目的:探讨微小RNA-135a(miR-135a)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、迁移和凋亡的影响及可能的机制。方法:构建miR-135a过表达和空载病毒的Saos-2细胞分别为miR-135a UP组(实验组)，Control组(对照组)。采用实时定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)检测c-Myc信使核糖核酸(mRNA)的改变，采用蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测c-Myc蛋白及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)(PAM)通路蛋白的改变。细胞集落形成和细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞增殖能力，划痕和Transwell实验分别检测迁移和侵袭能力，细胞流式技术检测抗凋亡能力，两组比较采用 t检验。 结果:miR-135a表达量实验组高于对照组(59.006±5.034比1.008±0.151， t＝23.031， P<0.01)，c-Myc与PAM通路蛋白表达量实验组低于对照组，细胞增殖能力实验组低于对照组(CCK-8法：1.311±0.048比2.029±0.046， t＝24.301， P<0.01；集落形成：0.210±0.034比1.000±0.016， t＝36.715， P<0.01)，迁移能力实验组低于对照组(0.539±0.097比1.000±0.037， t＝7.694， P<0.01)，侵袭能力实验组低于对照组[(77.333±28.885)/视野比(701.000±77.149)/视野， t＝13.113， P<0.01]，凋亡率实验组高于对照组(87.267±2.616比36.933±5.460， t＝14.399， P<0.01)。 结论:miR-135a通过调控c-Myc及PAM通路抑制OS细胞的增殖、迁移、侵袭及抗凋亡能力。

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)相关血清微小核糖核酸(miRNA)对糖尿病肾病(DKD)早期诊断的临床价值.方法 收集2019年1月至2021年12月在缙云县壶镇镇中心卫生院及缙云县人民医院就诊的2型糖尿病(T2DM)患者260例作为研究对象.根据尿白蛋白排泄率(UAER),研究对象分为单纯T2DM组135例、早期DKD组82例、临床DKD组43例.另选取50名健康志愿者作为对照组.检测各组血清miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c水平和TGF-β1水平,并进行指标间的相关关系分析.利用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miRNAs对DKD的早期诊断价值.结果 单纯T2DM组、早期DKD组和临床DKD组患者血清miR-27a、miR-27b、miR-200c水平及TGF-β1水平均高于对照组,miR-29c水平低于对照组(F=235.624、70.351、108.127、672.304,P均＜0.001).TGF-β1与血清 miR-27a、miR-27b、miR-200c呈正相关,与 miR-29c 呈负相关(r=0.668、0.429、0.618、-0.502,P均＜0.001).血清 miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c对T2DM患者发生DKD的诊断曲线下面积(AUC)为0.913、0.775、0.812、0.894,miR-27a和miR-200c的敏感度和特异度均＞0.7.验证队列中血清miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c对T2DM患者发生DKD的诊断AUC 分别为 0.901、0.787、0.802、0.896,差异有统计学意义(Z=-9.012,P＜0.0l).结论 血清 miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c对于早期DKD都有一定的诊断价值.

目的 探究血清miR-135b和miR-145 在未破裂颅内动脉瘤(unruptured intracranial aneurysm,UIA)患者中的表达水平及临床价值.方法 选取 2018 年 5 月～2020 年 3 月邯郸市第一医院神外三科收治的 102 例UIA患者作为研究组,另选同期健康体检者95例作为对照组,同时收集受试者一般资料进行比较.实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测血清中miR-135b和miR-145 表达水平;ROC曲线分析血清miR-135b和miR-145 对UIA的诊断价值;Logistic回归分析UIA形成的影响因素.结果 研究组中高血压(62.75%)、高血脂(60.00%)、吸烟史(64.76%)、饮酒史(70.59%)患者所占比例高于对照组(46.72%,44.21%,47.37%,53.68%),差异均有统计学意义(χ2=5.361,4.986,6.139,5.993,均P＜0.05);研究组患者血清miR-135b(0.79±0.20)表达水平低于对照组(1.03±0.27),血清miR-145 水平(1.28±0.24)高于对照组(0.99±0.22),差异均有统计学意义(t=7.122,8.821,均P＜0.05);与动脉瘤个数为 1 及动脉瘤直径<7mm的患者相比,动脉瘤个数≥2 及动脉瘤直径≥7mm的患者血清中miR-135b表达水平(0.68±0.18 vs 0.84±0.21,0.71±0.17mm vs 0.85±0.22mm)降低,miR-145水平(1.37±0.31mm vs 1.24±0.21mm,1.37±0.30mm vs 1.21±0.19mm)升高,差异均有统计学意义(t=2.472～3.689,均P＜0.05);血清miR-135b,miR-145 以及二者联合诊断UIA的曲线下面积(AUC)分别为 0.788,0.836 和 0.907,二者联合的诊断效能优于其各自单独检测(Z=4.236,3.226,均P＜0.05);Logistic回归分析结果显示,高血压(OR=1.326,95%CI=1.044～1.684)、吸烟史(OR=1.457,95%CI=1.077～1.970)、饮酒史(OR=1.879,95%CI=1.113～3.171)、血清miR-135b水平<0.94(OR=0.758,95%CI=0.612～0.939)、血清miR-145 水平≥1.22(OR=1.433,95%CI=1.113～1.845)均是UIA的影响因素(均P<0.05).结论 UIA患者血清miR-135b水平下调,miR-145 水平上调,二者与UIA的形成和发展存在相关性,且二者联合检测对UIA形成的诊断效能较高.

目的 探讨血清miR-135b水平与糖尿病肾病(DN)患者预后的关系.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测158例DN患者(DN组)和60例健康体检者(对照组)血清miR-135b水平,分析miR-135b与DN患者不同临床指标的关系.采用肾小球分级、间质性纤维化和小管萎缩评分(IFTA)及间质炎症来评价肾脏损伤情况,并应用ROC曲线分析血清miR-135b水平预测DN患者发生终末期肾病(ESRD)的价值.结果 DN组血清miR-135b水平为3.94±0.75,明显高于对照组0.64±0.13,差异有统计学意义(t=9.317,P＜0.01).血清miR-135b水平与蛋白尿定量、Cr,BUN及eGFR水平相关(P＜0.05).DN患者血清miR-135b水平与肾小球分级、IFTA及间质炎症均有关,且随着肾脏病理损伤程度的增加,血清miR-135b水平明显升高(P＜0.05).终末期肾病(ESRD)患者血清miR-135b水平(5.39±1.26)明显高于非ESRD患者(3.46±0.68),差异有统计学意义(t=4.157,P=0.025).ROC曲线显示,血清miR-135b水平预测DN患者发生ESRD的最佳截值取4.96时,其AUC[0.912(95％CI:0.850～0.973)]最大,敏感度(91.3％)和特异度(87.5％)较好.Spearman相关分析显示,DN患者血清miR-135b水平与蛋白尿定量、Cr,BUN,肾小球分级,IFTA及间质炎症呈正相关(r=0.504,0.396,0.438,0.475,0.351和0.559,均P＜0.01),与eGFR呈负相关(r=-0.637,P＜0.01).结论 血清miR-135b水平在DN患者中明显上调,且与DN患者肾脏损伤及预后不良有关.

目的 利用生物信息学方法分析前列腺癌(PCa)患者与健康男性血清差异表达基因.方法 将该院收治的PCa病例组和对照组血清进行微小核糖核酸(miRNA)和表达谱芯片检测,每组做3个独立生物学重复.对差异表达的基因进行生物信息学分析,并构建miRNA-mRNA互相作用调控网络图.采用Western blot及qRT-PCR方法检测锌指蛋白转录因子编码基因多形性腺瘤基因2(PLAGL2)、miR-135b-3p表达水平.结果 与对照组相比,病例组有11个miRNA、825个mRNA的表达发生显著变化.KEGG富集的通路有Hippo信号通路 、氨基酸生物合成通路等.与对照组相比,病例组PLAGL2水平降低,miR-135b-3p水平升高(P<0.05).PCa血清中PLAGL2表达与PCa患者初诊血清前列腺特异性抗原(PSA)、肿瘤临床分级 、Gleason评分显著相关(P<0.05).结论 miR-135b-3p靶向PLAGL2调控Hippo信号通路可能是导致PCa发生 、发展的重要原因之一.

目的:观察微小RNA-135b(miR-135b)、亮氨酸拉链肿瘤抑制基因1(LZTS1)信使核糖核酸(mRNA)、人附睾蛋白4(HE4)mRNA在卵巢癌中的表达水平及临床意义.方法:选取2018年1月至2020年11月本院接收的56例卵巢癌患者,收集手术切除的卵巢癌组织及其对应的癌旁组织.实时荧光定量PCR法检测两组卵巢组织中miR-135b、LZTS1 mRNA、HE4 mRNA的表达水平;分析卵巢癌组织中miR-135b、LZTS1 mRNA、HE4 mRNA表达水平与卵巢癌临床病理特征的关系及miR-135b、LZTS1 mRNA及HE4 mRNA表达水平对卵巢癌的诊断价值.结果:卵巢癌组miR-135b、HE4 mRNA表达水平均明显高于癌旁组(P均<0.05),LZTS1 mRNA表达水平明显低于癌旁组(P<0.05);卵巢癌组织中miR-135b、LZTS1 mRNA、HE4 mRNA表达水平与卵巢癌患者肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移相关(P均<0.05);miR-135b、LZTS1 mRNA、HE4 mRNA对卵巢癌诊断的曲线下面积(AUC)分别为0.781、0.755、0.773,对应截断值分别为1.25、0.87、1.20,此时对应灵敏度分别为74.5％、76.4％、72.7％,特异度分别为77.2％、72.9％、77.2％;三者联合诊断卵巢癌的AUC为0.943,其灵敏度、特异度分别为90.9％、84.2％.结论:卵巢癌患者卵巢癌组织中miR-135b、HE4 mRNA呈高表达,LZTS1 mRNA呈低表达,miR-135b、LZTS1 mRNA、HE4 mRNA对卵巢癌有一定诊断价值,三者联合可有效提高对卵巢癌的诊断效能.

目的:探索艾塞那肽结合厄贝沙坦治疗糖尿病肾病(DN)患者对其血清半乳糖凝集素-3(galectin-3)及微小核糖核酸(miR)-135b表达的影响.方法:选取2017年5月—2019年5月我院内科收治的132例DN患者,随机分成试验组和对照组,每组各66例.对照组患者在口服厄贝沙坦片,而试验组患者皮下注射艾塞那肽.对比两组患者临床疗效、血清galectin-3和miR-135b和不良反应等指标.结果:治疗后,两组患者空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)及低密度脂蛋白(LDL-C)等指标明显降低,而两组患者高密度脂蛋白(HDL-C)明显增加,且试验组患者上述指标变化幅度更高(P＜0.05);两组患者丙二醛(MDA)、血清肌酐(Scr)、尿微量白蛋白(Umalb)和尿白蛋白/肌酐比值(ACR)等指标明显降低,两组患者超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和肾小球滤过率(eGFR)等指标明显提高,且试验组患者上述指标变化幅度更高(P＜0.05);试验组患者临床总有效率为90.91％,明显高于对照组的77.27％(x2=4.587,P=0.032);两组患者血清galectin-3和miR-135b水平明显降低,且试验组患者血清galectin-3和miR-135b水平明显低于对照组(P＜0.05).治疗期间,两组患者不良反应事件差异无统计学意义(P＞0.05).结论:艾塞那肽结合厄贝沙坦治疗DN可有效改善患者血糖、血脂和血压水平,提高肾功能,降低氧化应激反应,优化临床疗效,下调血清galectin-3和miR-135b水平,延缓肾脏纤维化进程,安全有效.

目的 分析血清微小核糖核酸(miR)-671-3p、miR-135b水平与老年乳腺癌患者化疗耐药性的关系.方法 回顾性分析2019年1月至2020年2月在该院接受化疗且化疗结束后产生耐药性的52例老年乳腺癌患者作为耐药组,同期选取在该院接受化疗且化疗结束后未产生耐药性的52例老年乳腺癌患者作为敏感组,全部患者均接受6个周期新辅助化疗方案化疗,其患者资料完整,包括一般资料、实验室指标检测结果资料,重点分析化疗前血清miR-671-3p、miR-135b水平与老年乳腺癌患者化疗耐药性的关系.结果 耐药组血清miR-671-3p mRNA相对表达量低于敏感组,miR-135b mRNA相对表达量高于敏感组,差异有统计学意义(P<0.05);组间其他实验室指标比较差异无统计学意义(P>0.05);Spearman相关分析结果显示,老年乳腺癌患者血清miR-671-3p mRNA相对表达量与miR-135b mRNA相对表达量呈负相关(r<0,P<0.05);回归分析结果显示,血清miR-671-3p mRNA相对表达量高表达是老年乳腺癌患者化疗耐药性的保护因素(OR<1,P<0.05);miR-135b mRNA相对表达量高表达是老年乳腺癌患者化疗耐药性的危险因素(OR>1,P<0.05);绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),化疗前血清miR-671-3p mRNA相对表达量、miR-135b mRNA相对表达量预测老年乳腺癌患者化疗耐药性风险的曲线下面积均>0.70,预测价值较理想,且联合预测的价值最好.结论 血清miR-671-3p mRNA相对表达量、miR-135b mRNA相对表达量与老年乳腺癌患者化疗耐药性有关.

目的 检测肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)患者血清微小核糖核酸(microRNA,miRNA)-135b?5p的表达水平变化,探究其临床应用价值及其参与RCC发生、发展的作用机制.方法 采用荧光定量逆转录PCR(qRT?PCR)检测2022年1月至6月于东部战区总医院泌尿外科就诊且经病理学确诊的60例RCC患者及60例健康人对照血清miR?135b?5p的表达水平变化,评估其对于RCC患者的临床辅助筛查价值.体外培养RCC细胞系(ACHN、Caki?1)和正常肾小管上皮细胞系(HK?2),qRT?PCR检测细胞及细胞分泌的细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)中miR?135b?5p的表达水平;进一步应用生物信息学分析、EVs与细胞共培养、细胞功能等方法探究EVs miR?135b?5p参与RCC的初步作用分子机制.结果 RCC患者血清miR?135b?5p水平[6.932(5.524,9.964)]与健康人对照[5.534(4.373,6.555)]比较显著升高(U=1042,P<0.01).血清miR?135b?5p水平对于RCC筛查的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.711(95％CI:0.619～0.802).ACHN和Caki?1细胞中miR?135b?5p水平较正常HK?2细胞中的表达倍数显著明显升高(分别升高了7.821倍和1.919倍.P值分别为0.0003和0.0001);同时,ACHN和Caki?1 EVs中miR?135b?5p水平较HK?2 EVs中的表达倍数亦显著增高(分别升高了3.783倍和2.627倍.P值分别为0.0001和0.0004).生物信息学分析结合文献调研显示,miR?135b?5p可能通过调控潜在靶基因血管生成素样蛋白4(angiopoietin?like protein 4,ANGPTL4)的表达而参与血管生成.RCC EVs与人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)共培养结果显示,RCC细胞分泌的富含miR?135b?5p EVs在与HUVEC温育的不同时间点(4 h、6 h和8 h)均可明显促进内皮细胞成环,差异具有统计学意义(P值分别为0.0112,0.0057,0.0017).Western blot结果显示,mimics组ANGPTL4蛋白的表达水平为(0.616±0.003),较NC组(1.00±0.05)显著降低,差异具有统计学意义(t=12.44,P=0.0002).进一步分析发现与NC组相比,HUVEC中miR?135b?5p过表达组在连续观察时间内(2 h、4 h、6 h和8 h)的成环数明显增加(P值分别为0.0001,0.0001,0.0032,0.0095).结论 RCC患者血清、细胞系及细胞分泌的EVs miR?135b?5p表达水平均显著升高,血清miR?135b?5p水平测定对于RCC具有较高的临床辅助筛查价值,RCC细胞分泌EVs miR?135b?5p可通过调控ANGPTL4的表达,参与血管生成.