患者，女，7岁，因"戴镜1年后视力矫正不良"于2020年10月在天津市眼科医院就诊。患者曾在2019年6月因视力下降于外院就诊，复方托比卡胺睫状肌麻痹验光示：右眼最佳矫正视力（BCVA）-3.50=0.6，左眼BCVA-2.50+0.50×105°=0.4。诊断：屈光不正。左眼弱视，给予框架眼镜全矫屈光不正联合遮盖治疗。患者戴镜1年，矫正视力无提高。患者无全身疾病、外伤、激光笔照射及视力突然降低史。我院眼科检查示：双眼裸眼视力0.1，角膜映光正位，外眼及眼前节无异常；眼底检查示：左眼黄斑区月牙状瘢痕，边界清晰（图1）；光学相干断层扫描血管成像（Optical coherence tomography angiography，OCTA）示：左眼黄斑区色素上皮层隆起，椭圆体带缺失（图2）；复方托比卡胺睫状肌麻痹验光示：右眼BCVA-5.00=0.8，左眼BCVA-4.00+0.75×95°=0.4。右眼调节幅度9.50 D，调节灵敏度5 cpm，左眼调节幅度7.50 D，调节灵敏度3 cpm，双眼均为负镜片通过困难。诊断：双眼屈光不正，调节不足，左眼黄斑陈旧病变。给予框架眼镜矫屈光不正，遮盖右眼4 h/d联合海丁格刷（YGS光刷治疗仪，北京同明尚业医疗器械有限责任公司）和红光闪烁（YHY弱视治疗仪，北京同明尚业医疗器械有限责任公司）治疗，以及翻转拍进行视觉训练。患者于2020年12月复查，复方托比卡胺睫状肌麻痹验光示：右眼BCVA-6.50=1.0，左眼BCVA-5.00+1.00×90°=0.6；微视野（MAIA，意大利CenterVue公司）检查示：左眼旁中心注视，注视位点在黄斑鼻上方，注视稳定性较差。2021年3月检查结果：右眼BCVA 1.0，左眼BCVA 0.6；微视野检查示：左眼旁中心注视，注视位点位于黄斑鼻上方，注视稳定性较差。2021年5月检查结果：小瞳验光示右眼BCVA-6.5=1.0，左眼BCVA-5.0+1.0×90°=0.9；微视野检查示左眼黄斑中心凹旁注视点，注视稳定性明显改善（图3B）；双眼调节幅度及调节灵敏度均提升至正常，分别为13.50 D和13 cpm，其后间隔3~4个月随访（图3C-D），直至2022年3月，患者左眼BCVA均为0.9，并保持稳定的旁中心注视。

牙周病是一种主要由牙龈卟啉单胞菌、螺旋体等革兰阴性致病菌导致的慢性、感染性口腔疾病，对牙周组织（包括牙龈、牙周膜、牙槽骨、牙骨质）具有慢性破坏性。目前，牙周病的治疗主要是以清除菌斑来达到控制牙周疾病的发展进程为目的。随着激光技术的发展和其在口腔临床的普及，激光在牙周病治疗方面发挥着越来越重要的作用。强激光手术和弱激光照射是常见的激光治疗方式。弱激光照射主要通过光生物刺激效应和光动力效应，促进牙周病的组织修复与再生、抑制炎症、缓解疼痛、杀菌消毒等，其在牙周病的临床治疗中具有很好的应用前景。针对弱激光照射在牙周病的治疗中的应用进行综述。

目的:探讨雷帕霉素对光诱导下视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)自噬的影响.方法:将自噬双标mRFP-eGFP-LC3质粒转染进ARPE-19细胞中获得稳定表达的转染细胞株,随后随机分为6 h对照组、6 h模型组、6 h雷帕霉素组;12 h对照组、12 h模型组、12 h雷帕霉素组和24 h对照组、24 h模型组、24 h雷帕霉素组.对照组避光培养,模型组受光照刺激;雷帕霉素组加入10 μmol/L雷帕霉素后受光照刺激,光源采用LED冷光灯,在(16 500±500)lx光照强度下照射细胞6、12、24 h.检测转染效率,MTT检测ARPE-19细胞存活率;激光共聚焦显微镜对自噬流变化进行定性分析,透射电镜观察细胞自噬形态;蛋白免疫印迹法对Beclin1、LC3、P62自噬相关蛋白表达量进行检测.结果:与对照组相比,模型组光照6、12、24 h后,细胞存活率显著下降(P<0.001);雷帕霉素组经光照后细胞存活率高于模型组(P<0.05).光照6、12、24 h后模型组红色荧光斑点较对照组逐渐增多,绿色荧光斑点也随之增加,Merge图中从光照12 h开始黄色斑点数量增多明显.雷帕霉素组在光照6、12、24 h时红色荧光斑点较模型组加强,绿色荧光较模型组弱.透射电镜观察发现模型组胞内见较多的自噬泡,雷帕霉素组细胞见大量聚集分布自噬囊泡.蛋白免疫印迹结果发现光照6、12、24 h后,模型组中自噬相关蛋白Beclin1、LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ的相对表达水平均增加,P62蛋白表达较低.而采用雷帕霉素干预后,与模型组相比,雷帕霉素组在光照6 h时Beclin 1蛋白表达量差异不明显、在12、24 h时Beclin 1蛋白表达量逐渐升高;LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ的比值均高于模型组;P62蛋白表达量差异不显著.结论:光照可诱导ARPE-19细胞自噬现象的发生,且雷帕霉素能上调其自噬活性.

目的 探讨光生物调节(photobiomodulation,PBM)对脑慢性低灌注大鼠海马神经元再生及认知功能和炎症损伤的影响.方法 将雌性SD大鼠去双侧卵巢,1周后随机分为假手术组(Sham)、BCCAO组、PBM干预组(BCCAO+PBM),每组8只.BCCAO组永久性结扎大鼠双侧颈总动脉(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO)建立脑慢性低灌注模型,但不予光照;Sham组只钝性分离左、右侧颈总动脉,但不结扎,不予光照.BCCAO+PBM组在永久性结扎BCCAO的基础上,采用808 nm激光隔日照射大脑额叶皮层1个月,每次5 min,光剂量为20 mW/cm2.造模完成后第86～90天行Morris水迷宫测试观察大鼠的空间学习记忆功能,第90天处死大鼠进行免疫荧光染色和Western blot分析.免疫荧光染色检测海马齿状回(dentate gyrus,DG)区细胞增殖标记物5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、新生神经元前体细胞的特异性标志蛋白DCX、成熟神经元标志蛋白NeuN以及小胶质细胞标志蛋白Iba1的表达情况.Western blot分析海马区Iba1,炎症小体组成NLRP3、ASC、cleaved caspase-1的蛋白水平.结果 水迷宫潜伏实验中,与BCCAO组相比,PBM干预组大鼠找到水下平台的时长缩短;在探索实验中,移除平台后大鼠在原平台象限探索的时间增加(P<0.05).与BCCAO组相比,PBM干预组GFAP、Iba1的免疫荧光强度减弱(P<0.01);与Sham组和BCCAO组相比,PBM干预组可增加海马DG区BrdU阳性细胞的数量(P<0.05);3组间NeuN阳性细胞数差异无统计学意义,而PBM干预组DCX阳性细胞数增加(P<0.001),且DCX+/NeuN+共定位的细胞数较BCCAO组增多(P<0.001).Western blot 结果显示,与BCCAO组相比,PBM干预组Iba1、NLRP3、cleaved caspase-1蛋白的表达量均降低(P<0.05),ASC蛋白的表达量差异无统计学意义.结论 PBM能有效改善慢性低灌注大鼠的空间学习记忆功能,抑制胶质细胞的激活、降低NLRP3炎症小体介导的炎症损伤,促进大鼠海马DG区内源性神经干细胞的再生.

为探讨不同剂量1 064 nm激光照射后猪皮肤组织损伤效应和修复的规律,为扩大激光的临床应用提供指导,本文采用基模光纤激光器输出不同功率1 064 nm的连续激光,通过方格阵列法对活体猪皮肤进行单次照射,剂量由小到大依次照射后,即刻观察皮肤损伤反应并计算其发生率,采用加权概率单位法计算损伤阈值ED50,并在照后6 h至28 d动态观察激光皮肤损伤斑的愈合情况和病理形态学变化.随着激光辐照剂量的增加,皮肤损伤由轻到重依次出现红斑、白斑和焦斑等不同类型的损伤斑.剂量低于70.0 J/cm2时,猪皮肤损伤表现为可逆的红斑反应;剂量为192.2 J/cm2时,猪皮肤损伤以焦斑为主(发生率约为51.4%);而剂量为425.0 J/cm2时,猪皮肤焦斑发生率可达到100.0%.1 064 nm激光致猪皮肤损伤阈值ED50 为50.8 J/cm2.病理形态学观察结果显示,照射后3～28 d,各照射组创面均出现不同程度的修复趋势,但这种趋势随着照射强度的增加而趋于减弱,且高于192.2 J/cm2的激光辐照组恢复趋势缓慢.小型猪皮肤经1 064 nm激光照射后,辐照剂量越大,皮肤损伤越重,组织修复趋势越慢,显示出较好的量效关系.本研究为激光皮肤损伤和修复过程的医疗应用提供了重要的试验和理论依据.

目的 构建载血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1 (lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX-1)-siRNA靶向超声微泡,研究其对大鼠动脉粥样硬化斑块的生物学作用.方法 薄膜-水化-超声乳化法构建载LOX1-siRNA纳米级超声微泡(nanobubbles,NBs-siRNA).从Wistar大鼠体内分离、培养动脉平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs).通过凝胶迁移阻滞实验与siRNA细胞内化实验验证超声微泡可运载siRNA进入靶细胞内;qRT-PCR及Western blot检测LOX1的mRNA和蛋白表达水平;油红O染色观察细胞内脂质聚集情况.构建Wistar大鼠动脉硬化模型,实验组经鼠尾静脉注射含有LOX-1-siRNA的NBs-siRNA微泡100 μg,并使用超声仪照射.治疗15 d后,取标本HE染色后与对照组对比动脉硬化斑块病变程度;免疫组化法检测斑块组织中LOX-1表达情况.结果 凝胶迁移阻滞实验结果显示,证实NBs与siRNA结合成功.激光共聚焦显微镜观察证实NBs可通过超声照射介导siRNA内化入VSMCs之中.qRT-PCR及Western blot实验结果显示实验组VSMCs LOX-1 mRNA及蛋白表达水平降低(P＜0.01).油红O染色显示实验组细胞泡沫化较oxLDL组减弱.组织标本HE染色表明实验组大鼠动脉斑块病变中内膜增厚、中膜萎缩及炎细胞浸润情况较对照组减轻;免疫组化实验结果显示,实验组动脉斑块中LOX-1表达水平较各对照组降低(P＜0.01).结论 成功制备能够有效运载LOX-1-siRNA的超声微泡,体内外实验证实该微泡可以在超声辐照下内化入靶细胞内部,下调LOX-1表达,减少泡沫细胞形成,降低动脉硬化斑块病变的严重程度.

目的 观察不同年龄SD大鼠膝关节对热损伤的耐受能力,探究年龄因素诱导膝关节骨关节炎发生的机制.方法 雄性SD大鼠按月龄分3组:青年组(1月龄)、中年组(6月龄)、老年组(18月龄).取各年龄组大鼠各3只,大鼠双侧膝关节腔注入100 μL浓度为100 mg/L的Cu9S5@SiO,用980 nm、0.72 W/cm2激光照射右侧膝关节,温度上升至50℃后持续5 min,左侧膝关节作为对照组.4周后,观察大鼠膝关节软骨组织损伤情况.分别提取青、中、老年SD大鼠原代膝关节软骨细胞,检测3种细胞的端粒相对长度鉴定软骨细胞的衰老程度.依据来源将提取的软骨细胞分为青年、中年、老年.CCK-8法检测各年龄软骨细胞正常培养时的增殖能力及对过氧化氢(H2O2)和白细胞介素(IL)-1β的耐受能力.使用50μmol/L H2O2和100 ng/mLIL-1β分别干预3种软骨细胞后以TUNEL凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况.结果 光热损伤4周后青、中、老年组大鼠软骨损伤程度依次增加.CCK-8法显示青、中、老年大鼠膝关节软骨细胞增殖能力依次减弱(P＜0.05).在H2O2作用下,中年大鼠软骨细胞抵抗能力最强,青年次之,老年最弱.IL-1β作用下,当其浓度≤200 ng/mL时能促进青、中年大鼠软骨细胞增殖能力,浓度＞60 ng/mL时明显抑制老年大鼠软骨细胞增殖能力.TUNEL细胞凋亡检测显示50 μmol/L H2O2干预后青、中、老年大鼠软骨细胞凋亡比例依次减低(P＜0.05);100 ng/mL IL-1β干预后各年龄大鼠软骨细胞凋亡均无明显增高(P＞0.05).结论 不同年龄大鼠软骨细胞的增殖能力、对活性氧(ROS)和IL-1β的耐受能力差异显著.年龄越大,其自身增殖活性越低,抵抗外界损伤的能力越弱.初步验证了年龄因素诱导骨关节炎发生的机制.

目的:应用反射式共聚焦显微镜(reflectance confocal microscope,RCM)观察臭氧外用治疗带状疱疹的临床疗效及安全性.方法:将60例带状疱疹患者分为对照组和臭氧组(n=30).对照组口服伐昔洛韦片剂或颗粒剂(每日300 mg,每日3次),同时采用局部弱激光照射治疗,外用2％莫匹罗星软膏(每日2次);臭氧组将莫匹罗星改为臭氧水湿敷(每日1次)和臭氧油外用(每日2次),分别在治疗前和治疗的第3,7,14天观察临床症状和体征的变化,并用RCM检测靶部位水疱内圆盘状细胞的变化,比较两组的临床疗效并记录不良反应.结果:治疗第7天,臭氧组包涵体消失,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);各时间点臭氧组疼痛评分下降百分比明显高于对照组(P＜0.05);臭氧组患者总有效率为100％,对照组为86.7％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者均未见明显不良反应和并发症发生.结论:臭氧外用治疗带状疱疹有助于缓解患者疼痛、缩短病程、提高临床疗效,无明显不良反应,值得临床推广应用.

背景:通过施加外在因素可改变壳聚糖和Nafion的生物相容性.目的:探究不同弱激光(红光、蓝光、绿光)照射对多孔壳聚糖膜和Nafion膜材料生物相容性的影响.方法:①多孔壳聚糖膜实验:将48只SD大鼠随机分为红光、蓝光、绿光照射组,每组16只.沿脊柱为对称轴,在大鼠背部皮下组织两侧各植入2个多孔壳聚糖圆形膜,红光照射组每只大鼠4个膜材料分别以红色弱激光照射0,2,4,6 min,每天均在同一时间段内照射,持续照射至材料植入7,14,28,56 d取材,进行组织学分析;蓝、绿光照射处理方式同红光照射组;②Nafion膜实验:将24只SD大鼠随机分为红光、蓝光、绿光照射组,每组8只.沿脊柱为对称轴,在大鼠背部皮下组织两侧各植入2个Nafion圆形膜,红光照射组每只大鼠4个膜材料分别以红色弱激光照射0,2,4,6 min,每天均在同一时间段内照射,持续照射至材料植入7,14 d取材,进行组织学分析;蓝、绿光照射处理方式同红光照射组.结果与结论:①红色弱激光照射后,多孔壳聚糖膜植入7 d时的红细胞平均密度相对较高,而对应的红细胞累积吸光度值也较大;其他植入时间点下,有的组别这两个值也较大,但变化趋势不尽相同,整体来看红色弱激光照射可提高膜材料周围的血管密度;②红色弱激光照射后,Nafion膜周围的血细胞密度和面积增加,植入7 d时的红细胞累积吸光度值增加较为明显,整体上,红色弱激光照射可显著提高Nafion膜周围的血管密度;③绿色弱激光照射4 min能有效减轻多孔壳聚糖膜周围炎症反应强度,而蓝色弱激光对多孔壳聚糖膜植入后的炎症影响较小;绿色弱激光可减弱Nafion膜植入7 d内的炎症反应,而蓝色弱激光没有这种效果;④红色弱激光照射对两种膜周围炎症反应和纤维包膜厚度的影响较小,蓝绿色弱激光对两种膜周围纤维包膜厚度和血管密度影响较小,而且变化无明显规律,整体上,绿光弱激光在一定程度能提高膜材料的生物相容性;⑤结果表明,弱激光照射在一定程度上能提高多孔壳聚糖膜和Nafion膜的生物相容性.

目的 评估弱激光血管外照射降低血压、血脂和血糖的疗效.方法 采用问卷调查方法,采集全国腕带式弱激光仪使用者的治疗信息,分析用户治疗前后的血压、血脂和血糖变化情况,采用单因素与多重线性回归方法分析弱激光照射降压的影响因素.结果 共回收问卷5801份,因缺失值较多,仅将有治疗前后对比数据的调查对象纳入分析,其中,高血压1335例,高血糖180例,血脂异常129例.治疗后仪器使用者的收缩压(SBP) (t=53.16,P＜0.001)、舒张压(DBP)(=34.17,P＜0.001)、三酰甘油(TG)(=7.87,P＜0.001)、总胆固醇(TC) (t=8.78,P＜0.001)和空腹血糖(FBG)水平(t=11.64,P＜0.001)均较使用前明显下降.与基线水平相比,治疗后仪器使用者的SBP、DBP、TG、TC和FBG分别下降了23.3 mmHg (14.50％) (1 mmHg =0.133 kPa)、10.6 mmHg (11.40％)、0.86 mmol/L(28.70％)、1.11 mmol/L (18.00％)和3.64 mmol/L (34.40％).不失眠者的DBP下降幅度明显高于失眠者(F=9.54,P =0.00),不饮酒者的DBP下降幅度明显高于饮酒者(F=5.08,P=0.02);男性TG下降幅度明显高于女性(Z=-2.48,P=0.01),有精神压力者的TG下降幅度显著高于无精神压力者(Z=-2.16,P=0.03),吸烟者TG下降幅度明显高于无吸烟用户(Z=-2.17,P=0.03).所有使用者的中位使用时间为616 d(1～5479 d),以四分位数分为＜272 d、272 ～698 d、699～1435 d和1437 d 4组,其SBP下降幅度分别为(-22.25±16.22)、(-21.59±15.24)、(-24.96±16.82)和(-24.66±15.88)mmHg,差异有统计学意义(F=3.55,P=0.01).多元线性回归分析结果显示,性别(β=-0.08,P =0.0178)和仪器使用时间(β=-0.09,P=0.0016)是SBP变化的影响因素;性别(β=-0.10,P=0.0039)、失眠(β=0.09,P=0.0015)和饮酒(β=0.10,P=0.0033)是DBP变化的影响因素.结论 长时间弱激光血管外照射有降压、降脂和降糖效果.