目的:探讨心痛泰颗粒对动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达的影响及其机制.方法:6～8周龄SPF级健康雄性ApoE-/-小鼠72只,采用高脂饮食喂养12周进行造模,另设SPF级健康雄性C57BL/6J野生小鼠12只为对照组,予以普通饲料喂养.各组相应药物给药8周后,观察各组小鼠体质量及一般情况,采用生化试剂盒检测小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,HE染色和油红O染色观察主动脉病理结构,ELISA法检测血清ox-LDL及主动脉组织中ICAM-1和VCAM-1水平,Western blot法检测主动脉NADPH氧化酶4(NOX4)、NOX亚单位p22phox、核因子抑制蛋白激酶α(IKK-α)、IKK-β和核因子κB(NF-κB)蛋白表达情况.结果:与对照组比较,模型组小鼠体质量增加(P<0.05),且毛发晦暗无光泽、局部脱落,抓起反应迟钝;血清TC、TG和LDL-C上升,HDL-C下降(P<0.05),血清ox-LDL水平上升(P<0.05),主动脉ICAM-1和VCAM-1水平升高(P<0.05),主动脉NOX4、p22phox、IKK-α、IKK-β和NF-κB蛋白表达增加(P<0.05).与模型组比较,各用药组小鼠体质量下降(P<0.05),且毛发脱落及反应灵活程度亦有所改善;血清TC、TG和LDL-C降低,HDL-C升高(P<0.05),血清ox-LDL水平下降(P<0.05),主动脉ICAM-1和VCAM-1水平降低(P<0.05),主动脉NOX4、p22phox、IKK-α、IKK-β和NF-κB蛋白表达减少(P<0.05).HE及油红O染色显示,模型组小鼠血管内可见典型动脉粥样硬化斑块,且红染区域分布广泛;各用药组与模型组比较,以上情况均有不同程度减轻.结论:心痛泰颗粒可减少高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块面积,下调血清TC、TG和LDL-C水平,升高HDL-C水平,减少血清ox-LDL水平,下调主动脉ICAM-1和VCAM-1水平,抑制主动脉NOX4、p22phox、IKK-α、IKK-β和NF-κB蛋白的表达,改善动脉粥样硬化.

目的 通过生信分析和细胞实验探讨心痛泰含药血清干预PI3K/Akt/HIF-1α对兔主动脉平滑肌细胞(Aortic vascular smooth muscle cell,VSMC)凋亡的作用机制.方法 采用ox-LDL诱导实验兔主动脉平滑肌细胞凋亡,构建动脉粥样硬化的细胞模型.采用细胞增殖与活性检测(Cell counting Kit8,CCK8)法筛选心痛泰含药血清最佳作用浓度.在中药药理数据分析平台中收集心痛泰的主要化学成分,通过PubChem数据库收集各活性化合物成分信息,SwissTargetPrediction数据库预测活性化合物相关靶点,通过GeneCards和DisGeNET数据库收集"动脉粥样硬化"、"细胞凋亡"的作用靶点,STRING平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(Protein-protein interaction network,PPI)网络,DAVID在线分析GO分析和KEGG分析.VSMC分为空白血清组、模型组、心痛泰含药血清组、磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)抑制剂(LY294002)组、心痛泰含药血清+LY294002组.分别采用原位末端标记(TdT mediated dUTP Nick End Labeling,TUNEL)法和流式细胞术检测VSMC凋亡,计算凋亡率;聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)法测定PI3K、丝/苏氨酸蛋白激酶(Phospho-Alpha serine/threonine-protein kinase,Akt)、缺氧诱导因子(Hypoxia-Inducible factor 1-Alpha,HIF-1α)、caspase-3、caspase-9的mRNA表达;蛋白质免疫印迹(Western blot)法测定磷酸化的PI3K(p-PI3K)/PI3K、磷酸化的Akt(p-Akt)/Akt、HIF-1α、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的蛋白表达;细胞免疫荧光法检测VSMC中收缩型特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的荧光定量.结果 CCK-8筛选出最佳干预浓度为20%心痛泰中剂量含药血清;TUNEL法和流式细胞术表明,与空白组相比,模型组的VSMC凋亡阳性细胞百分比、早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率均明显升高(P<0.01),PI3K、Akt、HIF-1α、caspase-3、caspase-9 mRNA表达明显增加(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、HIF-1α、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达明显增加(P<0.01),α-SMA明显减少(P<0.01).与模型组相比,心痛泰含药血清组、LY294002组、心痛泰含药血清+LY294002组的VSMC凋亡阳性细胞百分比、早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率均降低(P<0.01或P<0.05),PI3K、Akt、HIF-1α、caspase-3、caspase-9 mRNA表达减少(P<0.01或P<0.05),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、HIF-1α、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达下调(P<0.01或P<0.05),α-SMA明显增加(P<0.01或P<0.05).与心痛泰含药血清组比,心痛泰含药血清+LY294002组的VSMC凋亡阳性细胞百分比、早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率均无明显差异(P>0.05),PI3K、Akt、HIF-1α、caspase-3、caspase-9的mRNA表达,以及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、HIF-1α、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达无差异(P>0.05),α-SMA的荧光强度无差异(P>0.05).结论心痛泰含药血清可能通过下调PI3K/Akt/HIF-1α信号通路及下游的凋亡相关因子,改善ox-LDL诱导的VSMC凋亡,从而达到稳定动脉易损斑块的作用.

目的 观察心痛泰颗粒对动脉粥样硬化小鼠血脂及肿瘤坏死因子-α (TNF-c)、白细胞介素-6(IL-6)水平的影响.方法 将ApoE-小鼠按随机数字表法分成4组,予以高脂饲料喂养;野生型小鼠作为空白对照组,予以普通饲料喂养.将成模ApoE-小鼠随机分为模型组、心痛泰低剂量组、高剂量组和他汀组.分别予以生理盐水、心痛泰低、高剂量及阿托伐他汀钙片连续灌胃8周后,运用酶法检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),比色法检测低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C),ELISA法检测血清TNF-α、IL-6,免疫组化法观察TNF-α、IL-6.结果 与空白组比较,模型组和心痛泰各组均能显著减少TC、TG、LDL-C (P＜ 0.05),增加HDL-C (P＜ 0.05)水平,控制TNF-α、IL-6浓度,下调TNF-αα、IL-6的阳性表达,且心痛泰高剂量组、他汀组优于低剂量组(P＜0.05),但心痛泰颗粒高剂量组与他汀组组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 心痛泰颗粒可调节血脂,控制炎症反应,调控TNF-α、IL-6的阳性表达,干预动脉内斑块形成,从而发挥防治AS的作用.

目的:探讨心痛泰颗粒对动脉粥样硬化小鼠血脂及ICAM-1、VCAM-1影响的研究.方法:将ApoE-/-小鼠造模后随机分为模型组、心痛泰低、高剂量组和他汀组,每组10只,分别予以生理盐水、心痛泰低、高剂量及阿托伐他汀钙片灌胃;野生型小鼠作为空白对照组,予普通饲料正常喂养.治疗8周后检测血浆TC、TG、LDL-C、HDL-C,血清ICAM-1、VCAM-1变化情况.结果:心痛泰颗粒低、高剂量组、他汀组TC、TG、LDL-C水平均低于模型组,且心痛泰颗粒高剂量组低于心痛泰低剂量组,差异均有统计学意义(P＜0.05);心痛泰颗粒低剂量组、高剂量组、他汀组ICAM-1、VCAM-1水平均低于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05),且高剂量组、他汀组ICAM-1、VCAM-1水平低于心痛泰低剂量组(P＜0.05),他汀组低于高剂量组(P＜0.05);心痛泰颗粒低、高剂量组、他汀组ICAM-1、VCAM-1阳性表达率均低于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05),且心痛泰高剂量组、他汀组低于心痛泰低剂量组(P＜0.05),他汀组低于心痛泰高剂量组(P＜0.05).结论:心痛泰颗粒可调节血脂,控制炎症反应,调控ICAM-1、VCAM-1的阳性表达率,干预动脉内斑块形成,从而发挥防治AS的作用.

目的 观察心痛泰对动脉粥样硬化兔Toll样受体4(TLR4)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、髓过氧化物酶(MPO)、Ras基因家族成员A(RhoA)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响,探讨心痛泰治疗动脉粥样硬化的可能作用机制.方法 采用高脂饲料喂养联合免疫损伤建立兔动脉粥样硬化模型,分别予生理盐水、瑞舒伐他汀、心痛泰高、中、低剂量进行干预,采用Western blotting、RT-PCR检测胸主动脉TLR4、p38 MAPK、MPO、RhoA、eNOS蛋白及mRNA的表达水平.结果 与空白组比较,模型组TLR4、p38 MAPK、MPO、RhoA蛋白、mRNA的表达均升高,eNOS蛋白、mRNA的表达降低,差异有显著统计学意义(P＜0.01);与模型组比较,心痛泰低剂量组MPO蛋白、MPO mRNA、RhoA蛋白、mRNA、p38MAPK mRNA表达均降低,eNOS蛋白、eNOS mRNA表达均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,心痛泰中剂量组p38MAPK、MPO、RhoA蛋白、mRNA及TLR4 mRNA表达均降低,eNOS蛋白、mRNA表达均升高,差异有显著统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,心痛泰高剂量组TLR4、p38 MAPK、MPO、RhoA蛋白、mRNA的表达均降低,eNOS蛋白、eNOS mRNA的表达均上升,差异有显著统计学意义(P＜0.01);阳性组与心痛泰高剂量组比较,TLR4、p38 MAPK、MPO、RhoA、eNOS蛋白及其mRNA的表达虽有差异,但均无统计学意义(P＞0.05).结论 心痛泰可能通过降低TLR4、p38 MAPK、MPO、RhoA蛋白及其mRNA的表达,上调eNOS蛋白、eNOSmRNA的表达,抑制血管内炎症,保护主动脉血管内皮,达到治疗动脉粥样硬化的目的.

目的:通过构建急性心肌缺血模型,探讨心痛泰对急性心肌缺血大鼠新生血管密度、缺血心肌中Notch1、Dll4蛋白表达的影响.方法:100只SD大鼠,除假手术组10只外,其余大鼠予以结扎大鼠冠状动脉左前降支造成急性心肌缺血损伤模型,成模大鼠随机分为模型组,心痛泰低、中、高剂量组及麝香保心丸组.分别给以蒸馏水,心痛泰低、中、高剂量及麝香保心丸进行灌胃2周后,采用免疫组化法测新生微血管密度及缺血区心肌组织Notch1、Dl14蛋白的表达情况.结果:模型组大鼠的缺血心肌微血管密度、缺血心肌中的Notch1、DlN蛋白表达均高于假手术组(P＜0.05);心痛泰各剂量组及麝香保心丸组大鼠缺血心肌微血管密度、缺血心肌中的Notch1、Dll4蛋白表达均高于模型组(P＜0.05).结论:心痛泰具有保护缺血心肌的作用,这可能与其能激活Notch信号通路,上调Notch1、Dll4蛋白在缺血区的表达,促进血管新生有关.

目的 探讨短期应用前列地尔对老年冠心病患者择期行PCI术后造影剂肾病(CIN)的预防作用,进一步分析前列地尔降低CIN发生率的可能机制.方法 选择2016年12月～2017年6月天津市胸科医院、天津市第四中心医院、天津市第一中心医院、泰达国际心血管病医院心内科择期行PCI的冠心病患者440例,按照随机数字表法分为对照组220例,前列地尔组220例.比较2组术后CIN发生率,术前和术后血肌酐、高敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)、尿素、胱抑素C、估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipoprotein,NGAL)水平变化.记录住院期间不良药物反应发生情况.结果 所有患者中,CIN 23例(5.2％).前列地尔组CIN发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(2.3％ vs 8.2％,x2 =7.817,P=0.005).2组术后血肌酐、hs-CRP水平较术前明显升高,eGFR、胱抑素C、尿素水平较术前明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组术后NGAL水平较术前明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).前列地尔组术后NGAL、胱抑素C、hs-CRP水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).多因素logistic回归分析显示,前列地尔是CIN的保护因素(OR =0.261,95％CI:0.095～0.716,P=0.009).结论 前列地尔对冠心痛患者术后CIN的发病有一定预防作用.

目的 建立心痛泰颗粒的HPLC指纹图谱,为其质量评价提供依据.方法 采用 Phenomenext Luna C18柱(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以0.1％甲酸溶液-甲醇为流动相,检测波长为280nm,体积流量为1.0mL/min; 柱温为 30℃.测定 10批心痛泰颗粒样品,应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)建立心痛泰颗粒指纹图谱共有模式图,并计算相似度,再通过对照晶色谱图对共有峰进行指认.结果 通过 10批样品的测定,建立心痛泰颗粒HPLC指纹图谱,相似度均在 0.95以上,共标定 26个共有色谱峰,共有峰全部归属到各药材,其中 3个共有峰(21、22、26号峰)为丹参专属,8个共有峰(4～10、16号峰)为葛根专属,7个共有峰(13、15、17～20、23号峰)为枳壳专属,12号峰为川芎专属,14号峰为甘草专属,1号峰为三七与甘草共有,2号峰为三七、木香与山楂共有,3号峰为川芎与木香共有,11号峰为葛根与郁金共有,24号峰为川芎与枳壳共有,25号峰为郁金与枳壳共有,并通过对照晶色谱图对共有峰进行指认,7、12、22、26号峰分别为葛根素、阿魏酸、丹酚酸B、丹参酮ⅡA.结论 10批样品相似度结果表明该颗粒制备工艺方法稳定可行,同时建立的 HPLC指纹图谱方法稳定可靠,可以用于衡量心痛泰颗粒生产过程的稳定性和成品质量的可控性.

目的 通过检测青中年未绝经女性各项生物化学指标及其他暴露因素,探讨青中年未绝经女性发生动脉粥样硬化(As)的相关危险因素.方法 本研究样本来自2013年1月至2016年3月泰山医学院附属医院就诊或者健康体检的青中年女性(≤50岁),共筛选出符合条件的青中年未绝经女性390位,年龄26～ 50岁,平均(45.6±4.4)岁.所有研究对象均采用高频线阵超声探测颈总动脉、颈内外动脉分叉处及颈内动脉颅外段的横轴和纵轴实时二维图像,测量动脉管壁内膜中膜厚度及有无斑块.入选者分为2组:As组191例,对照组199例.详细询问所有入选对象的既往病史及家族遗传史并测量血压、身高、体质量等;自动生物化学分析仪测定血脂、空腹血糖、糖化血红蛋白、无机离子、肝功能、肾功能、甲状腺功能、血细胞分析、尿液分析等指标.结果 As组与对照组间年龄、3级高血压、糖尿病痛史、长期饮酒史、吸烟史(合被动吸烟)、早发冠心痛家族史、低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、载脂蛋白B、陀微球蛋白、空腹血糖、糖化血红蛋白、尿葡萄糖、碳酸氢根、氯离子等具有显著性差异(P＜0.05).单因素Logistic回归分析结果显示,青中年未绝经女性As的发生与年龄、3级高血压、糖尿病痛史、长期饮酒史、吸烟史(含被动吸烟)、早发冠心痛家族史、低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、载脂蛋白B、β2微球蛋白、空腹血糖、糖化血红蛋白、尿葡萄糖、血碳酸氢根等呈正相关.进一步行多因素Logistic回归分析表明,年龄、3级高血压、长期饮酒史、吸烟史(含被动吸烟)、早发冠心痛家族史、低密度脂蛋白胆固醇升高等为青中年女性As发生的独立危险因素.结论 年龄、3级高血压、长期饮酒史、吸烟史(含被动吸烟)、早发冠心痛家族史、低密度脂蛋白胆固醇升高等是青中年未绝经女性As发生的独立危险因素.

目的:基于TLR4/p38MAPK/AP-1信号通路探讨心痛泰对兔动脉粥样硬化和血管重构的影响.方法:日本大耳白兔120只随机分为空白组,模型组,心痛泰低、中、高剂量组和瑞舒伐他汀组.采用前瞻性实验研究,造模的同时给予药物灌胃.8周后取胸主动脉,免疫组化法测定白介素-8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1);Masson染色观察胶原分解和平滑肌纤维;测定胸主动脉最大内膜厚度(MIT)、最小管腔直径(MLD)、管腔面积(LA)、内弹力膜围绕面积(IELa)、外弹力膜围绕面积(EELa),计算内膜面积(IA)、中膜面积(MA)、管腔狭窄百分比(LS);Western Blot法测定胸主动脉组织Toll样受体-4(TLR4)、丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、转录激活因子(AP-1)的蛋白表达.结果:与模型组比较,心痛泰各剂量组、瑞舒伐他汀组IL-8、MCP-1、MMP-9含量显著降低(P＜0.01),TIMP-1含量显著升高(P＜0.05,P＜0.01),TLR4、p38MAPK、AP-1的蛋白表达显著降低(P＜0.05,P＜0.01);与心痛泰低剂量组比较,心痛泰高剂量组及瑞舒伐他汀组IL-8、MCP-1、MMP-9显著降低(P＜0.01),TIMP-1升高(P＜0.01),TLR4、p38MAPK、AP-1的蛋白表达显著降低(P＜0.01).与模型组比较,心痛泰各剂量组、瑞舒伐他汀组的IA、MA、LS均显著降低(P＜0.01).与心痛泰低剂量组比较,心痛泰中、高剂量组和瑞舒伐他汀组的IA、MA、LS均显著降低(P＜0.01).Masson染色显示,模型组管壁变薄,胶原分解增多,平滑肌纤维排列紊乱,管腔直径扩大,管腔内血栓形成;与模型组比较,心痛泰各剂量组和瑞舒伐他汀组动脉管壁胶原纤维分解减少,平滑肌细胞排列较为整齐,管腔、管壁结构有所改善.结论:心痛泰可能是通过调控TLR4/p38MAPK/AP-1信号通路及下游的细胞因子,减少血管胶原分解、抑制纤维细胞增生,改善动脉粥样硬化和血管重构.