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微小RNA-486-5p通过调控缺氧诱导因子-1α/人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶A信号通路影响结肠癌的发生发展
编辑人员丨5天前
目的:探讨微小RNA-486-5p(miR-486-5p)通过调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶A(Akt)信号通路影响结肠癌的发生发展。方法:脂质体Lipofectamine? 3000将miR-486-5p模拟物NC(对照),miR-486-5p模拟物转入SW480结肠癌细胞中,细胞购自上海细胞库。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-486-5p表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,Transwell实验检测细胞侵袭,蛋白质印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关蛋白X(bax)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p27、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、HIF-1α、PTEN、PI3K及磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达。组间比较采用 t检验进行分析。 结果:miR-486-5p模拟物组细胞miR-486-5p表达量(1.87±0.09比1.00±0.10, t=5.589, P<0.05)、细胞早期凋亡率[(15.48±0.97)%比(1.47±0.09)%, t=4.327, P<0.05],细胞晚期凋亡率[(27.46±1.54)%比(3.24±0.13)%, t=5.652, P<0.05],细胞周期G 1期[(60.32±4.43)%比(24.08±1.96)%, t=4.578, P<0.05]、bax(0.96±0.08比0.18±0.01, t=5.373, P<0.05)、p27(0.86±0.06比0.32±0.01, t=5.762, P<0.05)及PTEN(1.64±0.09比0.46±0.02, t=4.874, P<0.05)蛋白表达量高于对照组,miR-486-5p模拟物组细胞活力(0.33±0.01比0.54±0.03, t=4.582, P<0.05)、细胞侵袭数目[(37.59±2.64)个比(179.93±6.96)个, t=4.147, P<0.05],bcl-2(0.21±0.01比1.04±0.09, t=5.287, P<0.05)、Cyclin D1 (0.14±0.00比0.85±0.07, t=4.642, P<0.05)、MMP-9(0.28±0.02比0.84±0.06, t=4.643, P<0.05)、HIF-1α(0.45±0.03比1.53±0.09, t=5.562, P<0.05)、PI3K(0.38±0.01比1.78±0.10, t=5.468, P<0.05)及p-Akt(0.38±0.02比1.10±0.08, t=4.129, P<0.05)蛋白表达量低于对照组。 结论:上调miR-486-5p表达量可诱导结肠癌细胞SW480凋亡、抑制细胞侵袭、使细胞周期发生阻滞,可能与抑制HIF-1α/PTEN/PI3K/Akt信号通路有关。
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编辑人员丨5天前
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血清3′端2′- O-甲基化修饰的miR-486-5p诊断冠心病的临床价值
编辑人员丨5天前
目的:检测冠心病患者血清中3′端2′- O-甲基化(2′- O-methylation,2′Ome)修饰的微小RNA-486-5p(miR-486-5p)水平的变化,评估其作为辅助诊断冠心病生物标志物的临床应用价值。 方法:选取2021年1月至2022年12月于东部战区总医院确诊的冠心病患者70例及同期年龄、性别匹配的健康体检者60例进行回顾性病例对照研究。根据冠状动脉造影结果计算Gensini积分,将冠心病组分为轻中度狭窄(40例)和重度狭窄亚组(30例)。比较冠心病组及健康对照组的血清生化指标、miR-486-5p及2′Ome-miR-486-5p表达水平;采用Spearman相关性分析生化指标、Gensini积分与血清miR-486-5p及2′Ome-miR-486-5p水平的相关性;多因素Logistic回归分析血清miR-486-5p及2′Ome-miR-486-5p的水平对冠心病及冠状动脉狭窄程度的影响;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价2′Ome-miR-486-5p水平对冠心病及冠状动脉狭窄程度的诊断价值。结果:冠心病组血清miR-486-5p和2′Ome-miR-486-5p水平高于健康对照组[0.31(0.17,0.84)比0.21(0.11,0.49), Z=2.055, P<0.05;2.30(1.32,5.40)比0.86(0.55,1.72), Z=5.840, P<0.05];轻中度和重度狭窄亚组血清2′Ome-miR-486-5p表达水平均高于健康对照组( P均<0.05),且重度狭窄亚组中血清2′Ome-miR-486-5p水平高于轻中度狭窄亚组[3.54(1.78,5.44)比1.63(1.25,4.07), Z=-2.053, P<0.05]。血清miR-486-5p和2′Ome-miR-486-5p水平均与Gensini评分呈正相关( r=0.277、0.479, P均<0.05);多因素Logistic回归分析显示,在校正了年龄、性别等混杂因素的影响后,血清2′Ome-miR-486-5p水平是冠状动脉狭窄程度的独立影响因素( OR=1.025,95% CI 1.002~1.049, P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清2′Ome-miR-486-5p水平诊断冠心病、冠状动脉轻中度和重度狭窄的ROC曲线下面积分别为0.798、0.752和0.859,在最佳截断值为0.912、0.863和2.209时,敏感度分别为91.4%、92.5%和73.3%,特异度分别为56.7%、51.7%和81.7%。 结论:冠心病患者血清2′Ome-miR-486-5p水平较高,且是冠状动脉狭窄程度的影响因素,可作为冠心病患者辅助诊断的生物标志物。
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编辑人员丨5天前
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动态对比增强磁共振成像联合血清微小RNA-486-5p在胰腺癌诊断及手术可切除性评估的应用
编辑人员丨5天前
目的:探究动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)联合血清微小RNA(miR)-486-5p对胰腺癌诊断及手术可切除性评估价值。方法:选取2019年6月至2023年6月烟台市烟台山医院收治136例胰腺占位患者为研究对象,患者均接受DCE-MRI扫描及血清miR-486-5p检测,以手术病理为诊断金标准,以实际手术切除为手术可切除性标准,通过诊断试验四格表评价DCE-MRI、血清miR-486-5p及两者联合对胰腺癌诊断、手术可切除性评估价值,组间比较采用Mann-Whitney U检验和 χ2检验。 结果:136例患者经病理诊断确诊胰腺癌(胰腺癌组)98例,非胰腺癌(良性病变组)38例。胰腺癌组血清miR-486-5p表达为3.48(1.41~7.64),显著高于良性病变组的1.02(0.36~1.58)( Z=3.162, P<0.05)。DCE-MRI联合血清miR-486-5p诊断胰腺癌的敏感度、特异度、准确度、与病理诊断的一致性Kappa值分别为97.95%(96/98)、81.58%(31/38)、93.38%(127/136)、0.829。98例胰腺癌患者中,最终实际行手术切除35例(可切除组),不可切除63例(不可切除组)。可手术组血清miR-486-5p表达为2.05(1.01~3.72),显著低于不可切除组的4.88(2.95~10.01)( Z=3.882, P<0.05)。DCE-MRI联合血清miR-486-5p预测胰腺癌可切除的敏感度、特异度、准确度、与实际手术切除的一致性Kappa值分别为77.14%(27/35)、100.00%(63/63)、91.84%(90/98)、0.813。 结论:DCE-MRI联合血清miR-486-5p能提高胰腺癌诊断敏感度及准确度,且预测手术可切除性与实际手术切除一致性更高。
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编辑人员丨5天前
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微小RNA-486对小鼠酒精性脂肪肝病的影响
编辑人员丨5天前
目的:观察微小RNA(miRNA,miR)-486对小鼠酒精性脂肪肝病的影响。方法:同源的miR-486敲除小鼠(购自江苏集萃药康生物有限公司)杂合子交配得到子一代,选取8周龄子一代分为miR-486敲除对照组(KO-PAIR组)、miR-486敲除实验组(KO-ETOH组)、野生对照组(WT-PAIR组)和野生实验组(WT-ETOH组),每组8只。实验组小鼠喂食5%TP4030D酒精饲料,对照组喂食TP4030C对照饲料,每只小鼠每天喂食15 ml,喂养4周。实验最后1 d上午酒精组联合1次酒精(31.5%)灌胃,对照组用糊精灌胃,每只100 μl。9 h后处死小鼠收集其肝组织和血清。肝组织切片行苏木精-伊红(HE)和饱和油红O染色;检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法(Western blot)检测脂质代谢相关分子腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的mRNA和蛋白水平;评估酒精性脂肪肝病的严重程度,并探讨机制。多样本间比较采用单因素方差分析,组间比较采用 t检验分析。 结果:HE染色和饱和油红O染色显示,WT-ETOH组肝脏脂肪变最严重,KO-ETOH组脂肪变明显改善。与WT-ETOH组比较,KO-ETOH组的血清ALT、AST和TNF-α均明显降低[(124.875±38.591) U/L比(45.500±20.333) U/L,(190.750±23.789) U/L比(140.625±31.794) U/L,(73.407±17.121) μg/L比(50.056±12.717) μg/L, F=32.503、5.876、30.865, P<0.05],差异有统计学意义;与WT-ETOH组比较,KO-ETOH组AMPK的mRNA水平较高(0.61±0.09比1.06±0.11, F=21.249, P<0.01),差异有统计学意义,而ACC的mRNA水平较低(1.98±0.23比1.23±0.12, F=68.584, P<0.01),差异有统计学意义;Western blot实验检测进一步验证了这一结果。 结论:miR-486敲除可以减轻小鼠酒精性脂肪肝病,其机制可能是通过调节脂质代谢来实现的。
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编辑人员丨5天前
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微小RNA-486-5p通过调控缺氧诱导因子-1α/人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶A信号通路影响前列腺癌的发生发展
编辑人员丨5天前
本研究将在前人基础上,以微小RNA(miR)-486-5p为研究对象,探讨miR-486-5p对前列腺癌细胞PC-3凋亡、侵袭的影响及其机制。
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编辑人员丨5天前
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生长激素腺瘤中差异表达的微小RNAs及其靶基因的相关生物信息学分析
编辑人员丨5天前
目的:探讨垂体生长激素(GH)细胞腺瘤中差异表达的微小RNAs(miRNAs)及其靶基因的生物学功能和两者的调控关系。方法:利用miRDB、miRwalk、Targetscan7.2及starbase数据库对差异表达的miRNAs进行靶基因预测并对靶基因进行GO、KEGG和蛋白-蛋白相互作用网(PPI)分析,随后筛选出有意义的核心靶基因,取核心靶基因和数据库的mRNAs测序结果进行对比,构建可视化的miRNAs-靶基因调控关系网。结果:以蛋白相互作用程度≥20为标准,本研究得到113个上调的miRNAs核心靶基因和128个下调的miRNAs核心靶基因,进一步取交集得到13个目的核心靶基因,这些基因主要涉及的通路为泛素介导蛋白水解通路,其相对应的调控miRNAs为miR-15b、miR-365、miR-32-3p、miR-486-5p。结论:本研究应用生物信息学分析工具构建了与GH细胞腺瘤密切相关的miRNAs-核心靶基因相互调控网,发掘了一些可能与GH细胞腺瘤发病机制和病理过程有关的蛋白和通路。
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编辑人员丨5天前
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结直肠癌患者癌组织及血清中微小RNA-486-3p的表达及其临床意义
编辑人员丨5天前
本研究旨在观察微小RNA(microRNA,miR)-486-3p在结直肠癌患者中的表达,探讨其与病理特点之间的关系。
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编辑人员丨5天前
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肿瘤相关钙信号传感器2在结直肠癌组织的表达及其调控因子分析
编辑人员丨5天前
目的:探讨肿瘤相关钙信号传感器2在结直肠癌组织的表达变化及其上游微小RNA(miRNA,miR)对其表达水平的调控。方法:选取2020年1月至2023年1月新乡医学院第一附属医院收治的58例结直肠癌临床标本和癌旁组织作为研究对象,采用双向电泳技术分析结直肠癌和癌旁组织差异表达的蛋白,选取肿瘤相关钙信号传感器2作为研究对象,采用蛋白质印迹法(Western blot)分析癌旁组织和结直肠癌组织肿瘤相关钙信号传感器2表达水平。免疫组织化学分析两组组织细胞增殖抗原(PCNA)的阳性率;相关性分析肿瘤相关钙信号传感器2与细胞增殖的关系。转录组学分析癌旁组织和结肠癌组织miRNA,筛选差异靶向肿瘤相关钙信号传感器2的miRNA,并采用双荧光素酶报告基因验证分析miRNA的靶向性。组间计量数据比较采用 t检验。 结果:双向电泳筛选10个差异的蛋白质,本研究选择差异显著的蛋白肿瘤相关钙信号传感器2作为研究对象。癌旁组织中肿瘤相关钙信号传感器2蛋白表达水平(0.92±0.14)明显低于结直肠癌组织(1.62±0.20),差异有统计学意义( t=14.320, P<0.05)。PCNA表达阴性患者肿瘤相关钙信号传感器2蛋白表达水平(1.33±0.13)明显低于结直肠癌组织(1.69±0.16),差异有统计学意义( t=6.092, P<0.05)。癌旁组织和结直肠癌组织总计差异miRNA共1 218个,其中上调表达732个,下调486个。发现5个与肿瘤相关钙信号传感器2存在互补的miRNA,分别为miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p。癌旁组织中miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p表达水平(1.07±0.08、1.07±0.09、1.11±0.15、1.01±0.10、1.15±0.15)明显高于结直肠癌组织(0.28±0.05、0.30±0.07、0.45±0.08、0.54±0.09、0.69±0.12),差异有统计学意义( t=21.050、26.350、14.850、12.600、9.165, P<0.05)。miRNA对照和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.96±0.07、0.94±0.03、0.92±0.06、0.91±0.08、0.95±0.05)明显高于miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p模拟物和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.22±0.06、0.24±0.07、0.34±0.09、0.45±0.08、0.60±0.12),差异有统计学意义( t=23.541、23.102、18.208、14.231、12.514, P<0.05)。 结论:肿瘤相关钙信号传感器2在结直肠组织中表达显著上调,受miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p等miRNA调控。
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编辑人员丨5天前
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急性髓系白血病患者血清LncRNA PVT1、miR-486-5p表达及预后价值
编辑人员丨2周前
目的 探讨急性髓系白血病(AML)患者血清长链非编码RNA PVT1基因(LncRNA PVT1)、微小RNA-486-5p(miR-486-5p)表达水平与疾病病理特征和预后的关系.方法 回顾性选取2017年4月—2019年3月河北北方学院附属第二医院血液科就诊的AML患者100例为AML组,选取同期健康体检者100例为健康对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血清LncRNA PVT1、miR-486-5p相对表达量;采用Pearson相关法分析AML患者血清LncRNA PVT1与miR-486-5p水平的相关性;Kaplan-Meier法分析AML患者生存曲线;采用Cox回归分析评价影响AML患者预后的危险因素.结果 AML组患者LncRNA PVT1水平高于健康对照组,miR-486-5p水平低于健康对照组(t/P=15.403/<0.001、18.305/<0.001).Pearson 相关性分析显示,AML 患者 LncRNA PVT1 与miR-486-5p水平呈负相关(r=-0.261,P<0.01);不同白细胞计数、骨髓原始细胞比率、NCCN危险分层患者LncRNA PVT1、miR-486-5p 水平比较差异有统计学意义(LncRNA PVT1:t/P=2.934/0.004,2.901/0.005,10.985/<0.001;miR-486-5p:t/P=2.598/0.012,2.604/0.012,8.593/<0.001).LncRNA PVT1 高水平表达者 3 年总生存率低于LncRNA PVT1低水平表达者(x2/P=14.16/<0.001),miR-486-5p高水平表达者3年总生存率高于miR-486-5p低水平表达者(x2/P=16.82/<0.001).Cox回归分析显示,LncRNA PVT1高表达、miR-486-5p低表达、NCCN危险分层高是急性髓系白血病患者预后不良的危险因素[RR(95%CI)=1.982(1.148~2.993),1.668(1.085~2.641),1.659(1.068~2.602)].结论 AML患者LncRNA PVT1高表达,miR-486-5p低表达,二者水平与白细胞计数、骨髓原始细胞比率、NCCN危险分层和患者预后有关.
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编辑人员丨2周前
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晚期NSCLC放疗前后血清circPVT1和miR-486-5p水平变化及临床意义
编辑人员丨2023/9/30
目的 探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者放疗前后血清环状RNA浆细胞瘤转化迁移基因 1(circPVT1)、微小RNA-486-5p(miR-486-5p)水平变化及对放疗疗效的评估价值.方法 研究纳入137例晚期NSCLC患者作为NSCLC组,另选取健康体检者140例作为对照组.采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清circPVT1、miR-486-5p表达水平,比较放疗前后及不同放疗疗效患者血清circPVT1和miR-486-5p水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circPVT1、miR-486-5p水平对放疗疗效的诊断价值.结果 与对照组相比,NSCLC组放疗前血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);经Targetscan在线分析显示,circPVT1与miR-486-5p有靶向关系;鳞癌与腺癌NSCLC患者放疗前血清circPVT1、miR-486-5p表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);与TNM分期Ⅲ期患者相比,Ⅳ期患者血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);与放疗前相比,放疗后患者血清circPVT1表达水平降低,miR-486-5p表达水平升高(P<0.05).与放疗有效组相比,无效组放疗前和放疗后血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);与放疗前相比,放疗有效组和无效组在放疗后均显示血清circPVT1水平降低,而miR-486-5p水平升高(P<0.01).血清circPVT1、miR-486-5p联合诊断放疗无效的AUC为0.918(95%CI:0.859~0.958),敏感度为80.65%,特异度为88.00%,联合诊断效能优于单独诊断.结论 血清circPVT1、miR-486-5p水平对晚期NSCLC放疗疗效有一定评估价值.
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编辑人员丨2023/9/30
