目的:鉴定非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者和健康对照组人血清外泌体微小RNAs（microRNAs）差异表达谱，探索miRNAs在NAFLD发病、诊断及治疗中的价值。方法:各取4例人口学特征、个人史相近的S2~3级NAFLD患者和健康对照者进行血清外泌体miRNAs高通量测序，对差异表达最显著的4条miRNAs按S1组、S2~3组、对照（Control）组每组各20例行qRT-PCR验证，并进行靶基因预测，对靶基因进行GO和KEGG富集分析。正态分布的计量资料使用 t检验或方差分析，等级资料和非正态分布资料使用秩和检验，计数资料使用Pearson χ2检验或Fisher精确检验。 结果:初步鉴定出差异有统计学意义（ P < 0.05）且差异表达在2倍以上的血清外泌体miRNAs共19条，hsa-miR-122-5p、hsa-miR-146b-5p、hsa-miR-197-3P的相对表达关系为：S2~3组>S1组>Control组，hsa-miR-483-3p的相对表达关系为：NAFLD组（S1或S2~3）>Control组。GO分析显示靶基因在分子功能、细胞组分、生物过程均有广泛的注释，靶基因显著富集的通路共84条，从20条与NAFLD最密切的通路中筛选出与至少10条通路都相关的靶基因共5个，即PIK3R2、AKT2、AKT3、MAPK1、NFKB1。 结论:初步分析了NAFLD患者和健康对照组血清外泌体miRNAs差异表达谱，研究了4条miRNAs对于判断肝脂肪变性程度的价值，预测了数以千计的靶基因及其参与的复杂信号通路，为寻找无创诊断NAFLD的生物标志物和特异性治疗的新靶点提供了新的参考。

目的:探讨环状RNA VMA21(circ_VMA21)对脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞损伤和氧化应激的影响及其机制。方法:人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)随机分为Control、LPS、LPS+pcDNA-circ_VMA21、LPS+pcDNA、LPS+微小RNA(miR)-122-5p inhibitor、LPS+anti-miR-NC、LPS+pcDNA-circ_VMA21+miR-122-5p mimic组；实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_VMA21和miR-122-5p的表达水平；细胞计数检测细胞活性；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹法检测蛋白表达；酶联免疫吸附法检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活性；双荧光素酶报告实验检测circ_VMA21和miR-122-5p的靶向关系。两组间均数比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析(组间两两比较采用LSD- t检验)。 结果:LPS诱导的HUVEC中circ_VMA21表达水平降低(0.17±0.02比1.00±0.00)，miR-122-5p表达水平升高(3.76±0.09比1.00±0.00)，细胞活性降低(0.41±0.02比1.22±0.07)，细胞凋亡率(24.17±0.93比7.62±0.39)及裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)表达水平升高(0.80±0.06比0.13±0.01)，MDA含量[(736.11±27.21) nmol/ml比(159.37±14.93) nmol/ml]及LDH活性升高[(486.45±16.07) U/L比120.58±9.00) U/L]，SOD活性降低[(46.25±4.44) U/L比238.49±11.23) U/L， t＝9.721、13.122、15.321、22.472、10.817、38.123、18.237、25.522， P<0.05]；与LPS组和LPS+anti-miR-NC组比较，LPS+miR-122-5p inhibitor组miR-122-5p表达水平降低，细胞活性升高，细胞凋亡率及cleaved-Caspase-3表达水平降低，MDA含量及LDH活性降低，SOD活性升高( F＝2 564.169、693.501、540.990、704.667、41 336.059、1 170.734、414.559， P<0.05)。与LPS+pcDNA-circ_VMA21组比较，LPS+pcDNA-circ_VMA21+miR-122-5p mimic组miR-122-5p表达水平升高，细胞活性降低，细胞凋亡率及cleaved-Caspase-3表达水平升高，MDA含量及LDH活性升高，SOD活性降低( F＝810.792、298.432、376.370、279.806、634.476、528.520、343.420， P<0.05)。 结论:circ_VMA21通过下调miR-122-5p抑制脂多糖诱导的血管内皮细胞损伤和氧化应激。

目的:探讨血清微小RNA（miR）-15a-5p与局部进展期胃癌（LAGC）患者预后和新辅助化疗（NAC）反应的相关性。方法:回顾性分析中国人民解放军东部战区空军医院2016年5月至2020年4月122例接受NAC后行手术治疗的LAGC患者的临床资料。记录患者的一般临床资料和实验室检查结果。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清miR-15a-5p表达水平，分析miR-15a-5p表达与LAGC患者不同临床特征的关系。采用Becker肿瘤退缩分级标准评估病理学反应，其中1a级、1b级和2级患者为敏感组，3级患者为抵抗组。结果:根据血清miR-15a-5p中位数1.038将LAGC患者分为高表达（>1.038）和低表达（≤1.038），各61例。血清miR-15a-5p表达水平与喜食辛辣食物、超声内镜（EUS）-T分期和EUS-N分期有关（ P<0.01或<0.05）。根据病理学反应评估结果，抵抗组47例，敏感组74例。抵抗组血清miR-15a-5p明显高于敏感组[1.69（1.39，1.97）比0.99（0.96，1.02）]，差异有统计学意义（ Z =-8.55， P<0.01）。受试者工作特征曲线分析结果显示，血清miR-15a-5p预测NAC反应的曲线下面积为0.959（95% CI 0.929~0.990），最佳截断值为1.049，灵敏度为100.0%，特异度为85.1%。多因素Logistic回归分析结果显示，miR-15a-5p是影响LAGC患者NAC反应的独立危险因素（ HR = 1 880.840，95% CI 123.510~28 641.846， P<0.01）。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示，miR-15a-5p高表达患者中位总生存时间和中位无进展生存时间明显短于miR-15a-5p低表达患者（19个月比62个月和12个月比51个月），差异有统计学意义（log-rank χ2 = 41.99和61.97， P<0.01）；miR-15a-5p高表达患者10年总生存率和10年无进展生存率明显低于miR-15a-5p低表达患者（4.9%比52.5%和24.6%比85.2%），差异有统计学意义（log-rank χ2 = 33.70和45.32， P<0.01）。多因素Cox回归分析结果显示，R 0切除和miR-15a-5p是影响LAGC患者总生存时间和无进展生存时间的独立危险因素（总生存时间： HR = 1.945和3.487，95% CI 1.033~3.660和2.112~5.759， P<0.05或<0.01；无进展生存时间： HR = 2.427和6.335，95% CI 1.069~5.510和3.341~12.013， P<0.05或<0.01）。 结论:血清miR-15a-5p水平升高与LAGC患者NAC反应和预后不良有关，可作为LAGC预后和NAC反应预测的可靠生物标志物。

目的:探讨姜黄素对骨髓间充质干细胞(BMSCs)骨向分化的调控机制。方法:2018年2月至2019年10月，采用15 μmol/L浓度姜黄素处理BMSCs细胞(购自中国科学院上海细胞库)，细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡，蛋白印迹法(Western blot)检测聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白(Col Ⅱ)、SRY-盒转录因子9(Sox9)和成纤维细胞生长因子18(FGF18)表达。将微小RNA(miRNA，miR)-NC组(转染miR-NC)、miR-122-5p组(转染miR-122-5p mimics)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-FGF18组(转染pcDNA-FGF18)、姜黄素＋miR-NC组(转染miR-NC)、姜黄素＋miR-122-5p组(转染miR-122-5p mimics)、姜黄素＋pcDNA组(转染pcDNA)、姜黄素＋pcDNA-FGF18组(转染pcDNA-FGF18)转染至BMSCs细胞，对照组仅加入培养基。检测并比较不同组增殖、凋亡和蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验、RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验检测miR-122-5p与FGF18间的结合。两组间比较采用 t检验，多组间均值比较采用SNK- q法分别比较组间差异。 结果:姜黄素组BMSCs细胞增殖率、Aggrecan、Col Ⅱ和Sox9蛋白表达显著高于对照组( t＝18.275、12.001、8.598、10.124， P<0.05)，凋亡率显著低于对照组( t＝18.056， P<0.05)，差异均有统计学意义。姜黄素组BMSCs中miR-122-5p表达显著低于对照组(0.47±0.03比1.01±0.07， t＝21.272， P<0.05)，FGF18的mRNA和蛋白表达显著高于对照组(mRNA为2.78±0.17比0.99±0.05，蛋白为1.56±0.13比1.01±0.09， t＝30.305、10.436， P<0.05)，差异均有统计学意义。过表达miR-122-5p可抑制BMSCs细胞增殖和Aggrecan、Col Ⅱ、Sox9蛋白表达并促进凋亡，过表达FGF18则有相反的作用。过表达miR-122-5p可显著减弱姜黄素对BMSCs细胞增殖、凋亡和成骨分化的调控作用，而过表达FGF18则可明显增强姜黄素对BMSCs细胞增殖、凋亡和成骨分化的作用。 结论:姜黄素可促进BMSCs细胞增殖和成骨分化并抑制凋亡，其机制可能与调控miR-122-5p/FGF18信号通路有关。

目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和医院风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。

目的:研究慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis，CAG）患者血清微小RNA-122-5p（miR-122-5p）表达水平及其与炎症因子、疾病严重程度的相关性。方法:选择2019年12月~2021年12月在山西省人民医院收治的CAG患者120例为观察对象，根据胃黏膜病理评分将患者分为病情一般58例和病情严重62例，另选择同期慢性非萎缩性胃炎患者105例作为对照组。采用qRT-PCR法检测血清miR-122-5p表达水平，免疫比浊法检测血清hs-CRP水平，酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清TNF- α、IL-6水平； Pearson法分析CAG患者血清miR-122-5p表达水平与hs-CRP、IL-6、TNF- α及病情严重程度的相关性；Logistic回归分析影响CAG的危险因素。 结果:CAG组与对照组之间性别、年龄、及吸烟史等比较，差异无统计学意义（ P>0.05）；CAG组饮酒及Hp阳性比例分别为（52.50%、62.50%），显著高于对照组（25.71%、43.80%）（ P<0.05）；CAG组血清miR-122-5p、hs-CRP、IL-6、TNF-α水平分别为[（2.31±0.42）、（24.89±4.56）mg/L、（39.26±7.68）ng/ml、（85.42±9.65）pg/ml]，显著高于对照组[（1.05±0.12）、（16.54±3.85）mg/L、（22.39±5.21）ng/ml、（862.34±7.46）pg/ml]（ P<0.05）；CAG病情严重患者血清hs-CRP、IL-6、TNF- α水平、miR-122-5p表达水平Hp阳性感染率及病理评分分别为[（28.14±3.21）mg/L、（44.55±5.73）ng/ml、（93.42±8.81）pg/ml、（2.74±0.30）、72.58%、（4.30±1.20）分]，显著高于病情一般患者[（21.42±3.67）mg/L、（33.61±5.54）ng/ml、（76.87±7.59）pg/ml、（1.85±0.36）、51.72%、（1.60±0.30）分]（ P<0.05）。相关性分析显示，CAG患者血清miR-122-5p表达水平与hs-CRP、IL-6、TNF- α及病情程度呈正相关性（ r=0.475、0.453、0.505、0.563， P<0.01）；多因素Logistic分析显示，Hp阳性感染（ OR=2.527，95% CI=1.125~5.678）、miR-122-5p（ OR=2.323，95% CI=1.341~4.025）是影响CAG的独立危险因素（ P<0.05）。 结论:CAG患者血清miR-122-5p表达水平升高，与患者血清炎症因子、疾病严重程度和Hp感染有关，可能成为诊断CAG的标志物。

目的:观察华支睾吸虫感染大鼠肝脏组织微小RNA（miR）-122的表达变化及其与血清炎症细胞因子表达水平的相关性。方法:选择24只SPF级Wistar雄性大鼠，采用随机数字表法按体质量（100~120 g）分为对照组（100 μl生理盐水灌胃）、感染4周组（100个华支睾吸虫囊蚴灌胃）、感染8周组（100个华支睾吸虫囊蚴灌胃），每组8只。感染第3周开始收集大鼠粪便，采用生理盐水直接涂片进行华支睾吸虫感染Wistar大鼠动物模型鉴定；感染4、8周组大鼠分别于感染4、8周后处死，对照组大鼠分别于感染4、8周后各处死4只，采集各组大鼠心脏血及左叶肝脏组织。采用苏木精-伊红（HE）染色光镜下观察肝脏病理损伤情况，实时荧光定量PCR检测肝脏miR-122表达水平，Luminex 200液相悬浮芯片检测血清炎症细胞因子[肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）]表达水平；利用Pearson相关分析miR-122与炎症细胞因子的相关性。结果:光镜下，对照组大鼠肝细胞形态正常，未见炎症细胞浸润；感染4周组大鼠肝脏组织汇管区周围有淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等炎症细胞浸润；感染8周组大鼠肝细胞排列紊乱、出现不同程度肿胀，细胞质疏松浅染，部分肝细胞呈水样变性，肝脏组织内可见胆管扩张、胆管壁增厚。对照组和感染4、8周组大鼠肝脏miR-122（1.00 ± 0.32、2.57 ± 0.60、3.63 ± 1.63），血清TNF-α[（0.14 ± 0.06）、（0.43 ± 0.09）、（0.61 ± 0.10）ng/ml]、IL-6表达水平[（0.03 ± 0.01）、（1.06 ± 0.24）、（1.48 ± 0.33）ng/ml]比较，差异均有统计学意义（ F = 13.36、69.99、82.23，均 P < 0.001）；IL-1β表达水平比较差异无统计学意义（ F = 2.15， P = 0.141）。Pearson相关分析结果显示，肝脏miR-122与血清TNF-α和IL-6表达水平均呈正相关（ r = 0.67、0.80，均 P < 0.001）。 结论:华支睾吸虫感染可引起宿主肝脏miR-122表达升高，且miR-122与血清炎症细胞因子TNF-α、IL-6表达水平密切相关。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)人去泛素化酶含有卵巢肿瘤结构域的6B反义RNA 1(OTUD6B-AS1)通过微小RNA(microRNA，miR)-122-5p对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测2010年1月至2013年1月河南科技大学第一附属医院手术切除的98例肝癌组织标本及其配对的癌旁组织、肝癌细胞系(Hhu7、Hep3B、HCCLM3、MHCC97H)和人正常肝细胞(LO2)中OTUD6B-AS1的相对表达量。用脂质体2000(Lipofectamine? 2000)分别将sh-NC(sh-NC组)和sh-OTUD6B-AS1(sh-OTUD6B-AS1组)转染入Hep3B细胞。克隆形成实验和细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖；Transwell检测细胞侵袭；细胞划痕实验检测细胞迁移。用TargetScan预测OTUD6B-AS1与miR-122-5p的互补结合位点，随后用双荧光素酶报告基因实验确定两者的靶向关系。为了进一步验证两者调控关系，将Hep3B细胞分别分为sh-NC＋miR-NC组、sh-OTUD6B-AS1＋miR-NC组、sh-OTUD6B-AS1＋anti-miR-122-5p组，比较3组细胞增殖、侵袭和迁移。两两比较采用 t检验；多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD- t检验；生存分析采用Log-rank检验。 结果:肝癌组织中OTUD6B-AS1相对表达量为2.42±0.96，明显高于癌旁组织(0.92±0.39， t＝14.331， P<0.05)，差异有统计学意义。肝癌细胞系Hhu7(2.84±0.23)、Hep3B(3.80±0.68)、HCCLM3(1.89±0.25)和MHCC97H(2.01±0.71)的OTUD6B-AS1相对表达量明显高于正常肝细胞LO2(1.04±0.23， F＝51.827， P<0.05)，差异有统计学意义。sh-OTUD6B-AS1组细胞增殖、侵袭和迁移能力均低于sh-NC组( t＝5.556、2.454， P值均<0.05)，差异均有统计学意义。双荧光素酶报告基因实验结果证实OTUD6B-AS1可以靶向调控miR-122-5p。sh-NC＋miR-NC组和sh-OTUD6B-AS1＋anti-miR-122-5p组增殖、侵袭和迁移能力明显高于sh-OTUD6B-AS1＋miR-NC组( F＝111.908、0.301， P值均<0.05)，差异均有统计学意义。 结论:OTUD6B-AS1可能通过负调控miR-122-5p促进肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

目的:探索血清中神经来源的外泌体中MicroRNA-211-5p(miR-211-5p)的水平和脑源性神经营养因子(BDNF)水平与帕金森病(PD)认知障碍的相关性和诊断意义。方法:选择2017年1月至2018年4月于嘉兴市第二医院就诊的帕金森病患者80例(PD组)，根据蒙特利尔认知评估量表将患者分为认知障碍36例，非认知障碍44例。同时选择同期体检的健康人30例作为对照组。取受试者外周血后采用ExoQuick试剂盒提取外泌体，L1细胞黏附分子(L1CAM)生物素化抗体分离神经来源的外泌体。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测外泌体中BDNF的水平，实时荧光定量PCR(RT-QPCR)检测外泌体中miR-211-5p的表达水平。结果:(1)血清神经来源外泌体中BDNF和miR-211-5p具有相关性( r＝－0.805， P<0.001)，PD组血清神经来源外泌体中BDNF和miR-211-5p具有相关性( r＝－0.785， P＝0.002)，对照组亦具有相关性( r＝－0.867， P<0.001)。(2)PD组患者血清神经源外泌体中miR-211-5p的水平为(0.30±0.08)显著高于对照组(0.17±0.04)，而BDNF水平为(0.55±0.06)mg/L，低于对照组(0.75±0.06)mg/L，( t＝7.125、6.368，均 P＝0.000)。(3)认知障碍组患者血清神经源外泌体中BDNF水平为(0.45±0.07)mg/L，低于非认知障碍组(0.63±0.07)mg/L和对照组(0.75±6.54)mg/L，( t＝8.999、7.608，均 P＝0.000)。而miR-211-5p为(0.36±0.07)显著高于非认知障碍组(0.24±0.05)和对照组(0.17±0.04)，( t＝10.923，7.520，均 P＝0.000)。(4)ROC曲线结果显示miR-211-5p作为PD认知障碍的曲线下面积为0.860(95% CI：0.770～0.950)阈值为0.32。BDNF作为PD认知障碍的曲线下面积为0.891(95% CI：0.822～0.961)阈值为0.67。(5)miR-211-5p的靶基因可能是BDNF，可能通过抑制BDNF的mRNA表达降低BDNF的水平。 结论:人血清神经源性外泌体miR-211-5p在PD认知障碍中高表达，可以作为PD认知障碍的诊断标准之一，其作用可能与BDNF mRNA表达抑制有关。

目的:探究微小RNA-122(miR-122)抑制乙型肝炎病毒(HBV)感染相关肝细胞癌生长的分子机制。方法:检测肝癌细胞HepG2、HepG2.2.15及肝细胞LO2中miR-122及N-myc下游调节基因3(NDRG3)的mRNA及蛋白表达。将HepG2.2.15细胞分为转染miR-122组(转染miR-122模拟物)、转染对照组(转染miR-122模拟物的对照物)和不作处理的对照组，检测各组细胞的miR-122、NDRG3 、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)表达变化，比较各组细胞的迁移、侵袭和增殖能力。结果:转染miR-122组的miR-122表达量为(2.32±0.05)，高于对照组的(0.48±0.09)，转染miR-122组NDRG3的mRNA及蛋白表达量分别为(0.45±0.15)、(0.43±0.08)，均小于对照组的(1.53±0.14)、(1.68±0.25)，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。转染miR-122组HBsAg、HBeAg及HBV-DNA表达量分别为(1.05±0.05)IU/ml、(0.69±0.09)NCU/ml、(0.45±0.07)Ig/ml，均小于对照组的(1.51±0.11)IU/ml、(1.32±0.15)NCU/ml、(1.00±0.12)Ig/ml，差异均有统计学意义( P<0.05)。转染miR-122组细胞迁移率(33.48±4.12)%、侵袭率(44.11±5.96)%均小于对照组的(91.22±11.45)%、(96.76±12.58)%，转染后48和72 h的细胞增殖率也降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。转染对照组与对照组的各指标比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:miR-122可能通过下调NDRG3表达而抑制HBV复制及抗原表达，进而阻断HBV感染的肝细胞癌的细胞增殖、侵袭及迁移。