目的 观察心康冲剂含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖的影响,基于GAS5-miR-21探讨其抑制CFs增殖的作用机制.方法 取SD乳鼠心肌,差速贴壁法分离CFs,采用血管紧张素Ⅱ诱导CFs增殖,在转染微小RNA-21(miR-21)过表达慢病毒、生长阻滞特异性转录本5(GAS5)沉默慢病毒后,分别用心康冲剂含药血清干预24 h.CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,免疫荧光染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,RT-qPCR检测GAS5、miR-2l、磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)mRNA表达,Western blot检测PTEN、Akt、周期蛋白D1(Cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组CFs细胞活力增强,G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,α-SMA阳性表达升高,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达降低,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05).与模型组比较,心康冲剂组CFs细胞活力减弱,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,α-SMA阳性表达降低,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达升高,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达降低;miR-21过表达组和GAS5沉默组CFs细胞活力增强,G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,α-SMA阳性表达升高,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达降低,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05).与miR-21过表达组、GAS5沉默组比较,miR-21过表达+心康冲剂组、GAS5沉默+心康冲剂组CFs细胞活力减弱,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,α-SMA阳性表达降低,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达升高,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 心康冲剂含药血清可抑制沉默GAS5所致miR-21、Akt表达升高,对抗过表达miR-21所致GAS5和PTEN表达降低,抑制CFs增殖周期,促进GAS5发挥"分子海绵"作用,改善血管紧张素Ⅱ诱导的CFs过度增殖.

目的 基于cGAS/STING信号通路探讨心康冲剂对慢性心力衰竭大鼠炎症因子的干预作用及分子机制.方法 将SD大鼠随机分为正常组、造模组,通过腹腔注射盐酸阿霉素建立慢性心力衰竭模型,待模型成功后再分为模型组、缬沙坦组、心康冲剂组.模型组每日灌胃蒸馏水,缬沙坦组每日以缬沙坦溶液灌胃,心康冲剂组每日灌胃心康冲剂溶液治疗,连续 4 周.采用超声心动图检测各组大鼠心功能;苏木素-伊红染色(HE)检测各组大鼠心肌病理学改变;透射电镜观察各组大鼠心肌超微结构改变;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血清中白细胞介素 1β(IL-1β)、白细胞介素 6(IL-6)含量;实时荧光定量法(qPCR)检测各组大鼠心肌组织中线粒体转录因子A(TFAM)、环化鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)、干扰素刺激基因(STING)、IL-6 mRNA的表达水平.免疫组化法检测大鼠心肌组织cGAS、STING蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠心肌炎性细胞浸润明显,可见炎性水肿;心功能明显降低(P＜0.05,P＜0.01),血清炎症因子明显升高(P＜0.01),心肌组织中TFAM mRNA表达明显降低(P＜0.01),IL-6、cGAS、STING mRNA表达明显上调(P＜0.01),心肌组织中cGAS、STING 蛋白明显增加(P＜0.01).与模型组比较,心康冲剂组大鼠心功能明显改善(P＜0.05,P＜0.01);心肌细胞炎性浸润减轻;血清炎性因子表达明显降低(P＜0.01),心肌组织中TFAM mRNA表达明显增加(P＜0.05),IL-6、cGAS、STING mRNA表达明显下调(P＜0.01);心肌组织中cGAS、STING 蛋白表达明显下调(P＜0.01).结论 心康冲剂可降低慢性心力衰竭大鼠炎性因子表达,改善心功能,其机制可能与抑制cGAS/STING信号通路有关.

目的 探讨心康冲剂对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞焦亡的调控作用.方法 46只SD大鼠,其中随机取6只大鼠为空白组,余40只经腹腔注射阿霉素药物建立慢性心力衰竭模型,模型成功后将32只大鼠随机分为模型组12只、心康冲剂组10只、缬沙坦组10只.缬沙坦组以等效剂量0.03 g/(kg·d)灌胃、心康冲剂组给予0.5 g/(kg·d)等效剂量灌胃.空白组与模型组每日等量生理盐水灌胃,连续4周.实验结束后,心脏超声检测各组大鼠心功能,HE、Masson染色观察心脏组织形态,透射电镜下观察心肌组织超微结构,免疫组化法检测焦亡底物消皮素D-N端片段(GasderminD-N,GSDMD-N)表达,酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠血清白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素18(Interleukin-18,IL-18)表达,实时荧光定量PCR法检测各组大鼠心肌组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体 3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)通路各 mRNA,Western blot法检测NLRP3通路各蛋白表达量.结果 与空白组相比,模型组大鼠左室射血分数(Left ventricular ejection fractions,LVEF)、左心室短轴缩短率(Left ventricular fractional shortening,LVFS)均明显降低(P＜0.01),染色结果显示心肌细胞死亡增多、纤维化严重,且GSDMD-N焦亡蛋白表达在胞膜和胞浆,透射电镜结果显示模型组中心肌细胞膜有破裂,有孔隙形成,线粒体肿胀严重,血液中炎症因子IL-18、IL-1β明显升高(P＜0.01),心肌组织中NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(Cysteine-containing aspartate-specific proteases-1,Caspase-1)、GSDMD mRNA 及GSDMD-N蛋白表达均明显升高(P＜0.01).与模型组相比,心康冲剂、缬沙坦干预后心肌细胞焦亡减轻,LVEF、LVFS都不同程度地增加(P＜0.01);染色及电镜结果显示心肌病理学损伤减轻;炎症因子IL-18、IL-1β及细胞焦亡通路NLRP3、Caspase-1、GSDMD/GSDMD-N的mRNA及蛋白都有所降低(P＜0.01).结论 心康冲剂可改善慢性心力衰竭大鼠心功能,抑制NLRP3细胞焦亡通路及下游产物,从而减轻心肌炎症,防止慢性心衰中的心肌细胞死亡过多.

目的 探讨心康冲剂调控长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(long non-coding RNA growth arrest specif-ic transcript 5,lncGAS5)/DNA甲基转移酶3A(DNA methyltransferase 3A,DNMT3A)通路抗慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的机制.方法 62只SD大鼠,其中随机取6只大鼠为正常组,余56只经腹腔注射阿霉素药物建立慢性心力衰竭模型,将造模成功的52只大鼠随机分为模型组12只(注射PBS+生理盐水灌胃),GAS5沉默组(注射AAV9-GAS5-RNAi病毒+生理盐水灌胃)、阴性对照组(注射AAV NC病毒+生理盐水灌胃)、心康冲剂组(注射AAV9-GAS5-RNAi病毒+心康冲剂溶液灌胃)、缬沙坦组(注射AAV9-GAS5-RNAi病毒+缬沙坦溶液灌胃)各10只.分组处理后,心脏超声检测各组大鼠心功能;Masson染色观察心脏组织形态;免疫荧光染色检测各组大鼠左心室纤维化蛋白α-SMA表达;酶联免疫吸附法检测大鼠血清Col Ⅰ表达;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠心尖组织lncGAS5、DNMT3A mRNA;Western blot法检测DNMT3A、第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chro-mosome ten,PTEN)、磷酸化蛋白质激酶蛋白B(phosphorylated protein kinase B,AKT)各蛋白表达量.结果 与正常组相比,模型组大鼠左室射血分数(left ventricular ejection fractions,LVEF)、左心室短轴缩短率(left ventricular fractional short-ening,LVFS)均明显降低(P＜0.05);染色结果显示心肌纤维化严重;血液中Ⅰ型胶原(type Ⅰ collagen,Col Ⅰ)明显升高(P＜0.05);lncGAS5 mRNA表达降低,DNMT3A mRNA及蛋白表达升高,PTEN蛋白表达降低,AKT蛋白表达升高(P＜0.05);与模型组相比,GAS5沉默组染色或指标结果进一步降低或升高;与GAS5沉默组相比,染色结果显示心康冲剂、缬沙坦组干预后心肌纤维化减轻,LVEF、LVFS都不同程度地增加(P＜0.05);血清中Col Ⅰ水平降低;lncGAS5mRNA表达升高,DNMT3AmRNA表达降低;DNMT3A、AKT蛋白表达降低,PTEN蛋白表达升高(P＜0.05).结论 心康冲剂可通过调控lncGAS5/DNMT3A/PTEN/AKT通路及下游纤维化因子,从而改善慢性心力衰竭之心肌纤维化.

目的 基于GAS5/miR-21探讨心康冲剂抗心力衰竭大鼠心肌纤维化的作用机制.方法 46只SD大鼠选取6只作为正常组,剩余40只通过腹腔注射阿霉素(2 mg/mL)诱导慢性心力衰竭并分为模型组、缬沙坦组及心康冲剂组.心康冲剂组予心康冲剂0.5 g/kg灌胃,缬沙坦组予缬沙坦0.03 g/kg灌胃,正常组和模型组予等体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续4周.心脏彩超检测大鼠心功能,ELISA检测血清Ⅰ型胶原(ColⅠ)和基质金属蛋白酶9(MMP9)含量,HE和Masson染色观察左心室病理变化,免疫荧光染色检测左心室α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,qRT-PCR检测磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、生长阻滞特异性转录本5(GAS5)、miR-21基因表达,Western blot检测PTEN、Akt、周期蛋白D1(CyclinD1)和周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)表达.结果 与正常组比较,模型组大鼠左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)降低(P<0.05),血清MMP9、ColⅠ含量增加(P<0.05),心肌细胞肿胀变性、胞浆溶解,细胞排列紊乱,可见大量蓝色胶原纤维,胶原容积分数增加(P<0.05),左心室α-SMA表达升高(P<0.05),PTEN、GAS5基因表达降低(P<0.05),miR-21表达升高(P<0.05),Akt、CDK4、CyclinD1蛋白表达升高(P<0.05),PTEN蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,心康冲剂组和缬沙坦组大鼠LVEF、LVFS升高(P<0.05),血清MMP9、ColⅠ含量减少(P<0.05),心肌细胞肿胀、胞浆溶解程度相对较轻,蓝色胶原纤维较少,胶原容积分数减少(P<0.05),左心室α-SMA表达降低(P<0.05),PTEN、GAS5基因表达升高(P<0.05),miR-21表达降低(P<0.05),Akt、CDK4、CyclinD1蛋白表达降低(P<0.05),PTEN蛋白表达升高(P<0.05).结论 心康冲剂可能通过调节GAS5/miR-21、PTEN/Akt及细胞周期相关蛋白表达抑制细胞增殖,降低心力衰竭大鼠心肌纤维化程度.

目的 观察清肝冲剂与吡喹酮联用治疗血吸虫病肝纤维化的效果.方法 收集2018年7月-2020年6月湖南省血吸虫病防治所附属湘岳医院住院的血吸虫病患者,采用病例配对研究方法将其分为对照组(n=62)和观察组(n=62),对照组给予吡喹酮联合九味肝泰胶囊常规治疗,观察组给予吡喹酮联合清肝冲剂抗纤维化治疗,疗程均为4周.比较2组治疗前后血吸虫病肝纤维化声像图分级、透明质酸(HA)和Ⅲ型前胶原肽(PCⅢP)水平、生命质量8项维度指标[生理功能(PF)、生理职能(RP)、躯体疼痛(BP)、总体健康(GH)、生命力(VT)、社会功能(SF)、情感职能(RE)、心理健康(MH)]评分的变化.结果 治疗前,2组肝声像图病变分级Ⅲ级占比、HA、PCⅢP、生命质量评分比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).治疗后,观察组肝声像图病变分级Ⅲ级占比,HA、PC ⅢP水平,生命质量 8 项维度指标(PF、RP、RE、SF、BP、VT、MH、GH)评分[14.52％、(86.89±12.18)ng/mL、(78.56±10.89)ng/mL、(72.23±11.61)分、(53.08±19.87)分、(41.69±23.32)分、(76.58±13.68)分、(58.11±18.54)分、(62.18±13.23)分、(52.12± 13.09)分、(49.65±18.89)分]较治疗前[30.65％、(197.12±15.23)ng/mL、(138.26±11.23)ng/mL、(91.20±12.56)分、(66.56±21.27)分、(58.29±24.62)分、(86.56±21.09)分、(74.25±18.69)分、(71.23±18.59)分、(66.25±16.78)分、(61.85± 21.26)分]明显降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05);且观察组肝声像图病变分级Ⅲ级占比、HA和PC ⅢP水平,生命质量8项维度指标中PF、RP、RE、BP、VT、MH评分明显低于对照组[29.03％、(188.80±23.39)ng/mL、(137.41± 13.62)ng/mL、(87.00±18.80)分、(61.40±20.90)分、(53.86±26.63)分、(69.68±16.87)分、(67.56±15.54)分、(62.58± 12.63)分],差异均有统计学意义(P均＜0.05);而对照组除生命质量GH维度评分外,其余各项指标与治疗前比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 清肝冲剂能降低血吸虫病患者肝纤维化程度,改善生活质量.

目的 探讨心康冲剂抗慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的机制.方法 48只雄性SD大鼠随机均分为正常组、模型组、心康冲剂治疗组(治疗组)、缬沙坦对照组(缬沙坦组).除正常组外,其余各组经腹腔注射注射用盐酸多柔比星1.5 mg/kg制造慢性心力衰竭大鼠模型.治疗组给与1.2 g/(kg·d)心康冲剂;缬沙坦组给与1.62 mg/(kg·d)缬沙坦胶囊;正常组、模型组给予等体积灭菌注射用水灌胃.每日1次,连续灌胃8周.以超声心动图检测大鼠心功能[左室射血分数(left ventricular ejection fractions,LVEF)、左心室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)],Masson染色观察心肌纤维化,RT-qPCR法检测心肌组织Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ,ColⅠ)mRNA表达水平,Western blot法检测心肌ColⅠ、磷酸化酪氨酸激酶2(phospho-Janus kinase,p-JAK2)、磷酸化信号转导和转录激活子3(phoso-signal transducer and activator of transcription 3,p-STAT3)的蛋白含量.用Pearson相关及线性回归分析ColⅠ、p-JAK2、p-STAT3与左室收缩末期内径(left ventricular end systolic diameter,LVESD)之间的相关性.结果 与正常组比较,模型组大鼠LVEF、LVFS显著下降(P<0.01);与模型组比较,治疗组大鼠LVEF、LVFS均升高(P<0.01),LVESD下降(P<0.01),ColⅠmRNA及蛋白含量均下降(P<0.05,P<0.01),p-JAK2、p-STAT3蛋白含量均下降(P<0.05,P<0.01);与缬沙坦组比较,治疗组LVEF、LVFS升高(P<0.01),p-STAT3蛋白含量降低(P<0.05),而ColⅠmRNA、p-JAK2、ColⅠ蛋白含量差异无统计学意义(P>0.05).ColⅠ、p-STAT3、p-JAK2均与LVESD具有明显线性关系.结论 心康冲剂可通过下调JAK2/STAT3信号通路激活,降低ColⅠmRNA表达与ColⅠ蛋白合成,从而抗慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化.

目的 探讨心康冲剂抗心衰大鼠心肌纤维化的机制.方法 90只SD大鼠分为正常组10只,模型组、对照组及心康低、中、高剂量组各16只.心康低、中、高剂量组分别给予0.5、1、2g/(kg·d)的心康冲剂溶液.对照组给予0.06 g/(kg·d)的芪苈强心胶囊.正常组、模型组按1 mU/(kg·d)灌服生理盐水.各组均每日1次,连续灌服8周.计算左心室质量指数(LVMI);心脏切片行HE、Masson染色并计算胶原容积分数(CVF);采用Real-time PCR法检测miRNA-21、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)mRNA表达水平;用Pearson相关及Logistic多元线性回归分析miRNA-21、PTEN mRNA、CVF与LVMI之间的相关性.结果 与正常组比,模型组大鼠心肌CVF、LVMI比值及miRNA-21表达升高(P<0.01),PTENmRNA表达下降(P<0.01).与模型组比,心康低、中、高剂三组CVF、LVMI比值及miRNA-21表达下降(P<0.0l)、PTENmRNA表达升高(P<0.0l);与芪苈强心组比较,心康冲剂低、中、高剂LVMI、CVF、miRNA-21、PTEN mRNA无明显差异(P>0.05).miRNA-21、PTENmRNA、CVF均与LVMI有明显线性相关关系.结论 心康冲剂可通过下调miRNA-21、升高PTEN mRNA表达抗心肌纤维化.

目的 观察中医温经疏肝化瘀通络法治疗原发性痛经患者的疗效以及对疼痛、生存质量与炎性因子的影响.方法 将130例原发性痛经患者随机分为2组,对照组65例给予益母草冲剂治疗(月经来潮前3 d开始口服,每次15 g,每天3次,连服7 d),治疗组65例给予温经疏肝化瘀中药治疗(月经来潮前3 d开始口服,每天1剂,每次服150 mL,早晚各1次,连服7 d),2组均以连续治疗3个月经周期为1个评估疗程.统计2组临床疗效,观察治疗前后痛经程度及疼痛评分、生存质量WHOQOL-BREF量表评分和血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化情况.结果 治疗组的临床总有效率明显高于对照组(P<0. 05);2组治疗后的痛经程度评分、VAS 评分及血清hs-CRP、IL-6、TNF-α水平均明显低于治疗前(P均<0. 05),且治疗组明显低于对照组(P均<0. 05).治疗后治疗组患者生存质量、健康主观感觉评分均明显高于对照组与治疗前(P均<0. 05);心理与社会关系评分明显高于治疗前(P均<0. 05),但与对照组比较差异无统计学意义(P均>0. 05).结论 中医温经疏肝化瘀通络法能够有效提高原发性痛经的临床治疗有效性,缓解痛经疼痛并提高患者的生存质量,对微炎症状态也有良好的改善作用.

目的:研究心康冲剂对心衰大鼠心肌微血管内皮功能保护作用.方法:各组大鼠实验完毕后行心脏超声、血流动力学检测,心脏切片行HE及免疫荧光染色,采用ELISA法检测血清大鼠内皮素-1(ET-1)、血管性血友病因子(vWF)、血小板内皮细胞黏附分子1(C D31)水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠心功能明显下降,HE染色示血管形态轮廓模糊,免疫荧光染色示大量荧光点分布,ET-1、vWF、CD31水平升高.与模型组比较,低、中剂组、缬沙坦组心功能增强,HE染色示血管形态形态轮廓较清晰,免疫荧光染色示少量荧光点分布,ET-1、vWF、CD31水平下降.与缬沙坦组比较,高剂量组ET-1、vWF水平升高.结论:心康冲剂低、中剂量能保护心肌微血管内皮功能抗心衰.