目的:基于HPLC-Q-TOF-MS/MS技术和网络药理学方法,分析预测瓜蒌祛痰止咳的质量标志物(Q-Marker).方法:采用HPLC-Q-TOF-MS/MS技术鉴定瓜蒌水提液的入血原型成分,利用Swiss Target Prediction、SEA平台预测成分的作用靶点,并与CooLGeN数据库中止咳化痰药物靶点比对筛选,获得瓜蒌祛痰止咳的作用靶点.利用String数据库获得各蛋白之间的相互关系.使用DAVID数据库对瓜蒌祛痰止咳的作用靶点进行GO和KEGG通路富集分析.利用Cytoscape 3.6.0软件构建成分-靶点、蛋白-蛋白相互作用、成分-靶点-通路网络.结果:该研究共从大鼠血浆中鉴定出17个入血原型成分.经网络药理学分析,筛选得到15个与瓜蒌祛痰止咳相关的活性成分,涉及61个潜在作用靶点和23条作用通路.初步预测葫芦素D、葫芦素R、栝楼酯碱3个成分可作为瓜蒌潜在的Q-Marker.结论:该研究为瓜蒌质量标志物的筛选提供参考,同时也为瓜蒌祛痰止咳药效物质基础和作用机制研究提供参考.

目的 探讨栝楼桂枝汤调控干扰素调控因子5(IRF5)信号通路抑制M1型小胶质细胞激活、减轻炎症反应保护受损神经细胞的分子机制.方法 将小胶质细胞(BV2)分为BV2-对照组、BV2-模型组和BV2-低、中、高剂量实验组.BV2-对照组常规培养;BV2-模型组用100 ng·mL-1脂多糖(LPS)刺激BV2细胞建立炎症模型,BV2-低、中、高剂量实验组分别用含50、100、200 μg·mL-1栝楼桂枝汤+100 ng·mL-1 LPS的培养基培养.将神经细胞(HT22)分为HT22-空白组、HT22-模型组、HT22-对照组和HT22-实验组,HT22-空白组常规培养;HT22-模型组进行氧糖剥夺2 h后,更换完全培养基继续培养24 h;HT22-对照组进行氧糖剥夺2 h后,更换含100 ng·mL-1 LPS培养基继续复氧培养24 h;HT22-实验组进行氧糖剥夺2 h后,加入200 Vg·mL-1栝楼桂枝汤条件培养基复氧培养24 h.用酶联免疫吸附试验法检测细胞培养上清液中白细胞介素(IL)-12、IL-23含量,用蛋白质印迹法检测干扰素调控因子5(IRF5)、分化簇16(CD16)和组织相容性复合物Ⅱ(MHC-Ⅱ)的表达情况,用免疫荧光法观察神经突触标志蛋白β微管蛋白(Tuj-1)的表达情况.结果 BV2-对照组、BV2-模型组和BV2-低、中、高剂量实验组的IL-12含量分别为(2.62±1.02)、(10.67±3.22)、(6.87±1.61)、(3.96±1.22)和(3.36±1.04)pg·mL-1,IL-23含量分别为(20.40±2.04)、(77.08±3.25)、(76.28±3.75)、(63.96±4.94)和(54.48±3.34)pg·mL-1,IRF5蛋白相对表达水平分别为0.80±0.41、2.22±0.69、1.11±0.11、0.92±0.39 和 0.65±0.29,CD16 蛋白相对表达水平分别为 0.69±0.45、1.91±0.52、1.42±0.22、1.04±0.15 和0.67±0.30,MHC-Ⅱ 蛋白相对表达水平分别为 0.89±0.27、1.96±0.19、1.34±0.38、1.15±0.19和0.68±0.24.BV2-中、高剂量实验组的上述指标与BV2-模型组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).HT22-空白组、HT22-模型组、HT22-对照组和HT22-实验组的Tuj-1蛋白表达水平分别为 28.85±6.69、14.44±1.98、7.75±1.12 和 20.05±3.54,HT22-实验组与HT22-对照组比较,在统计学上差异有统计学意义(P＜0.05).结论 栝楼桂枝汤可能通过IRF5信号通路减少M1型小胶质细胞激活来抑制炎症反应,从而发挥对受损神经细胞的保护作用.

栝楼(Trichosanthes kirilowii Maxim.)是一种重要的药用植物,具有丰富的药用价值和广泛的应用前景.传统的种植方式存在效率低和品质不稳定等问题,通过组织培养可以成功实现栝楼无菌苗的快速生长和繁殖,通过科学合理的繁殖方法、水肥管理和病虫害防治,可以进一步提高栝楼的产量和品质.现对栝楼组培快繁及高效栽培技术的研究进展进行综述,以期为栝楼的生产提供有效的理论支持,促进栝楼产业的高质量发展.

《神农本草经》记载泽泻:"味甘,寒.主风寒湿痹,乳难,消水,养五脏,益气力,肥健.久服耳目聪明,不饥,延年,轻身,面生光,能行水上."以《神农本草经》中泽泻的主治作用为线索,分析《伤寒杂病论》中泽泻的应用.泽泻主治消水,消心下之水,常与白术配伍,以泽泻汤为代表方;消膀胱之水,常与茯苓、白术、桂枝等药配伍,以五苓散为代表方;消腰下之水,常与牡蛎、栝楼根、葶苈子等药配伍,以牡蛎泽泻散为代表方;消肾脏之水,常与生地黄、山茱萸等药配伍,以肾气丸为代表方;消血中之水,常与当归、芍药等药配伍,以当归芍药散为代表方.泽泻可调养五脏,培补正气,"养五脏,益气力,耳目聪明",常与生地黄、山药等配伍,以肾气丸为代表方;"轻身,面生光,能行水上",常与茯苓、甘草、桂枝等药配伍,以茯苓泽泻汤为代表方.

[目的]通过网络药理学及分子对接的方法,探究瓜蒌皮注射液治疗冠心病的分子机制.[方法]首先通过查阅文献汇总瓜蒌皮注射液中的主要化学成分,通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、SwissADME数据库筛选其活性成分并预测其作用靶点,与在GeneCards数据库、OMIM数据库中获取的冠心病的相关靶点交集获得核心靶点;其次通过String数据库构建靶点蛋白互作网络,转换格式导入Cytoscape3.7.2 软件构建蛋白互作网络和"相关活性成分-潜在作用靶点"网络并分析关键靶点蛋白与活性成分;然后通过Metascape数据库对靶点基因进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;最后通过AutoDock Vina软件将活性成分与核心靶点进行分子对接来对网络药理学预测的准确性进行虚拟验证.[结果]研究获得瓜蒌皮注射液治疗冠心病的可能相关活性成分10 个,核心靶点 7 个.瓜蒌皮注射液的活性成分可能通过调控蛋白激酶B抗体(AKT1)、表皮生长因子受体(EGFR)、非受体酪氨酸激酶(SRC)、热休克蛋白 90AA1(HSP90AA1)、半胱氨酸蛋白酶 3(CASP3)、雌激素受体 1(ESR1)、纤溶酶原(PLG)等核心靶点及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、白介素(IL)-17、叉头框蛋白O(FoxO)通路等信号通路以达到治疗冠心病的作用,分子对接结果表明活性成分与关键靶点蛋白结合稳定,AKT1与 3,29-二苯甲酰基栝楼仁二醇、木犀草苷和槲皮苷等对接更为稳定.[结论]瓜蒌皮注射液通过多靶点、多途径来干预冠心病,为进一步揭示瓜蒌皮注射液的药理作用机制提供理论基础.

《金匮要略》中的"大气一转"思想强调了气机通畅对人体的重要性.水气病风水表虚证,张仲景用防己黄芪汤调和在表之营卫,使阴阳相得;风水夹热证,用越婢汤宣通肺气,使肺气转;皮水夹热证,用越婢加术汤运转肺气;气虚阳郁证,用防己茯苓汤通阳化气利水.血痹轻证,以针引阳气到达病所,引阳入阴;血痹重证,用黄芪桂枝五物汤温通血脉,通阳行痹.虚劳失精,以桂枝加龙骨牡蛎汤调和在里之阴阳,使阴阳相交;虚劳腰痛,用八味肾气丸使阴阳互生;虚劳风气百疾,用薯蓣丸阴阳俱补.肺气痿弱,用麦门冬汤养阴润肺,兼清虚热,使阴得以制阳;肺痿虚寒,用甘草干姜汤辛甘化阳、培土生金."阳微阴弦"之胸痹,以栝楼薤白白酒汤温通阳气,使阴阳之气复得;心痛轻证,用桂枝生姜枳实汤散逆消痞祛寒;心痛重证,用乌头赤石脂丸收敛浮越之阳气.冲任虚寒之崩漏,用温经汤温补冲任,养血祛瘀调经,使阴阳复得.或治以行脏腑之气,以上或治以温周身之阳,治法虽众,要旨惟一:使阴阳之气相交,气血调和,邪气自祛.

良性前列腺增生症是以尿频、尿急、排尿困难等下尿路症状为典型表现的中老年男性常见病,其病机以三焦气化失常所致水液代谢乏源为本,水饮、痰浊等病理产物郁滞于膀胱为标.三焦气化与肺、脾、肾三脏密切相关:若肺气不宣,则上焦郁闭,小便不通;若脾气不健,则中焦失化,小便不利;若肾精不充,则下焦水停,小便不畅.故可从恢复三焦气化入手分而治之:上焦郁闭则应宣发肺气,启闭以开上焦,可用五苓散加减;中焦郁闭则应健运脾气,转枢以通中焦,可用栝楼瞿麦丸加减;下焦郁闭则应充益肾气,蒸化以利下焦,可用八味肾气丸加减.附验案1则以佐证.

目的 分析不同来源栝楼Trichosanthes资源群体的遗传结构和自然亚群间基因漂移分析以及资源的遗传多样性,为栝楼育种奠定基础.方法 从100对相关序列扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)引物中筛选出扩增效果好、稳定性高的43对引物对13个来源于3个自然亚群的栝楼资源进行扩增,进行不同亚群间和品种之间的遗传结构和多样性分析.结果 共扩增出691个位点,其中多态性位点百分率达到79.16％,整个群体的多态性信息含量(polymorphic information content,PIC)、观察等位基因数(observing the number of alleles,Na)、有效等位基因数(effective number of alleles,Ne)、香农信息指数(Shannon information index,I)和遗传距离(genetic distance,H)依次为 0.495 5、1.791 6、1.374 6、0.359 4和0.2316,3个自然亚群中其他野生类群的遗传丰富度最高,潜山和合肥自然亚群之间的遗传相似度高,达到0.922 9.亲缘关系类群体间的群间分化系数(intergroup differentiation coefficient,Fst)平均为0.265 6,类群间基因流(gene flow,Nm)平均为1.382 6,遗传分化系数较大,不同自然亚群间具有一定的基因交流,但不同位点基因交换的差异很大.13个品种资源被分成2个亚群,2个长萼栝楼地方品种单独组成一个亚群,其他11个双边栝楼资源被聚为另一个亚类,2个亚群遗传相似性系数仅为60.94％,福建野生型与安徽育成品种相似性较低,四川野生型相似性较高,说明四川野生型已被大量应用于安徽栝楼育种.结论 栝楼种质资源之间有较大的遗传相似性,不同自然亚群的栝楼种质资源之间有一定的基因交流.

研究罗汉果(Siraitia grosvenorii)水提果渣的化学成分及其体外抗炎活性.采用多种色谱方法对罗汉果果渣化学成分进行系统的分离纯化,得到了 26个化合物,并结合MS、NMR等波谱学手段对其进行结构鉴定,分别为齐墩果酸28-Oβ-D-吡喃葡萄糖苷(1)、齐墩果酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷-6'-乙酯(2)、(3α)-3,29-dihydroxy-7-oxomul-tiflor-8-ene-3,29-diyl dibenzoate(3)、3,29-二苯甲酰基栝楼仁二醇(4)、isomultiflorenol(5)、curcasinlignan B(6)、uroli-gnoside(7)、diospyrosin(8)、楝叶吴萸素B(9)、4'-羟基苯基乙基香草酸酯(10)、橙黄胡椒酰胺乙酸酯(11)、山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(12)、山柰苷(13)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷(14)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷-7-O-β-D-木糖苷(1-2)-O-α-L-鼠李糖苷(15)、sagittatin A(16)、葫芦烷-5,24-二烯-3β-醇(17)、balsaminol E(18)、大豆脑苷I(19)、β-谷甾醇(20)、β-胡萝卜苷(21)、胆甾-5-烯-3β,7α-二醇(22)、2E-4-羟基-壬烯酸(23)、香兰素(24)、对羟基苯乙醇(25)、β-hydroxypropiovanillone(26).化合物2、6～11为首次在葫芦科植物中分离得到,化合物1、3、4、14～16、18、19、22～26为首次从罗汉果属植物中分离得到.初步研究了化合物1～26的体外抗炎活性,化合物4、5、7、13、19和21能抑制TNF-α生成,化合物13和21能同时抑制IL-1β、IL-6的生成,化合物7、19、22能抑制IL-1β的生成,化合物5能抑制IL-6的生成.

目的 建立小儿消积止咳口服液(XXZOL)多指标成分分析方法及其HPLC指纹图谱,为提高其质量标准提供方法和技术支持.方法 采用Agilent Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5.0μrn)色谱柱,乙腈-0.4％冰醋酸水溶液流动相体系,进行梯度洗脱,体积流量为0.6 mL/min,柱温25℃,检测波长254 nm;利用HPLC-ESI-Q-TOF/MS技术分析鉴别XXZOL中的成分,采用HPLC-DAD法对10种成分(峰1-辛弗林、峰13-绿原酸、峰16-槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、峰22-金丝桃苷、峰24-连翘酯苷A、峰26-柚皮苷、峰27-橙皮苷、峰29-新橙皮苷、峰33-连翘苷、峰37-3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇)进行定量测定,在多批次样品分析的基础上建立其HPLC指纹图谱.结果 建立了10批样品的指纹图谱,10批样品的相似度分别为0.999 3、0.999 6、0.999 2、0.999 2、0.9994、0.999 3、0.999 4、0.999 5、0.999 1、0.999 7,相似度均在0.9以上.XXZOL共有峰38个,确定了32个已知成分,另外有6个未知成分;10个成分量分别为2 542.42、158.61、147.02,34.35、432.42、1 813.01、1 339.70、2 580.71、175.32、1 615.17 μ.g/mL.结论 建立的XXZOL HPLC多指标成分分析及其指纹图谱,为提高其质量标准提供了科学依据.