目的:评估脉冲光辐照强度对微生物的杀灭效果，为杀菌技术设计提供验证依据。方法:以金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、枯草芽孢杆菌(ATCC9372)为实验菌，用载体定量杀菌方法评估杀菌效果，指数稀释、倾注培养计数法计算杀菌效率。用扫描电镜和透射电镜观察光照强度对细菌结构的影响。实验设置细菌对照组：未经脉冲光照射处理的相同初始浓度菌，平行培养30、60和90 s。细菌实验组：分别距离脉冲光源50、100、150和200 cm 4个点接受辐照处理，同样设置30、60和90 s 3个辐照时间点。结果:距离脉冲光源50、100 cm时，照射30 s金黄色葡萄球菌灭活率为100%。枯草芽孢杆菌灭活率为99.9%。当细菌距离光源为150 cm时，金黄色葡萄球菌辐照30、60和90 s的灭活率分别为81.9%、95.4%、100%，枯草芽孢杆菌的灭活率分别为76.0%、92.3%和99.9%。当辐照距离提高至200 cm时，脉冲光对细菌的灭活效率明显下降，3个检测时间点金黄色葡萄球菌灭活效率分别为24.5%、38.8%、48.8%，枯草芽孢杆菌分别为14.2%、20.0%、28.5%。结论:脉冲光能迅速灭活微生物，灭活速度、效率与光照强度密切相关。

目的:探究高压氧(HBO)逆转肺炎克雷伯菌对三、四代头孢菌素的耐药性及其机制。方法:选取2017年1月至2017年12月济宁市第一人民医院呼吸与危重症医学科收集的肺炎克雷伯菌3株，均表现为AmpC(头孢菌素酶)和ESBLs(超广谱β-内酰胺酶)阳性，采用VITEK微生物分析系统对菌株进行鉴定。随后将3个菌株均分为对照组和HBO组，随后将其培养于不同浓度的三、四代头孢菌素中，采用琼脂二倍稀释法测定菌株对三、四代头孢菌素的最低抑制浓度(MIC)，平板计数法检测菌株活性。此外，提取菌株中的总蛋白，采用Western blotting检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达水平；采用头孢他啶、头孢匹罗三维实验法和纸片确证扩散法分别对菌株中的AmpC和ESBLs进行检测。结果:与对照组相比，HBO处理后，3个菌株对三、四代头孢菌素的MIC值降低，活性降低，HIF-1α的表达降低( P<0.05)；此外，HBO处理明显降低了AmpC和ESBLs的检出率。 结论:HBO处理能够明显逆转肺炎克雷伯菌对三、四代头孢菌素的耐药性，其机制可能与HIF-1α通路被抑制及AmpC、ESBLs检出率的降低有关。

目的 分析三台县2018-2022年农村饮用水微生物指标监测结果,分析处理方式和消毒剂种类对微生物指标的影响,为三台县农村地区饮水安全工作提供参考和建议.方法 根据2018-2022年水质卫生监测方案,在三台县范围内设置农村饮用水监测布点,各年采样量分别为252、248、252、252和404份,合计1 408份.平皿计数法检测菌落总数,酶底物法中的51孔定量盘法检测总大肠菌群和大肠埃希氏菌.参照GB/T 5749-2006进行水质评价,以SPSS 16.0软件进行统计分析,采用Median检验法、Kolmogorov-Smirnov Z检验法及x2检验法,检验水准为α=0.05.结果 2018-2022年三台县农村饮用水微生物指标合格率为64.7％、63.7％、57.9％、62.7％和87.6％.菌落总数和总大肠菌群中位数总体呈现先升后降、大肠埃希菌中位数也呈下降态势;不同年份菌落总数中位数差异有统计学意义(x2=11.531,P=0.021),总大肠菌群和大肠埃希菌中位数差异均无统计学意义(x2==5.932、8.207,P=0.204、0.084).仅消毒和常规处理水样微生物指标合格率(79.34％、75.97％)高于未处理水样(31.42％),差异有统计学意义(x2==221.065,P＜0.001);仅消毒水样微生物指标合格率高于常规处理水样,但差异无统计学意义(x2=1.712,P=0.191).仅消毒和常规处理水样菌落总数、总大肠菌群数、大肠埃希菌数中位数低于未处理水样,其中菌落总数和大肠埃希菌差异有统计学意义(x2=24.117、6.689;P＜0.001,P=0.035).高纯二氧化氯处理水样微生物指标合格率(76.7％)低于漂白粉处理水样(88.5％),差异有统计学意义(x2=9.452,P=0.002).高纯二氧化氯处理水样与漂白粉处理水样比较,菌落总数、总大肠菌群、大肠埃希菌中位数差异无统计学意义(Z=-1.397、-1.086和-0.63,P均＞0.05).结论 三台县农村地区饮用水微生物指标合格率处于较低水平;消毒可以提高农村饮水中微生物指标合格率,降低饮水中微生物指标检出水平,但常规处理消毒措施效果欠佳;高纯二氧化氯消毒效果低于漂白粉.

目的 研究超高温瞬时、臭氧与高温煮沸不同杀菌方法对饮用水的水质理化特性与微生物指标的影响.方法 2022年选择某包装公司生产线饮用水30 L纳入本研究,将纳入的水样本随机分成超高温组(n=10 L)、臭氧组(n=10 L)与煮沸组(n=10 L),进行平行检测.核磁共振波谱法测定3组水样的分子团大小,采用有机聚合物生成反应原理测定氢自由基浓度,3组水样的导电率采用电极法测定,溴酸盐含量采用离子色谱法测定,分别采用滤膜法和平板计数法对铜绿假单胞菌和大肠菌群进行检测.结果 煮沸组的水样分子团最高,为(134.47±8.21)Hz,其次为臭氧组的(120.84±9.37)Hz,最低为超高温组,为(89.52±4.95)Hz;超高温组的氢自由基为(0.365±0.021)mmol/L,其次为煮沸组的(0.321±0.019)mmol/L,最低为臭氧组,仅为(0.226±0.014)mmol/L;煮沸组水样导电率最高,为72.8％,其次为臭氧组,为52.1％,超高温组水样导电率最低,仅为48.6％;3组水样溴酸盐含量均不足0.005 mg/L;经3种杀菌方案处理后各组水样中均未发现铜绿假单胞菌和大肠菌群.结论 超高温瞬时、臭氧与高温煮沸杀菌均可对饮用水水质理化特性产生一定的影响,但超高温瞬时杀菌方案能够缩小水样分子团,提高氢自由基浓度,杀菌效果理想.

目的 明确浙江省市售猪肉中非伤寒沙门菌(non-typhoidal Salmonella,NTS)的污染特征、影响因素及血清型分布.方法 2017-2021年在浙江省流通和餐饮环节采集猪肉样品999份,按《GB 4789.4-2016食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》开展猪肉中NTS的定性检测和血清学分型,采用MPN计数法进行NTS定量检测.结果 浙江省市售猪肉中NTS检出率为39.94％(339/999),9.32％(26/279)的样品中NTS污染水平＞55 MPN/g,不同猪肉类型、采样场所和采样季节采集的猪肉NTS检出率差异有统计学意义(P＜0.05).猪肉类型、采样季节和采样场所是影响NTS检出的重要因素,夏季是影响阳性猪肉样本中NTS污染水平的显著因素(P＜0.05).445株NTS分离株共分为48种血清型,主要为里森沙门菌(19.33％)、伦敦沙门菌(14.38％)、德尔卑沙门菌(13.48％)和鼠伤寒沙门菌(9.66％).结论 2017-2021年浙江省市售猪肉NTS检出率高,污染程度受多方面因素影响,血清型多样.

目的 了解淮安市婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌污染现状及其对药物敏感、主要毒力基因携带情况.方法 2022～2023年抽取淮安市七个县区的婴幼儿奶粉及婴幼儿辅助食品共218批,根据GB4789.14-2014《食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验》蜡样芽胞杆菌平板计数法(第一法)进行检测,并进行药物敏感性试验,采用荧光定量PCR对检出的蜡样芽胞杆菌进行溶血性(hblC)基因、非溶血性基因(nheB)、呕吐毒素基因(ces)检测.结果 218批婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌检出39批次,检出率达17.89％.在23种药物敏感性试验中,蜡样芽胞杆菌对庆大霉素、阿米卡星、替考拉宁、万古霉素、氯霉素、利奈唑胺、呋喃妥因、利福平、左氧氟沙星、莫西沙星、诺氟沙星敏感率100％,对环丙沙星、米诺环素、四环素、红霉素、克林霉素、莫匹罗星高浓度、复方新诺明、苯唑西林敏感率分别为97.44％、92.31％、89.74％、82.05％、38.46％、23.08％、20.51％、5.13％,对达托霉素非敏感,对头孢洛林、氨苄西林、青霉素全部耐药.溶血性hblC基因携带率高达100％,非溶血性基因nheB携带率为58.97％,本次试验未检出呕吐毒素基因ces.结论 婴幼儿食品蜡样芽孢杆菌检出率较高且检出菌中携带至少一种毒力基因的概率高达100％.对头孢洛林、氨苄西林、青霉素全部耐药,对达托霉素、苯唑西林等药物敏感性差,可为临床用药方案提供指导.

目的 研究纳米铁去除水体中大肠杆菌的影响因素及特性.方法 将纳米铁(40～200 mg/L)投加到不同pH值(5.0～9.0)、温度(20～40℃)和大肠杆菌初始浓度(104～106 CFU/ml)的细菌悬液中,振荡培养(120 r/min),在预设时间点(10、30min和1、2、4、6、8h)取样培养后用平板计数法进行大肠杆菌计数.同时将纳米铁与普通铁对大肠杆菌的去除能力进行比较,并且将纳米铁(120 mg/L)残渣进行重复利用,考察纳米铁残渣对大肠杆菌的去除效果.结果 随着纳米铁投加量的增加、大肠杆菌初始浓度的降低、pH值的降低和温度的降低,纳米铁对大肠杆菌的去除量增加.纳米铁(120mg/L)对大肠杆菌的去除能力(2.72 log)比普通铁粉(2.21 log)高,并且在剩余纳米铁的连续反应中,3次反应后的剩余纳米铁对大肠杆菌仍然有较强的去除能力.结论 纳米铁对大肠杆菌具有优异的去除效果,明显优于普通铁,且纳米铁去除效果受纳米铁投加量、大肠杆菌初始浓度、温度和pH值的影响.

比较复方青黛胶囊《中国药典》2015年版与2010年版微生物限度检查法的验证研究.按照《中国药典》2010年版附录[1]及2015年版四部[2]通则1105非无菌产品微生物限度检查进行方法学建立和验证.复方青黛胶囊试验按《中国药典》2010年版方法检查可采用培养基稀释法进行细菌检查,平皿法进行霉菌和酵母菌检查;按《中国药典》2015年版方法检查可采用平皿倾注法进行需氧菌总数及霉菌和酵母菌总数的测定.2015年版《中国药典》所用培养基广谱性强,有助于所有存活微生物生长;同时新版药典的微生物计数法与2010年版相比,更科学、严谨、操作性更强,达到了与国际接轨的目的.

为了研究紫外线联合消毒的协同作用,获得更高效的饮用水不易灭活微生物消毒手段,本研究采用紫外线消毒及过硫酸钠消毒的方式,研究其对大肠杆菌以及枯草芽孢杆菌的灭活效果,通过平板计数法对其灭活效果进行定量评估.结果表明:过硫酸钠协同紫外线消毒,对大肠杆菌灭活有明显效果(紫外光强113.0 μW/cm2,过硫酸钠浓度为0.5 mmol/L情况下照射10 min,灭活率超过6 lg);单独过硫酸钠对枯草芽孢杆菌基本无灭活效果,过硫酸钠浓度为0.5 mmol/L情况下10 min的灭活率仅为0.98个对数级;单独紫外线消毒对枯草芽孢杆菌的灭活效果较好,光强为113.0 μW/cm2、照射时间10 min可达3.48个对数级;采用联合消毒时,过硫酸钠与紫外线联合消毒在一定程度上对灭活枯草芽孢杆菌有积极影响,最佳情况下可较单独UV消毒和单独过硫酸钠消毒分别增加0.90和3.40个对数级.紫外过硫酸钠联合消毒有望成为一种高效的饮用水微生物消毒方式,并在给水领域得到广泛应用.

目的:建立替硝唑氯化钠注射液灭菌前产品的微生物计数法.方法:分别取灭菌前产品100 ml,按设立的验证试验方法,在样品中加入试验菌,测定试验菌的回收率.结果:验证试验中所有试验菌(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉)均生长良好,且回收率均在50％～200％之间,符合药典规定的要求.结论:该方法有效可行,可用于该品种灭菌前产品的微生物计数.