目的:从蛋白质泛素/类泛素化修饰平衡角度探讨白藜芦醇抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成的内在机制。方法:以人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株为研究对象，分别给予培养基中加入50 μmol/L和100 μmol/L白藜芦醇处理对数生长期A431细胞作为实验组，以不加白藜芦醇培养基处理为对照组。按照上述实验分组，培养48 h采用3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）实验检测各组细胞增殖活性；采用血管模拟形成实验检测白藜芦醇处理12 h对A431细胞血管拟态形成能力的影响；采用Western印迹检测白藜芦醇处理48 h各组细胞泛素（ubiquitin）、小泛素相关修饰蛋白1（SUMO1）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子受体（VEGFR）相对表达水平。将24只8周龄BALB/c雄性去胸腺小鼠随机均分3组，于腹股沟皮下接种A431细胞，治疗组予1 mg/kg或2 mg/kg白藜芦醇腹腔注射给药，对照组注射相同体积的生理NaCl溶液，每3天注射1次，第21天处死小鼠，解剖肿瘤称重；采用免疫组化检测各组肿瘤组织中CD31的表达。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:对照组、50 μmol/L组、100 μmol/L组A431细胞增殖率差异有统计学意义（ F = 17.75， P = 0.017），50 μmol/L组、100 μmol/L组低于对照组（66.53% ± 5.09%、35.88% ± 4.28%比100%，LSD- t = 21.17、29.04， P = 0.011、0.004）；3组A431细胞血管管壁样细胞嵴的总长度差异有统计学意义（ F = 21.37， P = 0.004），50 μmol/L组、100 μmol/L组低于对照组[（102.73 ± 11.36）μm、（37.83 ± 4.19）μm比（185.26 ± 8.02）μm，均 P < 0.05]；3组细胞泛素、SUMO1、HIF-1α、VEGFR相对表达差异均有统计学意义，50 μmol/L组、100 μmol/L组泛素相对表达均高于对照组（2.09 ± 0.13、3.53 ± 0.16比0.68 ± 0.11，均 P < 0.05），SUMO1、HIF-1α、VEGFR的相对表达均低于对照组（SUMO1：1.87 ± 0.13、1.02 ± 0.11比3.10 ± 0.11，HIF-1α：0.81 ± 0.06、0.45 ± 0.06比0.97 ± 0.08，VEGFR：0.73 ± 0.09、0.39 ± 0.05比0.98 ± 0.07，均 P < 0.05）。动物试验中，对照组、1 mg/kg组、2 mg/kg组小鼠皮下肿瘤质量[（3.29 ± 0.57）g、（2.91 ± 0.49）g、（2.55 ± 0.52）g]、肿瘤组织CD31细胞阳性率（76.24% ± 5.51%、39.45% ± 5.48%、12.07% ± 3.54%）差异均有统计学意义（ F = 14.33、15.34， P = 0.019、0.021），1 mg/kg组、2 mg/kg组均低于对照组（均 P < 0.05）。 结论:白藜芦醇能够抑制肿瘤生长与肿瘤组织新生血管形成，可能与通过降低HIF-1α蛋白泛素/类泛素化修饰途径抑制皮肤鳞癌新生血管形成有关。

目的:从蛋白质类泛素化修饰角度解析亚低温对神经干细胞（neural stem cells，NSCs）的保护机制，为新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic ischemic encephalopathy，HIE）的亚低温治疗提供科学依据。方法:原代分离培养小鼠NSCs，分为对照组、缺氧组、亚低温组、缺氧+亚低温组并予相应处理，Western Blot法检测小泛素相关修饰蛋白2/3（small ubiquitin-related modifier 2/3，SUMO2/3）、低氧诱导因子1 α（hypoxia inducible factor 1 α，HIF-1α）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1 α（peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1 α，PGC-1α）和八聚体结合转录因子4（octamer-binding transcription factor 4，Oct4）的蛋白水平；比较NSCs克隆球直径变化，酶联免疫吸附法检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）含量，流式细胞术检测细胞凋亡率，免疫荧光法检测NSCs向神经元细胞分化情况。结果:与对照组相比，缺氧组NSCs中SUMO2/3、HIF-1α和PGC-1α的蛋白水平分别升高至1.33、2.26和2.40倍，亚低温组NSCs中SUMO2/3和PGC-1α的蛋白表达水平分别升高至1.52倍和6.36倍，差异均有统计学意义（ P<0.05）；与缺氧组相比，缺氧+亚低温组NSCs中SUMO2/3、HIF-1α、PGC-1α和Oct4的蛋白表达水平分别升高至1.44、1.40、3.30和1.59倍，差异均有统计学意义（ P<0.05）。缺氧组、亚低温组、缺氧+亚低温组细胞克隆球直径明显小于对照组，缺氧+亚低温组细胞克隆球直径明显小于缺氧组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。亚低温组与对照组LDH水平比较差异无统计学意义（ P>0.05），缺氧+亚低温组LDH水平明显低于缺氧组（ P<0.05）。亚低温组细胞死亡率与对照组比较差异无统计学意义（ P>0.05），缺氧+亚低温组细胞死亡率明显低于缺氧组（ P<0.05）。与对照组相比，缺氧组和亚低温组巢蛋白表达水平均有所升高，但神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）水平明显下降（ P<0.05）；与缺氧组和亚低温组相比，缺氧+亚低温组巢蛋白表达水平进一步增强，同时NSE表达水平进一步下降（ P<0.05）。 结论:亚低温可能通过强化蛋白质的SUMO化修饰方式增加NSCs对缺氧的耐受，进一步为亚低温治疗HIE提供了理论依据。

泛素和小泛素样修饰物（SUMO）以共价键形式连接到特定的蛋白底物上，进行泛素化修饰或SUMO化修饰，通过调控蛋白质的稳定性、活性、定位或相互作用来影响多种细胞活动，其中包括DNA损伤修复、细胞周期、细胞凋亡和免疫应答等。当细胞受到DNA损伤时，泛素化修饰和SUMO化修饰能够调控相关蛋白质的功能和相互作用，参与到DNA损伤修复和信号传导的过程中。这些修饰作用对于维持基因组的完整性至关重要。近年来，研究发现泛素化修饰和SUMO化修饰在DNA损伤修复中都发挥着重要作用。笔者对这些作用机制进行综述，为深入了解电离辐射诱导的DNA损伤修复机制提供参考。

目的:评价选择性脑亚低温对大鼠脑缺血再灌注时动力相关蛋白1(Drp1)小泛素样修饰蛋白2/3(SUMO2/3)化修饰的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠60只，6~8周龄，体质量240~260 g，采用随机数字表法分为4组( n＝15)：假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、选择性脑亚低温组(HT组)和常温组(NT组)。4组大鼠在监测脑温及直肠温度下进行操作，S组仅暴露颈部动脉；其余3组采用阻塞大脑中动脉2 h恢复灌注的方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。HT组和NT组拔除线栓即刻于左侧颈内动脉以80 ml·kg -1·h -1的速率分别灌注4和37 ℃生理盐水15 min。于再灌注24 h时行改良神经功能缺损严重程度评分(mNSS)。随后对大鼠实施深麻醉断头取脑，TTC染色观察并计算脑梗死体积百分比；取脑皮质缺血半暗带组织，透射电镜下观察线粒体超微结构改变，免疫共沉淀法检测Drp1 SUMO2/3化修饰水平，Western blot法检测总Drp1(T-Drp1)和总细胞色素c(T-Cytc)表达，分离线粒体和胞浆后检测线粒体外膜Drp1(M-Drp1)和胞浆Cytc(C-Cytc)表达。 结果:与S组比较，其余3组mNSS和脑梗死体积百分比升高，M-Drp1、T-Drp1、C-Cytc和T-Cytc表达上调，Drp1 SUMO2/3化修饰水平升高( P<0.05)，线粒体碎片化加重，嵴断裂和空泡化明显；与I/R组比较，HT组mNSS和脑梗死体积百分比降低，M-Drp1、T-Drp1、C-Cytc和T-Cytc表达下调，Drp1 SUMO2/3化修饰水平升高( P<0.05)，线粒体碎片化减轻、嵴断裂和空泡化减弱。NT组各指标与I/R组比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:选择性脑亚低温减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的机制与进一步增加Drp1 SUMO2/3化修饰水平，降低Drp1与线粒体外膜结合，减少线粒体过度分裂有关。

目的:探讨通过诱导蛋白质广泛去类泛素化修饰途径抑制子宫内膜癌的干性维持潜能，达到子宫内膜癌侧群细胞化疗增敏的目的。方法:流式细胞术分选培养CD133 +CD44 +的KLE子宫内膜癌侧群细胞克隆球，Western blot法检测小泛素相关修饰蛋白1(SUMO1)及肿瘤侧群细胞干性维持基因八聚体结合转录因子4(Oct4)和性别决定区Y-box2(Sox2)蛋白的表达情况。慢病毒介导KLE侧群细胞稳定转染SUMO特异性蛋白酶1(SENP1)基因，Western blot法检测SENP1、SUMO1、Oct4和Sox2的蛋白表达；比较过表达与未过表达SENP1基因的KLE侧群细胞克隆形成率，流式细胞术检测细胞周期变化，四甲基偶氮唑蓝实验和流式细胞术检测子宫内膜癌侧群细胞对顺铂的化疗敏感性，子宫内膜癌荷瘤鼠模型检测SENP1过表达对顺铂的化疗敏感性影响。 结果:CD133 +CD44 +和CD133 -CD44 -子宫内膜癌KLE细胞克隆形成率分别为(23.64±5.03)%和(4.64±1.25)%，差异有统计学意义( P＝0.003)，CD133 +CD44 +子宫内膜癌KLE细胞中SUMO1、Oct4和Sox2蛋白表达水平高于CD133 -CD44 -子宫内膜癌KLE细胞(均 P<0.05)。与未转染SENP1基因的KLE侧群细胞比较，SENP1过表达的KLE侧群细胞SUMO1、Oct4、Sox2蛋白表达水平降低，细胞克隆形成率由(25.67±5.44)%下降至(7.46±1.42)%，细胞周期发生由G 0/G 1期向G 2期的偏移，顺铂半数抑制浓度由(55.46±6.14) μg/ml下降至(11.55±3.12) μg/ml，细胞凋亡率由(9.76±2.09)%上升至(16.79±3.44)%，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。过表达SENP1能够降低KLE侧群细胞增殖能力，增加化疗敏感性。 结论:通过过表达SENP1能够诱导蛋白质去SUMO化修饰，抑制子宫内膜癌侧群细胞的干性维持潜能，进而增强其化疗敏感性。

目的:评价小泛素相关修饰物(SUMO) E3连接酶(PIAS)调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的SUMO化修饰在小鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)内源性保护机制中的作用。方法:实验Ⅰ　清洁级野生型雄性C57BL/6小鼠24只，6~8周龄，体质量18~22 g，采用随机数字表法分为4组( n＝6)：对照组(C组)、ALI组、ALI+ PPARγ诱导剂TZD组(ALI+T组)、ALI+TZD+SUMO化抑制剂漆树酸组(ALI+T+A组)。尾静脉注射LPS 15 mg/kg制备内毒素性ALI模型。ALI+T+A组注射LPS前1 h时腹腔注射漆树酸5 mg/kg；ALI+T组和ALI+T+A组注射LPS前30 min时腹腔注射TZD 50 mg/kg。给予LPS 12 h后处死小鼠取肺组织，测定湿重/干重(W/D)比值，光镜下观察病理学结果，并行肺损伤评分；分别采用Western blot法和PCR法测定PIAS1、PIAS2、PIAS3和PIASy及其mRNA的表达。实验Ⅱ 　体外培养的小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S细胞)采用随机数字表法分为4组( n＝5)：对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+ PIAS2 siRNA组(L+P组)和LPS+Con siRNA组(L+C组)。C组常规培养，余3组给予10 μg/ml LPS刺激MH-S细胞，制备内毒素攻击模型。L+P组和L+C组于加入LPS前48 h时分别转染50 nmol/L PIAS2 siRNA或Con siRNA。加入LPS孵育24 h时收集细胞，检测细胞活力；采用流式细胞术检测肺泡M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞水平，计算M1型/M2型比值；釆用Western blot法检测PIAS2和PPARγ表达，采用免疫共沉淀法测定PPARγ-SUMO1共表达；采用PCR测定TNF-α和IL-10的mRNA表达。 结果:实验Ⅰ　与C组比较，其余3组肺损伤评分和肺组织W/D比值升高，PIAS2及其mRNA表达上调( P<0.05)；与ALI组比较，ALI+T组和ALI+T+A组肺损伤评分和肺组织W/D比值降低，PIAS2及其mRNA表达上调( P<0.05)；与ALI+T组比较，ALI+T+A组肺损伤评分和肺组织W/D比值升高，PIAS2及其mRNA表达下调( P<0.05)。4组间肺组织PIAS1、PIAS3和PIASy及其mRNA表达差异无统计学意义( P>0.05)。实验Ⅱ与C组比较，其余3组细胞活力降低，PPARγ表达和PPARγ-SUMO1共表达上调，M1型和M2型巨噬细胞水平、M1/M2型比值升高，TNF-α mRNA表达上调，IL-10 mRNA表达下调，L组和L+C组细胞PIAS2表达上调( P<0.05)；与L组比较，L+P组细胞活力下降，PIAS2、PPARγ表达和PPARγ-SUMO1共表达下调，M1型巨噬细胞水平和M1型/M2型比值升高，TNF-α mRNA表达上调，IL-10 mRNA表达下调( P<0.05)，L+C组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)；与L+C组比较，L+P组细胞活力下降，PIAS2、PPARγ表达和PPARγ-SUMO1共表达下调，M1型肺泡巨噬细胞水平和M1型/M2型比值升高，TNF-α mRNA表达下调，IL-10 mRNA表达上调( P<0.05)。 结论:PIAS2调控PPARγ的SUMO化修饰是小鼠内毒素性ALI的内源性保护机制，可能与抑制巨噬细胞向M1型极化，减轻炎症反应有关。

目的:从蛋白质类泛素化修饰角度解读氧含量对肝癌化疗药物敏感性的影响,为未来肝癌患者的化疗增敏治疗提供实验依据.方法:以人源性肝癌细胞株Hep3B为实验对象,分别置于乏氧、常氧及高氧培养环境,Western Blot 法检测小泛素样相关修饰蛋白 1(small ubiquitin-like-related modified protein 1,SUMO1)、SUMO2/3、性别决定区 Y-box2(sex-determining region Y-box2,Sox2)和八聚体结合转录因子 4(octamer-binding transcription factor 4,Oct4)的蛋白表达水平;观察Hep3B细胞克隆球形成率;然后在Hep3B细胞培养基中加入顺铂,MTT法检测肿瘤细胞半数致死量,ELISA法检测乳酸脱氢酶(lactate dehy-drogenase,LDH)含量,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:乏氧及高氧均不影响共价态SUMO1产物的增加(P＞0.05),乏氧能够明显增加共价态SUMO2/3产物,但高氧则短暂升高共价态SUMO2/3产物后又快速下调;乏氧能够增加肿瘤细胞克隆球形成率及细胞干性维持蛋白Sox2和Oct4的蛋白表达(P＜0.05),而高氧则降低克隆球形成率及Sox2和Oct4的蛋白表达(P＜0.05);乏氧能够提高Hep3B细胞对顺铂的半数致死量(P＜0.05),降低LDH水平及细胞凋亡率(P＜0.05),高氧则能够降低Hep3B细胞对顺铂的半数致死量(P＜0.05),提高LDH水平及细胞凋亡率(P＜0.05).结论:乏氧能够通过提高蛋白质SUMO化修饰水平增加肝癌细胞干性,降低化疗药物敏感性;高氧则能够通过降低蛋白质SUMO化修饰水平降低肝癌细胞干性,提高化疗药物敏感性.

小泛素相关修饰蛋白(SUMOs)是近年来新发现的一类重要的蛋白质翻译后修饰蛋白,类泛素化修饰(Sumoylation)在人体多种生物学活动过程中发挥重要作用.周围神经损伤临床常见,损伤后修复再生是一个相当复杂的过程,本文拟对SUMO化修饰在周围神经损伤再生过程中作用的最新研究作一综述.

PML蛋白作为一种肿瘤抑制因子,在三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的过程中发挥重要作用.绝大多数APL患者的典型特征是细胞内PML基因和RARα基因发生融合,该融合基因所表达的PML-RARα 融合蛋白是APL发病的主要原因.三氧化二砷作为临床治疗APL的一线药物,通过直接作用于PML-RARα融合蛋白的PML部分,诱导相关蛋白多聚化,并招募多种功能蛋白,促进PML核小体重构,使PML-RARα蛋白发生小泛素修饰蛋白(SUMO)化和泛素化,最终经蛋白酶体途径降解,达到治疗APL的目的.PML蛋白发生点突变会导致APL复发及三氧化二砷耐药.本文阐述了PML蛋白的结构和功能、PML-RARα融合蛋白诱导APL发病的机制、PML蛋白参与三氧化二砷治疗APL的分子机制以及PML蛋白发生突变导致APL患者发生三氧化二砷耐药的现象,以期为目前治疗方案的优化及针对耐药患者有效治疗手段的开发提供理论指导.

小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifiers,SUMO)作为泛素相关类似物(ubiquitin-like modifiers,UBLs)的重要成员之一,可与多种靶蛋白结合,并发挥其相应的生物学功能.SUMO化修饰是一种动态可逆的蛋白质翻译后修饰,其在调节各种细胞过程如转录调节,DNA复制,细胞周期进展和应激反应中起关键作用.SUMO修饰功能的失调也可能导致某些疾病的发生.该文总结了SUMO的结构、功能、检测技术及针对SUMO化的潜在的临床应用价值.