目的:探究动态对比增强磁共振成像（DCE-MRI）联合血清微小RNA（miR）-486-5p对胰腺癌诊断及手术可切除性评估价值。方法:选取2019年6月至2023年6月烟台市烟台山医院收治136例胰腺占位患者为研究对象，患者均接受DCE-MRI扫描及血清miR-486-5p检测，以手术病理为诊断金标准，以实际手术切除为手术可切除性标准，通过诊断试验四格表评价DCE-MRI、血清miR-486-5p及两者联合对胰腺癌诊断、手术可切除性评估价值，组间比较采用Mann-Whitney U检验和 χ2检验。 结果:136例患者经病理诊断确诊胰腺癌（胰腺癌组）98例，非胰腺癌（良性病变组）38例。胰腺癌组血清miR-486-5p表达为3.48（1.41～7.64），显著高于良性病变组的1.02（0.36～1.58）（ Z＝3.162， P<0.05）。DCE-MRI联合血清miR-486-5p诊断胰腺癌的敏感度、特异度、准确度、与病理诊断的一致性Kappa值分别为97.95%（96/98）、81.58%（31/38）、93.38%（127/136）、0.829。98例胰腺癌患者中，最终实际行手术切除35例（可切除组），不可切除63例（不可切除组）。可手术组血清miR-486-5p表达为2.05（1.01～3.72），显著低于不可切除组的4.88（2.95～10.01）（ Z＝3.882， P<0.05）。DCE-MRI联合血清miR-486-5p预测胰腺癌可切除的敏感度、特异度、准确度、与实际手术切除的一致性Kappa值分别为77.14%（27/35）、100.00%（63/63）、91.84%（90/98）、0.813。 结论:DCE-MRI联合血清miR-486-5p能提高胰腺癌诊断敏感度及准确度，且预测手术可切除性与实际手术切除一致性更高。

目的:观察激素性股骨头坏死(SONFH)患者来源骨髓间充质干细胞(BMSCs)分泌的低表达微小RNA(miR)-127-5p细胞外囊泡(EVs)对正常BMSCs增殖及成骨分化的影响。方法:骨髓来源于郑州大学第一附属医院10例需行全髋关节置换手术的患者(激素性股骨头坏死5例，非股骨头坏死5例)，提取其中的BMSCs进行培养。使用差速离心法分离SONFH-BMSCs-EVs并用蛋白质印迹法(Western blot)和纳米颗粒跟踪分析(NTA)鉴定。将正常BMSCs中加入SONFH-BMSCs-EVs作为实验组，对照组加入等量磷酸盐缓冲液(PBS)，用噻唑蓝(MTT)法检测SONFH-BMSCs-EVs对BMSCs的增殖的影响。分别取两组第3代BMSCs，提取总RNA，使用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-127-5p的表达差异。取第3代BMSCs进行成骨诱导，诱导过程中加入miR-127-5p mimic、miR-127-5p NC，分别用茜素红染色、MTT法、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3/7活性细胞凋亡检测，来检验miR-127-5p对BMSCs增殖及成骨分化的影响。采用单因素方差分析和 t检验进行统计学分析。 结果:SONFH-BMSCs-EVs为大小不均的圆形膜性囊泡，粒径范围在40～200 nm之间且表达CD63、CD9标志蛋白。共聚焦显微镜下显示EVs可以被BMSC摄取。MTT法显示实验组(0.98±0.20)增殖活性低于对照组(0.40±0.13， t＝5.39， P<0.01)。RT-PCR显示实验组miR-127-5p的相关表达(1.03±0.21)明显低于对照组(0.58±0.12， t＝4.05， P<0.01)。茜素红染色显示SONFH＋miR-127-5p mimic(Smm)组成骨分化染出红色的阳性率远远高于SONFH(S)组。MTT法和Caspase-3/7活性细胞凋亡检测显示Smm组相较于S组，促进增殖(Smm组1.51±0.18，S组1.09±0.17， t＝3.84， P<0.01)，减少凋亡(Smm组0.59±0.12，S组1.02±0.12， t＝5.56， P<0.01)。 结论:SONFH患者来源的BMSCs分泌的低表达miR-127-5p EVs可以抑制正常BMSCs增殖及成骨分化。

目的:探讨POU3F3对垂体瘤细胞增殖和周期的影响及其作用机制。方法:选取2016年6月到2019年12月驻马店市中心医院手术切除的150例垂体瘤和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析POU3F3和微小RNA(miRNA，miR)-127-5p表达水平；采用短发卡RNA(shRNA)和过表达技术在RC-4BC垂体瘤细胞中分别敲降POU3F3和过表达miR-127-5p，采用Lipo2000过表达采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞术分析POU3F3和miR-127-5p对细胞增殖和周期的影响；采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析POU3F3和miR-127-5p及其靶基因关系；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析POU3F3和miR-127-5p对靶基因表达的影响。组间比较采用 t检验。 结果:与癌旁组织中POU3F3表达水平(1.10±0.19)比较，垂体腺癌组织中POU3F3表达水平(2.84±0.22)显著增加，差异有统计学意义。与癌旁组织中miR-127-5p表达水平(1.04±0.15)比较，垂体腺癌组织中miR-127-5p表达水平(0.34±0.11)显著下调，差异有统计学意义。与对照shRNA组细胞G 0/G 1期、S期和G 2/M期[(37.54±3.45)%、(39.10±3.90)%和(20.58±2.87)%]比较，POU3F3 shRNA组细胞G 0/G 1期比例(64.33±6.24)%显著增加，而S期和G 2/M期比例[(20.14±3.01)%和(14.33±2.88)%]显著下调，差异有统计学意义。与对照mimic组细胞G 0/G 1期、S期和G 2/M期[(35.66±4.02)%、(40.89±4.61)%和(25.33±2.19)%]比较，miR-127-5p minic组细胞G 0/G 1期比例显著增加[(59.48±6.14)%]，而S期和G 2/M期比例[(24.23±2.71)%和(17.59±1.99)%]显著下调，差异有统计学意义。miR-127-5p与POU3F3存在碱基配对，FOXD1是miR-127-5p靶基因。与对照shRNA组和对照mimic组细胞FOXD1蛋白表达水平(1.16±0.21、0.97±0.14)比较，POU3F3 shRNA组和miR-127-5p mimic组细胞FOXD1蛋白表达水平(0.22±0.15、0.32±0.12)显著下降，差异有统计学意义。 结论:POU3F3通过miR-127-5p/ FOXD1调控垂体腺癌细胞增殖和周期。

目的:构建基于微小RNA(miRNA，miR)表达量的肺腺癌预后列线图风险模型，研究其对肺腺癌患者生存的预测价值。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载获取肺腺癌miRNA表达数据，包括miRNAseq和临床数据。应用R 3.6.2软件中的edgeR包筛选肺腺癌组织和正常肺组织的差异基因，以│logFC│>2， P<0.05为筛选条件。应用单因素回归分析、LASSO回归分析、多因素Cox回归分析筛选与预后明显相关的miRNAs，建立风险评分(risk score)方程，构建列线图模型。应用内部验证法和图像校准法、受试者工作特征曲线(ROC)评价模型的特异性和敏感性。通过风险评分及生存曲线对患者进行生存分析。分析miRNAs在各种族表达差异。 结果:识别127个差异miRNA，下调16个，上调111个。单因素回归分析得到14个与预后相关的miRNAs，LASSO回归分析得到13个与预后相关的miRNAs( P<0.05)。多因素回归分析结果显示hsa-miR-1293、hsa-miR-450a-1、hsa-miR-5571、hsa-miR-3189、hsa-miR-490、hsa-miR-142、hsa-miR-31、hsa-miR-548v是显著的预测因素( P<0.05)。应用这8个miRNA构建列线图模型，Concordance值(0.701)及图像校准显示该列线图预测能力较好。1、3、5年曲线下面积(AUC)为0.721、0.748、0.733。生存分析结果显示高风险组较低风险组生存率低( P<0.05)，随着风险评分数值的升高，死亡人数增多。KM生存曲线显示hsa-miR-1293、hsa-miR-5571、hsa-miR-490、hsa-miR-142、hsa-miR-31、hsa-miR-548v与肺腺癌生存预后相关( P<0.05)。另外这8个miRNAs表达种族差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:成功构建基于miRNAs表达预测肺腺癌预后的列线图模型，其预测准确性较高。

目的:筛选血浆外泌体微小核糖核苷酸(microRNA)作为肝细胞癌(HCC)的诊断标志物，并分析候选miRNA在HCC进展中可能发挥的作用。方法:2018年10月至2019年2月收集12例于广州市第一人民医院初诊为"HCC"的患者及12例健康志愿者血浆样本，利用超速离心法收集血浆外泌体，经动态光散射法及蛋白质免疫印迹法鉴定后，提取RNA进行测序。通过定量聚合酶链反应(qPCR)验证候选外泌体miRNA差异表达量，使用 t检验分析各miRNA表达量差异。通过生物信息学方法预测候选miRNA的靶基因及可能调控的通路，分析其在HCC进展过程中发挥的作用，组间比较采用 t检验。 结果:以差异表达倍数2倍以上(Fold change>2.0或<0.5，且 P<0.05)作为标准，分别比较HCC患者术前、术后及健康志愿者血浆外泌体miRNA的差异表达结果，结合两次结果，筛选表达同时上/下调miRNA共12个。其中，表达上调6个(miR-2115-3p、miR-214-3p、miR-511-5p、miR-1299、miR-10a-5p、miR-375-3p)，表达下调6个(miR-219a-2-3p、miR-127-3p、miR-9-5p、miR-383-5p、miR-212-5p、miR-1248)。qPCR验证候选miRNA在HCC患者及健康志愿者血浆外泌体中的表达差异，HCC组miR-1248表达低于健康志愿者组(9.046 ΔCt比7.597 ΔCt， t＝2.849， P<0.05)。 结论:血浆外泌体miR-1248有作为HCC的诊断标志物的潜力。血浆外泌体miR-1248可通过调控受体细胞的细胞外基质受体相互作用、介导代谢重编程抑制HCC进展。

目的:观察结直肠癌细胞中环状RNA PLCE1(circPLCE1)靶向作用于微小RNA(miR)-127-5p/热休克蛋白(HSP)70对细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)/奥沙利铂(OXA)化疗耐药的影响。方法:选取108例结直肠癌组织标本作为研究对象。采用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)分析癌组织中circPLCE1的表达水平与临床病理特征及化疗耐药的关系；培养耐药的结直肠癌细胞SW480/R和HCT116/R，分别敲低/过表达circPLCE1，利用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)和流式细胞法观察两者对细胞化疗耐药的影响；利用转录组测序及蛋白质印迹法(Western blot)分析circPLCE1表达水平与结直肠癌细胞凋亡通路的关系；利用双荧光素酶报告基因实验及Western blot分析circPLCE1和miR-127-5p的关系及miR-127-5p的下游靶基因。计数资料比较采用 χ2检验，计量数据比较采用 t检验。 结果:qRT-PCR实验结果显示，circPLCE1表达量与患者淋巴结转移、远处转移、TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期)和CapeOX方案化疗耐药相关(51.9%比25.9%、14.8%比3.7%、53.7%比25.9%、37.5%比12.5%， χ2＝7.636、3.967、8.694、5.333， P<0.05)。在SW480/R和HCT116/R细胞中敲低circPLCE1表达后行细胞耐药实验，结果显示细胞活力下降，凋亡水平升高(2.66±0.12比4.85±0.12、3.47±0.24比5.82±0.41， t＝13.410、4.912， P<0.05)；过表达circPLCE1后行细胞耐药实验，结果显示细胞活力升高，凋亡水平下降(8.69±0.29比2.58±0.12、5.19±0.12比2.80±0.07， t＝19.580、17.020， P<0.05)。蛋白印迹实验表明在SW480/R细胞中敲低circPLCE1表达后B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)/bcl-2相关X蛋白(bax)比值、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达水平升高(1.00±0.03比2.18±0.11、1.00±0.05比1.38±0.08， t＝9.970、4.250， P<0.05)，过表达circPLCE1后bcl-2/bax比值、Caspase-3蛋白表达水平降低(1.00±0.05比0.42±0.02、1.00±0.03比0.71±0.03， t＝10.340、6.330， P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果表明miR-127-5p靶向circPLCE1(1.00±0.03比0.57±0.02， t＝12.082， P<0.05)和HSP70的3’端非编码区(3’UTR)(1.00±0.03比0.66±0.04， t＝6.438， P<0.05)。在SW480和HCT116细胞中，敲低circPLCE1表达后HSP70蛋白表达降低(1.00比0.61±0.03、1.00比0.60±0.05， t＝12.130、8.729， P<0.05)，过表达circPLCE1后HSP70蛋白表达升高(1.00比1.92±0.06、1.00比1.35±0.09， t＝15.580、4.068， P<0.05)。 结论:circPLCE1可通过靶向作用于miR-127-5p/HSP70信号轴调控结直肠癌细胞5-Fu/OXA化疗耐药。

目的:探讨人微小RNA(has-miR)-30a-5p调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对胃癌细胞增殖及侵袭的影响及其作用机制。方法:体外培养胃癌MKN-45细胞；在所研究胃癌细胞系中使用小干扰RNA(siRNA)转染建立miR-30a-5p的敲除和过表达模型，胃癌MKN-45细胞分为3组：miR-30a-5p小干扰RNA(miR-30a-5p inhibitor)组，miR-30a-5p过表达RNA组和空白对照组(NC)，荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测Wnt/β-catenin信号通路相关标志物Cyclin D1(CCND1)基因的表达水平；双荧光素酶报告基因实验验证miR-30a-5p与Wnt信号通路下游关键基因CCND1的靶向调节关系；在培养的胃癌细胞MKN-45中加入Wnt/β-catenin信号通路抑制剂-银杏双黄酮，分为miR-30a-5p inhibitor组、miR-30a-5p inhibitor+银杏双黄酮组、miR-30a-5p Inhibitor NC组及miR-30a-5p Inhibitor NC+银杏双黄酮组，应用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验验证各组细胞的增殖能力，细胞迁移实验(Transwell)验证各组细胞的侵袭能力。各组间比较采用 t检验。 结果:qPCR实验结果显示过表达miR-30a-5p能够显著抑制CCND1在mRNA的表达(0.58±0.05， t＝11.39， P<0.01)，Western blot实验结果显示，CCND1蛋白水平，miR-30a-5p inhibitor组较NC组明显上升(284 437±2 127比215 273±4 097， t＝25.95， P<0.01)，miR-30a-5p mimics组较NC组明显下降(85 586±309比197 661±948， t＝194.70， P<0.01)；双荧光素酶实验结果显示过表达miR-30a-5p后野生组中WNT信号通路活性较对照组显著降低(0.39±0.03， t＝13.96， P<0.01)；CCK-8结果显示2 d后miR-30a-5p inhibitor+银杏双黄酮组细胞抑制率明显高于miR-30a-5p inhibitor组[(93.09±4.18)%比(146.42±5.80)%， t＝12.92， P<0.01]；miR-30a-5p Inhibitor NC+银杏双黄酮组细胞抑制率明显高于miR-30a-5p Inhibitor NC组[(53.80±3.54)%比(100.00±2.18)%， t＝19.25， P<0.01]。Transwell结果显示miR-30a-5p inhibitor+银杏双黄酮组穿膜细胞量明显低于miR-30a-5p inhibitor组[(63.67±9.61)个比(100.00±10.44)个， t＝4.44， P<0.05]；miR-30a-5p Inhibitor NC+银杏双黄酮组穿膜细胞量明显低于miR-30a-5p Inhibitor NC组[(19.33±6.66)个比(45.00±4.58)个， t＝5.50， P<0.01]。 结论:miR-30a-5p可以调控Wnt/β-catenin信号通路，过表达miR-30a-5p后可抑制Wnt/β-catenin信号通路降低胃癌细胞中Cyclin D1(CCND1)的表达，进一步影响胃癌的增殖与侵袭。

目的 分析血浆微小RNA-379(miR-379)、微小RNA-195(miR-195)、生长停滞特异性蛋白6(Gas6)水平早期检测在急性心肌梗死(AMI)患者中的应用价值.方法 选取2021年5至2022年7月于首都医科大学附属北京世纪坛医院心内科住院治疗的265例患者,分为AMI组(n=127)和非AMI组(n=138),选取同期120名健康体检者设为对照组.比较三组入组时的血浆miR-379、miR-195表达量及Gas6水平;采用Pearson相关系数分析AMI患者入组时的血浆Gas6水平与miR-379、miR-195表达量的关系;采用受试者工作曲线(ROC)分析入组时的血浆Gas6水平及miR-379、miR-195表达量对早期AMI的诊断价值.结果 三组入组时的血浆miR-379、miR-195、Gas6水平比较差异有统计学意义(P<0.05);血浆miR-379水平比较:AMI组<非AMI组<对照组,miR-195、Gas6水平比较:AMI组>非AMI组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05).Pearson相关系数分析显示,Gas6与miR-379水平呈负相关(P<0.05),与miR-195水平呈正相关(P<0.05).ROC结果显示,血浆miR-379、miR-195、Gas6水平单独诊断早期AMI具有一定局限性(AUC=0.808、0.718、0.752),三者联合诊断的效能更佳(AUC=0.879).结论 血浆miR-379、miR-195、Gas6水平在AMI患者中异常表达,三指标可作为AMI早期疾病诊断的参考指标.

目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-127在体外调节胰腺癌的作用及其分子机制.方法 利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测各种胰腺癌细胞和胰腺癌临床样本中内源性miR-127的表达;利用慢病毒载体过表达miR-127,并将其作用于胰腺癌细胞Capan-1和PANC-1细胞中,利用细胞增殖检测方法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell小室方法检测细胞侵袭能力;双荧光素酶检测方法和RT-qPCR方法检测miR-127的下游靶基因,B细胞淋巴瘤/白血病-2相关基因5 (BAG5);过表达BAG5在过表达miR-127的胰腺癌Capan-1和PANC-1细胞中,随后检测其效果.结果 与正常胰腺导管细胞比较,miR-127在多种胰腺癌细胞株的表达从(30.0±8.1)％ ～(72.0±12.3)％ (P=0.004),与周围正常胰腺组织比较,胰腺肿瘤的表达为(48.0±18.2)％ (P=0.003);通过慢病毒感染CAPAN-1和PANC-1细胞,过表达miR-127能抑制癌症增殖(P =0.002),细胞周期阻滞在G1期,Canpan-1细胞从(49.0±6.2)％增加到(62.0±4.3)％(P=0.010),PANC-1细胞比例从(56.0±7.1)％增加到68±4.1％ (P=0.015)和侵袭能力的下降(P=0.004);胰腺癌中miR-127的下游靶基因是BAG5;过表达BAG5在Capan-1和PANC-1细胞中能逆转miR-127对癌症发展的肿瘤抑制作用(P =0.000).结论 MiR-127可作为在胰腺癌中的肿瘤抑制因子,其功能调节的下游靶基因是BAG5.

目的 探讨微小RNA 127(miR-127)在宫颈癌组织的表达变化及意义.方法 采用实时荧光定量PCR法检测93例宫颈癌患者癌组织(观察组)和31例子宫肌瘤患者宫颈组织(对照组)miR-127表达.分析miR-127表达与宫颈癌患者临床病理参数(年龄、FIGO分期、肿瘤直径、肿瘤类型、病理分型、组织学分级、肌层浸润深度、淋巴结转移)的关系,用Kaplan-Meier生存曲线和Log Rank检验比较观察组miR-127高、低表达者的5年生存率和生存时间.结果 宫颈癌组织miR-127表达明显低于正常宫颈组织(P<0.05);miR-127表达水平与宫颈癌淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄、FIGO分期、肿瘤直径、病灶类型、病理分型、组织学分级、肌层浸润深度均无关(P均>0.05).宫颈癌患者miR-127低表达40例,高表达53例;miR-127高表达者及低表达者5年生存率分别为92.45%、62.50%,生存时间分别为(57.79 ±1.20)、(49.20 ±2.62)个月(P均<0.05).结论 miR-127在宫颈癌组织中低表达,宫颈癌组织miR-127表达检测有助于预测淋巴结转移情况和患者预后.