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鼻腔免疫淋病奈瑟球菌疫苗候选蛋白MetQ的免疫保护效果初步评估
编辑人员丨5天前
目的:原核表达淋病奈瑟球菌MetQ蛋白,采用鼻腔免疫途径初步评估MetQ蛋白的免疫保护效果。方法:利用基因重组技术构建pCold TF-metQ- E.coli BL21表达菌株,并进行MetQ蛋白的表达纯化。将6 ~ 8周龄BALB/c雌性小鼠随机分两组,每组6只,MetQ组:MetQ蛋白+霍乱毒素B亚单位(CTB)佐剂等比例混匀后对小鼠进行鼻腔滴注,10 μg/只;磷酸盐缓冲液(PBS)组:鼻腔滴注等比例、等剂量的PBS + CTB佐剂。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MetQ组末次免疫后3只小鼠的血清及阴道分泌物中的抗体效价。免疫印迹分析MetQ在不同淋病奈瑟球菌中的表达情况。间接ELISA分析MetQ抗血清与全菌抗原的结合能力。评估MetQ抗血清对淋病奈瑟球菌的杀菌活性以及对ME-180细胞的黏附抑制作用。计量资料以 ± s表示,不同处理组间比较采用 t检验。 结果:成功表达去除信号肽的MetQ蛋白。MetQ组小鼠经鼻腔免疫后血清能检测到特异性IgG、IgG1、IgG2a、IgA抗体,抗体滴度分别达1 × 10 7、1 × 10 5、2 × 10 4、1 × 10 2,阴道分泌物能检测到特异性IgG、IgA抗体,抗体滴度分别达1 × 10 3和1 × 10 2。免疫印迹结果显示,MetQ蛋白在8株淋病奈瑟球菌中均有表达。间接ELISA结果显示,MetQ抗血清与淋病奈瑟球菌全菌抗原结合能力为20。血清杀菌力实验结果显示,与无血清对照组(100%)相比,MetQ抗血清的有效杀菌滴度可达1∶320(淋病奈瑟球菌存活率:46.33% ± 6.67%, t = 8.05, P = 0.001),MetQ抗血清稀释1∶160、1∶640时,淋病奈瑟球菌存活率分别为22.01% ± 6.80%( t = 11.47, P <0.001)、84.55% ± 6.99%( t = 2.21, P > 0.05)。黏附抑制实验结果显示,与无血清对照组(100%)相比,MetQ抗血清稀释1∶20、1∶40、1∶80能抑制淋病奈瑟球菌对ME-180细胞的黏附作用(淋病奈瑟球菌黏附率= 17.25%、28.23%、54.51%, t = 48.44、31.88、7.29,均 P<0.05)。 结论:MetQ蛋白在不同淋病奈瑟球菌中均有表达,经鼻腔免疫小鼠后能在血清及阴道分泌物中检测到高效价的特异性抗体。MetQ抗血清与淋病奈瑟球菌有较好的亲和性,并具有较好的血清杀菌活性及抗体黏附抑制作用,是一种有潜力的淋病奈瑟球菌疫苗候选蛋白。
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编辑人员丨5天前
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2015—2019年成都市含无细胞百白破成分联合疫苗预防接种安全性评价
编辑人员丨5天前
目的:评价成都市含无细胞百日咳、白喉和破伤风(DTaP)成分的联合疫苗预防接种安全性。方法:通过中国免疫规划信息管理系统疑似预防接种异常反应(AEFI)监测模块,收集2015—2019年成都市报告的DTaP-b型流感嗜血杆菌疫苗(DTaP-Hib)以及DTaP-灭活脊髓灰质炎-b型流感嗜血杆菌疫苗(DTaP-IPV/Hib)报告AEFI的病例,对其进行描述流行病学分析。结果:2015—2019年成都市接种含DTaP成分联合疫苗4 232 248剂,报告AEFI共8 234例,报告发生率194.55/10万剂,其中一般反应为7 897例(186.59/10万剂),异常反应为234例(5.53/10万剂);DTaP报告AEFI共4 240例,报告发生率为140.63/10万剂,DTaP-Hib报告AEFI共2 490例,报告发生率为399.09/10万剂,DTaP-IPV/Hib报告AEFI共1 504例,报告发生率为253.49/10万剂。基础免疫(1、2、3剂)报告发生率86.94/10万剂,加强免疫(4剂)报告发生率548.67/10万剂,加强免疫报告发生率高于基础免疫( P<0.001);异常反应以过敏性皮疹为主,报告发生率6.27/10万剂。 结论:成都市3种含DTaP成分疫苗的AEFI监测敏感性高,异常反应发生率低,安全性良好。
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编辑人员丨5天前
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栝楼组培快繁及高效栽培技术研究进展
编辑人员丨3周前
栝楼(Trichosanthes kirilowii Maxim.)是一种重要的药用植物,具有丰富的药用价值和广泛的应用前景.传统的种植方式存在效率低和品质不稳定等问题,通过组织培养可以成功实现栝楼无菌苗的快速生长和繁殖,通过科学合理的繁殖方法、水肥管理和病虫害防治,可以进一步提高栝楼的产量和品质.现对栝楼组培快繁及高效栽培技术的研究进展进行综述,以期为栝楼的生产提供有效的理论支持,促进栝楼产业的高质量发展.
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编辑人员丨3周前
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基于正交实验的赤苍藤组培快繁体系建立
编辑人员丨2024/4/27
以赤苍藤(Erythropalum scandens)带芽点的半木质化枝条为材料建立赤苍藤组培快繁体系,研究外植体灭菌条件,通过正交实验,设计不同植物生长调节剂组合对赤苍藤愈伤组织诱导、愈伤组织分化、生根壮苗及移栽驯化的影响.结果表明,赤苍藤外植体消毒最佳方法是以体积浓度为75%乙醇浸泡60秒后,再以质量浓度为0.1%HgCl2消毒10分钟,成功率为48.89%;叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+1.0 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-1 IBA,培养30天,诱导率达71.11%,且绿色紧密;茎段诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-1 IBA,培养30天,诱导率为70.00%,且绿色紧密;诱导愈伤组织增殖以及分化的最佳培养基为MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 TDZ+1.0 mg·L-1 I BA,芽分化率达98.89%,增殖系数为3.33;生根最佳培养基为MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 IBA,生根率为100%,平均生根数为2.2条;生根苗在小颗粒泥炭土中成活率达88.89%.该研究建立了赤苍藤组培快繁体系,为赤苍藤优质种苗生产奠定了良好基础.
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编辑人员丨2024/4/27
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神經性梅毒之發熱療法
编辑人员丨2024/4/27
按本院所治療之三病案,第一病案發瘧疾八次,待瘧疾停止後,兩腿肌肉力量加增,行動靈敏,患者極爲愉快,胃之漲痛亦無.惜出院後,未能再査其脊髓液.第二病案接種瘧疾後,雖只有四次發熱,但效果實出意料之外.病人來時,不能站立,發熱後下床用杖,可以行步,但兩足無力,至出院時,則行走隨便,不用手杖,病人自己步行出院,極爲滿意.病人於八月二十三號入院,十月十八號出院,在院內共住五十五天,除接種瘧疾外,注射殺台盤劑(tryparsamide)七次,總劑量爲十五克,鉍劑九次,共17 c.c.第三病案,係用傷寒菌苗靜脈注射發生熱度,待八次射完.三月十三號出院後,卽給以薩法散.隨射此藥,卽呈大效.在初入院時,患者兩腿無力,行動困難,不能工作.因患者爲濟南津浦鐵廠鐵工,病時不能工作,生活艱窘,面貌憔悴,精神頹喪.及經治療後,兩腿力量恢復,精神活潑,於四月二十四日卽已囘廠工作.著者於五月十號見此病人,來院注射薩法散,又細詢其情形,患者以單腿跳行數步,以表其腿力恢復,並云可由津浦鐵廠步行走來(十里).患者年雖半百,但自康健復原後,所表現之活潑狀態頗似幼童.細査其知覺反應,完全復原,麻木區域亦全復原.但瞳孔仍無光反應,味覺亦未完全復原.停止射藥後四星期,復取其脊髓液用膠體金試法及乏色曼試法査之,已大見進步.膠體金所現之曲線,與未治療前大不相同,與正常者所差無幾.此次報吿,只三病案,但結果皆有相當進步.按各國醫師報吿:發熱療法,特如接種瘧疾,對於治療神經梅毒之效果,以脊髓癆及全身麻痺,不全麻痺,或麻痺癡呆爲有特效;其他神經梅毒,其爲效不如是之大.本篇所報吿之三病案,第一案係早期脊髓癆,只有膠體金試法,脊髓液現脊髓癆反應,亦有胃漲痛,行動不便二病狀.第二病案所顯之病狀爲脊髓癆,膠體金試法亦顯陽性,第三病案所顯之病狀及血淸脊髓液試驗,皆爲標準脊髓癆.三病案經發熱療法治療後,各有良好結果.第一,二兩病人皆離濟南甚遠,未能再試其脊髓液,惟第三病人得再試驗之,結果極好.應用此種療法,在我國尙不甚多.惟望海內諸同道繼續硏究,努力前進,則將來當有更美滿之結果,報吿大家也.註一,Prof, Dr. R. 0. Stein.爲世界著名皮膚病專家Finger之高足,現在維也納大學任皮膚病教授,著者在維也納時,蒙其訓誨,得益甚多;石氏對於梅毒,淋病,經驗尤深.註二,Pandy test.潘氏試法;卽用百分之七的石炭酸三,四C.C.,盛於小試管內(test tube),再滴入三,四滴脊髓液,若有梅毒,液體變白;此試驗之好處,卽應效迅速,且易辦.但腦瘤,及大腦炎(encaphalitis)亦能現同樣應效,惟此可用他法以分別之.潘氏試法比乏色曼早現,所以對於預防治療,用此試驗較好.
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编辑人员丨2024/4/27
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浙麦冬愈伤组织的诱导与再生植株的获得
编辑人员丨2024/3/30
目的:建立浙麦冬组织培养快繁体系,为其规模化生产提供技术支撑.方法:以'浙麦冬 1 号'嫩叶基部为外植体,研究植物生长调节剂对诱导愈伤组织、不定芽分化和不定根形成的影响,并进行了炼苗与移栽.结果:'浙麦冬 1 号'愈伤组织诱导最适培养基为MS+KT 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂2.5 g/L+活性炭2.0 g/L,诱导率为 92.22%;愈伤组织分化不定芽最适培养基为MS+KT 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖 30.0 g/L+琼脂 2.5 g/L+活性炭 2.0 g/L,不定芽分化率达88.89%;最适生根培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖 30.0 g/L +琼脂 2.5 g/L,生根率为 96.67%;组培苗经驯化,2 周后移栽成活率为 89.00%.结论:建立了'浙麦冬 1 号'组织培养快繁体系.
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编辑人员丨2024/3/30
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基于代谢组学技术分析枸杞愈伤组织抗氧化活性成分差异
编辑人员丨2023/12/9
采用非靶向代谢组学技术,探究不同植物生长调节剂组合对枸杞愈伤组织抗氧化活性成分富集的影响.以枸杞无菌苗茎段为外植体,分别以0.25 mg/L 1-萘乙酸+0.125 mg/L6-苄氨基嘌呤(NB)和0.25 mg/L2,4-二氯苯氧乙酸+0.125 mg/L激动素(DK)为植物生长调节剂进行愈伤组织培养,以DPPH自由基清除法检测不同愈伤组织的抗氧化活性,在相同浓度下NB抗氧化活性是DK的1.9倍.基于UHPLC-Q-TOF-MS的代谢组学技术对两组样品进行代谢物分析,共鉴定出752种代谢物,其中55种的相对含量存在显著差异,主要为氨基酸类和糖类;KEGG分析发现差异代谢通路主要为ABC转运蛋白通路.ABC转运蛋白的功能差异可能是导致枸杞愈伤组织抗氧化活性差异显著的主要原因.
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编辑人员丨2023/12/9
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母牛分枝杆菌菌苗对HIV感染合并结核分枝杆菌潜伏感染者外周血T细胞亚群的影响
编辑人员丨2023/10/28
目的:探讨母牛分枝杆菌菌苗对HIV合并结核分枝杆菌潜伏感染(latent tuberculosis infection,LTBI)者T细胞亚群的影响及其使用的安全性.方法:采用多中心前瞻性队列研究方法,连续纳入2003年6月至2020年6月宁夏回族自治区银川市AIDS管理机构管理的经结核菌素皮肤试验筛查确诊的96例HIV感染合并LTBI者作为研究对象.研究对象按照银川市所辖县区划分为试验组(63例)和对照组(33例).试验组在高效抗逆转录病毒治疗的基础上,注射母牛分枝杆菌菌苗22.5 μg/次,每2周注射1次,共3次.对照组在高效抗逆转录病毒治疗的基础上,口服异烟肼300 mg/次,1次/d,连续服用6个月.于治疗前和治疗结束后1个月、3个月随访时,检测并比较两组研究对象的CD4+、CD8+、CD3+T细胞等免疫细胞水平及肝功能指标变化情况;同时,评价两组研究对象不良反应发生情况.结果:试验组在治疗结束后1个月,CD3+T细胞水平为(1583.83±584.69)个/μl,明显高于治疗前[(1221.20+399.52)个/μl;t=-2.962,P=0.004];治疗结束后 3 个月,CD3+、CD4+、CD8+T 细胞水平分别为(1816.67±736.86)个/μl、(674.10±282.30)个/μl和(833.21±314.11)个/μl,均明显高于治疗前[分别为(1221.20±399.52)个/μ1、(588.71±273.44)个/μl和(609.65±267.71)个/μl],差异均有统计学意义(t=-4.460,P<0.001;t=-2.801,P=0.044;t=-3.801,P<0.001).治疗结束后 3 个月,试验组 CD3+、CD4+T 细胞水平及CD4+/CD8+比值(0.86±0.54),均明显高于对照组[分别为(1716.47±689.07)个/μl、(559.11± 187.14)个/μl、0.82±0.74],差异均有统计学意义(t=2.209,P=0.034;t=3.666,P=0.008;t=3.502,P=0.001).在治疗结束后1个月,对照组谷草转氨酶水平为(33.15±11.70)U/L,明显高于试验组[(26.54± 9.63)U/L],差异有统计学意义(t=2.624,P=0.011);治疗结束后3个月,对照组谷丙转氨酶[(52.58± 27.72)U/L]、谷草转氨酶[(33.74±11.89)U/L]水平均明显高于试验组[(35.29±21.16)U/L、(26.67± 11.07)U/L],差异均有统计学意义(t=2.563,P=0.013;t=2.172,P=0.034).试验组无不良反应,无退出治疗患者,治疗完成率达到100.0%(63/63),明显高于对照组的84.9%(28/33),差异有统计学意义(x2=7.235,P=0.007).结论:母牛分枝杆菌菌苗用于HIV感染合并LTBI者抗结核预防性治疗可提高其细胞免疫水平,且对肝功能的损伤更小,具有较好的安全性.
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编辑人员丨2023/10/28
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盐肤木体细胞胚胎发生及植株再生
编辑人员丨2023/10/28
以盐肤木(Rhus chinensis Mill.)幼胚为外植体,研究不同植物生长调节剂组合对其愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生的影响,以建立盐肤木体细胞胚胎发生及植株再生体系.结果表明,最适愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,诱导率为84.57%,诱导出的初代愈伤组织白色或淡黄色,质地疏松,表面光滑,为非胚性愈伤.初代愈伤组织转移到1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上培养1个月后,长出淡黄色质地紧密的胚性愈伤组织,诱导率高达100%,在此培养基上胚性愈伤组织增殖倍数为854.73%.所获得的胚性愈伤组织转接到1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖4%的培养基上培养1个月后可诱导体细胞胚胎发生,诱导率可达32.67%.诱导得到的体细胞胚胎经历球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚进一步分化发育成苗.无菌苗炼苗后栽种到泥炭土:蛭石:珍珠岩为2:1:1的生长基质上,能100%稳定成活.经过细胞学观察分析,体细胞胚的发育与合子胚相似.
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编辑人员丨2023/10/28
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苹果抗寒半矮化砧木‘54-118’的组织培养及其离体叶片不定梢再生
编辑人员丨2023/8/6
本文以苹果抗寒半矮化砧木‘54-118’为试材,研究基本培养基及植物生长调节物质对无菌苗增殖和生根的影响;并以无菌苗离体叶片为外植体,研究基本培养基、植物生长调节物质及碳源对叶片不定梢再生的影响.结果表明,无菌苗的适宜增殖培养基为QL+1 mg·L-1 6-BA+0.3 mg·L-1 IBA+30 g·L-1蔗糖,增殖系数为5.1.适宜的生根培养基为1/4MS+0.5 mg·L-1IBA+20 g·L-1蔗糖,生根率为77.9%,平均每株根数为3.5.离体叶片不定梢再生的最佳培养基为改良MS (NM)+3 mg·L-16-BA+0.3 mg·L-1IBA+30 g·L-1D-山梨醇,再生率为85.6%.
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编辑人员丨2023/8/6
