目的:分析甘肃省肃北、肃南县喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地内气象因素对鼠疫流行的影响。方法:收集1973 - 2016年肃北、肃南2个县喜马拉雅旱獭疫源地鼠疫监测资料（来源于甘肃省疾病预防控制中心）和当年及领先1、2、3年（相对于当年作为参照的前1、2、3个年份）的气象因素（年均降雨量、气温、相对湿度）资料（来源于中国气象数据共享服务网）。采用R2.3.2软件，以年鼠疫检菌阳性率为因变量，气象因素为自变量建立时间序列半参数广义相加模型（generalized additive model，GAM），采用非线性效应关系定量研究气象因素对鼠疫的影响。结果:2006 - 2016年与1974 - 1983年相比，年均气温、相对湿度、降雨量的平均值肃北县分别上升了0.99 ℃、3.55%RH、12.16 mm；肃南县分别上升了1.00 ℃、2.01%RH、14.60 mm。1973 - 2016年共发生11起人间鼠疫，发病12例，死亡7例。肃北县鼠疫疫源地内领先3年年均降雨量在一定范围内每升高1.00 mm，动物鼠疫发生增加0.40%；领先2年年均相对湿度在一定范围内每升高1.00%RH，动物鼠疫发生增加11.66%。肃南县鼠疫疫源地内领先1年年均降雨量在一定范围内每升高1.00 mm，动物鼠疫发生增加1.32%；领先3年年均相对湿度在一定范围内每升高1.00%RH，动物鼠疫发生增加11.96%。另外，肃北、肃南县领先2年年均气温在一定范围内每升高1.00 ℃，动物鼠疫发生分别增加73.17%、70.18%。结论:甘肃省肃北、肃南县鼠疫的发生流行与气象因素关系密切，一定范围内的年均气温上升对鼠疫的流行不仅有明显的促进作用，而且存在滞后效应。另外，同一疫源地内不同类型气候对动物鼠疫流行的影响存在一定差异。

目的:观察青海省青藏高原喜马拉雅旱獭分离的布鲁氏菌的多位点可变数目串联重复序列分析（multiple locus variable-number tandem repeat analysis，MLVA）分型，探讨其与既往青海省布鲁氏菌分离菌株间的亲缘关系。方法:2019年3月至2020年10月，采集青海省青藏高原喜马拉雅旱獭全血样本，对虎红平板凝集试验（rose bengal test，RBT）布鲁氏菌抗体阳性样本进行病原体分离培养，采用传统生物学方法和分子生物学方法（BCSP31-PCR和AMOS-PCR方法）进行菌株鉴定。同时，应用MLVA方法对分离菌株进行基因分型，并结合既往青海省不同宿主分离的70株布鲁氏菌的基因型，应用聚类分析方法探讨菌株间的亲缘关系。结果:共采集青藏高原喜马拉雅旱獭全血样本1 466份，从其中64份RBT阳性样本中分离培养出2株布鲁氏菌，分别命名为QH2013054、QH2013062，经传统生物学和分子生物学方法鉴定为羊种布鲁氏菌生物Ⅲ型。MLVA分型结果显示，QH2013054与QH2013062菌株在Bru16位点有差异，为不同的MLVA基因型。聚类分析结果显示，QH2013054菌株与7株菌株具有相同的MLVA基因型，其中6株来自共和县同一个家庭的3名农民和3只羊，1株来自门源回族自治县农民；QH2013062菌株与4株菌株具有相同的MLVA基因型，其中3株来自门源回族自治县的3名农民，1株来自互助土族自治县农民。结论:从青海省青藏高原喜马拉雅旱獭中分离的布鲁氏菌与在本省人、羊中分离的部分布鲁氏菌具有相同的MLVA基因型，推测宿主人、羊、青藏高原喜马拉雅旱獭可能具有共同的传染源。

目的:探讨基于单核苷酸多态性（SNP）的甘肃省鼠疫耶尔森菌（简称鼠疫菌）的基因分型及其地区分布特征。方法:选取1962 - 2017年甘肃省喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地和阿拉善黄鼠鼠疫疫源地分离的52株鼠疫菌，培养并提取基因组DNA，进行Illumina PE150二代测序，鉴定鼠疫菌SNP位点。基于SNP位点，采用Mega 10.0软件中邻接法的Kimura-2-parameter模型确定甘肃省鼠疫菌种群特征，并对群内菌株采用最大似然法的Hasegawa-Kishino-Yano模型构建分子进化树。结果:甘肃省52株鼠疫菌共鉴定出103个SNP位点，其中，基因间区位点28个，非同义突变位点43个，同义突变位点31个，无义突变位点1个。52株鼠疫菌划分为2个生物型3个群，分别为古典型（1.IN2、3.ANT），中世纪型（2.MED）。其中，35株属于1.IN2群，13株属于3.ANT群，4株属于2.MED群。1.IN2群内菌株进一步划分为肃北县鱼儿红乡、党城湾镇，肃南县马蹄乡、大河乡，夏河县5个亚群。3.ANT群内菌株进一步划分为阿克塞县红柳湾镇和肃北县党城湾镇马场2个亚群。结论:SNP方法能够对甘肃省不同鼠疫疫源地的鼠疫菌进行基因分型，且具有一定的区域性特征。

目的:分析呼伦贝尔高原蒙古旱獭鼠疫自然疫源地鼠疫监测结果，掌握该疫源地鼠疫疫情的发展和变化特点。方法:2009 - 2020年，每年5 - 9月在满洲里市、陈巴尔虎旗、新巴尔虎左旗、新巴尔虎右旗开展监测，采用一日弓形夹法调查达乌尔黄鼠密度，5 m夹线法调查其他小型啮齿类动物；对达乌尔黄鼠体外寄生蚤，于低倍光镜下进行分类鉴定，对获取的鼠、蚤可检材料，按照《鼠疫诊断标准》（WS 279-2008），进行鼠疫耶尔森菌（鼠疫菌）分离培养；采集捕获的活鼠血清，采用间接血凝试验进行鼠疫抗体检测。结果:2009 - 2020年，呼伦贝尔高原蒙古旱獭鼠疫自然疫源地达乌尔黄鼠平均密度为0.45只/hm 2；其他小型啮齿类动物捕获率为1.25%（787/63 091），共获鼠类4科8属9种；达乌尔黄鼠总染蚤率为28.37%（1 945/6 856），蚤指数为1.04，共获蚤类2科3属3种；共剖检达乌尔黄鼠6 674只，培养各种蚤类2 537组6 787只，鼠疫菌检测结果均为阴性；共检测达乌尔黄鼠血清6 795份，检出阳性血清11份，阳性检出率为0.16%，阳性血清最高滴度为1∶1 280。2010 - 2014年连续5年均发现间接血凝试验阳性血清，且均分布在满洲里市、新巴尔虎右旗。 结论:呼伦贝尔高原蒙古旱獭鼠疫自然疫源地多个年度检出达乌尔黄鼠鼠疫菌抗体阳性血清，值得高度警惕，今后应持续开展监测工作，加强检菌工作，以及时发现可能存在的鼠疫疫情，做好各项鼠疫防控工作。

目的 克隆中国旱獭Ⅰ型干扰素受体β亚基(mhIFNAR2)的基因,并进行抗体制备及功能鉴定.方法 应用RT-PCR技术,从中国旱獭脾组织中扩增得到序列,克隆至原核表达载体pRSET-B,表达重组蛋白,电泳和Western Blot法鉴定;重组蛋白常规免疫BALB/c小鼠制备其胞外段多克隆抗体,免疫组化、免疫荧光和Western Blot法鉴定;再通过siRNA阻断的方法检测其功能.计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.结果 从mhIFNAR2扩增出149～1 300 bp片段,其同源性在分析的种属中以土拨鼠最高,可达98.05%.成功地构建了表达胞外段mhIFNAR2(50-181aa)蛋白的原核表达质粒,命名为pRSET-B.mhIFNAR2;其表达重组蛋白分子量27 kD,纯化后纯度约为95%,浓度约为160 μg/mL.用纯化的重组蛋白常规免疫BALB/c小鼠后,获得1∶1 000的特异性多克隆抗体,用免疫组化及免疫荧光可见细胞膜、细胞质有表达.合成的三条siRNA,其中有一条起始于277位点的siRNA(siRNA277)与空白对照及阴性对照相比,可以沉默目的基因的表达,并能减弱干扰素的信号通路(P值均<0.05).结论 获得mhIFNAR2的部分序列,成功地制备出抗mhIFNAR2胞外段多克隆抗体,该抗体有较高的效价和特异性,并能用于免疫组化、免疫荧光及Western Blot的检测.用siRNA277可以抑制目的基因的表达,并能阻断干扰素的信号通路.

目的 了解喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地与南方家鼠鼠疫疫源地鼠疫菌表型及其遗传特征,为掌握两块鼠疫疫源地鼠疫菌病原学特征提供参考依据.方法 选取我国喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地和南方家鼠鼠疫疫源地内分离的412株鼠疫菌,对其进行糖醇酵解实验、毒力因子鉴定、DFR分型和CRISPR分型研究.结果 两块鼠疫疫源地鼠疫菌生化型呈明显的地区性分布特征,喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地鼠疫菌被分为5个生化型;南方家鼠鼠疫疫源地鼠疫菌生化特性较为稳定,只有1个生化型.两块疫源地分离的鼠疫菌绝大多数能产生毒力因子Fl和PstI,其中喜马拉雅旱獭疫源地 70.53％(201/285)菌株为 VW 阳性,Pgm 阳性菌株占 75.09％(214/285),Pgm 阴性菌株占 20.00％(57/285),Pgm 混合型菌株占5.26％(15/285);南方家鼠鼠疫疫源地37.80％(48/127)菌株为VW阳性,Pgm阳性菌株占29.13％(37/127),Pgm阴性菌株占58.27％(74/127),Pgm混合型菌株占12.60％(16/127).DFR分型发现喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地鼠疫菌包括22种基因型,其主要基因型为5、7、8、10、19、32、49型;家鼠鼠疫疫源地鼠疫菌DFR基因分型相同,均属于9型.CRISPR分型发现,喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地所有菌株分为7个CRISPR基因簇14个CRISPR基因型,主要基因型为G7、G22、G26-a1'、G22-a1';家鼠鼠疫疫源地鼠疫菌CRISPR基因型均为G30型,其基因簇为Ca8.结论 喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地鼠疫菌表型和基因型多样,地理分布特征明显;南方家鼠鼠疫疫源地鼠疫菌表型和基因型单一,因此采用DFR、CRISPR基因分型方法结合表型特征可有效地鉴别两块疫源地鼠疫菌和满足鉴定溯源研究的需求.

目的 掌握昌吉地区啮齿类动物种类组成、区系分布及其宿主作用.方法 采用鼠夹、鼠笼、挖洞和人工捕获,种类鉴定、文献分析相结合的方法.结果 昌吉地区啮齿类动物现已知8科25属35种;2市5县均有分布,动物地理区别均属西部荒漠区、天山山地亚区;其中灰旱獭为昌吉市、玛纳斯县、呼图壁县山区鼠疫自然疫源地的主要储存宿主;同时也是森林脑炎病毒的保菌宿主.结论 种类和区系分布调查为昌吉地区自然疫源性疾病的预防控制提供了科学依据.

青海高原位于中国西北部内陆腹地,1954年,长春鼠疫防治所和西北、青海防疫队联合调查首次发现并证实了喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地,同时对传播鼠疫的蚤类进行了广泛而持久的调查与监测.1 青海高原蚤类的研究1.1 青海高原蚤类区系组成及分析 目前,全世界已发现蚤类2 500余种和亚种,分别隶属于5总科16科238属,我国已发现的蚤类为4总科10科75属655种和亚种,青海地区已知蚤类170种和亚种,隶4总科8科43属,约占我国已知蚤类种数的四分之一,是我国蚤类种数最多的省、区之一.

目的 根据2006-2017年格尔木市西大滩地区鼠疫自然疫源地内各种宿主动物及媒介的监测情况,探讨西大滩地区的动物鼠疫流行趋势,为该地区鼠疫发生的预测、预警提供依据.方法 根据《全国鼠疫监测方案》,对格尔木市鼠疫自然疫源地的宿主动物及媒介昆虫进行采集和监测,应用Excel 2010、SAS 9.4等分析软件对相关数据进行统计分析.结果 2006-2017年共捕获各类啮齿动物2目5科5属6种,共2 937只,其中旱獭882只,平均密度0.04只/ha;未投药年份与投药年份旱獭密度差异有统计学意义(Z=-1.548 2,P=0.068＜0.01);媒介昆虫2目4科6属6种,共264只;病原学检测2 950份,结果全部为阴性;血清学检测1567份,阳性7份,其中牧羊犬血清6份,占85.7％,旱獭血清1份,占14.3％.结论 格尔木市西大滩地区保护性投药能够有效地控制旱獭密度;该地区非宿主动物的阳性血清比例占主要部分,提示在今后的鼠疫监测中应高度重视指示动物的监测工作.

目的 对四川省新龙县分离的鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)开展差异区段(DFR)分型研究,为鼠疫研究提供科学依据.方法 选取新龙县和其他5个鼠疫县分离的鼠疫菌16株,按鼠疫菌DFR分型方法,使用23个DFR和pMT1的扩增引物,对被试菌株DNA进行PCR扩增,采用BioNumerics 6.6软件进行分型,确定新龙县鼠疫菌DFR基因型.结果 石渠县鼠疫菌菌株聚为第1类,为Genomovar14型;新龙县鼠疫菌DFR基因型与德格、巴塘、理塘、雅江县相同,聚为第2类,均为Genomovar05型.结论 新龙县分离到的鼠疫菌基因型为Genomovar05型,新龙县鼠疫自然疫源地属于青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地的一部分.