游离DNA（cell-free DNA, cfDNA）和内源性脱氧核糖核酸酶活性是相反的介质，可能会影响急性缺血性卒中发病后的炎症反应。德国汉诺威医学院的Grosse等进行了一项队列研究，旨在急性卒中患者中探讨这些标志物、循环炎症介质以及临床病程之间的联系，包括卒中相关感染（stroke-associated infections, SAI）。

目的:探索局部晚期食管鳞癌同期放化疗敏感性相关基因及分子标志物。方法:收集2017—2018年间31例在中国医学科学院肿瘤医院采用根治性同期放化疗的局部晚期食管鳞癌患者治疗前外周血并提取血浆Cf DNA，采用基于NovaSeq6000高通量测序平台的目标基因捕获测序技术检测靶基因与肿瘤突变负荷(TMB)变化。根据放化疗近期疗效将患者分为放化疗敏感组(CR+PR)和放化疗抗拒组(SD+PD)，综合生物信息学和临床资料分析两组间的基因突变和TMB差异。结果:31例患者测序数据中突变频率>10%的肿瘤相关基因为Tp53、NOTCH1、BRAF、FGFR4、CDKN2A、ATRX和AXIN2，他们在放化疗敏感组和放化疗抗拒组均有分布且相近。高频突变基因主要与7条信号通路相关，主要涉及凋亡信号通路和细胞周期信号通路等，它们主要参与的是RTK-RAS信号通路。放化疗敏感组患者TMB值高于放化疗抵抗组( P＝0.04)，但GXYLT1和KRT18基因在放化疗抵抗组患者的突变率高于放化疗敏感组( P<0.05)。 结论:Tp53、NOTCH1和CDKN2A可能是与食管鳞癌发生发展相关的高频突变基因，而KRT18、GXYLT1和TMB与局部晚期食管鳞癌患者同期放化疗敏感性密切相关。

目的:研究血清循环游离脱氧核糖核酸(cfDNA)、血管内皮生长因子A(VEGFA)与晚期胃癌患者化疗疗效和预后的关系.方法:选取2018年6月～2020年6月在空军第九八六医院接受含奥沙利铂方案化疗的晚期胃癌患者108例,所有患者均接受含奥沙利铂方案化疗,化疗2个周期后,根据实体瘤疗效评价标准(RECIST)1.1版评估疗效分为敏感组和不敏感组,比较两组血清cfDNA、VEGFA水平;随访24个月,Kaplan-Meier生存曲线分析血清cfDNA、VEGFA高表达和低表达组的总生存期(OS),采用Cox风险比例模型进行预后多因素分析.结果:不敏感组血清cfDNA、VEGFA水平显著高于敏感组(P＜0.05).cfDNA、VEGFA高表达组患者中位OS均明显短于cfDNA、VEGFA低表达组(P＜0.05).Cox回归模型单因素分析显示,性别、年龄、部位与晚期胃癌预后无关(P＞0.05),而TNM分期Ⅳ期、分化程度低分化、有淋巴结转移、化疗疗效不敏感、cfDNA高水平、VEGFA高水平与晚期胃癌预后差显著相关(P＜0.05).Cox回归模型多因素分析显示,淋巴结转移、化疗疗效不敏感及cfDNA、VEGFA水平高是晚期胃癌患者预后的危险因素(P＜0.05).结论:血清cfDNA、VEGFA水平检测有助于晚期胃癌患者化疗疗效监测和预后评估.

目的 探讨早期血清循环游离DNA(cf-DNA)水平对腹部外伤合并脓毒症患者预后的预测价值.方法 62例腹部外伤合并脓毒症患者根据最终结果分为存活组(51例)和病死组(11例).采集发病6h内血样标本,直接荧光分析法检测血清cf-DNA水平.应用散点图以及Spearman秩相关分析评价血清cf-DNA水平与急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭估计(SOFA)评分及炎症指标之间的相关性.结果 病死组血清cf-DNA和CRP水平、APACHEⅡ评分、SOFA评分以及中性粒细胞计数均高于存活组(P＜0.05或P＜0.01).脓毒症早期血清cf-DNA水平与APACHEⅡ评分(rs=0.352,P＜0.01)、SOFA评分(rs=0.300,P＜0.05)、血清CRP水平(n=0.377,P＜0.01)和中性粒细胞计数(rs=0.342,P＜0.01)呈正相关.以0.876μg/ml为诊断界值,血清cf-DNA预测患者存活的灵敏度为90.8％,特异度为82.4％.血清cf-DNA、SOFA评分、APACHEⅡ评分和CRP预测患者存活的AUC分别为0.911[95％CI(0.831～0.990)]、0.775[95％CI(0.640～0.910)]、0.840[95％CI(0.731～0.949)]和0.743[95％CI(0.562～0.925)].结论 腹部外伤合并脓毒症患者早期血清cf-DNA水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分及炎性指标相关.与APACHEⅡ评分和SOFA评分相比,血清cf-DNA水平对患者预后具有更好的预测优势.

目的 基于二代测序(NGS)技术对肺癌患者外周血游离表皮生长因子受体(EGFR)、鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)、人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)、MNNG HOS转化基因(MET)、磷脂酰肌醇激酶催化亚基α多肽基因(PIK3CA)及人抑癌基因TP53(T P53)基因的突变情况进行检测,分析其与临床病理特征的相关性,以期协助肺癌的临床诊疗.方法 前瞻性纳入2017年12月至2018年7月就诊于空军军医大学唐都医院的194例肺癌患者,采用NGS检测受试者血液样本中游离EGFR、KRAS、PTEN、MET、PIK3CA及TP53基因的突变情况,初步探讨基因突变与临床病理特征之间的相关性及危险因素,并进一步分析各基因之间的关系.结果 EGFR在女性(P=0.007)、不吸烟(P=0.034)的肺癌患者中的突变率明显升高;KRAS突变与肿瘤转移显著相关(P=0.029);PTEN、MET、PIK3CA突变与临床病理特征之间均无相关性(P值均>0.05);T P53突变与病理类型显著相关(P=0.001).性别与吸烟史是EGFR突变的危险因素(P=0.007、0.035),病理类型是TP53突变的危险因素.EGFR与PIK3CA之间有相关性(P=0.005);KRAS与PTEN、MET、PIK3CA、TP53之间均显著相关(P值均<0.05);MET与PIK3CA有相关性(P=0.007),但与TP53之间无相关性(P=0.246);PIK3CA与TP53之间无相关性(P=0.075).结论 基于NGS技术可密切监测肺癌患者外周血基因突变谱的改变,对精确个体化治疗具有良好的临床应用价值.

目的:研究血清循环游离脱氧核糖核酸(cfDNA)水平与人类表皮生长因子受体2(HER2)阴性胃癌化疗疗效的相关性.方法:以我院2018年1月至2019年5月收治的60例不能手术的Ⅲ～Ⅳ期HER2阴性单纯化疗的胃癌患者为研究对象,化疗方案为奥沙利铂联合替吉奥(奥沙利铂130 mg ? m-2静脉滴注,第1天,替吉奥40 mg·m-2 口服,每天2次,第1～14天,每21 d重复).每化疗2个周期后评估疗效,评估标准根据实体瘤疗效的评价标准(RECIST 1.1版),直至疾病进展或患者死亡.另选我院同期体检正常者60例为对照组,比较两组血清cfDNA水平之间的差异,分析治疗组患者的血清cfDNA水平与化疗疗效、组织分化程度、有无淋巴结转移、TNM分期、有无远处转移之间的相关性.结果:胃癌患者的血清cfDNA水平显著高于对照组(P ＜0.05);不同性别、年龄患者的血清cfDNA水平差异无统计学意义(P ＞0.05);组织分化程度、有无淋巴结转移、TNM分期、有无远处转移患者血清cfDNA差异具有统计学意义(P ＜0.05);客观有效患者的血清cfDNA水平显著低于客观无效患者(P＜0.05).结论:血清cfDNA水平可方便且无创地预测HER2阴性胃癌患者化疗疗效和预后,从而可帮助临床医生及时调整和更换化疗方案,使治疗更为合理、科学和有效.

循环游离DNA(cfDNA)是循环体液中游离状态的DNA,其在体内的释放被认为与细胞的坏死、凋亡等相关.近年来cfDNA甲基化检测作为一种"液体活组织检查"技术已成为疾病诊疗中的研究热点.心肌梗死后外周血循环中cfDNA的含量升高,并发现cfDNA升高与心肌梗死后并发症的发生有相关性.近年来通过甲基化模式分析寻找到心肌细胞特异性的cfDNA,使cfDNA检测能够为心肌梗死提供更多客观的评估证据.该文综述近几年国内外cfDNA甲基化模式分析在心肌梗死中的研究进展.

目的 比较单钠尿酸盐(monosodium urate,MSU)刺激下外周血中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)水平在痛风急性发作期的作用及其临床意义.方法 收集2017年1月至2018年1月就诊于内蒙古医科大学附属医院风湿免疫科的急性发作期痛风性关节炎患者56例入组为痛风组,以及25例健康志愿者为健康对照组(HC组).PicoGreen?荧光分光光度法测定血浆样品游离脱氧核糖核酸(cell-free deoxyribonucleic acid,cfDNA)含量,酶联免疫吸附剂测定法检测血浆样品中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)含量,比较MSU体外诱导下,痛风急性发作期与健康对照、治疗后缓解期外周血NETs生成水平的差异,以及与临床表现、实验室检查以及疾病活动性、严重性评分的相关性.结果 在MSU的诱导下,痛风急性发作期患者的cfDNA、NE含量均显著高于健康对照组(P<0.01).痛风急性期患者外周血中cfDNA、NE含量与痛风活动评分(gout activity score,GAS)和痛风影响量表(gout impact scale,GIS)呈高度的正相关性(r>0.6,P<0.01);缓解期患者外周血中cfDNA、NE含量较其急性发作期明显下降(P=0.001).GAS与血浆NETs的变化(DNA,NE)显示中等程度的正相关性(r>0.5,P<0.01).结论 尿酸诱导痛风急性发作期患者生成循环NETs,可能参与加重痛风的炎症进程,本研究发现NETs的水平与急性发作期的疾病活动性及病情严重性呈正相关,有利于痛风病情的评价和监控.

脱氧核糖核酸酶( DNase )是特异性靶向 DNA的核酸内切酶.DNase 中发挥主要作用的是DNase1家族,其主要功能为降解体内异常的DNA.DNase1 家族属于 Tat D 蛋白家族,现有 DNase1、DNase1 L1、DNase1 L2和DNase1 L3共4个成员,成员之间具有很高的序列同源性,但表达部位却有很大差异[1].DNase1是该家族最先被发现的成员,有助于清除循环中游离的DNA.缺乏DNase1 时,血清中DNA/染色质复合物将会持续存在,导致自身抗体的形成.DNase1在系统性红斑狼疮( systemic lu-pus erythematosus,SLE)、类风湿关节炎、干燥综合征、甲状腺自身免疫性疾病和炎症性肠病患者的血清中活性降低[2-4] ,是许多自身免疫性疾病(尤其是SLE)的危险因素[5-7].DNase1 是肾小管上皮细胞中消化DNA的主要核酸酶[8] ,其功能障碍会导致严重的狼疮性肾炎[9].Dnase1 已被证明可以成功地消化囊性纤维化中的游离DNA,可以清除黏液,达到治疗目的[10].