目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定藏茵陈中獐牙菜苦苷、芒果苷、龙胆苦苷、当药苷、异荭草苷、异牡荆苷、当药黄素、当药醇苷、甲基当药宁、齐墩果酸含量的方法.方法:采用Welch Ultimate XB-C18 色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量为 1.0 mL·min-1,獐牙菜苦苷、芒果苷、龙胆苦苷、当药苷测定波长为 240 nm,异荭草苷、异牡荆苷、当药黄素测定波长为 270 nm,当药醇苷、甲基当药宁测定波长为 250 nm,齐墩果酸检测波长为 205 nm,进样量为 10 μL.结果:该条件下指标成分进样质量分别为獐牙菜苦苷 126.7～16 040.0 ng(r=0.999 8)、芒果苷 6.3～801.6 ng(r=0.999 6)、龙胆苦苷 6.4～814.4 ng(r=0.999 7)、当药苷 15.9～2 016.0 ng(r=0.999 9)、异荭草苷 7.1～900.0 ng(r=0.999 5)、异牡荆苷 5.5～699.2 ng(r=0.999 7)、当药黄素 5.4～681.6 ng(r=0.999 8)、当药醇苷 5.4～685.6 ng(r=0.999 6)、甲基当药宁 19.3～2 438.0 ng(r=0.999 7)、齐墩果酸 13.6～1 716.0 ng(r=0.999 8)时与峰面积具有较好的线性关系;方法学考察结果显示精密度(RSD≤0.95%)和重复性(RSD≤1.86%)良好,供试品溶液在室温条件下 24 h内稳定,RSD≤1.85%;平均加样回收率和相应的 RSD 分别为 99.56%(0.58%)、100.37%(1.23%)、98.63%(0.59%)、99.11%(1.02%)、98.64%(0.57%)、102.26%(0.88%)、100.37%(0.59%)、97.05%(1.36%)、96.01%(0.45%)、101.55%(0.49%).18 批藏茵陈原植物中獐牙菜苦苷、芒果苷、龙胆苦苷、当药苷、异荭草苷、异牡荆苷、当药黄素、当药醇苷、甲基当药宁、齐墩果酸的质量分数差异较大,分别为 0.111%～6.592%、0.195%～1.959%、0.046%～4.139%、0.058%～0.662%、0.090%～1.421%、0.082%～0.283%、0.061%～0.384%、0.022%～1.589%、0.106%～1.858%、0.160%～0.657%.结论:建立的HPLC同时测定藏茵陈中 10 个有效成分含量,方法简便、快速、准确,可为藏茵陈质量控制及资源有效开发提供参考.

目的:建立HPLC法同时测定印度獐牙菜中9个成分含量的方法。方法:用Waters SunFire C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；以甲醇-0.05%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱；柱温30 ℃，流速1.0 ml/min，检测波长为254 nm。结果:獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、当药苷、芒果苷、异荭草素、苦龙胆酯苷、当药醇苷、8-羟基-1，3，5三甲氧基 酮、雏菊叶龙胆酮在进样质量范围内呈良好的线性关系，加样回收率分别为95.38%、92.41%、95.14%、91.87%、92.24%、92.51%、95.08%、91.72%、95.74%。 结论:该方法简便、高效、灵敏、准确、经济实用，具有良好的重复性和稳定性，为印度獐牙菜的质量控制、综合利用提供了有效参考依据。

为了研究杏叶防风(Pimpinella candolleana)的化学成分及其抗炎活性,采用正相硅胶、ODS反相硅胶、D101大孔吸附树脂及MCI树脂等多种色谱方法对杏叶防风70％乙醇提取物部位进行了分离,并通过与文献对比波谱数据鉴定化合物结构.体外培养小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW 264.7)细胞,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW 264.7细胞建立氧化损伤模型,利用一氧化氮(NO)试剂盒检测NO浓度,评价各化合物的抗炎活性.从该植物中分离得到 25 个黄酮类化合物,分别鉴定为 1-hydroxy-2,3,4,7-tetramethoxyxanthone(1)、1-hydroxy-2,3,4,6-tet-ramethoxyxanthone(2)、bellidifolin(3)、desmethylbellidifolin(4)、当药醇苷(5)、日本当药黄素(6)、异日本獐牙菜素(7)、木犀草素-7-O-β-D-芸香糖苷(8)、luteolin-7-O-β-D-glucopyranosyl-(1 →6)-[6'''-O-caffeoyl]-β-D-glucopyranoside(9)、木犀草素-4'-O-β-D-葡萄糖苷(10)、木犀草素-6-C-β-L-岩藻糖苷(11)、荭草素(12)、异荭草素(13)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(14)、芹菜素(15)、quercetin-3-O-β-D-(6"-caffeoylgalactoside)(16)、小麦黄素-7-O-β-D-葡萄糖苷(17)、葛根素(18)、牡荆素(19)、商陆素-3-O-β-D-葡萄糖苷(20)、商陆素-3-O-β-D-半乳糖苷(21)、鼠李素-3-O-β-D-半乳糖苷(22)、鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(23)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(24)、柯伊利素-7-O-β-D-葡萄糖苷(25).其中,化合物13～15首次从杏叶防风中分离得到,化合物1～12、16～25首次从茴芹属植物中分离得到;生物活性测定结果表明,化合物1～3、6～10、12～15、17～20、23、25能抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞的NO释放,显示出一定的抗炎活性.

目的 对小槐花(Ohwia caudata(Thunberg)H.Ohashi)叶的化学成分进行研究,丰富其物质基础.方法 采用加热回流提取法对小槐花干燥叶进行提取,综合利用多种色谱法对小槐花叶的化学成分进行分离纯化,采用核磁共振波谱和质谱技术对其进行结构鉴定.结果 从小槐花干燥叶体积分数70%乙醇提取物中分离鉴定了异牡荆苷(1)、牡荆苷(2)、芹菜素-6,8-二-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、异肥皂草苷(4)、异牡荆素-2″-O-鼠李糖苷(5)、当药黄素(6)、异当药黄素(7)、2″-O-鼠李糖基当药黄素(8)、2″-O-鼠李糖基异当药黄素(9)、异荭草素(10)、荭草素(11)、异荭草素 2″-O-鼠李糖苷(12)、日当药黄素(13)、2″-O-鼠李糖基日当药黄素(14)、异金雀花素-7-O-葡萄糖苷(15)等15 个黄酮碳苷类成分.结论 化合物4、5、7、11-15 为首次从小槐花属植物中分离得到.

目的 基于网络药理学结合谱效关系及分子对接,探讨五味甘露抗炎的物质基础及作用机制.方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、Genecards、Pubchem、UniProt、中国学术期刊全文数据库(CNKI)等数据库筛选五味甘露的活性成分及抗炎的作用靶点,利用STRING数据库、Cytoscape3.7软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并筛选核心靶点,利用Metascape数据库进行基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.将细胞炎症模型与高效液相色谱法相结合分析五味甘露不同极性部位的抗炎活性和药效成分.采用Discovery Studio Lib Dock软件将主要药效成分与核心靶点进行分子对接,并进行可视化分析.结果 网络药理学分析共获取五味甘露抗炎成分125个,潜在抗炎靶点251个,得到核心靶点131个,包括肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)重要靶点.KEGG通路富集分析,共富集到20条相关通路,其中涉及基因较多的包括脂质与动脉粥样硬化和类风湿性关节炎(RA)等通路,诸多通路均涉及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)核心靶点.五味甘露的醋酸乙酯相能够抑制炎症相关的NLRP3、IL-1β、TNF的表达,且其中总黄酮含量最高,为(305.0±11.4)mg·g-1.LC-MS图谱分析和分子对接实验显示醋酸乙酯相中山柰酚、杨梅素、异荭草素、异槲皮苷和黄芪苷等黄酮类物质的离子强度远远高于单味药材且其母核结构与NLRP3受体蛋白的7个氨基酸活性位点有显著的相互作用.结论 五味甘露抗炎的主要物质为黄酮类,可通过抑制NLRP3炎症小体的活化起到抗炎作用.

目的 探讨异荭草苷对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗效果及其作用机制.方法 将 48 只 C57BL/6J 小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组(600 mg·kg-1)、异荭草苷低剂量组(25 mg·kg-1)、异荭草苷高剂量组(50 mg·kg-1)及异荭草苷对照组(50 mg·kg-1),每组 8 只.小鼠自由饮用 2%DSS溶液复制UC模型,实验进行 3 周后,各给药组给予相应药物灌胃治疗 4 周.给药结束后,称取体质量,摘眼球取血,剖取结肠组织.采用苏木素-伊红(HE)、阿利新蓝-过碘酸-雪夫染色(AB-PAS)法观察小鼠结肠组织病理形态变化;透射电子显微镜观察小鼠结肠组织超微结构;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、脂多糖(LPS)和髓过氧化物酶(MPO)水平;免疫组化法检测小鼠结肠组织中半乳糖凝集素(Gal-3)蛋白表达;免疫荧光法检测黏蛋白(MUC2)表达及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白 3(NLRP3)和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)共定位情况;免疫印迹(Western Blot)法检测小鼠结肠组织中 Gal-3、NLRP3、ASC、半胱氨酸蛋白酶 1(Caspase-1)、IL-1β、IL-18、闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白 1(ZO-1)蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠体质量明显下降,结肠长度明显缩短,肠质量指数明显增加(P＜0.01);小鼠肠黏膜结构紊乱,微绒毛稀疏,隐窝结构见大量炎性细胞浸润,线粒体肿胀明显,杯状细胞明显减少;血清IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、LPS和MPO水平明显升高,IL-10 水平明显降低(P＜0.01);结肠组织MUC2 蛋白阳性表达减少及NLRP3 和ASC共定位增强;结肠组织中Gal-3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18 蛋白表达明显增加,Occludin和ZO-1 蛋白表达明显降低(P＜0.01).与模型组比较,异荭草苷低、高剂量组小鼠体质量明显上升,结肠长度明显增长,肠质量指数明显降低(P＜0.05,P＜0.01);肠黏膜、微绒毛及线粒体结构明显恢复,炎性浸润减轻,杯状细胞明显增加;血清IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、LPS和MPO水平明显降低,IL-10 水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01);结肠组织MUC2 蛋白阳性表达增加,NLRP3 和ASC共定位减弱;结肠组织中Gal-3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18 蛋白表达明显降低,Occludin和ZO-1 蛋白表达明显增加(P＜0.05,P＜0.01).结论 异荭草苷对DSS诱导的UC小鼠具有良好的治疗效果,其机制可能与抑制Gal-3/NLRP3/IL-1β信号通路,保护肠黏膜屏障有关.

目的 研究荭草素和异荭草素降血糖的靶点及其体外活性.方法 从蛋白质数据库(www.rcsb.org)获取糖尿病相关靶点蛋白结构,利用虚拟分子对接打分评价荭草素和异荭草素与糖尿病相关靶点的结合强弱;基于分子对接的结果,采用荧光标记的 1-脱氧葡萄糖(1-NBDG)、4-硝基苯基-α-D-葡萄糖苷PNDG(PNPG)、对硝基苯酚磷酸酯(pNPP)作为底物对荭草素和异荭草素进行体外抑制α-葡萄糖糖苷酶、钠-葡萄糖协同转运蛋白 2(SGLT2)和蛋白酪氨酸磷酸酶 1B(PTP1B)活性评价.结果 荭草素与α-葡萄糖苷酶、SGLT2、和PTP1B的分子对接得分分别为-5.67、-9.32、-4.75,异荭草素与α-葡萄糖苷酶、SGLT2 和 PTP1B 的分子对接得分分别为-5.34、-8.63、-4.93,而阳性对照药与靶标的分子对接打分依次是-5.58、-9.79、-9.28.体外实验显示,荭草素对α-葡萄糖苷酶、SGLT2、PTP1B的抑制率依次是(16.7±5.8)%、(15.4±1.2)%、(3.0±0.5)%,异荭草素对α-葡萄糖苷酶、SGLT2、PTP1B的抑制率依次是(11.8±3.8)%、(9.4±1.1)%、(-3.8±0.6)%,而阳性对照对α-葡萄糖苷酶、SGLT2、PTP1B的抑制率依次为(63.7±5.8)%、(92.7±8.8)%、(73.4±8.3)%.结论 荭草素和异荭草素对SGLT2 和α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制活性,对PTP1B几乎没有抑制作用,且荭草素的体外活性略强于异荭草素,荭草素有可能作为一类具有双靶点作用的降血糖药物的先导化合物.

目的:研究云南蓍Achillea wilsoniana Heimerl ex Hand.-Mazz.的黄酮类化学成分及其体外抗炎活性.方法:采用多种色谱技术对云南蓍70％乙醇提取物进行分离纯化,并根据化合物的理化性质与波谱数据进行结构鉴定.采用脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7体外炎症模型测定化合物对一氧化氮(NO)释放的抑制作用.结果:从云南蓍中分离得到22个黄酮类化合物,分别鉴定为:木犀草素(1)、hydnocarpin(2)、槲皮素(3)、异荭草素(4)、quercetin-3-O-α-arabinopyranosyl(1'''→6'')-β-glucopyranoside(5)、芦丁(6)、异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷(7)、异金雀花素(8)、异鼠李素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、异槲皮苷(10)、蒿黄素(11)、槲皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷(12)、异牡荆苷(13)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14)、苜蓿素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(16)、芹菜素(17)、异鼠李素(18)、casticin(19)、槲皮苷(20)、泽兰黄素(21)、vitexin(22).体外抗炎实验结果表明,化合物1、3、11、13～15、17、19和21对LPS诱导的RAW 264.7细胞NO生成具有一定的抑制活性.结论:其中,化合物1、3～7、10、11、13～15、17～19、21、22为首次从云南蓍中分离得到,化合物2、8、9、12、16、20为首次从蓍属植物中分离得到,化合物1、3、11、13～15、17、19、21具有一定的抗炎活性.

目的 对广金钱草Desmodium styracifolium中的黄酮及黄酮苷类化学成分进行研究.方法 采用溶剂提取法、MCI HP20柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、ODS柱色谱、制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,并利用现代波谱技术对化合物进行结构鉴定.结果 从广金钱草醇提取物醋酸乙酯和正丁醇部位中分离得到31个黄酮及黄酮苷类化合物,分别鉴定为5,7-二羟基-2'-甲氧基-3',4'-亚甲二氧基二氢异黄酮(1)、5,7-二羟基-2',4'-二甲氧基二氢异黄酮(2)、金圣草黄素(3)、异鼠李素(4)、红车轴草素(5)、parvisoflavanone(6)、3,3'-二甲氧基槲皮素(7)、5,7,3'-三羟基4,5'-二甲氧基异黄酮(8)、5,7-二羟基-3',4'-二甲氧基黄酮(9)、eriocoumaronochromone(10)、染料木素(11)、苜蓿素(12)、3'-甲氧基大豆苷元(13)、5,7,2'-三羟基-4'-甲氧基二氢异黄酮(14)、山柰酚(15)、木犀草素(16)、大豆苷元(17)、7,3'-二羟基4,5'-二甲氧基异黄酮(18)、spicatolignan B(19)、槲皮素(20)、香豌豆酚(21)、3-甲氧基山奈酚(22)、芹菜素(23)、二氢山柰酚(24)、dalbergiodin(25)、2'-羟基染料木素(26)、木犀草苷(27)、异荭草苷(28)、染料木素-7-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(29)、异牡荆苷(30)、维采宁-2(31).结论 化合物6～8、10、14、18～19为首次从广金钱草中分离得到,丰富了广金钱草黄酮类成分的结构类型.

目的 建立同时测定肋柱花药材中 5 种活性成分含量的超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法.方法 色谱柱为Thermo Hypersil GOLD C18 柱(100 mm×2.1 mm,1.9 μm),流动相为甲醇-含 5 mmol/L甲酸铵的 0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.25 mL/min,柱温为 30℃,进样量为 5 μL;离子源为电喷雾电离(ESI),电离模式为ESI-(木犀草素、芒果苷)和ESI+(异荭草苷、獐牙菜苦苷、当药黄素),多反应监测(MRM)模式,喷雾电压为 3 500V(正离子模式)和 3 000V(负离子模式),雾化温度为 300℃.采用SIMCA 14.1软件进行主成分分析.结果 木犀草素、异荭草苷、獐牙菜苦苷、芒果苷、当药黄素的质量浓度分别在0.4041～12.9312 mg/L、0.392 2～12.550 4 mg/L、0.283 8～9.081 6 mg/L、0.305 5～9.776 0 mg/L、0.356 7～11.414 4 mg/L范围内与峰面积线性关系良好(R2≥0.999 0);检测限分别为 0.521 0,1.319 8,0.813 3,1.219 4,2.083 0 μg/L,定量限分别为 1.510 9,3.931 2,2.709 6,4.024 1,6.736 5 μg/L;精密度、稳定性、重复性试验结果的 RSD 均小于 3.5%(n = 6);加样回收率分别为 94.83%,92.30%,100.47%,95.13%,95.53%,RSD分别为 1.49%,2.50%,0.92%,0.91%,1.48%(n = 6).12 批不同产地的药材样品中 5 种活性成分的总含量为39.85～67.82 mg/g,獐牙菜苦苷的含量最多(33.87～61.44 mg/g).主成分分析结果显示,第一主成分、第二主成分的方差贡献率分别为 36.30%和 31.70%,筛选出的主要贡献成分为木犀草素(0.623 0)、獐牙菜苦苷(0.520 5)和芒果苷(0.753 3).结论 该方法操作简便、专属性强、结果准确、灵敏度高,可用于肋柱花药材中活性成分的定量分析,木犀草素、獐牙菜苦苷、芒果苷可作为肋柱花药材的质量控制标志物.