目的:探讨微小RNA-486-5p(miR-486-5p)通过调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶A(Akt)信号通路影响结肠癌的发生发展。方法:脂质体Lipofectamine? 3000将miR-486-5p模拟物NC(对照)，miR-486-5p模拟物转入SW480结肠癌细胞中，细胞购自上海细胞库。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-486-5p表达，噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期，Transwell实验检测细胞侵袭，蛋白质印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关蛋白X(bax)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p27、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、HIF-1α、PTEN、PI3K及磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达。组间比较采用 t检验进行分析。 结果:miR-486-5p模拟物组细胞miR-486-5p表达量(1.87±0.09比1.00±0.10， t＝5.589， P<0.05)、细胞早期凋亡率[(15.48±0.97)%比(1.47±0.09)%， t＝4.327， P<0.05]，细胞晚期凋亡率[(27.46±1.54)%比(3.24±0.13)%， t＝5.652， P<0.05]，细胞周期G 1期[(60.32±4.43)%比(24.08±1.96)%， t＝4.578， P<0.05]、bax(0.96±0.08比0.18±0.01， t＝5.373， P<0.05)、p27(0.86±0.06比0.32±0.01， t＝5.762， P<0.05)及PTEN(1.64±0.09比0.46±0.02， t＝4.874， P<0.05)蛋白表达量高于对照组，miR-486-5p模拟物组细胞活力(0.33±0.01比0.54±0.03， t＝4.582， P<0.05)、细胞侵袭数目[(37.59±2.64)个比(179.93±6.96)个， t＝4.147， P<0.05]，bcl-2(0.21±0.01比1.04±0.09， t＝5.287， P<0.05)、Cyclin D1 (0.14±0.00比0.85±0.07， t＝4.642， P<0.05)、MMP-9(0.28±0.02比0.84±0.06， t＝4.643， P<0.05)、HIF-1α(0.45±0.03比1.53±0.09， t＝5.562， P<0.05)、PI3K(0.38±0.01比1.78±0.10， t＝5.468， P<0.05)及p-Akt(0.38±0.02比1.10±0.08， t＝4.129， P<0.05)蛋白表达量低于对照组。 结论:上调miR-486-5p表达量可诱导结肠癌细胞SW480凋亡、抑制细胞侵袭、使细胞周期发生阻滞，可能与抑制HIF-1α/PTEN/PI3K/Akt信号通路有关。

目的:检测冠心病患者血清中3′端2′- O-甲基化（2′- O-methylation，2′Ome）修饰的微小RNA-486-5p（miR-486-5p）水平的变化，评估其作为辅助诊断冠心病生物标志物的临床应用价值。 方法:选取2021年1月至2022年12月于东部战区总医院确诊的冠心病患者70例及同期年龄、性别匹配的健康体检者60例进行回顾性病例对照研究。根据冠状动脉造影结果计算Gensini积分，将冠心病组分为轻中度狭窄（40例）和重度狭窄亚组（30例）。比较冠心病组及健康对照组的血清生化指标、miR-486-5p及2′Ome-miR-486-5p表达水平；采用Spearman相关性分析生化指标、Gensini积分与血清miR-486-5p及2′Ome-miR-486-5p水平的相关性；多因素Logistic回归分析血清miR-486-5p及2′Ome-miR-486-5p的水平对冠心病及冠状动脉狭窄程度的影响；采用受试者工作特征（ROC）曲线评价2′Ome-miR-486-5p水平对冠心病及冠状动脉狭窄程度的诊断价值。结果:冠心病组血清miR-486-5p和2′Ome-miR-486-5p水平高于健康对照组［0.31（0.17，0.84）比0.21（0.11，0.49）， Z=2.055， P<0.05；2.30（1.32，5.40）比0.86（0.55，1.72）， Z=5.840， P<0.05］；轻中度和重度狭窄亚组血清2′Ome-miR-486-5p表达水平均高于健康对照组（ P均<0.05），且重度狭窄亚组中血清2′Ome-miR-486-5p水平高于轻中度狭窄亚组［3.54（1.78，5.44）比1.63（1.25，4.07）， Z=-2.053， P<0.05］。血清miR-486-5p和2′Ome-miR-486-5p水平均与Gensini评分呈正相关（ r=0.277、0.479， P均<0.05）；多因素Logistic回归分析显示，在校正了年龄、性别等混杂因素的影响后，血清2′Ome-miR-486-5p水平是冠状动脉狭窄程度的独立影响因素（ OR=1.025，95% CI 1.002~1.049， P<0.05）。ROC曲线分析显示，血清2′Ome-miR-486-5p水平诊断冠心病、冠状动脉轻中度和重度狭窄的ROC曲线下面积分别为0.798、0.752和0.859，在最佳截断值为0.912、0.863和2.209时，敏感度分别为91.4%、92.5%和73.3%，特异度分别为56.7%、51.7%和81.7%。 结论:冠心病患者血清2′Ome-miR-486-5p水平较高，且是冠状动脉狭窄程度的影响因素，可作为冠心病患者辅助诊断的生物标志物。

目的:探究动态对比增强磁共振成像（DCE-MRI）联合血清微小RNA（miR）-486-5p对胰腺癌诊断及手术可切除性评估价值。方法:选取2019年6月至2023年6月烟台市烟台山医院收治136例胰腺占位患者为研究对象，患者均接受DCE-MRI扫描及血清miR-486-5p检测，以手术病理为诊断金标准，以实际手术切除为手术可切除性标准，通过诊断试验四格表评价DCE-MRI、血清miR-486-5p及两者联合对胰腺癌诊断、手术可切除性评估价值，组间比较采用Mann-Whitney U检验和 χ2检验。 结果:136例患者经病理诊断确诊胰腺癌（胰腺癌组）98例，非胰腺癌（良性病变组）38例。胰腺癌组血清miR-486-5p表达为3.48（1.41～7.64），显著高于良性病变组的1.02（0.36～1.58）（ Z＝3.162， P<0.05）。DCE-MRI联合血清miR-486-5p诊断胰腺癌的敏感度、特异度、准确度、与病理诊断的一致性Kappa值分别为97.95%（96/98）、81.58%（31/38）、93.38%（127/136）、0.829。98例胰腺癌患者中，最终实际行手术切除35例（可切除组），不可切除63例（不可切除组）。可手术组血清miR-486-5p表达为2.05（1.01～3.72），显著低于不可切除组的4.88（2.95～10.01）（ Z＝3.882， P<0.05）。DCE-MRI联合血清miR-486-5p预测胰腺癌可切除的敏感度、特异度、准确度、与实际手术切除的一致性Kappa值分别为77.14%（27/35）、100.00%（63/63）、91.84%（90/98）、0.813。 结论:DCE-MRI联合血清miR-486-5p能提高胰腺癌诊断敏感度及准确度，且预测手术可切除性与实际手术切除一致性更高。

目的:观察微小RNA(miRNA，miR)-486对小鼠酒精性脂肪肝病的影响。方法:同源的miR-486敲除小鼠(购自江苏集萃药康生物有限公司)杂合子交配得到子一代，选取8周龄子一代分为miR-486敲除对照组(KO-PAIR组)、miR-486敲除实验组(KO-ETOH组)、野生对照组(WT-PAIR组)和野生实验组(WT-ETOH组)，每组8只。实验组小鼠喂食5%TP4030D酒精饲料，对照组喂食TP4030C对照饲料，每只小鼠每天喂食15 ml，喂养4周。实验最后1 d上午酒精组联合1次酒精(31.5%)灌胃，对照组用糊精灌胃，每只100 μl。9 h后处死小鼠收集其肝组织和血清。肝组织切片行苏木精-伊红(HE)和饱和油红O染色；检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平；实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法(Western blot)检测脂质代谢相关分子腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的mRNA和蛋白水平；评估酒精性脂肪肝病的严重程度，并探讨机制。多样本间比较采用单因素方差分析，组间比较采用 t检验分析。 结果:HE染色和饱和油红O染色显示，WT-ETOH组肝脏脂肪变最严重，KO-ETOH组脂肪变明显改善。与WT-ETOH组比较，KO-ETOH组的血清ALT、AST和TNF-α均明显降低[(124.875±38.591) U/L比(45.500±20.333) U/L，(190.750±23.789) U/L比(140.625±31.794) U/L，(73.407±17.121) μg/L比(50.056±12.717) μg/L， F＝32.503、5.876、30.865， P<0.05]，差异有统计学意义；与WT-ETOH组比较，KO-ETOH组AMPK的mRNA水平较高(0.61±0.09比1.06±0.11， F＝21.249， P<0.01)，差异有统计学意义，而ACC的mRNA水平较低(1.98±0.23比1.23±0.12， F＝68.584， P<0.01)，差异有统计学意义；Western blot实验检测进一步验证了这一结果。 结论:miR-486敲除可以减轻小鼠酒精性脂肪肝病，其机制可能是通过调节脂质代谢来实现的。

目的:探讨肿瘤相关钙信号传感器2在结直肠癌组织的表达变化及其上游微小RNA(miRNA，miR)对其表达水平的调控。方法:选取2020年1月至2023年1月新乡医学院第一附属医院收治的58例结直肠癌临床标本和癌旁组织作为研究对象，采用双向电泳技术分析结直肠癌和癌旁组织差异表达的蛋白，选取肿瘤相关钙信号传感器2作为研究对象，采用蛋白质印迹法(Western blot)分析癌旁组织和结直肠癌组织肿瘤相关钙信号传感器2表达水平。免疫组织化学分析两组组织细胞增殖抗原(PCNA)的阳性率；相关性分析肿瘤相关钙信号传感器2与细胞增殖的关系。转录组学分析癌旁组织和结肠癌组织miRNA，筛选差异靶向肿瘤相关钙信号传感器2的miRNA，并采用双荧光素酶报告基因验证分析miRNA的靶向性。组间计量数据比较采用 t检验。 结果:双向电泳筛选10个差异的蛋白质，本研究选择差异显著的蛋白肿瘤相关钙信号传感器2作为研究对象。癌旁组织中肿瘤相关钙信号传感器2蛋白表达水平(0.92±0.14)明显低于结直肠癌组织(1.62±0.20)，差异有统计学意义( t＝14.320， P<0.05)。PCNA表达阴性患者肿瘤相关钙信号传感器2蛋白表达水平(1.33±0.13)明显低于结直肠癌组织(1.69±0.16)，差异有统计学意义( t＝6.092， P<0.05)。癌旁组织和结直肠癌组织总计差异miRNA共1 218个，其中上调表达732个，下调486个。发现5个与肿瘤相关钙信号传感器2存在互补的miRNA，分别为miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p。癌旁组织中miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p表达水平(1.07±0.08、1.07±0.09、1.11±0.15、1.01±0.10、1.15±0.15)明显高于结直肠癌组织(0.28±0.05、0.30±0.07、0.45±0.08、0.54±0.09、0.69±0.12)，差异有统计学意义( t＝21.050、26.350、14.850、12.600、9.165， P<0.05)。miRNA对照和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.96±0.07、0.94±0.03、0.92±0.06、0.91±0.08、0.95±0.05)明显高于miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p模拟物和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.22±0.06、0.24±0.07、0.34±0.09、0.45±0.08、0.60±0.12)，差异有统计学意义( t＝23.541、23.102、18.208、14.231、12.514， P<0.05)。 结论:肿瘤相关钙信号传感器2在结直肠组织中表达显著上调，受miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p等miRNA调控。

目的 探讨急性髓系白血病(AML)患者血清长链非编码RNA PVT1基因(LncRNA PVT1)、微小RNA-486-5p(miR-486-5p)表达水平与疾病病理特征和预后的关系.方法 回顾性选取2017年4月—2019年3月河北北方学院附属第二医院血液科就诊的AML患者100例为AML组,选取同期健康体检者100例为健康对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血清LncRNA PVT1、miR-486-5p相对表达量;采用Pearson相关法分析AML患者血清LncRNA PVT1与miR-486-5p水平的相关性;Kaplan-Meier法分析AML患者生存曲线;采用Cox回归分析评价影响AML患者预后的危险因素.结果 AML组患者LncRNA PVT1水平高于健康对照组,miR-486-5p水平低于健康对照组(t/P=15.403/＜0.001、18.305/＜0.001).Pearson 相关性分析显示,AML 患者 LncRNA PVT1 与miR-486-5p水平呈负相关(r=-0.261,P＜0.01);不同白细胞计数、骨髓原始细胞比率、NCCN危险分层患者LncRNA PVT1、miR-486-5p 水平比较差异有统计学意义(LncRNA PVT1:t/P=2.934/0.004,2.901/0.005,10.985/＜0.001;miR-486-5p:t/P=2.598/0.012,2.604/0.012,8.593/＜0.001).LncRNA PVT1 高水平表达者 3 年总生存率低于LncRNA PVT1低水平表达者(x2/P=14.16/＜0.001),miR-486-5p高水平表达者3年总生存率高于miR-486-5p低水平表达者(x2/P=16.82/＜0.001).Cox回归分析显示,LncRNA PVT1高表达、miR-486-5p低表达、NCCN危险分层高是急性髓系白血病患者预后不良的危险因素[RR(95％CI)=1.982(1.148～2.993),1.668(1.085～2.641),1.659(1.068～2.602)].结论 AML患者LncRNA PVT1高表达,miR-486-5p低表达,二者水平与白细胞计数、骨髓原始细胞比率、NCCN危险分层和患者预后有关.

Oral cancer(OC)is the most common form of head and neck cancer.Despite the high incidence and unfavourable patient outcomes,currently,there are no biomarkers for the early detection of OC.This study aims to discover,develop,and validate a novel saliva-based microRNA signature for early diagnosis and prediction of OC risk in oral potentially malignant disorders(OPMD).The Cancer Genome Atlas(TCGA)miRNA sequencing data and small RNA sequencing data of saliva samples were used to discover differentially expressed miRNAs.Identified miRNAs were validated in saliva samples of OC(n=50),OPMD(n=52),and controls(n=60)using quantitative real-time PCR.Eight differentially expressed miRNAs(miR-7-5p,miR-10b-5p,miR-182-5p,miR-215-5p,miR-431-5p,miR-486-3p,miR-3614-5p,and miR-4707-3p)were identified in the discovery phase and were validated.The efficiency of our eight-miRNA signature to discriminate OC and controls was:area under curve(AUC):0.954,sensitivity:86%,specificity:90%,positive predictive value(PPV):87.8%and negative predictive value(NPV):88.5%whereas between OC and OPMD was:AUC:0.911,sensitivity:90%,specificity:82.7%,PPV:74.2%and NPV:89.6%.We have developed a risk probability score to predict the presence or risk of OC in OPMD patients.We established a salivary miRNA signature that can aid in diagnosing and predicting OC,revolutionising the management of patients with OPMD.Together,our results shed new light on the management of OC by salivary miRNAs to the clinical utility of using miRNAs derived from saliva samples.

Inappropriate levels of hyperactivity,impulsivity,and inattention characterize attention deficit hyperactivity disorder,a common childhood-onset neuropsychiatric disorder.The cognitive function and learning ability of children with attention deficit hyperactivity disorder are affected,and these symptoms may persist to adulthood if they are not treated.The diagnosis of attention deficit hyperactivity disorder is only based on symptoms and objective tests for attention deficit hyperactivity disorder are missing.Treatments for attention deficit hyperactivity disorder in children include medications,behavior therapy,counseling,and education services which can relieve many of the symptoms of attention deficit hyperactivity disorder but cannot cure it.There is a need for a molecular biomarker to distinguish attention deficit hyperactivity disorder from healthy subjects and other neurological conditions,which would allow for an earlier and more accurate diagnosis and appropriate treatment to be initiated.Abnormal expression of microRNAs is connected to brain development and disease and could provide novel biomarkers for the diagnosis and prognosis of attention deficit hyperactivity disorder.The recent studies reviewed had performed microRNA profiling in whole blood,white blood cells,blood plasma,and blood serum of children with attention deficit hyperactivity disorder.A large number of microRNAs were dysregulated when compared to healthy controls and with some overlap between individual studies.From the studies that had included a validation set of patients and controls,potential candidate biomarkers for attention deficit hyperactivity disorder in children could be miR-140-3p,let-7g-5p,-30e-5p,-223-3p,-142-5p,-486-5p,-151a-3p,-151a-5p,and-126-5p in total white blood cells,and miR-4516,-6090,-4763-3p,-4281,-4466,-101-3p,-130a-3p,-138-5p,-195-5p,and-106b-5p in blood serum.Further studies are warranted with children and adults with attention deficit hyperactivity disorder,and consideration should be given to utilizing rat models of attention deficit hyperactivity disorder.Animal studies could be used to confirm microRNA findings in human patients and to test the effects of targeting specific microRNAs on disease progression and behavior.

目的 探讨鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE?2R过表达miR?486?5p后的放射增敏效应.方法 采用microRNA(miRNA)测序和RT?qPCR检测miR?486?5p在鼻咽癌亲本细胞CNE2和放射抗拒细胞CNE?2R中的表达水平.使用miR?486?5p过表达及阴性对照慢病毒液感染CNE?2R细胞,分别定义为CNE?2R?Mimics组和CNE?2R?NC组,利用CCK?8实验、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力和经不同照射剂量(0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy)X射线照射后的细胞活力,Annexin V?APC/7?AAD双染法流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 miRNA测序和RT?qPCR结果均显示CNE?2R细胞中的miR?486?5p表达水平低于亲本细胞CNE2.CCK?8实验结果显示,培养48 h、72 h、96 h后,过表达miR?486?5p的CNE?2R细胞增殖能力较CNE?2R?NC组减弱(均P<0.05);经2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy照射剂量照射后,CNE?2R?Mimics组存活分数低于CNE?2R?NC组(均P<0.05),其中在8 Gy照射剂量下两组存活分数差异最大(t=30.152,P<0.001).流式细胞术实验结果显示,在未照射(0 Gy)和8 Gy照射剂量下,CNE?2R?Mimics组凋亡率均高于CNE?2R?NC组(均P<0.05),其中在8 Gy剂量照射下细胞凋亡率差异更显著(t=14.945,P<0.001).平板克隆形成实验结果显示,在不同照射剂量照射下,CNE?2R?Mimics组克隆形成数均低于CNE?2R?NC组,其中CNE?2R?Mimics组的放射生物学参数D0、Dq和照射2 Gy时的存活分数均小于CNE?2R?NC组(均P<0.05).结论 鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE?2R过表达miR?486?5p后可能通过抑制细胞增殖和促进细胞凋亡来增加放射敏感性.

目的 探讨肝癌患者血清miR-122-5p和miR-486-5p的表达水平,及两指标单独或与甲胎蛋白(AFP)联合诊断肝癌的临床应用价值.方法 采用病例对照研究.选择2016年6月至2017年3月在广州军区广州总医院住院的60例肝癌患者(HCC组),20例肝炎患者(肝炎组),20例肝硬化患者(肝硬化组),20例乳腺癌患者(乳腺癌组),20例胃癌患者(胃癌组)及20名健康体检人员(正常对照组),提取总RNA,采用实时荧光定量PCR技术,检测血清中miR-122-5p和miR-486-5p的相对表达量.用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)分析miRNA对肝癌诊断的特异度和灵敏度,并与肿瘤标志物AFP的测定结果进行比较.根据ROC曲线下面积判断诊断效能,评估其在肝癌诊断中的应用价值.各组间比较采用非参数秩和检验进行分析.结果 肝癌组、肝炎组、肝硬化组、乳腺癌组、胃癌组及健康对照组中血清miR-122-5p的相对表达量分别是0.14(0.05～0.51)、0.45(0.32～0.58)、0.53(0.34～0.67)、0.14(0.07～0.28)、0.29(0.13～0.36)和0.73(0.63～0.95),血清miR-486-5p的相对表达量分别是0.50(0.23～0.77)、0.62(0.48～0.82)、0.65(0.54～0.85)、0.23(0.08～0.40)、0.29(0.15～0.45)和0.76(0.69～1.23).肝炎组、肝硬化组、肝癌组中血清miR-122-5p的相对表达量较健康对照组低,差异均有统计学意义(U值分别为315.37,393.46,429.08,P均<0.01),肝炎组、肝硬化组、肝癌组中血清miR-486-5p的相对表达量较健康对照组较低,差异均有统计学意义(U值分别为103.67,156.18,207.35,P均<0.05).单项检测HCC时,AFP的敏感度最高(73.7％),miR-122-5p的特异度最高(95％).双项检测HCC时,AFP+miR-122-5p的敏感度最高(93％),miR-122-5p和miR-486-5p的特异度最高(70％),AFP+miR-122-5p的联合检测与单项AFP相比,AUC差异有统计学意义(Z=3.02,P<0.01),而AFP+miR-486-5p及miR-122-5p+miR-486-5p较AFP单项检测AUC差异无统计学意义(Z=1.57,1.39,P均>0.05).三项联合检测时,敏感度和特异度分别为96.5％和55％,ROC曲线下面积AUC为0.891(95％CI:0.818～0.964),三项联合检测时高于单独检测,且与AFP、miR-122-5p及miR-486-5p相比,AUC差异均有统计学意义(Z=3.26,3.72,4.25,P均<0.01).结论 血清miR-122-5p和miR-486-5p有可能成为肝癌辅助诊断的血清学标志物.