目的:探讨微小RNA(miR)-204对糖尿病视网膜病变大鼠模型的保护作用及其机制。方法:30只SD大鼠随机数字表格法分为对照组、模型组和miR-204组，每组10只，其中miR-204组大鼠经尾静脉注射过表达miR-204的腺相关病毒；对照组和模型组大鼠注射等体积对照腺相关病毒。注射30 d后，模型组和miR-204组大鼠通过高脂饲料喂养+腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病视网膜病变模型。治疗4周后，分析3组大鼠视网膜血管通透性和视网膜厚度；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组大鼠外周血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平；采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析3组大鼠视网膜细胞凋亡；蛋白质印迹法(Western blot)分析3组大鼠视网膜组织中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果:miR-204组大鼠视网膜组织miR-204表达水平(2.12±0.17)明显高于对照组和模型组miR-204表达水平(1.05±0.11、0.93±0.05)，差异有统计学意义( t＝16.480、21.130， P<0.05)。miR-204组大鼠视网膜厚度[(147.99±9.09) μm]明显高于模型组[(126.63±9.15) μm]，差异有统计学意义( t＝5.236， P<0.05)。miR-204组大鼠视网膜厚度[(15.41±2.39) μg/g]明显低于对照组[(27.61±1.87) μg/g]，差异有统计学意义( t＝12.770， P<0.05)。miR-204组大鼠血清炎性因子TNF-α和IL-6表达水平[(40.51±4.04)、(39.47±4.70) ng/ml]明显低于模型组[(77.54±7.55)、(54.63±4.27) ng/ml]，差异有统计学意义( t＝13.670、7.907， P<0.05)。miR-204组大鼠视网膜细胞凋亡率[(8.78±0.81)%]明显低于模型组[(19.94±2.34)%]，差异有统计学意义( t＝14.222， P<0.05)。miR-204组大鼠视网膜组织Caspase-3和HMGB1蛋白表达水平(1.64±0.12、1.83±0.19)明显低于模型组(1.64±0.12、1.83±0.19)，差异有统计学意义( t＝6.719、8.409， P<0.05)。 结论:miR-204可显著抑制视网膜血管通透性，抑制炎症和细胞凋亡，可能与抑制HMGB1和细胞凋亡通路有关。

目的 探究纳武利尤单抗联合安罗替尼治疗Ⅲb～Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的效果及对微小RNA-1269(miR-1269)、miR-204-5p表达的影响.方法 选取Ⅲb～Ⅳ期NSCLC患者82例,患者分配为 对照组、观察组,各41例,使用随机数字表法,对照组采用安罗替尼治疗,观察组在对照组的基础上采用纳武利尤单抗治疗;比较两组患者的疗效、治疗前后肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、miR-1269、miR-204-5p表达水平和不良反应的发生率.结果 观察组患者治疗后疾病控制率(87.80％,36/41)显著高于对照组(68.29％,28/41)(x2=4.556,P=0.033);与治疗前相比,治疗后观察组和对照组的CEA、CYFRA21-1、miR-1269水平显著降低,miR-204-5p水平显著升高(P＜0.05);治疗后与对照组相比,观察组的CEA、CYFRA21-1、miR-1269水平显著降低,miR-204-5p水平显著升高(P＜0.05);不良反应两组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 纳武利尤单抗联合安罗替尼治疗Ⅲb～Ⅳ期NSCLC患者可降低患者肿瘤标志物的水平,调节miR-1269、miR-204-5p的表达,效果更好.

目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和医院风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。

目的:探讨微小RNA(microRNA，miRNA)-34a和miRNA-204的异常表达是否能用于区别慢性胰腺炎(CP)与胰腺导管上皮内瘤变(PanINs)。方法:用部分结扎大鼠胆胰管和置入7，12-二甲基苯并蒽(DMBA)的方法建立SD大鼠(华中科技大学实验动物中心提供)CP-胰腺癌模型，获得16个CP标本和26个PanINs标本。然后用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测4种与胰腺癌相关的miRNAs(miR-34a、miR-204、miR-107和miR-21)在这些标本中的表达。两组之间的差异用方差分析、Kruskal-Wallis检验或Student’s t检验进行统计学分析。 结果:miR-34a在PanIN-1(1.81±0.12比1.00±0.08， t＝2.032， P<0.05)、PanIN-2(1.72±0.11比1.00±0.08， t＝1.332， P<0.05)和PanIN-3(2.62±0.14比1.00±0.08， t＝4.135， P<0.05)标本中的表达显著高于CP组，差异有统计学意义。miR-204在PanIN-2(0.59±0.08比1.00±0.12， t＝5.037， P<0.05)和PanIN-3(0.51±0.07比1.00±0.12， t＝5.385， P<0.05)标本中的表达显著低于CP组，差异有统计学意义。miR-21只在PanIN-3(2.23±0.21比1.00±0.12， t＝4.485， P<0.05)标本中表达显著高于CP组，差异有统计学意义。 结论:miR-34a和miR-204在CP发展到胰腺癌的过程中表达异常，可用于区别CP与PanINs。

本研究旨在探讨微小RNA(microRNA，miR)-494在膀胱癌细胞增殖、侵袭过程中的作用及其机制。

目的:探讨环状RNA Ras同源家族成员T1(circ-RHOT1)及微小RNA-204-5p (miR-204-5p)在乳腺癌中的表达及其对人类乳腺癌细胞株7(MCF-7)细胞增殖、克隆形成、侵袭、迁移、凋亡及上皮-间充质转化过程的影响。方法:定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测circRHOT1及miR-204-5P在乳腺癌细胞系(人源性)MCF-7以及正常乳腺上皮细胞(人源性)MCF-10A中的表达；双荧光素酶实验及qRT-PCR证明circRHOT1和mirR-20-5p的关系。采用噻唑蓝(MTT)实验，克隆形成实验，流式细胞实验，transwell侵袭实验，划痕实验，检测各组细胞的增殖、克隆形成、侵袭、迁移及凋亡能力。蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞上皮间质标志物表皮钙黏蛋白(E-cadlherin)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达。采用 t检验或单因素方差分析进行统计分析。 结果:circRHOT1在乳腺癌细胞系MCF-7中的表达量显著高于乳腺正常上皮细胞MCF-10A(4.77±0.11比1.00±0.09， t＝45.940， P<0.01)。miR-204-p在乳腺癌细胞系MCF-7中的表达量显著低于乳腺正常上皮细胞(0.32±0.03比1.05±0.01， t＝10.330， P<0.01)。si-circROT1组的表达明显低于si-NC组(1.00±0.08比0.15±0.03， t＝17.230， P<0.01)。si-circRHOT1组细胞的体外增殖能力明显低于si-NC组(24 h：0.73±0.05比0.58±0.04， t＝43.517， P<0.05；48 h：1.15±0.10比0.82±0.06， t＝4.901， P<0.01；72 h：1.68±0.18比1.08±0.12， t＝5.003， P<0.01)、si-circRHOT1组细胞的集落形成能力明显低于si-NC组(77.69±13.54比27.82±5.76， t＝5.872， P<0.01)、si-circRHOT1组细胞的侵袭及迁移能力明显低于si-NC组[30.82±8.77比72.68±11.78， t＝4.935， P<0.01；(17.24±4.21)%比(67.77±8.02)%， t＝9.661， P<0.01]，si-circRHOT1组细胞的凋亡能力明显高于si-NC组(22.92±4.46比5.62±1.31， t＝6.448， P<0.01)。si-circRHOT1组细胞E-cadherin的表达高于对照组(6.84±0.56比0.96±0.24， t＝13.320， P<0.01)，si-circRHOT1组细胞N-cadherin，vimentin的表达低于si-NC组(0.34±0.07比1.06±0.35， t＝9.331， P<0.01；0.36±0.05比1.10±0.36， t＝8.645， P<0.01)。circRHOT1可充当miR-204-5P海绵，靶向抑制miR-204-5P表达；干扰miR-204-5P的表达可部分逆转circRHOT1介导的肿瘤抑制作用。 结论:circRHOT1通过充当miR-204-5P海绵，靶向调控miR-204-5p，增强乳腺癌MCF-7细胞增殖、集落形成、侵袭、迁移并减轻细胞凋亡能力。

目的:探讨肿瘤相关钙信号传感器2在结直肠癌组织的表达变化及其上游微小RNA(miRNA，miR)对其表达水平的调控。方法:选取2020年1月至2023年1月新乡医学院第一附属医院收治的58例结直肠癌临床标本和癌旁组织作为研究对象，采用双向电泳技术分析结直肠癌和癌旁组织差异表达的蛋白，选取肿瘤相关钙信号传感器2作为研究对象，采用蛋白质印迹法(Western blot)分析癌旁组织和结直肠癌组织肿瘤相关钙信号传感器2表达水平。免疫组织化学分析两组组织细胞增殖抗原(PCNA)的阳性率；相关性分析肿瘤相关钙信号传感器2与细胞增殖的关系。转录组学分析癌旁组织和结肠癌组织miRNA，筛选差异靶向肿瘤相关钙信号传感器2的miRNA，并采用双荧光素酶报告基因验证分析miRNA的靶向性。组间计量数据比较采用 t检验。 结果:双向电泳筛选10个差异的蛋白质，本研究选择差异显著的蛋白肿瘤相关钙信号传感器2作为研究对象。癌旁组织中肿瘤相关钙信号传感器2蛋白表达水平(0.92±0.14)明显低于结直肠癌组织(1.62±0.20)，差异有统计学意义( t＝14.320， P<0.05)。PCNA表达阴性患者肿瘤相关钙信号传感器2蛋白表达水平(1.33±0.13)明显低于结直肠癌组织(1.69±0.16)，差异有统计学意义( t＝6.092， P<0.05)。癌旁组织和结直肠癌组织总计差异miRNA共1 218个，其中上调表达732个，下调486个。发现5个与肿瘤相关钙信号传感器2存在互补的miRNA，分别为miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p。癌旁组织中miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p表达水平(1.07±0.08、1.07±0.09、1.11±0.15、1.01±0.10、1.15±0.15)明显高于结直肠癌组织(0.28±0.05、0.30±0.07、0.45±0.08、0.54±0.09、0.69±0.12)，差异有统计学意义( t＝21.050、26.350、14.850、12.600、9.165， P<0.05)。miRNA对照和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.96±0.07、0.94±0.03、0.92±0.06、0.91±0.08、0.95±0.05)明显高于miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p模拟物和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.22±0.06、0.24±0.07、0.34±0.09、0.45±0.08、0.60±0.12)，差异有统计学意义( t＝23.541、23.102、18.208、14.231、12.514， P<0.05)。 结论:肿瘤相关钙信号传感器2在结直肠组织中表达显著上调，受miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p等miRNA调控。

目的:观察甲状腺乳头状癌(PTC)细胞中微小RNA(miR)-204对E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)表达的影响，及对上皮-间充质转化(EMT)及细胞侵袭能力的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测甲状腺乳头状癌及其癌旁组织中miR-204的表达；将miR-204 mimics转染到甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中，采用荧光定量PCR的方法检测ZEB1、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的表达水平，应用双荧光素酶报告基因分析实验观察miR-204对ZEB1基因表达的调控作用；同时，将miR-204 mimics与过表达ZEB1质粒共转染至人甲状腺乳头状癌细胞-1(TPC-1)细胞中，采用Transwell细胞侵袭实验观察miR-204和ZEB1表达变化对甲状腺乳头状癌细胞侵袭能力的影响。组间比较采用 t检验。 结果:miR-204在甲状腺癌乳头状组织中的表达水平低于癌旁正常组织中的表达水平，差异有统计学意义(1.14±0.08比3.52±0.07， t＝13.250， P<0.05)；miR-204 mimics转染组侵袭细胞数低于对照组侵袭细胞数[(149.4±20.2)个比(268.6±30.2)个， t＝3.402， P<0.05]，差异有统计学意义；miR-204 mimics转染组细胞E-cadherin表达水平高于对照组细胞(0.98±0.17比0.35±0.12， t＝2.903， P<0.05)，差异有统计学意义，N-cadherin和vimentin表达量低于对照组细胞(0.29±0.11比0.89±0.10， t＝2.974， P<0.05；0.30±0.13比0.93±0.15， t＝2.859， P<0.05)，差异有统计学意义；双荧光素酶报告基因分析结果显示，miR-204 mimics转染组ZEB1的相对荧光素酶活性低于对照组(0.23±0.06比1.12±0.04， t＝12.460， P<0.05)，差异有统计学意义；甲状腺癌乳头状癌TPC-1细胞中转染miR-204 mimics组ZEB1基因的表达水平低于对照组(0.41±0.06比1.10±0.07， t＝6.783， P<0.05)，差异有统计学意义；miR-204 mimics与ZEB1过表达质粒共转染后，甲状腺癌细胞的侵袭细胞数与对照组比较差异无统计学意义[(224.4±23.5)个比(230.0±28.5)个， t＝1.140， P>0.05]，差异有统计学意义。 结论:miR-204能够通过靶向抑制ZEB1的表达，从而抑制细胞发生上皮间质转化进而抑制甲状腺乳头状癌细胞的侵袭能力。

目的 分析口腔黏膜下纤维化(OSF)患者血清微小RNA(miR)-204和miR-200b水平与临床疗效的关系.方法 选取2021年12月至2022年12月在河北工程大学附属医院就诊的110例OSF患者作为研究组,另选取50例同期体检健康者作为对照组.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测研究组及对照组血清miR-204和miR-200b水平并进行比较.将研究组分为miR-204高表达组、低表达组和miR-200b高表达组、低表达组;比较血清miR-204和miR-200b不同水平患者的临床疗效、转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)、临床病理特征、视觉模拟评分(VAS),采用Spearman法和Pearson法分析血清miR-204和miR-200b水平与研究组各指标的相关性.结果 研究组血清miR-204和miR-200b水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).miR-204、miR-200b高表达组患者临床疗效总有效率均为100.00％,分别高于miR-204、miR-200b低表达组临床疗效总有效率(86.79％、88.89％),差异有统计学意义(P＜0.05).单因素分析结果表明,嚼槟榔、张口度≤28 mm、口腔黏膜病损面积＞4 cm2、VAS评分＞3分的OSF患者血清miR-204和miR-200b水平显著低于不嚼槟榔、张口度＞28 mm、口腔黏膜病损面积≤4 cm2、VAS评分≤3分的患者,差异有统计学意义(P＜0.05);miR-204、miR-200b高表达组TGF-β1和IL-6水平显著低于miR-204、miR-200b低表达组,差异有统计学意义(P＜0.05);相关性分析结果表明,OSF患者血清miR-204和miR-200b水平与口腔黏膜病损面积、VAS评分、TGF-β1、IL-6呈负相关(P＜0.05),与张口度呈正相关(P＜0.05).结论 OSF患者血清miR-204和miR-200b水平与临床疗效关系密切,血清miR-204和miR-200b水平升高,OSF患者临床疗效较好.

目的 本研究旨在揭示种植体周炎发生发展过程中参与调控的关键基因,并通过随机森林(RF)和人工神经网络(ANN)构建种植体周炎的诊断模型.方法 本研究从GEO数据库中获取GSE33774、GSE106090和GSE57631数据集.对GSE33774和GSE106090数据集进行差异表达和功能富集分析,通过蛋白质互作网络(PPI)和RF筛选出关键基因,利用ANN建立种植体周炎的诊断模型,并在GSE33774 和GSE57631数据集中进行验证.同时,构建转录因子-基因相互作用网络和转录因子-微小RNA(miRNA)调控网络.结果 本研究共筛选出124个参与调控种植体周炎的差异表达基因(DEGs).富集分析结果表明,DEGs主要和免疫受体活性蛋白及细胞因子受体活性相关,主要参与白细胞和中性粒细胞迁移的过程.PPI和RF筛选出6个关键基因,分别为CD38、CYBB、FCGR2A、SELL、TLR4和CXCL8.受试者操作特征曲线(ROC)表明ANN模型具有较好的诊断性.本研究还发现FOXC1、GATA2和NF-κB1可能是种植体周炎中重要的转录因子,hsa-miR-204可能是关键的miRNA.结论 RF和ANN构建的种植体周炎的诊断模型可信度高,CD38、CYBB、FCGR2A、SELL、TLR4和CXCL8是潜在的诊断标志物.FOXC1、GATA2和NF-κB1可能是种植体周炎中重要的转录因子,hsa-miR-204作为关键的miRNA在其中扮演着重要角色.