目的:探讨膝骨关节炎患者血清脂氧素A4、富含半胱氨酸蛋白61水平及其与病情严重程度的相关性。方法:回顾性选取2017年10月至2019年10月在咸宁市中心医院（湖北科技学院附属第一医院）治疗的106例膝骨关节炎患者作为研究对象，并根据Kellgren-Lawrence（K-L）分级标准将患者分为轻中度组（63例）和重度组（43例），另选取同期体检健康者80例为对照组。通过酶联免疫吸附法检测所有受检者的血清LXA4和Cyr61水平；采用Spearman相关性检验分析膝骨关节炎患者血清LXA4和Cyr61水平与病情严重程度的相关性；采用Logistic回归分析膝骨关节炎患者病情严重程度的影响因素；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清LXA4和Cyr61联合检测对膝骨关节炎患者病情严重程度的预测效能。结果:重度组和轻中度组血清LXA4水平低于对照组[（39.57 ± 6.20）、（46.16 ± 7.77） μg/L比（56.47 ± 9.62） μg/L]，重度组血清LXA4水平低于轻中度组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。重度组和轻中度组血清Cyr61水平高于对照组[（96.88 ± 8.47）、（89.76 ± 10.47） ng/L比（25.07 ± 2.77） ng/L]，重度组血清Cyr61水平高于轻中度组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。Spearman相关性检验结果显示，膝骨关节炎患者病情严重程度与血清LXA4水平呈负相关性（ r = - 0.451， P<0.05），与血清Cyr61水平呈正相关性（ r = 0.358， P<0.05）。Logistic回归分析结果显示，血清Cyr61、LXA4水平是膝骨关节炎患者病情严重程度的影响因素（ P<0.05）；ROC曲线分析结果显示，血清LXA4和Cyr61水平联合检测预测重度膝骨关节炎患者的曲线下面积（AUC）为0.819，灵敏度为79.07%，特异度为79.34%。 结论:膝骨关节炎患者血清LXA4水平降低，Cyr61水平升高，并与患者病情严重程度有关，二者联合检测能够较好地辅助诊断膝骨关节炎严重程度。

目的:探讨雷帕霉素通过调控富含半胱氨酸61（Cyr61）和自噬对狼疮小鼠认知功能的作用机制。方法:将MRL/lpr狼疮小鼠随机分为狼疮组和雷帕霉素+狼疮组，野生型C57BL/6小鼠随机分为正常对照组和雷帕霉素组，每组6只，雷帕霉素+狼疮组和雷帕霉素组小鼠采用腹腔注射雷帕霉素（2.0 mg/kg）治疗；狼疮组和正常对照组注射等量二甲基亚砜（DMSO）。Morris水迷宫观察小鼠认知功能变化；蛋白质印迹法检测Cyr61和自噬蛋白程序性死亡受体-1（Beclin-1）、微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）表达；苏木素-伊红（HE）染色观察海马区病理改变；尼氏染色观察海马区神经元和尼氏小体改变；免疫荧光染色检测Cyr61及LC3B在海马区的定位及表达。多组间比较采用单因素方差分析。结果:蛋白质印迹法结果显示：与正常对照组[（0.73±0.08），（0.81±0.12），（0.80±0.03）]比较，狼疮组Cyr61（0.99±0.15）蛋白表达量明显升高（ P=0.011），Beclin-1（0.64±0.04）和LC3B（0.54±0.05）蛋白表达量明显降低（ P=0.025， P=0.008）；雷帕霉素组和雷帕霉素+狼疮组Cyr61（0.75±0.05），（0.75±0.08）、Beclin-1（0.84±0.08），（0.92± 0.04）、LC3B（0.93±0.16），（0.76±0.08）蛋白表达均无明显改变（ P>0.05）。与雷帕霉素组比较，狼疮组Cyr61（0.99±0.15）蛋白表达量明显升高（ P=0.016），Beclin-1（0.64±0.04）和LC3B（0.54±0.05）蛋白表达量明显降低（ P=0.013， P=0.001）；雷帕霉素+狼疮组Cyr61（0.75±0.08）、Beclin-1（0.92±0.04）、LC3B（0.76±0.08）蛋白表达均无明显改变（ P=0.999， P=0.241， P=0.062）。与狼疮组比较，雷帕霉素+狼疮组Cyr61（0.75±0.08）蛋白表达量明显降低（ P=0.016），Beclin-1（0.92±0.04）和LC3B（0.76±0.08）蛋白表达均明显升高（ P=0.002， P=0.017）。免疫荧光结果显示：Cyr61和LC3B主要定位于海马神经元胞质中表达，定量检测结果与蛋白质印迹法检测结果趋势一致，差异均有统计学意义（ P=0.025， P=0.032）。苏木精-伊红染色可见狼疮组小鼠海马区细胞层次和数量减少，排列稀疏，细胞核深染，呈核固缩、偏移等表现；尼氏染色可见尼氏小体相对减少，神经元排列松散，部分细胞出现空泡区，在雷帕霉素治疗后狼疮小鼠上述表现均有所改善。 结论:雷帕霉素对狼疮小鼠认知功能起保护作用，其机制可能是通过抑制海马组织Cyr61表达并促进自噬实现的。

目的:研究NVP-TNKS656对肝细胞癌(HCC)细胞系生长的影响以及相应分子机制。方法:采用2.5、5、10.0 μmol/L剂量NVP-TNKS656处理5种HCC细胞系，选取HLE及HLF细胞系，分为四组：二甲基亚砜(DMSO)组、NVP-TNKS656 2.5.0 μmol/L组、NVP-TNKS656 5.0 μmol/L组和NVP-TNKS656 10 μmol/L组，细胞培养48 h进行后续实验。采用结晶紫染色法计数细胞克隆形成数目；蛋白质印迹法检测是相关蛋白(YAP)、血管动蛋白样1(AMOTL1)、血管动蛋白样2(AMOTL2)蛋白表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测YAP及其下游结缔组织生长因子(CTGF)和富含半胱氨酸的血管生成诱导剂61(Cyr61)的mRNA表达；采用双荧光素酶报告基因检测转录增强因子域家族(TEAD)荧光素酶活性。结果:在HLE、HLF、Huh7、MHCC97-H、MHCC97-L细胞系中，NVP-TNKS656以剂量依赖的方式抑制了5种HCC细胞系的生长，DMSO对照组与不同剂量给药组间细胞克隆形成计数均差异有统计学意义( F＝90.46、68.58、191.8、114.6、201.4，均 P<0.05)。在HLE和HLF细胞系中，NVP-TNKS656可呈剂量依赖性显著降低YAP蛋白水平，降低YAP下游靶基因CTGF(HLE细胞分别为1.02±0.02、0.90±0.03、0.57±0.02、0.38±0.03，HLF细胞分别为0.98±0.03、0.86±0.02、0.66±0.02、0.43±0.01)及Cyr61(HLE细胞分别为1.00±0.01、0.86±0.02、0.74±0.03、0.44±0.03，HLF细胞分别为0.99±0.02、0.87±0.01、0.72±0.02、0.54±0.01)的表达(均 P<0.05)，并抑制YAP/TEAD荧光素酶分子的活性。同时NVP-TNKS656以剂量依赖的方式上调了YAP的两个主要负调控因子，即AMOTL1/2蛋白，促进HLE和HLF细胞的凋亡。 结论:NVP-TNKS656可以通过稳定AMOTL1/2下调YAP下游靶基因从而抑制HCC的增殖，可能成为治疗HCC的潜在药物。

目的:探讨野黄芩苷（Scu）对脓毒症相关性急性肾损伤（SA-AKI）的保护作用及其机制。方法:①体内实验：将36只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为生理盐水（NS）对照组、脂多糖（LPS）致SA-AKI模型组（LPS组）、20 mg/kg Scu对照组（Scu 20对照组）及5、10、20 mg/kg Scu预处理组，每组6只。腹腔注射10 mg/kg LPS制备SA-AKI小鼠模型；NS对照组给予等量NS；Scu预处理组于注射LPS前腹腔注射不同剂量Scu，每日1次、持续1周；Scu 20对照组仅给予20 mg/kg Scu，持续1周。各组于LPS处理24 h后处死小鼠取肾脏，观察肾组织损伤情况；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测核转录因子-κB（NF-κB）信号通路相关分子、凋亡相关蛋白及富含半胱氨酸蛋白61-结缔组织生长因子-肾母细胞瘤过表达基因1（CCN1）的蛋白表达。②体外实验：体外培养人肾小管上皮细胞株HK-2，待细胞融合至80%时用于实验。在未经LPS处理和经过100 g/L的LPS处理后的细胞中，分别转染pcDNA3.1-CCN1过表达CCN1或小干扰RNA（siRNA）抑制CCN1表达，观察CCN1是否参与了NF-κB信号通路激活和细胞凋亡；同时在转染和未转染CCN1 siRNA的HK-2细胞中加入100 g/L的LPS及20 μmol/L的Scu，观察Scu对LPS诱导HK-2细胞损伤保护作用的机制。结果:①体内实验结果：LPS诱导SA-AKI小鼠肾功能显著下降，肾小管严重受损；Scu可呈剂量依赖性缓解肾功能及组织学损伤。Western blotting条带分析进一步证实，Scu预处理可呈剂量依赖性降低AKI小鼠肾组织中NF-κB信号通路相关分子及CCN1的蛋白表达，并对细胞凋亡具有显著的缓解作用，说明CCN1参与了NF-κB信号通路激活和细胞凋亡。②体外实验结果：在未经LPS处理的HK-2细胞中，过表达CCN1对凋亡相关蛋白及NF-κB信号通路促炎因子表达无显著影响。而在经过LPS处理的HK-2细胞中，过表达CCN1可显著抑制促炎因子白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的mRNA表达，与单纯LPS刺激细胞比较差异有统计学意义〔IL-1β mRNA（2 -ΔΔCT）：3.20±0.57比4.88±0.69，TNF-α mRNA（2 -ΔΔCT）：2.99±0.44比5.00±0.81，MCP-1 mRNA（2 -ΔΔCT）：2.81±0.50比5.41±0.75，均 P<0.05〕，并使凋亡相关蛋白显著下调；当用siRNA抑制CCN1表达时，促炎因子的mRNA表达则较单纯LPS刺激细胞上调〔IL-1β mRNA（2 -ΔΔCT）：6.01±1.13比4.88±0.69，TNF-α mRNA（2 -ΔΔCT）：5.15±0.86比5.00±0.81，均 P<0.05〕，同时凋亡相关蛋白显著上调。在LPS诱导的细胞模型中，经过Scu处理后HK-2细胞中促炎因子的mRNA表达显著下调，与单纯LPS刺激细胞比较差异有统计学意义〔IL-1β mRNA（2 -ΔΔCT）：2.55±0.50比6.15±1.04，TNF-α mRNA（2 -ΔΔCT）：2.58±0.40比3.95±0.52，MCP-1 mRNA（2 -ΔΔCT）：2.64±0.44比6.21±0.96，均 P<0.05〕，而且凋亡相关蛋白显著下调；当用siRNA抑制CCN1表达时，则削弱了Scu对细胞的保护作用，表现为细胞中促炎因子的mRNA表达较未抑制CCN1表达的细胞显著上调〔IL-1β mRNA（2 -ΔΔCT）：5.34±0.76比2.55±0.50，TNF-α mRNA（2 -ΔΔCT）：3.66±0.54比2.58±0.40，MCP-1 mRNA（2 -ΔΔCT）：5.15±0.79比2.64±0.44，均 P<0.05〕，且凋亡相关蛋白表达亦显著上调。 结论:Scu能保护SA-AKI小鼠的肾功能，该保护作用与NF-κB信号通路和CCN1有关；Scu可能通过CCN1调节NF-κB信号通路以减轻LPS诱导的肾损伤。

目的 探究直肠癌患者血清X型胶原A1链(COL10A1)、Ⅳ型胶原(COLⅣ)、富含半胱氨酸蛋白61(Cry61)表达对直肠癌患者预后的评估价值.方法 收集62例直肠癌患者临床资料.随访至2023年10月,观察预后情况,根据患者是否死亡分为不良组(n.=12例)和良好组(n=50例).比较两组性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤分期、分化程度、COL10A1、COLⅣ、Cry61水平;分析直肠癌患者血清COL10A1、COLⅣ、Cry61水平与临床特征的关系.结果 两组患者性别、年龄差异不显著(P＞0.05),两组淋巴结转移、肿瘤分期、分化程度差异有统计学意义(P＜0.05).不良组COL10A1、COLⅣ、Cry61水平高于良好组,差异显著(P＜0.05).COL10A1、COLⅣ、Cry61水平与患者性别、年龄无关,与淋巴结转移、Ⅲ～Ⅳ期、低分化有关,淋巴结转移、Ⅲ～Ⅳ期、低分化者COL10A1、COLⅣ、Cry61水平显著高于无淋巴结转移、Ⅰ～Ⅱ期、中高分化患者,差异显著(P＜0.05).COL10A1、COLⅣ、Cry61三者联合检测对直肠癌预后的预测价值良好,AUC为0.863,灵敏度、特异度分别为0.917、0.760,三者联合相对单一指标预测效能较好.三者预测阈值分别为6.840 ng/ml、158.965 ng/ml、481.795 ng/l.结论 COL10A1、COLⅣ、Cry61表达水平在直肠癌预后不良患者血清中呈现出显著的升高趋势.COL10A1、COLⅣ、Cry61三者联合对直肠癌预后不良有良好的评估价值.

目的 探讨Yes相关蛋白(YAP)在电离辐射(IR)后表皮干细胞(EPSC)分化中的作用.方法 ①利用打孔器建立小鼠背部皮肤损伤,随后分为IR组(给予60Co γ射线局部照射),对照组(不照射);照射后0,1,3,6,9和12d收集创面皮肤组织提取RNA和蛋白,Western印迹法检测创面愈合过程中YAP蛋白变化;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测创面愈合过程中Yap及其下游靶基因结缔组织生长因子(Ctgf)和富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)的mRNA变化.②将EPSC给予60Co γ射线照射,细胞对照组不照射;4或8Gy剂量照射后4,12,24和36h收集细胞提取RNA,RT-qPCR检测YAP mRNA变化.4或8Gy剂量照射36h收集细胞提取蛋白,Western印迹法检测YAP蛋白水平;③ 短发夹RNA(shRNA)构建稳定的YAP基因敲低细胞,Western印迹法验证sh YAP的敲低效率;RT-qPCR检测IR后YAP敲低对K1和K10 mRNA的影响.结果 ①与对照组相比,IR组小鼠在创面愈合过程中YAP蛋白水平显著降低(P<0.05,P<0.01),Yap及其下游靶基因Ctgf和Cyr61的mRNA水平显著降低(P<0.05,P<0.01).②与细胞对照组相比,IR组细胞YAP mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.01).③在sh YAP稳转细胞中,YAP蛋白水平显著降低(P<0.01);sh YAP在IR后EPSC分化标志物K1和K10的mRNA水平明显降低(P<0.01).结论 YAP调控IR后创面愈合过程中EPSC的分化.

目的:探讨血清高半胱氨酸蛋白61(CYR61)、干扰素-γ(IFN-γ)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平与Graves眼病疾病活动性的关系.方法:选择GO患者112例为研究对象,依据临床活动性评分(CAS)分为活动期组(CAS≥3分,62例)和非活动期组(CAS＜3分,50例).比较两组血清CYR61、IFN-γ、MMP-9水平.分析血清CYR61、IFN-y、MMP-9与疾病活动性的相关性及影响疾病活动性的危险因素.采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CYR61、IFN-γ、MMP-9对GO疾病活动性的预测价值.结果:非活动期组患者血清CYR61、IFN-γ、MMP-9水平较活动期组下降(均P＜0.05).血清CYR61、IFN-γ、MMP-9水平与GO患者疾病活动性呈正相关(均P＜0.05).血清CYR61、IFN-γ、MMP-9为影响GO患者疾病活动性的影响因素(均P＜0.05).血清CYR61、IFN-γ、MMP-9对GO患者疾病活动性均有一定的预测价值,三者联合的预测价值更高(均P＜0.05).结论:GO患者活动期血清CYR61、IFN-γ、MMP-9水平明显高于非活动期,与GO患者疾病活动性呈正相关,三者联合检测对GO患者疾病活动性的临床预测价值良好.

目的 探讨血清富含半胱氨酸蛋白61(CYR61)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在新生儿急性呼吸窘迫综合征诊断中的临床价值.方法 选择2020年11月至2022年11月在该院接受治疗的105例急性呼吸窘迫综合征患儿作为研究组,并分为轻度组(42例)、中度组(35例)、重度组(28例),另选择同期60例健康新生儿作为对照组.所有纳入对象入院后检测血清CYR61、H-FABP水平,并进行比较.采用受试者工作特征(ROC)曲线和曲线下面积(AUC)评估血清CYR61、H-FABP对新生儿急性呼吸窘迫综合征的诊断价值,采用多因素Logistic回归分析影响新生儿急性呼吸窘迫综合征发生的相关因素.结果 研究组血清CYR61、H-FABP水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);重度组患儿血清CYR61、H-FABP水平均高于中度组、轻度组(重度组＞中度组＞轻度组),差异有统计学意义(P＜0.05).ROC曲线分析显示,血清CYR61评估新生儿急性呼吸窘迫综合征的AUC为0.843(95％CI:0.824～0.893);血清H-FABP评估新生儿急性呼吸窘迫综合征的AUC为0.864(95％CI:0.814～0.914);二者联合评估新生儿急性呼吸窘迫综合征的AUC为0.925(95％CI:0.875～0.975).多因素 Logistic 逐步回归分析显示,血清 CYR61(OR=3.050,95％CI:1.738～5.352)、H-FABP(OR=3.773,95％CI:1.845～7.717)、C 反应蛋白(OR=2.349,95％CI:1.584～3.483)及氧合指数(OR=1.944,95％CI:1.444～2.619)均为影响新生儿急性呼吸窘迫综合征发生的危险因素(P＜0.05).结论 血清CYR61、H-FABP在新生儿急性呼吸窘迫综合征中均升高,并与疾病严重程度密切有关,有望作为早期诊断新生儿急性呼吸窘迫综合征发生的有效生物学指标.

富半胱氨酸61(Cystein rich 61,Cyr61)属于CCN家族,是一种富含半胱氨酸的分泌型蛋白,具有促进骨骼形成、细胞增殖、迁移、黏附以及诱导血管生成等多种生物学功能.近年来,Cyr61在肿瘤中的作用被迅速挖掘.研究证实,Cyr61在多种肿瘤细胞和组织中表达上调并扮演"促癌因子"的角色,其与肿瘤的发生发展具有密切的联系.本文就Cyr61的结构特征、生物学功能及其近年来与肿瘤的相关性研究进行综述.

目的 探讨小剂量右美托咪定在急性缺血性脑卒中(AIS)患者机械取栓术中的应用效果及对血清中枢神经特异性蛋白(S100β)及血浆中富含半胱氨酸蛋白61(CCNI)水平的影响.方法 选取自2018年1月—2021年12月收治的行介入机械取栓术治疗的AIS患者89例,随机分为三组,对照组、小剂量组、大剂量组.小剂量组(30例)、大剂量组(30例)在麻醉诱导前10 min均静脉泵注右美托咪定1.0 μg/(kg·h)后维持剂量分别为0.4、0.8 μg/(kg·h),直至气管拔管,对照组(29例)静脉泵注等容量生理盐水.于入室给药前(T0)、麻醉诱导后(T1)、维持剂量持续泵注右美托咪定10min(T2)、术毕带管恢复自主呼吸(T3)时对三组血清S100β蛋白、CCNI蛋白进行检测,并对比三组术后24 h镇静、NIHSS评分、穿刺-血管再通(PTR)时间、苏醒时间的差异以及躁动、谵妄发生率.结果 对照组T,～T3时血清S100β蛋白、CCNI蛋白与T0时的数值相比较差异无统计学意义(P＞0.05),小剂量组与大剂量组T1～T3时血清S100β蛋白、CCNI蛋白均明显低于T0时的数值(P＜0.05).T0时,三组血清S100β蛋白、CCNI蛋白比较差异无统计学意义(P＞0.05);T1～T3时,小剂量组与大剂量组血清S100β蛋白、CCNI蛋白均明显低于对照组,且小剂量组显著低于大剂量组(P＜0.05).小剂量组、大剂量组术后24 h的Ramsay评分、NIHSS评分、PTR及苏醒时间均优于对照组(P＜0.05);小剂量组NIHSS评分明显低于大剂量组(P＜0.05),但两组的Ramsay评分、PTR以及苏醒时间差异无统计学意义(P＞0.05).小剂量组、大剂量组躁动、谵妄的发生率明显低于对照组(P＜0.05),但小剂量组、大剂量组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).大剂量组低血压、心动过缓的发生率明显高于小剂组与对照组(P＜0.05),但小剂量组与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在AIS患者机械取栓术中大、小剂量右美托咪定均可降低S100β蛋白、CCNI蛋白水平,而1.0 μg/(kg·h)输注,小剂量[0.4 μg/(kg·h)]维持麻醉时镇静作用明显,可显著减轻神经功能的损伤,且不增加不良反应.