目的:探讨多次暴露于吸入性麻醉药七氟醚后，七氟醚是否通过Tau/类微管蛋白酪氨酸样连接酶6（TTLL6）/微管切割蛋白（Spastin）信号通路引起幼鼠神经元树突棘重塑。方法:选取幼年[出生6 d（P6）]及成年[出生60 d（P60）]小鼠44只，采用随机数字表法将小鼠分为4组（每组11只）：幼年对照组（P6con组）、幼年麻醉组（P6sevo组）、成年对照组（P60con组）、成年麻醉组（P60sevo组）。P6sevo组和P60sevo组给予3%七氟醚+60%氧气3 d，每天2 h；P6con组和P60con组给予60%氧气3 d，每天2 h。造模结束后当天取小鼠海马组织采用免疫印迹法（Western blot）检测突触后致密蛋白95（PSD95）、Tau、TTLL6、Spastin水平，免疫荧光检测Tau、TTLL6、Spastin表达及Tau、TTLL6共定位情况。结果:与P6con组比较，P6sevo组海马PSD95水平较低（ P<0.05），Spastin水平较高（ P<0.05），Tau、TTLL6水平差异无统计学意义（均 P>0.05）；P60con组与P60sevo组海马组织PSD95、Tau、TTLL6、Spastin水平比较，差异无统计学意义（均 P>0.05）。免疫荧光染色结果显示，P6con组和P6sevo组小鼠海马组织Tau和TTLL6存在共定位，P60con组和P60sevo组小鼠海马组织Tau和TTLL6共定位不明显；与P6con组比较，多次七氟醚处理可使P6sevo组海马中Tau、TTLL6及Spastin阳性细胞明显增加（均 P<0.05），而在成年小鼠中变化不明显（ P>0.05）。 结论:七氟醚通过Tau/TTLL6/Spastin信号通路引起幼鼠神经元树突棘重塑。

目的:采用基因敲除法评价海马载脂蛋白E(ApoE)在年龄因素影响多次七氟烷麻醉小鼠远期认知功能中的作用。方法:幼年(6日龄)及成年(60日龄)雌性野生型(WT)C57BL/6J小鼠72只、ApoE基因敲除型(ApoE-KO)C57BL/6J小鼠56只，幼年小鼠体重3～5 g，成年小鼠体重20～25 g。采用随机数字表法将WT小鼠和ApoE-KO小鼠分别分为4组(WT小鼠每组18只，ApoE-KO小鼠每组14只)：幼年对照组(P6＋C组)、幼年七氟烷组(P6＋S组)、成年对照组(P60＋C组)及成年七氟烷组(P60＋S组)。七氟烷组每天吸入3%七氟烷及60% O 2 2 h，连续3 d，对照组则置于相同环境，每天吸入60% O 2 2 h，连续3 d。于七氟烷麻醉结束当天(出生后8或62 d)每组随机选取4只小鼠，采用ELISA法检测海马IL-1β、IL-6和TNF-α含量；WT小鼠各组随机取4只，采用Western blot法检测海马完整长度ApoE和ApoE碎片段的表达水平；每组随机取10只小鼠进行标准化饲养，于七氟烷麻醉后22 d(出生后30或84 d)进行条件恐惧实验。 结果:WT小鼠：与P6＋C组比较，P6＋S组海马TNF-α、IL-6和IL-1β含量升高，完整长度ApoE和ApoE碎片段表达上调，僵直时间缩短( P<0.05)，P60＋C组与P60＋S组上述指标比较差异无统计学意义( P>0.05)；ApoE-KO小鼠：P6＋C组与P6＋S组比较、P60＋C组与P60＋S组比较海马TNF-α、IL-6、IL-1β含量和僵直时间差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:年龄因素影响多次七氟烷麻醉小鼠远期认知功能障碍的机制与上调海马ApoE表达，诱发神经炎性反应有关。

目的:探讨长期高脂饮食对幼年小鼠视皮质和海马神经元突触可塑性的影响及其机制。方法:实验研究。24只4周龄雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为两组，每组12只。正常饮食（ND）组采用正常饮食喂养，高脂饮食（HFD）组采用高脂饮食喂养。喂养12周，记录小鼠体重和体脂比，进行葡萄糖耐量试验和血脂水平测定。采用随机数字表法每组选择6只小鼠，对丘脑视皮质外侧膝状体（LGN）-初级视皮质双眼区（V1B区）和海马CA3-CA1的长时程增强作用进行在体记录，测量场兴奋性突触后电位（fEPSP）并计算标准化的fEPSP斜率，以评估小鼠皮质突触可塑性变化，之后取脑组织进行高尔基染色，观察初级视皮质双眼区Ⅱ-Ⅲ层和海马CA1区锥体神经元胞体、轴突、树突发育情况，比较树突棘形态与数量的变化。处死每组其余6只小鼠，取脑组织，采用透射电镜观察视皮质V1B区和海马CA1区神经元超微结构变化。采用独立样本 t检验进行统计学分析。 结果:喂养12周后，HFD组小鼠体重为（29.17±1.63）g，HFD组体重为（37.99±6.87）g，差异有统计学意义（ t=4.33， P<0.001）。ND组体脂比为0.85%±0.09%，HFD组体脂比为1.09%±0.22%，差异有统计学意义（ t=2.50， P=0.032）。HFD组小鼠在注射葡萄糖后30 min血糖水平升高显著，为（17.80±3.94）mmol/L，高于ND组的（23.10±1.48）mmol/L（ t=3.07， P=0.013）。HFD组血糖水平下降缓慢，在注射葡萄糖后60 min，ND组与HFD组血糖水平差异最大，分别为（13.58±2.39）mmol/L和（23.70±3.56）mmol/L，差异有统计学意义（ t=5.40， P<0.001）。之后两组血糖水平均开始下降，在注射葡萄糖后120 min，ND组血糖水平降至（8.50±1.05）mmol/L，而HFD组仍处于较高水平，为（16.03±4.17）mmol/L，差异有统计学意义（ t=3.91， P=0.004）。ND组与HFD组小鼠血清总胆固醇水平分别为（4.08±0.35）和（10.80±0.90）mmol/L，HFD组高于ND组（ t=15.23， P<0.001）；甘油三酯水平差异无统计学意义（ P>0.05）。ND组高密度脂蛋白胆固醇水平为（2.12±0.57）mmol/L，HFD组为（1.28±0.15）mmol/L，HFD组低于ND组（ t=3.15， P=0.014）。HFD组非高密度脂蛋白胆固醇水平为（11.06±1.46）mmol/L，ND组为（2.28±0.43）mmol/L，HFD组高于ND组（ t=12.88， P<0.001）。海马CA3-CA1区通路，ND组fEPSP斜率增加为基线的239.1%±88.8%，而HFD组为基线的147.6%±31.6%，HFD组低于ND组（ t=7.20， P<0.001）。LGN-V1通路，ND组fEPSP斜率增加为基线的204.8%±67.0%，HFD组为121.1%±15.7%，低于ND组（ t=9.11， P<0.001）。对于视皮质，ND组V1B区Ⅱ-Ⅲ层的锥体神经元每10 μm树突上的树突棘数量为（1.31±1.14）个，而HFD组为（0.77±0.43）个，树突棘密度下降，差异有统计学意义（ t=3.45， P<0.001）。ND组成熟型树突棘占比69.98%，非成熟型树突棘占比30.02%；HFD组成熟型树突棘占比45.76%，非成熟型树突棘占比54.24%。对于小鼠海马CA1区锥体神经元的变化，锥体细胞胞体及轴突未见损伤，HFD组神经元树突结构简单，分支减少。每10 μm树突上的树突棘数量HFD组为（10.25±3.84）个，ND组为（25.22±8.21）个，差异有统计学意义（ t=12.42， P<0.001）。ND组成熟型树突棘占比70.88%，非成熟型占比29.12%，HFD组成熟型树突棘占比47.37%，非成熟型占比52.63%。HFD组小鼠视皮质V1B区和海马CA1区神经元超微结构明显受损，细胞结构紊乱，线粒体肿胀、空泡化，线粒体嵴减少甚至消失，同时突触数量减少且结构受损。 结论:长期高脂饮食幼年小鼠的视皮质和海马区突触的发育和功能成熟异常。树突作为突触结构的基础，发育异常可引起相关区域神经元突触可塑性改变。

目的 探索Connexin43(Cx43)在幼年非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠模型肝脏中的表达变化,及其与肝细胞脂质沉积、内质网应激、炎症浸润及氧化应激的关系,为进一步探索可能的干预靶点奠定基础.方法 采用4周龄C57BL/6J(n=24只)小鼠,随机分为两组,分别给予正常饮食和高脂饮食13周,建立正常对照及NAFLD模型.测量小鼠体重、肝重.收集小鼠血液和肝脏标本,检测血糖、血脂、胆固醇、甘油三酯.采用HE和油红O染色观察肝脏病变程度.应用免疫组织化学染色检测Cx43在小鼠肝脏组织的表达及定位,及其与脂质沉积相关指标CD36,炎症浸润及氧化应激相关指标CD68、F4/80及内质网应激相关指标GRP78、pIRE1表达的相关性.结果 与正常对照组比较,NAFLD组小鼠体重、肝重、甘油三酯、胆固醇和血糖显著增高,差异有统计学意义(P＜0.001).与对照组小鼠相比,NAFLD小鼠肝脏Cx43 表达上调,GRP78、IRE1、CD68、F4/80、CD36 表达上调(P＜0.01).CD36(r=0.724)、CD68(r=0.544)、F4/80(r=0.648)、GRP78(r=0.575)、IREl(r=0.658)与 Cx43 均呈显著正相关(P＜0.05).结论 Cx43 在幼年 NAFLD 小鼠模型中表达上调,可能参与调控幼年NAFLD小鼠肝脏中脂质沉积、内质网应激、炎症浸润及氧化应激等病理变化过程.

个体在生命早期遭遇不幸事件(虐待、忽视等),即生命早期应激(ELS),会导致其成年后的大脑结构和功能发生改变,增加各类精神疾病(如抑郁症、创伤后应激障碍及精神分裂症等)的患病风险.为模拟人类幼年时期留守现象,啮齿动物的母婴分离(MS)模型得到广泛应用,有助于揭示ELS诱发疾病发生发展的机制.文章通过对大、小鼠MS模型的行为学及相关脑区改变的研究成果进行综述.

目的 通过应用A20治疗OVA诱导幼年小鼠过敏性气道炎症模型,探究A20对过敏性气道炎症小鼠治疗作用及机制.方法 将24只BALB/c幼鼠随机分为正常组、模型组、A20蛋白20 μg+2 mg Al(OH)3治疗组、A20蛋白50μg+2 mgAl(OH)3治疗组,每组6只.除正常组小鼠外,其余组小鼠用OVA致敏、滴鼻激发.治疗组用不同剂量A20蛋白腹腔注射治疗.对各组小鼠血清中OVA特异性IgE、IgG2a和IgG1水平,脾细胞培养上清中细胞因子IL-4、TNF-α、IFN-γ、IL-10、TGF-β的含量,小鼠脾细胞中表达IL-10和TGF-β的Treg比例进行检测,对BALF中炎性细胞进行计数、分类,对肺组织病理切片进行观察.结果 模型组与正常组相比,特异性IgE、IL-4水平显著增加(P＜0.05),肺组织切片中炎症反应较重.治疗组与模型组相比,IgG1、IL-4水平显著降低(P＜0.05),IL-10 和 TGF-β 产生显著增加(P＜0.05),CD4+IL-10+Treg 和 CD4+TGF-β+Treg 产生显著增加(P＜0.05),高剂量A20治疗组增加更加明显(P＜0.01).BALF中嗜酸性粒细胞及中性粒细胞数量降低比较明显(P＜0.05).肺组织切片中炎症反应减轻.结论A20通过促使免疫耐受因子IL-10和TGF-β的产生来抑制Th2反应,从而降低过敏性气道炎症小鼠肺部炎症,而非促进Th1反应.

目的 观察不同月龄C57BL/6 小鼠大脑皮质不同功能区的微血管构筑,并进行定量分析.方法 采用改良碱性磷酸酶染色法染色C57BL/6 小鼠大脑皮质运动皮质区(初级运动皮层、次级运动皮层)、感觉皮质区(初级体感皮层、次级体感皮层)、视觉皮质区(初级视觉皮层、次级视觉皮层)、听觉皮质区(初级听觉皮层、次级听觉皮层)、嗅觉皮质区(外嗅皮层、内嗅皮层)的微血管形态,OLMPUS BX51 显微镜结合Image-Pro Plus 5.1 进行图像捕获,采用Image-Pro Plus 5.1 软件进行微血管长度密度(mlcrovascular length density,Lv)、微血管表面积密度(microvascular surface area density,Sv)、微血管体积密度(microvascular volume density,Vv)的定量分析.结果 碱性磷酸酶在成年组和老年组的大脑皮质微血管内表达丰富,在幼年组略有表达,而在乳鼠组无表达;软脑膜血管进入皮质的方式分T字形、Y字形、大弧形和小弧形四种;相同年龄不同部位的Lv、Sv和Vv显示运动皮质区、感觉皮质区、视觉皮质区、听觉皮质区、嗅觉皮质区呈现下降趋势,且运动皮质区和感觉皮质区与嗅觉皮质区比较Lv、Sv、Vv微血管密度有统计学意义(P<0.05).老年组的各功能区血管密度均较成年组降低,但无统计学意义(P>0.05).结论 C57BL/6 小鼠大脑皮质不同功能区微血管内碱性磷酸酶的表达随年龄增长而增多,成年时达到峰值,其脑内微血管构筑为脑血管疾病及模型制备提供形态学参数.

[目的]探究藏红花素(CRO)对幼年小鼠肺炎模型的治疗作用及其与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子-κB(NF-κB)通路的关系.[方法]采用腹腔注射脂多糖(LPS)构建幼年小鼠肺炎模型,将小鼠随机分为对照组、模型组、DEX(阳性对照-地塞米松)组、CRO低剂量组、CRO中剂量组、CRO高剂量组、MAPK激活剂(Anisomycin)组(CRO高剂量+Anisomycin).检测小鼠肺湿/干(W/D)比和髓过氧化物酶(MPO)活性,苏木精-伊红(HE)染色观察肺部组织病理变化并进行病理损伤评分,血细胞计数器和吉姆萨染色进行总细胞、中性粒细胞和白细胞计数,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清和肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞因子水平,试剂盒检测血清和BALF中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),蛋白免疫印迹(Western Blot)检测MAPK/NF-κB通路蛋白表达.[结果]与模型组比较,DEX组和CRO低、中、高剂量组肺组织损伤减轻,W/D比、MPO活性、病理损伤评分、总细胞、中性粒细胞、白细胞计数、白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、MDA、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα显著下降,SOD显著升高(P<0.05);而Anisomycin可逆转高剂量CRO对肺炎小鼠的治疗作用(P<0.05).[结论]CRO对幼年肺炎小鼠有治疗作用,其作用机制可能与抑制MAPK/NF-κB通路有关.

目的 利福平为一线抗结核药物,可诱导非酒精性脂肪性肝炎(NASH),但其相关作用机理有待进一步阐明.方法 幼年小鼠在出生后第二天皮下注射谷氨酸钠(monosodium glutamate,MSG)5 g/kg以诱导肥胖、胰岛素抵抗的肥胖小鼠,用于考察利福平致小鼠NASH与胰岛素抵抗的相关性;采用静脉注射氯膦酸脂质体剔除小鼠肝脏Kupffer细胞,观察Kupffer细胞在利福平致小鼠NASH中的作用.结果 MSG小鼠在50 d龄时明显肥胖,Lee's指数显著增加,肝脏脂质轻度堆积、肝功能轻度受损,肝脏组织病理出现轻微的炎症反应.连续灌胃利福平600、300和150mg/kg7d可引起正常小鼠和肥胖小鼠肝功能受损,肝脏发生NASH样病理改变,对肥胖小鼠的作用明显强于正常小鼠.注射脂质体剔除肝脏Kupffer细胞小鼠体重降低并伴随着轻微的肝损伤,但未影响肝脏中TG和TC的含量;利福平可使Kupffer细胞剔除小鼠可使其体重降低,肝脏发生NASH样改变,但与正常小鼠相比并无明显差异.结论 研究结果表明利福平所致小鼠肝脏NASH变化与胰岛素抵抗及肝脏脂质堆积程度、肝组织功能状态密切相关,这些作用与Kupffer细胞无明显关联,提示利福平在临床用于结核病治疗时应加强检测患者肝功能及脂肪肝,有利于预防利福平所致的肝损伤.

目的 展示自然衰老和耳聋相关基因遗传缺陷之间耳蜗毛细胞缺失的不同模式.方法 用不同龄的长尾猴、南美栗鼠、豚鼠、Sprague-Dawley大鼠、CBA/CaJ小鼠、C57BL/6J小鼠、A/J小鼠、DBA/2J小鼠和侏儒灰色突变纯合子(dwg/dwg)小鼠作为受试对象.所有测试动物的耳蜗基底膜都被制作成平坦的耳蜗基底膜铺片.沿着耳蜗基底膜的全长,基底膜上所有的内外毛细胞都被完整计数,毛细胞的计数结果被输入到耳蜗图软件并自动生成每组实验条件的平均耳蜗图.结果 在天然衰老的动物中,耳蜗毛细胞的缺失总是发生在老年阶段.与此不同的是,在耳聋相关基因缺陷的动物中,耳蜗毛细胞的缺失却是发生在青年阶段甚至幼年阶段.发生在天然老化动物的耳蜗毛细胞缺失总是呈均匀分布或从耳蜗的顶回向底回扩展.但是,发生在具有耳聋相关基因遗传缺陷动物的耳蜗毛细胞缺失却通常表现为从耳蜗的底回向顶回扩展.结论 本实验观察结果表明,发生在天然衰老的不具备耳聋相关基因缺陷动物身上的年龄相关性耳蜗毛细胞缺失反映的是真正由衰老引起的耳蜗退化性病变,而发生在伴有耳聋相关基因遗传缺陷的年幼动物身上的年龄相关性耳蜗毛细胞缺失可能与耳聋相关基因的遗传缺陷有关.