目的:探讨宏基因组学二代测序技术(mNGS)在新生儿疑难感染性疾病中的临床应用。方法:回顾性分析2019年9月至2020年12月于郑州大学第三附属医院新生儿科住院治疗且经脑脊液、肺泡灌洗液或血液病原菌mNGS技术确诊的不明原因发热、抗感染治疗效果欠佳、危重感染患儿的临床资料和病原学mNGS结果。结果:4例新生儿，其中男2例，女2例，起病年龄为生后5 h至26 d。2例患儿为脑炎/脑膜炎，其中例1患儿表现为发热、抽搐、昏迷，例2患儿长期抗生素治疗临床症状不能缓解且脑脊液细胞数不能恢复正常；例3患儿长期发热伴C-反应蛋白增高，例4患儿发热、咳嗽、呼吸窘迫。传统培养均未检出致病微生物，mNGS分别检测出人单纯疱疹病毒2型、微小脲原体、人类疱疹病毒5型、结核分支杆菌复合群。结论:mNGS有助于不明原因发热、治疗效果欠佳、危重感染等新生儿疑难病原体感染的诊断。

本文报告1例脲原体脑膜炎病例，患儿以呼吸困难起病，脑脊液高通量二代测序确诊为微小脲原体感染，使用阿奇霉素20 mg/kg治疗26 d后痊愈。该病例提示当新生儿脑膜炎常规微生物检测无法确定病原，或经验性抗生素治疗无效时，应考虑脲原体脑膜炎的可能，阿奇霉素为可行的治疗方法。

目的:鉴定糖尿病性心肌病（DCM）小鼠心肌组织差异表达的环状RNA（circRNA），并分析其可能的生物学功能及调控网络。方法:C57BL/6小鼠，雄性，8周龄，体重21~27 g。选取8只小鼠作为正常组，15只进行建模。通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病小鼠模型。注射1周后，测定小鼠空腹血糖水平，经检测12只小鼠建模成功。在相同的实验室条件下饲养小鼠12周，通过超声心动图检测小鼠的心脏结构和功能，筛选出左心室射血分数≤60%，且二尖瓣舒张早期最大血流速度与心房收缩期最大血流速度比值（E/A）≤1.6的糖尿病小鼠作为DCM组（ n=3）。于DCM组确立当天麻醉后处死正常组和DCM组小鼠，取出心脏，从心肌组织中提取RNA备用。采用高通量测序对DCM组和正常组小鼠心肌组织中的RNA进行测序和鉴定分析，并利用DeSeq2进行差异性分析，通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）在组织水平上对分析结果进行验证，并对鉴定的差异circRNA进行GO分析和KEGG通路分析。通过微小RNA（miRNA）靶基因预测软件进行差异表达circRNA-miRNA相互作用预测。 结果:DCM小鼠心肌组织中共鉴定出63种差异表达circRNA。RT-qPCR验证结果示同源性分析筛选出的16种差异表达circRNA中8种组织水平的表达与测序结果一致，其中7种表达上调、1种表达下调。KEGG通路分析结果示，上调的circRNA主要与腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信号通路以及细胞间的黏着连接通路有关，下调的circRNA主要与心肌病有关。GO功能分析显示，上调表达的circRNA在分子功能方面主要与离子、蛋白质、激酶等因子的结合过程有关，并且在细胞组分方面参与调节细胞内结构尤其是细胞器的构成。分子功能与细胞组分方面的功能分析显示，上调的circRNA与细胞组分起源、募集、组织的生物学过程相关，并由此参与细胞生物学过程的调控；下调的circRNA在分子功能方面与催化活性相关，也与蛋白激酶的结合过程、转移酶及钙调蛋白的活性有关，在细胞组分方面与收缩性纤维的组分、肌原纤维的构成密切相关，而在富集的生物学过程GO分析术语中，包括赖氨酸肽基修饰、肌节的构成、肌原纤维的装配、心肌组织的形态学发育、心肌肥厚等生物学过程。本研究鉴定的差异表达circRNA均存在miRNA的结合位点，且部分miRNA与保护心肌细胞正常生理功能、抗氧化应激损伤、抑制心肌细胞凋亡以及抗心肌肥厚有关。结论:DCM小鼠心肌组织中circRNA存在差异表达，且其与DCM的发生发展密切相关。

目的:研究阿黑皮素原(POMC)在miR-21敲除小鼠表达下丘脑中的变化及其相应的能量代谢变化。方法:将miR-21敲除小鼠及野生型C57BL/6J小鼠分别分为糖尿病组和对照组，糖尿病组给予高脂饮食喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射，建立糖尿病模型。监测各组小鼠体重及血糖变化。实验结束后处死小鼠，取下丘脑组织检测POMC蛋白表达、STAT3 mRNA表达水平。结果:基线时各组小鼠体重及血糖水平均无明显差异( P>0.05)。造模后分别于3、6、9、12周比较各组小鼠体重及血糖的差异，结果显示，糖尿病组及miR-21敲除糖尿病组小鼠体重在各时间点均高于对照组( P<0.05)，并且，此2组间体重在3及12周时的差异也有统计学意义( P<0.05)。造模后糖尿病组小鼠血糖水平在各时间点均明显高于其他3组小鼠( P<0.05)。miR-21敲除糖尿病组小鼠在各时间点血糖水平均明显低于糖尿病组小鼠，而高于正常对照组，差异均具有统计学意义( P<0.05)。糖尿病小鼠下丘脑POMC蛋白及STAT3 mRNA水平较对照组明显降低，miR-21敲除的糖尿病小鼠下丘脑POMC蛋白及STAT3 mRNA水平较糖尿病组升高。 结论:miR-21敲除小鼠下丘脑POMC表达较未敲除miR-21糖尿病小鼠高，miR-21敲除可改善糖尿病小鼠血糖水平，减轻体重，改善能量代谢。

目的:探讨微小RNA(miR)-204对糖尿病视网膜病变大鼠模型的保护作用及其机制。方法:30只SD大鼠随机数字表格法分为对照组、模型组和miR-204组，每组10只，其中miR-204组大鼠经尾静脉注射过表达miR-204的腺相关病毒；对照组和模型组大鼠注射等体积对照腺相关病毒。注射30 d后，模型组和miR-204组大鼠通过高脂饲料喂养+腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病视网膜病变模型。治疗4周后，分析3组大鼠视网膜血管通透性和视网膜厚度；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组大鼠外周血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平；采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析3组大鼠视网膜细胞凋亡；蛋白质印迹法(Western blot)分析3组大鼠视网膜组织中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果:miR-204组大鼠视网膜组织miR-204表达水平(2.12±0.17)明显高于对照组和模型组miR-204表达水平(1.05±0.11、0.93±0.05)，差异有统计学意义( t＝16.480、21.130， P<0.05)。miR-204组大鼠视网膜厚度[(147.99±9.09) μm]明显高于模型组[(126.63±9.15) μm]，差异有统计学意义( t＝5.236， P<0.05)。miR-204组大鼠视网膜厚度[(15.41±2.39) μg/g]明显低于对照组[(27.61±1.87) μg/g]，差异有统计学意义( t＝12.770， P<0.05)。miR-204组大鼠血清炎性因子TNF-α和IL-6表达水平[(40.51±4.04)、(39.47±4.70) ng/ml]明显低于模型组[(77.54±7.55)、(54.63±4.27) ng/ml]，差异有统计学意义( t＝13.670、7.907， P<0.05)。miR-204组大鼠视网膜细胞凋亡率[(8.78±0.81)%]明显低于模型组[(19.94±2.34)%]，差异有统计学意义( t＝14.222， P<0.05)。miR-204组大鼠视网膜组织Caspase-3和HMGB1蛋白表达水平(1.64±0.12、1.83±0.19)明显低于模型组(1.64±0.12、1.83±0.19)，差异有统计学意义( t＝6.719、8.409， P<0.05)。 结论:miR-204可显著抑制视网膜血管通透性，抑制炎症和细胞凋亡，可能与抑制HMGB1和细胞凋亡通路有关。

目的:探讨新生儿脲原体脑膜炎的临床特征和诊治方式。方法:回顾性分析2021年湖南省儿童医院新生儿科收治的2例新生儿脲原体脑膜炎患儿临床资料，以“新生儿”、“早产儿”、“脲原体”、“解脲支原体”、“脑膜炎”、“颅内感染”、“中枢神经系统感染”、“脑炎”、“infant”、“neonate”、“newborn”、“ureaplasma”、“mycoplasma urealytium”、“meningitis”、“central nervous system infection”、“brain”为检索词，检索中国知网、万方数据库、中华医学期刊全文数据库、维普数据库、中国生物医学文献服务系统、PubMed、Embase和Web of Science自建库至2022年3月的相关文献，总结新生儿脲原体脑膜炎的临床特点、诊疗经过及预后。结果:病例1，女，胎龄33 +3周，生后第2天发现颅内出血及脑室扩张，脑脊液检测示脑膜炎、培养阴性，抗感染治疗无好转。生后30 d脑脊液宏基因组二代测序（metagenomic next-generation sequencing，mNGS）及23S rRNA检测提示解脲脲原体感染。多西环素治疗21 d，mNGS转阴但停多西环素23 d后脑脊液mNGS、解脲脲原体培养再次提示解脲脲原体感染，改多西环素和红霉素二联抗感染。随访至6月龄无神经系统发育迟滞。病例2，男，胎龄26周，生后第10天发现颅内出血及脑室扩张，脑脊液检测示脑膜炎、培养阴性，抗感染治疗无好转。生后28 d脑脊液mNGS及23S rRNA检测提示微小脲原体感染，红霉素治疗32 d。随访至5月龄无神经系统发育迟滞。共检索到27篇文献，41例新生儿脲原体脑膜炎患儿，结合本组2例共纳入43例。足月儿17例，早产儿26例。脑脊液白细胞、葡萄糖和蛋白水平中位数分别为566个/mm 3、0.2 mmol/L、2.2 g/L。27例应用脑脊液培养诊断，6例应用mNGS诊断，4例应用脑脊液培养和聚合酶链反应诊断，6例应用其他方式诊断。14例全程仅应用大环内酯类抗生素，8例大环内酯类与另一种抗生素联用，9例应用非大环内酯类抗生素，12例未予抗脲原体治疗。17例足月儿均存活，合并脑积水8例次。26例早产儿死亡8例，合并脑室周围-脑室内出血18例次，脑积水15例次。 结论:早产儿脲原体脑膜炎脑脊液葡萄糖水平明显降低，脑积水为常见并发症，病因不明且治疗无效的颅内感染可应用mNGS技术检测病原，单用或联合应用大环内酯类抗生素为主要治疗方式。

脲支原体属是一种人体生殖道常见的病原体，包含两个生物群：生物群1和生物群2，2002年，根据生物群间的差异，将生物群1独立成为新物种，命名为微小脲原体（Up），生物群2称为解脲脲原体（Uu）。Uu感染与多种泌尿生殖系统疾病相关，如不孕不育、早产、尿道炎等，而Up的致病作用仍存在争议。研究表明，不同血清型在不同疾病和人群中的致病性和耐药性方面存在差异，提示临床对脲支原体属进行分型、分群检测的重要性。本文就脲支原体属感染的影响因素与相关诊治现状进行综述，以期为脲支原体属检测阳性的临床意义和分型分群检测的必要性提供思考，为相关疾病的临床诊治工作提供参考。

脲原体在育龄期妇女阴道分泌物中检出率高，以微小脲原体为主，可通过母婴垂直传播感染新生儿，但关于新生儿脲原体感染的研究较少，治疗标准尚不统一。本文对新生儿脲原体感染的流行病学特点、致病机制、相关疾病、诊断、治疗及预防进行综述，以提高临床医生对新生儿脲原体感染的认识，指导新生儿脲原体感染的诊治及预防，减少相关并发症与远期后遗症的发生。

人型支原体脑脓肿临床上很少见，据统计，自1950年1月至2016年7月，国际上仅有13例人型支原体脑脓肿病例报道 [1]。人型支原体合并微小脲原体脑脓肿目前更罕有报道。解放军第九六〇医院神经外科于2020年收治1例高血压脑出血患者，行钻孔引流术后出现脑脓肿，经DNA检测确诊为人型支原体合并微小脲原体脑脓肿，通过积极治疗取得较好疗效，现将具体诊治过程报道如下，以期为临床工作者提供参考。

目的:探讨新生儿微小脲原体脑膜炎的临床特点及宏基因组二代测序(mNGS)技术的临床诊断价值。方法:回顾性分析2019年9月郑州大学第三附属医院新生儿科诊治的1例以持续脑脊液炎症和脑积水为突出表现的新生儿微小脲原体脑膜炎患儿的临床表现、诊治经过及预后，并检索及复习相关文献。结果:患儿，女，生后5 h，胎龄29周，出生时重度窒息，生后因呼吸困难于当地医院给予机械通气后转入我院NICU。住院期间多次查血常规及C-反应蛋白提示感染，住院第19天结合脑脊液常规、生化，临床诊断新生儿脑膜炎，血、脑脊液等培养均为阴性，给予经验性抗生素治疗70余天，脑脊液不能恢复正常，进一步行脑脊液mNGS检测提示脲原体属微小脲原体阳性，明确为微小脲原体脑膜炎。给予红霉素抗感染治疗3周后痊愈出院，出院后3周脑积水进展，行脑室外分流术，目前随访至1岁，运动发育良好。结论:临床上以持续脑脊液细胞计数增高、葡萄糖水平明显降低和脑积水为突出表现的新生儿，特别是早产儿脑膜炎，需考虑微小脲原体脑膜炎的可能；mNGS对中枢神经系统不典型病原体感染的诊断具有重要帮助。