合检测的曲线下面积（AUC）为0.927（95% CI：0.873~0.967），敏感度、特异度分别为91.0%、93.6%。 结论:外周血TAP、CRP可反映HPV感染及宫颈病变病情，与HPV感染类型、宫颈病变程度密切相关，两者联合检测可提高宫颈癌诊断效能，值得临床推广。

目的:评估p16/Ki-67双染检测在高危（HR）人乳头瘤病毒（HPV）阳性人群中的分流效果。方法:于2016年4—12月，选取在郑州大学第二附属医院妇科就诊，并进行阴道镜检查且HPV DNA检测结果为HR-HPV感染的女性为调查对象，收集其宫颈脱落细胞标本，并分别进行p16/Ki-67双染检测、HPV16/18检测、LBC检测和活检病理诊断。以活检病理结果为结局指标，计算和比较3种检测分流HR-HPV阳性者的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果:共发现HR-HPV阳性女性295例，年龄为（44.29±11.48）岁，其中p16/Ki-67双染检测、HPV16/18检测和LBC检测的阳性率分别为70.17%（207例）、56.95%（168例）和85.76%（253例）。以CIN2+为疾病终点指标时，3种检测方法中，p16/Ki-67双染检测的灵敏度为90.00%（95 %CI：85.06%~93.43%），高于HPV16/18检测，低于LBC检测；特异度最高，为71.58%（95 %CI:61.81%~79.67%）；阳性预测值最高，为86.96%（95 %CI:81.69%~90.88%）；阴性预测值最高，为77.27%（95 %CI:67.49%~84.78%）。以CIN3+为疾病终点指标时，p16/Ki-67双染检测的灵敏度为92.90%（95 %CI:87.74%~95.99%），低于LBC检测，高于HPV16/18检测；特异度为55.00%（95 %CI: 46.74%~63.00%），低于HPV16/18检测，高于LBC检测；阳性预测值为69.57%（95 %CI:62.99%~75.43%），低于HPV16/18检测，高于LBC检测；阴性预测值为87.50%（95 %CI:78.99%~92.87%），高于HPV16/18检测，低于LBC检测。 结论:p16/Ki-67双染检测技术作为HPV阳性妇女分流措施的效果优于HPV16/18检测和LBC检测方法。

目的:探讨子宫颈微生态与宫颈鳞状上皮内病变（squamous intraepithelial lesion，SIL）的关系。方法:选取2019年3月至5月南京医科大学附属无锡第二医院体检中心体检的和妇科就诊的12例子宫颈正常受试者（37~47岁），21例低度鳞状上皮内病变（low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL）患者（39~48岁），5例高度鳞状上皮内病变（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）患者（38~45岁）和3例宫颈鳞癌患者（42~43岁），填写调查问卷、行子宫颈检查，同时使用下一代测序技术（next generation sequencing，NGS）分析子宫颈分泌物的微生态，生物信息学分析NGS结果。根据NGS的人乳头状瘤病毒（human papilloma virus，HPV）检测结果将受试者分为HPV阴性组、低危HPV（low-risk HPV，lrHPV）、16/18型高危HPV（high-risk HPV，hrHPV）和其他hrHPV感染组。分析数据的韦恩图、微生态的多样性、物种的相对丰度和共现性以及受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线。结果:所有受试者子宫颈分泌物共获得种属水平微生态物种909种，各组之间有重叠。在不同宫颈病变受试者中，总HPV感染率、16/18型hrHPV感染率和其他hrHPV感染率差异无统计学意义（ P均>0.05）。按HPV感染分组，16/18型hrHPV和其他hrHPV感染患者的子宫颈微生态多样性升高（ U分别为39.00和43.00， P均<0.05），而各组之间卷曲乳酸杆菌相对丰度无差异（ H=4.37， P=0.213 6）。按子宫颈状况分组，子宫颈病变受试者子宫颈微生态多样性（ H=14.60， P=0.002 2）升高，卷曲乳酸杆菌丰度下降（ H=13.98， P=0.000 8）。在微生态物种中，支原体、衣原体和B族链球菌具有共现性；惰性乳酸杆菌、阴道加德纳菌、阿托波菌和二路普氏菌具有共现性。以卷曲乳酸杆菌相对丰度作为SIL诊断指标，其ROC曲线下面积（area under ROC curve，AUC）为0.874[95%置信区间（confidence interval， CI）：0.732~0.957]，卷曲乳酸杆菌和詹氏乳酸杆菌以及支原体联合诊断SIL的AUC为0.943[95 %CI：0.822~0.991]。 结论:子宫颈卷曲乳酸杆菌相对丰度下降和微生态多样性升高可能与HPV感染和子宫颈病变有关；NGS数据简化后可能有助于SIL诊断。

目的:探讨阴道镜下子宫颈活检对高级别子宫颈病变［即子宫颈上皮内瘤变Ⅱ级及以上病变（CIN Ⅱ +）］检出的价值，并通过基于不同风险条件组合的阴道镜检查实践，进一步优化阴道镜活检程序。 方法:前瞻性研究2017年4月至2019年12月在南京医科大学第一附属医院因子宫颈癌筛查结果异常转诊阴道镜检查的346例患者，在阴道镜下对每例患者的子宫颈实施4个点的定位活检（包括异常图像区域的靶向活检和正常区域的随机活检），用于评估靶向活检和随机活检对检出CIN Ⅱ +的价值、多点活检的增量效应。分析基于不同风险条件（包括子宫颈细胞学检查结果、高危型HPV检测结果和阴道镜诊断）的组合后阴道镜下子宫颈活检的效能。 结果:346例患者的中位年龄为38岁（范围为22~61岁）；活检后病理诊断为CIN Ⅱ + 190例，占54.9%（190/346）。（1）346例患者均进行了靶向活检，靶向活检检出CIN Ⅱ + 184例（96.8%，184/190），其中53例（27.9%，53/190）是在1级阴道镜异常表现（G1）的区域进行活检检出，131例（68.9%，131/190）是在2级阴道镜异常表现（G2）的区域进行活检检出。即以G2作为阴道镜下活检的阈值，阴道镜检出CIN Ⅱ +的敏感度为68.9%（131/190），而以G1为阈值时敏感度升至96.8%（184/190）。对每例行阴道镜检查的患者，在阴道镜诊断为G1或G2时，分别增加2个或1个点的靶向活检可检出所有CIN Ⅱ +。（2）346例患者中，270例进行了随机活检，检出CIN Ⅱ + 6例（3.2%，6/190）。随着阴道镜下异常图像（包括G1、G2）累及象限数的增加，随机活检额外的CIN Ⅱ +检出率显著降低（ P=0.010）。（3）子宫颈细胞学检查结果≥不除外高级别鳞状上皮内病变的不典型鳞状上皮细胞（ASC-H）、HPV 16型阳性和阴道镜诊断为G2是检出CIN Ⅱ +的高风险因素（ P<0.01）。这3项高风险因素中，仅存在1项高风险因素时，第1个点活检的CIN Ⅱ +检出率为34.0%，第2个点活检的CIN Ⅱ +检出率增加至51.0%（增加了17.0%），2个点活检可检出所有CIN Ⅱ +；存在≥2项高风险因素时，第1个点活检的CIN Ⅱ +检出率为90.7%，第2个点活检的CIN Ⅱ +检出率增加至92.6%（增加了1.9%），2个点活检可检出所有CIN Ⅱ +；不存在任何1项高风险因素时，第1个点活检的CIN Ⅱ +检出率为8.8%，第2个点和第3个点活检的CIN Ⅱ +检出率分别增加至17.6%和23.5%（分别增加了8.8%和5.9%），3个点活检可检出所有CIN Ⅱ +。 结论:在阴道镜检查中，通过靶向活检的多点活检增量效应可提高CIN Ⅱ +的检出率，随机活检作为靶向活检的补充，其作用有限。阴道镜检查时可根据子宫颈癌筛查结果与阴道镜诊断的不同风险条件的组合，相应增减活检点数，以优化阴道镜下活检程序，实现个体化的阴道镜检查。

目的:比较子宫上皮细胞稳定性细胞游离亚铁原卟啉（FH）检测与高危型人乳头瘤病毒（HPV）检测对宫颈癌及癌前病变的筛查价值。方法:选取2017年10月至2019年10月在淮南市第一人民医院诊治的宫颈异常患者238例进行FH检测及高危型HPV检测，并以液基薄层细胞学（TCT）检测及病理活检结果为金标准，比较FH检测与高危型HPV检测的诊断价值。结果:238例受检者中，TCT检测确诊正常或炎症（NLM）97例，非典型鳞状上皮细胞（ASCUS）以上级别者141例；对ASCUS以上级别者进行病理活检确诊宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅱ级以上病变70例；CINⅡ级以上患者FH检测阳性率为92.86%（65/70），高危型HPV检测阳性率为95.71%（67/70）；FH检测对CINⅡ级以上病变筛查敏感性、特异性分别为82.86%（58/70）、85.92%（60/70），高危型HPV检测筛查敏感性、特异性分别为94.29%（66/70）、98.59%（69/70），两种方法筛查敏感性、特异性比较差异均有统计学意义（χ 2=4.52、10.25，均 P<0.05）。 结论:高危型HPV检测对宫颈癌及癌前病变的诊断有较高的应用价值，其对宫颈癌及癌前病变筛查的敏感度、特异度均高于FH检测，但FH检测操作简便、经济、快捷，更适合于宫颈癌及癌前病变的大范围筛查。

目的:探讨不同宫颈病变女性阴道菌群的特征变化及菌群间的相互关系。方法:选取2018年1—6月于山西医科大学第二医院就诊、经病理学确诊宫颈病变的女性，其中正常宫颈(NC)41例，低度宫颈上皮内瘤样变(CIN 1)39例，高度宫颈上皮内瘤样变(CIN 2/3)37例，宫颈鳞状细胞癌(SCC)15例。应用16S rDNA测序技术对阴道分泌物中的阴道菌群进行检测，采用共生网络分析菌群间的Spearman相关关系。结果:NC、CIN 1和CIN 2/3患者优势菌均为乳酸杆菌属[构成比分别为79.4%(1 869 598/2 354 098)、63.6%(1 536 466/2 415 100)和58.3%(1 342 896/2 301 536)]，嗜胨菌属[20.4%(246 072/1 205 154)]为SCC患者的优势菌。随着宫颈病变的加重，阴道菌群多样性呈升高趋势(Shannon指数 F＝6.39， P＝0.001；Simpson指数 F＝3.95， P＝0.012)，乳酸杆菌属构成比逐渐降低，嗜胨菌属、纤毛菌属、普雷沃菌属等厌氧菌构成比逐渐增加，特征菌(LDA分值>3.5)由乳酸杆菌属演变为以嗜胨菌属、拟杆菌属、卟啉单胞菌属等为代表的厌氧菌。选取相对丰度居前10位、Spearman相关系数>0.4且 P<0.05的菌属经共生网络分析，结果显示，在不同阶段宫颈病变组中，普雷沃菌属、嗜胨菌属、卟啉单胞菌属、厌氧球菌属、纤毛菌属、奇异菌属、加德纳菌属、链球菌属等厌氧菌属之间呈正相关，而乳酸杆菌属与多种厌氧菌属呈负相关，尤其在CIN 1患者中阴道菌群间关系最为复杂，在SCC患者中仅嗜胨菌属与乳酸杆菌呈负相关。 结论:阴道菌群多样性增加、菌群间相互关系改变与宫颈病变密切相关，嗜胨菌属对宫颈病变的诊断及预测预警具有重要意义。