目的:构建反复种植失败（RIF）相关竞争性内源RNA（ceRNA）调控网络并进行临床样本验证。方法:从高通量基因表达数据库（GEO）得到RIF相关的长链非编码RNA（lncRNA）、微小RNA（miRNA）和信使RNA（mRNA）表达谱数据集，构建lncRNA-miRNA-mRNA的ceRNA调控网络。同时利用加权基因共表达网络分析（WGCNA）探索网络中的枢纽基因。回顾性收集2020—2021年于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行体外受精（IVF）/卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）助孕的RIF患者和对照组（助孕后至少有1次妊娠史）患者的子宫内膜组织，应用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）验证RIF相关枢纽基因的mRNA表达水平，并应用Western印迹和免疫组化技术验证血管细胞黏附分子-1（VCAM1）的蛋白表达水平。结果:构建了由32个lncRNA、31个miRNA和88个mRNA组成的RIF相关ceRNA调控网络，并利用WGCNA鉴定出7个RIF相关枢纽基因。将ceRNA网络中的88个mRNA与枢纽基因取交集得到2个RIF相关关键基因：VCAM1和白细胞介素2受体α（IL-2RA）。临床验证中，对照组和RIF组的年龄［ M（ Q1， Q3）］分别为26.50（25.00，34.00）和30.50（25.75，35.25）岁（ P>0.05）。与对照组相比，RIF组子宫内膜中VCAM1的mRNA［ M（ Q1， Q3）］［0.30（0.15，0.42）比0.99（0.69，1.34）， P=0.001］和蛋白表达水平［ M（ Q1， Q3）］［0.44（0.16，1.27）比2.39（1.58，2.58）， P<0.001］均降低。 结论:本研究成功构建了RIF相关ceRNA调控网络，并通过临床样本证实RIF患者子宫内膜组织中VCAM1的表达水平降低。

目的 探讨胃癌组织微小核糖核酸(miR)-23a-3p、miR-361-5p表达与磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路和预后的关系.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测120例胃癌患者胃癌组织与癌旁组织中miR-23a-3p、miR-361-5p、PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA 表达.Pearson 相关分析胃癌组织中 miR-23a-3p、miR-361-5p 表达与 PI3K mRNA、AKT mR-NA、mTOR mRNA表达的相关性,以及分析miR-23a-3p、miR-361-5p表达与胃癌患者临床病理特征的关系.Kaplan-Meier生存分析胃癌组织中不同miR-23a-3p、miR-361-5p表达与胃癌患者生存预后的关系.单因素及多因素COX回归分析影响胃癌患者生存预后因素.结果 相比于癌旁组织,胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达明显较低,而PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达明显较高,差异有统计学意义(均P＜0.05).Pearson 相关分析结果显示,胃癌组织中 miR-23a-3p、miR-361-5p 表达与 PI3K mRNA、AKT mR-NA、mTOR mRNA表达呈负相关(均P＜0.05).不同肿瘤TNM分期、肿瘤分化程度、术后辅助化疗及淋巴结转移的胃癌患者胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达比较,差异有统计学意义(均P＜0.05).miR-23a-3p低表达胃癌患者3年总体生存率为46.77％(29/62),低于miR-23a-3p高表达胃癌患者3年总体生存率[81.03％(47/58)],差异有统计学意义(Log-Rank x2=30.243,P＜0.001).miR-361-5p 低表达胃癌患者 3 年总体生存率为50.79％(32/63),低于miR-361-5p高表达胃癌患者3年总体生存率[77.19％(44/57)],差异有统计学意义(Log-Rank x2=24.932,P＜0.001).单因素及多因素Cox回归分析结果显示,TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移、无术后辅助化疗、miR-23a-3p低表达、miR-361-5p低表达是影响胃癌患者不良预后的独立危险因素(P＜0.05).结论 胃癌患者胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达降低,二者表达与PI3K/AKT/mTOR信号通路有关,是潜在的胃癌预后相关的肿瘤标志物.

目的:探讨急性缺血性脑卒中(AIS)颈动脉粥样硬化斑块性质影响因素及内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、微小核糖核酸-21(miR-21)对斑块性质、分级及预后的鉴别价值.方法:选取2020年2月～2023年2月太原钢铁(集团)有限公司总医院AIS患者120例,收集AIS患者的临床资料,测定其颈动脉粥样硬化斑块的性质和分级,测定AIS患者血清ESM-1、Lp-PLA2、miR-21水平,评定短期预后.比较不同斑块性质AIS患者临床资料及血清ESM-1、Lp-PLA2、miR-21水平,Logistic回归分析AIS颈动脉粥样硬化斑块性质影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价血清ESM-1、Lp-PLA2、miR-21对AIS颈动脉粥样硬化斑块性质的鉴别价值,Spearman相关性分析血清ESM-1、Lp-PLA2、miR-21与AIS颈动脉粥样硬化斑块分级的关系,比较联合血清ESM-1、Lp-PLA2、miR-21鉴别易损斑块与稳定斑块患者短期预后情况.结果:120例AIS患者经颈动脉超声检查可知,25例斑块未形成,95例斑块形成(其中稳定斑块38例,易损斑块57例);斑块分级:1级38例,2级32例,3级25例.易损斑块患者TG、LDL-C、ESM-1、Lp-PLA2、miR-21 均高于稳定斑块(P＜0.05);TG、LDL-C、ESM-1、Lp-PLA2、miR-21 均为 AIS 颈动脉粥样硬化斑块性质影响因素(P＜0.05);绘制ROC曲线,发现联合血清ESM-1、Lp-PLA2、miR-21鉴别诊断AIS颈动脉粥样硬化斑块性质的AUC最大,为0.899,具有较好诊断效能;血清ESM-1、Lp-PLA2、miR-21与AIS颈动脉粥样硬化斑块级别呈正相关关系(P＜0.05);联合血清ESM-1、Lp-PLA2、miR-21鉴别易损斑块患者短期预后良好率低于稳定斑块患者(P＜0.05).结论:TG、LDL-C、ESM-1、Lp-PLA2、miR-21为AIS患者颈动脉粥样硬化斑块性质影响因素,尤其是ESM-1、Lp-PLA2、miR-21可用于鉴别诊断斑块性质、分级,且在不同斑块性质患者短期预后评估中具有一定意义.

目的 分析食管癌放化疗期间并发肺部感染病原菌分布、微小核糖核酸(miR)表达水平及危险因素,并构建危险因素模型.方法 回顾性收集2020年1月-2022年12月黄冈市中心医院收治的298例放化疗食管癌患者的临床资料,根据是否并发肺部感染分为肺部感染组32例和无肺部感染组266例.统计肺部感染组病原菌分布特点,采用多因素Logistic回归分析放化疗食管癌患者肺部感染危险因素,并据其构建危险因素模型,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析危险因素模型对放化疗食管癌患者肺部感染的预测价值.结果 32例肺部感染患者分离出病原菌48株,革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌占比为62.50％、31.25％、6.25％.多因素Logistic回归分析结果显示,放疗时间≥30 d、血浆白蛋白≤30 g/L与外周血miR-574-5p表达水平较高为放化疗食管癌患者肺部感染的危险因素(P＜0.05).logit(P)=-10.351+放疗时间≥30 d × 1.109+血浆白蛋白≤30 g/L× 1.005+外周血miR-574-5p表达水平较高× 1.173,经ROC曲线分析显示当logit(P)＞12.15时,曲线下面积(AUC)为0.840,敏感度为68.75％,特异度为80.45％.结论 放化疗食管癌患者肺部感染病原菌主要为革兰阴性菌,可致外周血miR-18b-3p、miR-155、miR-574-5p表达水平升高,且其危险因素包括放疗时间、血浆白蛋白、miR-574-5p表达水平等.

目的 分析慢性心衰合并肺部感染患者病原菌与危险因素及血清微小核糖核酸-21(miRNA-21)表达水平.方法 选择2020年5月-2022年5月河南省人民医院收治的130例慢性心衰患者纳入研究,根据患者肺部感染情况将其分为感染组25例,未感染组105例;分析慢性心衰合并肺部感染的病原菌及两组血清miRNA-21水平,分析两组患者临床资料,归纳慢性心衰合并肺部感染的危险因素.结果 130例慢性心衰患者肺部感染25例,感染率为19.23％;25例慢性心衰合并肺部感染患者共培养分离病原菌32株,其中革兰阴性菌23株占71.88％,革兰阳性菌8株占25.00％,真菌1株占3.13％;将单因素分析具有统计学意义的指标作为自变量,慢性心衰合并肺部感染情况作为因变量,多因素Logistic分析结果显示,侵入性操作、血清miRNA-21水平升高是慢性心衰患者肺部感染的危险因素(P＜0.05).结论 慢性心衰合并肺部感染主要病原菌为革兰阴性菌,miRNA-21 可能参与疾病发展,慢性心衰患者肺部感染的易感因素能作为临床预防措施制定的依据.

目的 探讨前列腺增生患者术后尿路感染的危险因素及外周血微小核糖核酸(microRNA)水平.方法 回顾性分析175例2018年1月-2022年5月于上饶市人民医院泌尿外科接受前列腺增生手术患者的临床资料,根据尿路感染情况分为感染组(32例)和未感染组(143例);收集患者临床资料,并分析病原菌特征及耐药性,采用Logistic回归分析前列腺增生患者术后尿路感染的危险因素.结果 32例前列腺增生术后患者共检出菌株38株,其中革兰阴性菌24株占63.16％,革兰阳性菌11株占28.95％,真菌3株占7.89％;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对庆大霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率＞50.00％,而对亚胺培南均敏感;屎肠球菌、粪肠球菌对庆大霉素、青霉素、氨苄西林的耐药率＞50.00％,而对万古霉素、呋喃妥因均敏感;多因素Logistic回归分析结果显示,miR-15a、miR-34b、miR-103是前列腺增生患者术后尿路感染的危险因素(OR=2.280、3.350、3.043,P＜0.05).结论 前列腺增生术后尿路感染病原菌以革兰阴性菌为主,miR-15a、miR-34b和miR-103参与前列腺增生术后尿路感染过程,临床需合理选用抗菌药物,并根据尿路感染的危险因素和药敏结果制定预防对策,以降低尿路感染的发生.

目的 探讨梅毒血清固定患者外周血单个核淋巴细胞中微小核糖核酸(micro RNA,miR)-31和微小核糖核酸(micro RNA,miR)-192 的表达水平及其诊断价值.方法 选取 2020 年 11 月～2022 年 11 月江阴市人民医院收治的梅毒患者 81 例,根据患者进行驱梅治疗后的血清转变情况分为血清固定组(n=37)和转阴组(n=44),根据临床病理分期分为一期梅毒患者组(n=45)和二期梅毒患者组(n=36),根据梅毒快速血浆反应素试验(rapid plasma response test,RPR)分为反应素初始滴度＜1∶8梅毒患者组(n=31),1∶8～1∶32梅毒患者组(n=26)和＞1∶32梅毒患者组(n=24).另选取同期进行健康体检的 50 例志愿者为健康对照组.实时荧光定量PCR检测各组外周血miR-31 和miR-192 水平;Logistic回归分析梅毒患者发生血清固定的影响因素;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析外周血miR-31,miR-192 水平对梅毒患者发生血清固定的诊断价值.结果 血清固定组、转阴组和健康对照组外周血miR-31(0.36±0.10,0.68±0.13,1.01±0.22)和miR-192(0.51±0.12,0.73±0.19,1.03±0.05)表达水平逐渐升高,差异具有统计学意义(F=167.815,173.090,均P＜0.05);病理分期为Ⅰ期患者外周血miR-31(0.56±0.13),miR-192(0.76±0.14)水平显著高于Ⅱ期(0.38±0.10,0.47±0.08),差异具有统计学意义(t=6.842,11.059,均P＜0.05);反应素初始滴度＜1∶8、反应素初始滴度为1∶8～1∶32、反应素初始滴度＞1∶32的梅毒患者血清miR-31(0.56±0.18,0.48±0.12,0.39±0.09)和miR-192(0.80±0.20,0.64±0.13,0.49±0.12)表达水平逐渐降低,差异具有统计学意义(F=10.057,26.166,均P＜0.05);miR-31[OR(95%CI)=0.537(0.338～0.853)]和miR-192[OR(95%CI)=0.375(0.192～0.732)]均是梅毒患者发生血清固定的保护因素(均P＜0.05);外周血miR-31,miR-192 以及两者联合诊断梅毒患者发生血清固定的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.729(95%CI:0.618～0.821),0.821(95%CI:0.720～0.898)和 0.927(95%CI:0.847～0.973),联合诊断的敏感度和特异度分别为 83.78%,84.09%,二者联合优于外周血miR-31 和miR-192 各自单独诊断,差异具有统计学意义(Z=3.836,2.563,均P＜0.05).结论 外周血miR-31 和miR-192在梅毒血清固定患者体内下调,二者联合诊断梅毒血清固定具有较高效能.

目的 探讨下肢开放性骨折术后感染患者外周血微小核糖核酸-223(miR-223)、果蝇同源信号蛋白(Smad)表达及其诊断价值.方法 选取2018年12月-2021年12月建德市第一人民医院骨科收治的因下肢开放性骨折行内固定术患者350例为研究对象,根据术后感染情况分为感染组32例和未感染组318例.无菌采集伤口周围分泌物,进行病原菌分离鉴定.术后2 d采集空腹静脉血,检测炎症因子C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白细胞介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)水平和miR-223、Smad通路蛋白及其上下游因子转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)表达.结果 下肢开放性骨折患者术后感染率为9.14％,分离病原菌以革兰阳性菌(63.16％)为主;两组年龄、合并糖尿病、术中出血量、术后引流量和卧床时间比较有统计学差异(P＜0.05);感染组术后 IL-6、TNF-α、CRP 和 PCT 水平均高于未感染组(P＜0.05),miR-223、Smad1、Smad2、Smad3和TGF-β、VEGF水平均高于未感染组(P＜0.05),且预测下肢开放性骨折术后感染的曲线下面积(AUC)均＞0.7,预测效能较高.结论 下肢开放性骨折患者术后感染可引起外周血miR-223、Smad通路蛋白异常表达,并且对术后感染具有较好的预测价值.

目的 检测肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)感染诱发哮喘患儿血清中微小核糖核酸(micro RNA,miR)-424-5p和CX3CL1 表达水平及其与患儿预后的关系.方法 选取 2020 年 3 月～2021 年 5 月在内江市第一人民医院进行治疗的MP感染患儿128例作为研究对象,根据是否诱发哮喘分为哮喘组(n=82)和MP组(n=46),另选取50 例健康儿童作为对照组.分别比较哮喘组、MP组和对照组血清miR-424-5p,CX3CL1,IgE,IL-6,TNF-α水平和肺功能指标;根据哮喘患儿预后情况分为预后良好组(n=50)和预后不良组(n=32),分析哮喘患儿预后情况与临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法分析MP诱发哮喘患儿血清中miR-424-5p和CX3CL1表达与患儿预后的关系;采用多因素Logisitic回归分析MP诱发哮喘患儿预后的影响因素.结果 对照组、MP组和哮喘组血清miR-424-5p(0.95±0.26,1.12±0.35,1.34±0.39),CX3CL1(0.47±0.08,0.62±0.17,0.91±0.22 ng/ml),Ig E(22.64±5.74,41.26±8.91,52.31±10.26 IU/ml),IL-6(5.26±0.90,8.24±1.07,9.14±1.18 ng/L)和 TNF-α(55.27±10.54,88.56±18.67,105.26±26.48 pg/ml)水平依次升高,差异具有统计学意义(F=20.287,103.274,174.470,205.317,87.349,均P<0.05).对照组、MP组和哮喘组肺功能指标VC(80.24±19.35,62.35±15.48,51.26±12.38 ml),FVC(78.35%±18.29%,60.21%±16.34%,48.36%±11.73%)和FEV1(63.31%±17.26%,44.26%±10.31%,38.69%±9.58%)依次降低,差异具有统计学意义(F=54.943,61.821,63.006,均P<0.05).哮喘患儿预后良好组血清Ig E,IL-6,TNF-α,miR-424-5p和CX3CL1 水平均明显低于预后不良组,差异具有统计学意义(t=3.825,6.137,3.086,4.003,6.044,均P<0.05).Kaplan-Meier法分析显示,血清miR-424-5p低表达组和CX3CL1 低表达组患儿预后良好率高于高表达组(χ2=4.377,4.172,均P＜0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,Ig E,IL-6,TNF-α,miR-424-5p和CX3CL1水平为MP诱发哮喘患儿预后的影响因素(P<0.05).结论 MP诱发哮喘患儿血清miR-424-5p和CX3CL1水平上调,且二者水平变化与患儿预后情况密切相关.

目的 探讨微小RNA-1(miR-1)在心肺复苏术(CPR)后心搏骤停(CA)大鼠血浆中的表达及意义.方法 32只SD大鼠随机均分为两组:CPR组采用窒息法建立CA大鼠CPR模型;对照组实施假手术.对照组于气管切开后及CPR组于自主循环恢复后24 h取静脉血及心肌组织.采用qRT-PCR检测两组大鼠血浆miR-1的表达.测定两组大鼠血浆肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌钙蛋白I(cTnI)含量,分析其与血浆miR-1表达的相关性.采用TUNEL法检测两组大鼠心尖部心肌细胞凋亡指数(AI),免疫组化染色法检测心肌Bcl-2蛋白表达.结果 CPR组大鼠血浆miR-1、CK、CK-MB、cTnI和Bcl-2蛋白表达及AI均高于对照组(P<0.05).CPR组大鼠血浆miR-1的表达量与CK、CK-MB、cTnI含量和AI呈正相关性(r=0.721、0.664、0.911和0.783,P<0.01),与Bcl-2蛋白表达呈负相关(r=-0.876,P<0.01).结论 miR-1可能参与了CPR后心功能障碍的发生,可能通过调控靶基因的表达促进心肌细胞凋亡.