目的 调查2022年甘肃省市售小麦粉中恩镰孢菌素(ENNs)污染情况.方法 采集甘肃省15个市(州、区)市售小麦粉样品80份,按照《国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》方法检测,对所得数据进行统计学分析.结果 2022年甘肃省市售小麦粉中4种ENNs检出率由高到低依次为ENNB(11/80,13.75％)、ENNB1(9/80,11.25％)、ENNA与ENNA1均为(6/80,7.50％).甘肃省15个市(州、区)地区小麦粉中除武威、白银和定西的小麦粉样品中未检测出任何一种ENNs外,其余12个地区均至少检测出一种ENNs.结论 2022年甘肃省市售小麦粉中4种ENNs均有检出,但含量低于国内外已报道的研究,证明甘肃省市售小麦粉中ENNs污染程度较低.

镰孢菌Fusarium spp.通常引起多种作物病害,但其中某些种类可作为植物内生菌从而提高植物的生长和抗逆性.因此,研究非农田生态系统镰孢菌物种多样性和生态功能具有重要的科学意义.本研究对分离自滩涂盐碱地盐生植物根际的 23 株镰孢菌进行了种类鉴定、非生物胁迫抗性及毒性评价研究.结果表明:经形态学和多基因联合建树分析(ITS+rpb2+tef1-α),这些菌株属于 7 个系统发育种,多数菌株属于尖孢镰孢菌 F.oxysporum、恶臭镰孢菌 F.foetens 和藤仓镰孢菌 F.fujikuroi.在 7 种非生物胁迫条件下[H2O2、亚硫酸氢钠甲萘醌(menadione sodium bisulfite,MSB)、KCl、山梨醇(sorbitol)、荧光增白剂(calcofluor white,CFW)、刚果红(congo red)、NaCl]测定菌株抗性,上述 3 种镰孢菌与Fusarium sp.1 表现出相似的抗性能力;Fusarium sp.2 和Fusarium sp.3 尤其在离子胁迫和渗透胁迫方面表现出较强的适应性;芳香镰孢菌F.ambrosium则对多种胁迫均比较敏感.PCR 检测表明大多数菌株含有恩镰孢菌素(enniatin)合成核心基因,约 1/3 菌株包含伏马菌素(fumonisin)基因,少量菌株含有单端孢霉烯族毒素(trichothecene)基因.只有少量菌株扩增出 six2、six9和six13等编码木质部分泌蛋白SIX(secreted in xylem)的基因.接种试验表明,多数菌株对拟南芥和 NL895 杨树无性系具有不同程度的致病性,只有少量菌株具有明显的促生效应;而所有菌株接种小麦幼苗均未引起病害.研究发现促生和致病菌株在毒素合成基因和 six 基因数量方面并无明显差异,表明还存在其他致病或促生机制.本研究揭示了盐生植物根系存在较为丰富的镰孢菌种类,而且存在致病或促生等方面的差异.本研究为深入研究营养方式转变的基因组演化特征和植物-镰孢菌的共生互作提供了模型.

目的 建立大米粉和小麦粉中白僵菌素、恩镰孢菌素A、恩镰孢菌素A1、恩镰孢菌素B、恩镰孢菌素B1的超高效液相色谱-串联质谱分析方法.方法 样品用乙腈-水提取、Oasis Prime HLB固相萃取柱净化,Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm× 100 mm,1.8 μm)分离,电喷雾电离正离子模式下多反应监测进行测定,同位素内标法和基质匹配标准曲线外标法定量.结果 白僵菌素和4种恩镰孢菌素在0.1～50.0ng/mL范围内具有良好的线性关系(r＞0.999).大米粉和小麦粉中白僵菌素和4种恩镰孢菌素的平均回收率分别是96.4％～105.4％和99.1％～109.2％,相对标准偏差分别为1.01％～7.42％和1.09％～9.69％(n=6),检出限为0.03 μg/kg,定量限为0.1 μg/kg,基质效应分别为72.7％～99.3％和60.8％～100.4％.面粉中白僵菌素和恩镰孢菌素污染水平高于大米,恩镰孢菌素B在小麦粉和大米粉中的检出率最高,含量分别为0.03～9.57 μg/kg和0.03～0.56 μg/kg,检出率分别为98.5％和36.4％.结论 本方法简单快速、准确性好、灵敏度高,可用于小麦粉和大米粉中白僵菌素和恩镰孢菌素的测定.

目的 建立了玉米及其制品和小麦及其制品中白僵菌素(beauvericin,BEA)、恩镰孢菌素A(enniatin A,ENA)、恩镶孢菌素A1(enniatin A1,ENA1)、恩镰孢菌素B(enniatin B,ENB)和恩镰孢菌素B1(enniatin B1,ENB1)的高效液相色谱-串联质谱检测方法.方法 样品经乙腈-水(85∶15,V/V)提取、室温静置、固相萃取柱净化后,以2 mmol/L乙酸铵水-乙腈作为流动相,采用电喷雾电离正离子多反应监测模式进行检测.结果 该方法对玉米及其制品和小麦及其制品中BEA和4种恩镰孢菌素(ENNs)的检出限范围分别为0.01～0.12和0.02 ～0.21 μg/kg,定量限范围分别为0.02～0.44和0.05 ～0.68μg/kg,平均加标回收率范围分别为91.6％ ～149.7％和100.5％～128.2％,基质抑制或增强效应分别为88.0％～101.5％和55.8％～106.5％,且BEA和4种ENNs在所测基质中线性关系和精密度良好,相关系数均＞0.99,相对标准偏差均＜15％.结论 所建立的方法操作简便、灵敏度高、准确性好,可用于玉米及其制品和小麦及其制品中BEA和4种ENNs的测定.

目的 调查山东省部分地区2017年产玉米及其制品中六酯肽类真菌毒素,包括白僵菌素(BEA)和恩镰孢菌素(ENNs)中恩镰孢菌素A(ENA)、恩镰孢菌素A1(ENA1)、恩镰孢菌素B(ENB)和恩镰孢菌素B1(ENB1)的污染情况.方法 从山东省东部、西部、南部和中部四个地区采集2017年产玉米及其制品158份,样品经乙腈-水(85∶15,V/V)提取、固相萃取柱净化后高效液相色谱-串联质谱测定5种毒素的含量.结果 BEA是158份样品中的主要污染毒素,其阳性率和平均值分别为82.3％ (130/158)和65.26 μg/kg,4种ENNs的阳性率和平均值分别为ENA:55.1％ (87/158)和0.28 μg/kg,ENA1:8.2％ (13/158)和0.62 μg/kg,ENB:3.8％ (6/158)和1.19 μg/kg,ENB1:56.3％ (89/158)和0.13 μg/kg.玉米粒、玉米粉和玉米碴中5种毒素的平均值分别为BEA:46.96、86.45和0.17 μg/kg,ENA:0.13、0.35和0.06 μg/kg,ENAt:0.14、0.76和0.00μg/kg,ENB:0.23、2.15和0.00 μg/kg,ENB1:0.21、0.15和0.08 μμg/kg.东部地区样品中BEA的污染最严重,其阳性率和平均值分别为87.0％(87/100)和95.75 μg/kg;除南部地区ENA和ENB1的阳性率较高(均为91.3％,21/23)外,4种ENNs在其他3个地区阳性率均较低,且4种ENNs在4个地区的平均值均低于BEA.结论 山东省部分地区玉米及其制品可受5种六酯肽类真菌毒素的污染,BEA的污染水平高于4种ENNs的污染水平;毒素污染存在种类和地域差异,建议在山东省开展大范围监测的基础上,重点监测东部沿海地区玉米及其制品中BEA的含量.

白僵菌素(beauvericin,BEA)和恩镰孢菌素(enniatins,ENNs)是由镰刀菌属的多种真菌产生的六酯肽类真菌毒素,该类毒素对上皮细胞、免疫细胞、卵巢细胞等具有很强的毒性作用.本文主要针对能产生BEA和ENNs的重要产毒镰刀菌的形态学特征、分子遗传学特征以及影响BEA和ENNs产生的环境条件如温度、底物等因素进行概述.重点阐述了产毒镰刀菌在两类毒素合成酶的基因水平和氨基酸水平的差异及影响产毒等主要因素,为BEA和ENNs及其产毒镰刀菌的预防和控制提供理论依据.

目的:采用改良QuEChERS前处理技术,建立了超快速液相色谱-串联质谱(Ultra-High-performance Liquid Chroma-tography-TandemMass Spectrometry,UHPLC-MS/MS)检测中药三七中26种真菌毒素含量的分析方法.方法:样品用QuEChERS方法进行前处理,经15％甲酸乙腈溶液提取,用混合净化填料净化除杂,采用基质匹配标准曲线结合同位素内标法进行定量分析.结果:在低、中、高3个添加水平下,26种真菌毒素的平均加标回收率为80.1％～116.2％(n=5),平均回收率范围为26种真菌毒素在各自的线性范围内线性关系良好,相关系数(r2)≥0.99,检出限和定量限分别为0.05～6.25μg/kg和0.2～20.0μg/kg.结论:该法简单、快速、实用性强,适用于三七中26种真菌毒素的定量分析.

目的 将蝉花菌种接种于不同基质培养一定时间后,检测培养物中白僵菌素和恩镰孢菌素含量.方法 将一株蝉花菌种分别接种于4种液体培养基和4种固体培养基中,25℃下连续培养1～7周,采用高效液相色谱-串联质谱法测定蝉花培养物中的白僵菌素和恩镰孢菌素.结果 该株蝉花在4种液体培养基上培养不同时间后,白僵菌素的检出率在42.9%～100.0%之间,检出浓度范围为1.0～94.6μg/L;在4种固体培养基上培养不同时间后,白僵菌素的检出率均为100.0%,检出水平范围在60.9～44677.5μg/kg.在4种液体和4种固体培养物中均未检出恩镰孢菌素.结论 该株蝉花在8种试验培养基上培养一定时间后均可产生白僵菌素,且在固体培养基上产生的白僵菌素水平远高于液体培养基,但在两类培养基上均不产生恩镰孢菌素.

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)检测中药饮片中4种恩镰孢菌素含量的分析方法.方法 样品采用70％甲醇超声处理后,以2 mmol·L-1醋酸铵、甲醇-乙腈为流动相,经Agilent Infinity Lab Poroshell 120 SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm)梯度洗脱分离,在电喷雾电离(electrospray ionization,ESI)正离子模式下采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)进行测定,基质外标法定量.结果 在高、中、低3个加标水平下,4种恩镰孢菌素的平均回收率为92.15％～118.67％,各恩镰孢菌素在线性范围内线性关系良好,相关系数均≥0.999,方法检出限为0.002～0.02μg·kg-1,定量限为0.01～0.1μg·kg-1,结果显示4种恩镰孢菌素对17种样品均有不同程度的污染.结论 该方法简便、快速、准确,适用于中药饮片中4种恩镰孢菌素筛查.药饮片中恩镰孢菌素检出率较高.