目的 探讨循环微小核糖核酸(miR)-126-3p在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达及诊断价值.方法 收集多中心miR芯片及测序数据探讨NSCLC的循环miR-126-3p的表达差异.为了评估循环miR-126-3p综合表达水平,计算标准化均数差(SMD)和综合受试者工作特征(sROC)曲线,分析sROC曲线的曲线下面积(AUC),探讨灵敏度、特异度、阳性阴性似然比,并结合组织进一步综合分析循环miR-126-3p表达.通过miRDB、starBase v2.0和TargetScan 7.1,结合NSCLC中的上调差异基因,利用互补序列方法筛选了循环miR-126-3p潜在靶基因.结果 基于6项循环miR数据集发现循环miR-126-3p表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),受试者工作曲线显示循环miR-126-3p有较强的诊断效能(AUC＞0.5),而在199例NSCLC组中综合表达低于对照组(SMD=-1.46).sROC曲线显示循环miR-126-3p区分NSCLC组和对照组有高准确性(AUC=0.91),Egger's检验不存在发表偏倚(P＞0.05),灵敏度、特异度均≥0.80,阳性似然比、阴性似然比为5.37和0.18.此外,对26个数据集1 320例NSCLC循环和组织综合分析显示,循环miR-126-3p在NSCLC组中表达低于对照组(SMD=-2.07).sROC曲线显示低表达的循环miR-126-3p在区分NSCLC组和对照组有高准确性(AUC=0.97).此外,筛选得到循环miR-126-3p的潜在靶基因ADAM9和SLC7A5在NSCLC组中表达均高于对照组.结论 低表达的循环miR-126-3p可能是NSCLC高准确性筛查的重要生物标志物.

目的:研究血清中微小核糖核酸(miRNA)的特异性表达与儿童扩张型心肌病(DCM)发生的相关性。方法:收集2013年11月至2016年3月就诊于北京安贞医院小儿心脏中心且被确诊为DCM的儿童血清(DCM组，16例)及同期于北京安贞医院体检的年龄性别匹配的健康儿童血清(健康对照组，12例)，并进行miRNA测序。后期扩大样本量(DCM组扩大为30例，对照组扩大为16例)，对测序结果中有统计学意义的11种miRNAs行实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)验证。结果:血清miRNA测序结果，DCM组患儿较健康对照组儿童有172个miRNAs上调(fold change>2， P<0.001)，未发现下调的miRNAs。选择显著上调的top11miRNAs进行qRT-PCR试验验证，发现DCM组患儿血清中8个miRNAs(let-7f、let-7g、miR142-5p、miR143-3p、miR26a、miR27a-3p、miR27b-3p、miR126-3p)显著上调，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。在诊断DCM的受试者工作特征(ROC)曲线中，血清miR142-5p、miR143-3p、miR27b-3p、miR126-3p的曲线下面积分别为0.983、0.992、0.915、0.950，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:本研究发现4个血清miRNAs(miR-142-5p、miR-126-3p、miR-143-3p和miR-27b-3p)可用来区分DCM患儿和健康儿童。循环miRNAs可作为有效的儿童DCM筛查工具。

目的:探讨常规内参基因U6和Cel-miR-39用于结核性脑膜炎患者脑脊液微小核糖核酸（miRNA）定量检测的可行性，并初步用于脑脊液miRNA定量检测分析。方法:本研究选取首都医科大学附属北京胸科医院常规脑脊液检测后保存的标本，根据最终诊断依据纳入结核性脑膜炎患者36例、病毒性脑膜炎患者34例。提取其脑脊液标本miRNA，采用TaqMan探针法检测miRNA的表达水平。采用GeNorm、NormFinder和Bestkeeper软件分析内参基因miRNA的稳定性，采用2 -ΔCt方法计算靶标miRNA的相对表达量。标本重复检测的一致性分析采用Pearson检验。靶标基因在两组间的表达差异比较采用 t检验。 结果:70份脑脊液标本中，U6检测的循环阈值（Ct）为（30.40±3.30）个循环，表达丰度较低，Cel-miR-39检测的C t值为（21.49±0.70）个循环，表达丰度适中。内参和靶标基因miRNA在重复样本检测中一致性均较好（ r>0.931, P<0.001）。根据3种软件分析结果，Cel-miR-39在70份脑脊液标本中表达稳定性更高，更适合作为脑脊液miRNA检测的内参基因。以Cel-miR-39为内参，靶标基因miR-126-3p（1.13±0.41比3.34±0.82, t=2.452, P=0.016）、miR-130a-3p（0.56±0.10比2.59±0.70, t=2.960, P=0.004）和miR-151a-3p（0.64±0.25比2.11±0.33, t=3.536, P=0.001）在结核性脑膜炎组脑脊液中的相对表达量均显著低于病毒性脑膜炎组。 结论:Cel-miR-39可作为结核性脑膜炎患者脑脊液中miRNA定量检测的标准内参，脑脊液中miR-126-3p、miR-130a-3p和miR-151a-3p的相对表达量在结核性脑膜炎患者和病毒性脑膜炎患者之间存在差异。

目的 分析慢性心力衰竭(CHF)合并心房颤动(AF)患者血清微小核糖核酸(miR)-126、miR-222 与心功能和主要不良心血管事件(MACE)的关系.方法 选取2020 年1 月—2022 年10 月徐州医科大学附属连云港医院心内科收治的CHF合并AF患者120 例为AF组,根据纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级分为Ⅰ级22 例、Ⅱ级29例、Ⅲ级26 例、Ⅳ级43 例.随访3 个月,根据是否发生MACE分为MACE亚组和非MACE亚组;选取同期收治的未合并AF的CHF患者100 例为非AF组.另选取同期医院体检健康志愿者80 例为健康对照组.检测并比较3 组及不同NYHA心功能分级CHF合并AF患者血清miR-126、miR-222 水平;分析CHF合并AF患者血清miR-126、miR-222 水平与NYHA心功能分级的相关性;多因素Logistic回归分析CHF合并AF患者发生MACE的影响因素.受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-126、miR-222 水平对CHF合并AF患者发生MACE的预测价值.结果 血清miR-126、miR-222 水平AF组<非AF组<健康对照组(F/P =277.894/<0.001、410.653/<0.001);血清miR-126、miR-222 水平Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级依次降低(F/P =147.517/<0.001、115.625/<0.001);CHF合并AF患者血清miR-126、miR-222 水平与NYHA心功能分级呈负相关(rs=-0.501、-0.496,P均<0.001).随访 3 个月,CHF合并AF患者 120例MACE发生率为31.67%(38/120),NYHA心功能分级Ⅲ～Ⅳ级和N末端前体B型钠尿肽升高为CHF合并AF患者MACE的独立危险因素[OR(95%CI)=1.872(1.381～2.538)、1.002(1.000～1.004)],血清miR-126 升高、miR-222 升高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.679(0.535～0.862)、0.531(0.379～0.743)];血清miR-126、miR-222 及二者联合预测CHF合并AF患者发生MACE的AUC分别为0.734、0.741、0.839,二者联合优于各自单独预测效能(Z = 4.235,4.136,P = 0.013,0.014).结论 CHF 合并 AF 患者的血清 miR-126、miR-222 水平降低,与心功能降低和MACE发生有关,血清miR-126、miR-222 水平联合检测对CHF合并AF患者MACE具有较高的预测效能.

目的 探讨血浆miR-155在人乳头瘤病毒(human papilloma virus, HPV)阳性宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)患者中的表达及临床意义, 评估其对HPV阳性宫颈癌的早期诊断价值.方法 选取2014年3月-2017年3月涿州市医院收治的126例HPV阳性宫颈癌患者(宫颈癌组)、65例HPV阳性CIN患者(CIN组)和65例HPV单纯阳性/HPV阳性子宫良性病变者(对照组),采用RT-PCR检测血浆miRNA-155水平,分析miRNA-155表达与宫颈癌临床病理特征的关系.应用ROC曲线评价miRNA-155、SCCA及CA125对HPV阳性宫颈癌的诊断价值.Pearson相关分析HPV阳性宫颈癌患者血浆miRNA-155与SCCA、CA125的相关性.结果 宫颈癌组血浆miRNA-155、SCCA及CA125表达水平均明显高于CIN组和对照组[miRNA-155(2-ΔΔCt): 15.28 ± 6.37 vs 9.53 ± 2.26和6.27 ± 1.48; SCCA(ng/ml):10.25 ± 2.47 vs 3.57 ± 0.95和0.92 ± 0.24; CA125(U/ml): 48.72 ± 11.93 vs 20.28 ± 7.46和16.73 ±6.12,P均 ＜ 0.01]o HPV阳性宫颈癌患者血浆miRNA-155表达水平与临床分期、淋巴结转移及浸润深度相关(P ＜ 0.05).血浆miRNA-155诊断HPV阳性宫颈癌和CIN的最佳截值分别为12.65、7.82,敏感度分别为87.2％和81.3％,特异度分别为84.6％和80.4％.宫颈癌组血浆miRNA-155与SCCA呈正相关(r=0.702,P ＜ 0.01).结论 血浆miRNA-l55在HPV阳性宫颈癌患者中异常高表达,可作为HPV阳性宫颈癌早期诊断和CIN鉴别诊断的生物学标记物.

目的 检测微小核糖核酸(microribonucleicacids,miRNA)在老年性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)患者中的表达,并探讨miRNA的表达量与AMD病程之间的关系.方法 选取2014年1月至2016年11月于同济大学附属第十人民医院眼科门诊就诊的AMD患者6例为试验组,并选取同期6名正常人为对照组,通过基因芯片技术检测两组血液中miR-NA的表达量.扩大样本的病例对照研究中共纳入126例AMD患者和140名正常人,检测其血液样本中miRNA的表达,比较两组人群间miRNA的表达量差异.结果 通过基因芯片技术,在试验组与对照组间共检测出216个miRNA存在表达差异(均为P＜0.05),与对照组相比,试验组中111个miRNA表达量上升,105个miRNA表达量下降,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).扩大样本的病例对照研究结果表明,在AMD患者中,miR-27a-3p、miR-29b-3p、miR-195-5p的表达量显著上升,同时,湿性AMD患者血液中miR-27a-3p的表达量高于干性AMD患者,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 AMD患者外周血中miRNA表达量水平有明显变化,miR-27a-3p、miR-29b-3p、miR-195-5p可能成为AMD血清学诊断和预后的标志物.

目的 探索NO诱导的胎盘间充质干细胞(PMSCs)外泌体对脓毒症大鼠的治疗效果及药理机制.方法 分别利用NO、miR-126抑制剂、无效对照抑制剂对PMSCs进行诱导培养,超速离心获取3种外泌体(N-Exo、I-Exo和Exo).利用透射电镜观察外泌体形态,qPCR检测miR-126含量.取清洁级SD大鼠160只,等分成4组.对照组(假手术+PBS)、脓毒症组(CLP+ PBS)、N-Exo组(CLP+ N-Exo)、I-Exo组(CLP+ I-Exo).利用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建大鼠脓毒症模型.检测各组大鼠术后48 h血生化指标(血清ALT、AST、BUN、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ、IL-1β含量);取肺和肾,HE染色进行病理评分、测量血管微渗漏指数和干/湿重之比;Western blot检测肾脏内高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)、Toll样受体2(TRL-2)、TRL4、p-p65蛋白含量、qPCR测量miR-126-3p和miR-126-5p的含量;最终观察各组大鼠7d存活率.结果 ①miR-126含量:N-Exo＞ Exo＞ I-Exo(P＜0.05);②7d存活率:脓毒症组和I-Exo组显著低于N-Exo组和对照组(P＜0.05);③肝肾功能及炎症因子含量、肺和肾病理评分、血管微渗漏及干/湿重之比:脓毒症组和I-Exo组显著高于N-Exo组和对照组(P＜0.05);④肾脏内miR-126-3p、miR-126-5p及HMGB1、RAGE、TRL-2、TRL-4、p-p65蛋白含量:脓毒症组和I-Exo组显著低于N-Exo组和对照组(P＜0.05).结论 N-Exo可能是通过miR-126-HMGB1-NF-κB来抑制炎症反应,保护血管内皮细胞,最终提高脓毒症大鼠的生存率.

目的 探讨支气管哮喘患儿血清25(OH)D3水平与血清及支气管肺泡灌洗液中微小核糖核酸126 (microRNA-126)的关系.方法 51例支气管哮喘患儿(哮喘组)依据血清25(OH)D3水平分为3组,维生素D适当组、不足组和缺乏组.同期选择15例因支气管异物接受治疗的患儿为对照组,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测各组患儿血清25(OH)D3水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(q-RT-PCR)确定血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中miR-126相对水平.结果 哮喘组血清25(OH)D3明显低于对照组、血清miR-126、BALF miR-126明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).各组患儿最大呼气流量(PEF)、第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1％)以及第1秒用力呼气量占所有呼气量的比例(FEV1/FVC)水平比较,差异有统计学意义(P＜0.05).各组血清和BALF中miR-126依次缺乏组＞不足组＞适当组＞对照组(P＜0.05).血清25(OH)D3水平与BALF中miR-126呈负相关(P＜0.05),与PEF、FEV1％、FEV 1/FVC呈正相关(P＜0.05).结论 低水平25(OH)D3可能促使miR-126在哮喘患儿的外周血及BALF中上调,并导致免疫失衡,肺功能水平下调,与疾病严重程度存在一定的联系.

目的 探讨缺血后适应在大鼠心肌缺血再灌注时发挥保护作用的相关机制.方法 将30只成年雄性SD大鼠每组10只,分为三组,假手术组(Sham组):开胸后将6-0无损伤缝线穿过左冠状动脉前降支不阻断血管.缺血再灌注损伤组(I/R组):使用6-0无损伤缝线阻断左冠状动脉30 min后开放血管.缺血后适应组(Ipost组):缺血30 min后,立即行缺血后适应(开放10 s阻断10 s,反复3次).采用伊文思蓝和氯化三苯基四氮唑染色法测定缺血面积和梗死面积;通过实时荧光定量PCR检测各组大鼠再灌注2 h体内miRNA-21、miRNA-126表达水平;通过ELISA法、硝酸还原酶法测定各组大鼠再灌注2 h体内TNF-α、IL-6和NO浓度.结果 Sham组未见明显心肌缺血和坏死面积,Ipost组大鼠心肌AAR/LV与I/R组比较差异无统计学意义[(39.04±6.81)％比(41.05±8.04)％,P>0.05],Ipost组大鼠心肌IS/AAR则低于I/R组[(25.64±5.76)％比(47.25±7.26)％,P<0.05].I/R组、Ipost组术后miRNA-21、miRNA-126表达水平较Sham组升高,Ipost组升高更为明显.I/R组大鼠血清TNF-α、IL-6浓度明显高于Ipost组,I/R组血清NO浓度明显低于Ipost组.miRNA-21与TNF-α、IL-6呈正相关(r=-0.934、-0.925,P<0.05),与NO无明显相关性(r=0.135,P>0.05).miRNA-126与TNF-α、IL-6呈负相关(r=-0.926、-0.935,P<0.05)、与NO呈正相关性(r=0.553,P<0.05).结论 缺血后适应处理可减少大鼠心肌梗死面积,改善大鼠心肌缺血再灌注损伤.其心肌保护内在机制可能与调控miRNA-21、miRNA-126表达,抑制相关炎性因子释放有关.

检测胃癌组织中miR-126和PIK3CG、MMP-7的表达情况,为探索miR-126与胃癌相关性的研究提供新的理论依据.选取2015年3—11月内蒙古医科大学附属医院收治的胃癌患者50例,术前均未经放化疗.免疫组织化学检测PIK3CG和MMP-7在胃癌组织和距癌灶>5 cm的胃正常组织中的表达水平;随机抽取25对胃癌组织和距癌灶>5 cm的胃正常组织,应用real-time PCR检测miR-126的表达水平.PIK3CG、MMP-7在胃癌组织中高表达,均与TNM分期和有无淋巴结转移相关(P<0.05),与年龄、性别、分化程度和肿瘤大小无明显相关性(P>0.05);miRNA-126在胃癌组织中低表达(t=-20.986,P<0.05),且与患者的性别、年龄及肿瘤大小无明显相关性(P>0.05),与肿瘤分化程度、TNM分期和有无淋巴结转移有明显相关性(P<0.05).PIK3CG、MMP-7在胃癌组织中高表达,有致癌作用;miRNA-126在胃癌组织中低表达,有抑癌作用;miRNA-126与PIK3CG及MMP-7有相互抑制作用,可认为miRNA-126可抑制该2种因子的表达.