感染影响伤口愈合,如何快速筛查出伤口感染后的细菌类型,指导医生尽快使用对症的抗菌药物,促进伤口的快速恢复,在临床上具有重要意义.本研究围绕三种细菌类型快速筛查技术的原理和应用,并结合这三种技术取得的最新研究进展进行综述.

志贺菌是常见的革兰阴性致病菌，是细菌性痢疾的病原体。目前已发现志贺菌对多种抗菌药物产生耐药。本文对志贺菌关于喹诺酮类、大环内酯类和β-内酰胺类抗菌药物的耐药基因进行综述，并阐述了各种检测方法在耐药基因检测方面的原理和运用，为我国开展对志贺菌耐药基因的研究与检测提供参考依据。

目的:基于AIE荧光探针6PD-DPAN可结合细菌并聚集发光，荧光强度可体现细菌数量的原理，建立一种快速、简便、准确的细菌药物敏感性试验新方法，为临床快速精准用药提供依据。方法:评价类研究。收集东莞市厚街医院2022年1—12月临床样本分离菌共107株，其中46株用于新方法的建立，61株用于方法学验证。微量肉汤稀释法测定的最低抑菌浓度（MIC）为金标准，以庆大霉素，左氧氟沙星、头孢噻肟3种抗菌药物作为实验药物；计算第4 h荧光强度比值（R值），采用ROC曲线分析R值在判断细菌生长与否的效能并确定其截断值。新方法检测61株临床菌株的MIC，以微量肉汤稀释法为金标准，分析新方法的基本一致性、分类一致性、极重大错误和重大错误，采用Kappa检验确定两者的一致性。结果:培养4 h R值的ROC曲线分析：截断值为3.0，其对细菌生长的判定敏感度和特异度均为100%；细菌生长受抑制R值为11.1（8.6，14.4）；细菌生长R值为1.1（1.0，1.2）。与金标准相比，新方法检测61株临床菌株MIC的基本一致性为100%（61/61），分类一致性为96.7%（59/61），未出现极重大错误和重大错误，Kappa值为0.94，新方法与微量肉汤稀释法结果一致性较好。结论:本研究成功构建了一种基于AIE技术的细菌药物敏感性试验新方法，可在5 h内取得满意结果，为临床早期精准药物治疗提供依据。

黄原胶寡糖是通过降解黄原胶得到的由 2～20 个单糖通过糖苷键结合形成的低分子聚合物.黄原胶寡糖理化性质稳定,相比于黄原胶具有易溶于水、黏度低、生物利用度高等特点,具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤活性,对植物具有诱导抗病性,能够调节植物生长等广泛的生物活性,具有很好的应用前景,成为近年来寡糖领域的研究热点.黄原胶寡糖的活性与其结构特征密切相关,本文对黄原胶寡糖制备、分离纯化及结构表征进行综述,重点讨论了不同模式下的色谱分离技术及质谱和核磁共振波谱结构表征方法,阐述了各种方法的原理和应用范围,并对其优越性和局限性进行了总结,以期为黄原胶寡糖的进一步研究和应用提供参考.

目的 对新型抗结核分枝杆菌药普托马尼各合成路线涉及的3个共性工艺杂质:(S)-叔丁基二甲基硅烷缩水甘油醚(杂质Ⅰ)、(S)-丁酸缩水甘油酯(杂质Ⅱ)、4-三氟甲氧基溴苄(杂质Ⅲ)进行遗传毒性评价并建立相应的质量控制方法.方法 分别采用基于专家规则和统计学原理的2种互补的(定量)构效关系[(Q)SAR]模型(Derek和Sarah)对普托马尼中3个工艺杂质的遗传毒性进行评价和分类;根据评价结果建立气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法,采用分时段多反应监测(MRM)模式同时对这3个工艺杂质进行测定,并阐述这3个工艺杂质在EI源下的质谱裂解规律.结果 杂质Ⅰ和杂质Ⅲ Derek评估结果均为阳性,Sarah评估结果分别为模棱两可和阴性,依据ICH M7指南分类为3类致突变杂质;杂质Ⅱ Derek评估结果为阳性,Sarah结果显示有明确的Ames阳性实验结果,为2类已知致突变杂质.3个工艺杂质均需按照毒理学关注阈值(TTC)进行控制,建立的GC-MS/MS法经验证3个杂质可有效分离,线性关系良好,方法定量限均低于拟定限度的15％,平均回收率(m=9)分别为105.5％、104.4％和108.5％,重复性RSD(n=6)分别为2.2％、5.8％和2.2％.3批样品均检出杂质Ⅲ.结论 建立的GC-MS/MS法操作简单,专属性强,灵敏度高,可用于普托马尼中3个潜在致突变杂质的测定.由于杂质Ⅱ也是恶唑烷类抗菌药如利奈唑胺、咔哒唑胺、泰地唑胺等的共性工艺杂质,因此本研究也为其他恶唑烷类抗菌药中杂质Ⅱ的质量控制提供了参考.

自氨基糖苷类抗生素(aminoglycoside antibiotic,AmAn)广泛应用于临床以来,由AmAn致聋的病例时有发生.AmAn是化学结构中含有氨基糖分子的一类抗生素,较主要的有链霉素、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素和新霉素等.AmAn主要作用于革兰阴性菌,抗菌作用原理是阻碍细菌蛋白质的生物合成.这类药物可能会对肾脏、前庭和耳蜗造成不同程度的损伤[1].近年来,对AmAn的耳蜗毒性机制[2]进行了深入细致的研究,形成了许多种学说,但这些学说并不能完全解释这类药物耳毒性的机制,随着科学技术的进步,从分子水平上对AmAn耳毒性机制的研究进一步深入,取得了一定的突破,并在药物治疗AmAn所致耳蜗毒性和预防耳蜗损伤上有所进展,现综述如下.

抗菌药物药动学/药效学(PK/PD)综合考虑病原体、宿主和药物三者的相互关系,对制定抗菌治疗方案、优化感染治疗以及耐药菌感染治疗等方面具有重要价值.PK/PD参数是药动学参数和休外抗菌活性参数之间的综合定量参数,包括AUC0_/MIC、C /MIC和T＞MIC等,浓度依赖性和时间依赖性抗菌药物的抗菌行为各不相同,与治疗效果相关的参数也有所差异,据此的临床用药方式也各有侧重.临床在优化感染治疗中,需要根据PK/PD原理,按照病原种类、细菌耐药性、患者病理状况等有所不同,设计良好的给药方案,以提高感染治疗成功机率为目标;采用Monte Carlo模拟方法,选择经验治疗药物,调整抗菌药物剂量和给药方式,实为优化抗菌治疗最主要的内容之一.

目的 设计合成伪绵 马酚及其衍生物,并考察其抑菌活性.方法 基于拼合原理,通过还原、傅-克酰基化等反应合成伪绵马酚及其衍生物并鉴定目标化合物的结构;采用M38-A2微量稀释法测定绵马酚、伪绵马酚及中间体对红色毛癣菌、须癣毛癣菌及犬小孢子菌的抑菌活性.结果与结论 合成了伪绵马酚、4个中间体及2个伪绵马酚衍生物;活性研究表明,伪绵马酚对犬小孢子菌、须癣毛癣菌、红色毛癣菌3种皮肤癣菌的抗菌作用最强,其MIC 值分别为10、20、28.28 mg· L-1.结论 合成的目标化合物对3种受试真菌均具有不同程度的抑制作用,可以为间苯三酚类化合物的成药研究提供理论基础.

核糖体是蛋白质的“合成工厂”,也是临床上多种抗菌药物的作用靶点,因此,深入理解细菌核糖体的蛋白质翻译机制意义重大.蛋白质翻译是通过多步骤相互协调、多组分精细配合来实现高保真和精确调控.核糖体在mRNA上的移位作为翻译过程中最重要的事件之一,需要核糖体大规模的构象重排以及tRNA2-mRNA沿着核糖体的精确移动.在细菌中,移位是由延伸因子EF-G催化GTP水解来驱动的.近年来,单分子荧光共振能量技术(smFRET)的发展使得人们可以探究单个tRNA分子移位的动力学过程并实时观测核糖体的构象变化.本文首先介绍了smFRET技术的原理及特点,对其在核糖体结构动态及tRNA移位研究中的应用进行了较为系统的总结,并对其应用前景进行了展望.

目的 构建铜绿假单胞菌PA14细胞株的PA0745基因突变株,并验证其致病性.方法 采用同源重组原理构建铜绿假单胞菌PA0745基因缺失株和点突变株.利用质粒抗性和营养缺陷进行筛选,获得铜绿假单胞菌突变株E126A、E146A和△PA0745.分析突变PA0745基因后,PA14细胞株生长特性及致病性变化.结果 成功构建PA14细胞株的PA0745基因突变株E126A、E146A和APA0745.生长曲线测定结果表明,PA0745基因突变后,不影响PA14细胞株正常生长.细胞侵染实验结果显示,相较于PA14细胞株,E126A、E146A和△PA0745对RAW264.7侵染能力分别下降了29.51％、60.66％和79.34％.结论 本研究成功构建了PA14细胞株的PA0745基因突变株,并初步验证了PA0745基因的功能,这对开发抗菌药物有指导意义.