目的:探索基于显微注射方法构建胶质母细胞瘤(GBM)融合大脑类器官模型的可行性，观察该模型肿瘤组织对替莫唑胺(TMZ)的敏感性。方法:GBM组织和脑肿瘤旁组织标本(定义为正常脑组织)来源于中南大学湘雅医院神经外科行手术治疗的患者。采用绿色荧光蛋白(GFP)标记过的人诱导多能干细胞株(hiPSCs)培养24 d构建大脑类器官模型，通过免疫荧光染色方法检测蛋白标志物的表达，评估模型是否成功建立。采用显微注射方法将用红色荧光染料标记过的患者来源的GBM单细胞或U-251 MG细胞株注射到培养约30 d的大脑类器官中，构建GBM融合大脑类器官模型。采用免疫荧光染色法、HE染色等方法观察GBM细胞在大脑类器官中的增殖及浸润情况。采用免疫荧光染色法检测GBM融合大脑类器官中肿瘤细胞基质金属蛋白酶类(MMPs)及BrdU的表达情况，采用HE染色观察形态及结构变化。将10 μmol/L TMZ加入GBM融合大脑类器官模型及GBM肿瘤类组织中培养48 h，采用免疫荧光染色法检测两种模型中Caspase-3的表达。结果:(1)hiPSCs培养至第24天，形成具有明确芽和分层边缘的块状组织样结构；免疫荧光染色显示，该结构阳性表达前脑、脑室样结构、前额叶皮质及海马的标志蛋白FOXG1、N-cadherin、Auts2及Frizzled 9，以及星形胶质细胞标志蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元标志蛋白TUJ1。(2)荧光显微镜下及HE染色均显示肿瘤细胞在大脑类器官内快速增殖，呈浸润性生长。免疫荧光检测显示，与大脑类器官比较，GBM融合大脑类器官的肿瘤细胞中，MMP2和MMP13的表达明显增加，Fibronectin、MMP3及MMP9的表达明显减弱，差异均有统计学意义(均 P<0.05)，MMP10的表达差异无统计学意义( P>0.05)；GFAP和BrdU的表达水平均增高(均 P<0.05)。(3)TMZ处理48 h后，免疫荧光染色显示，GBM类肿瘤组织中Caspase-3的表达明显高于GBM融合大脑类器官。 结论:采用显微注射方法能够成功构建GBM融合大脑类器官模型。该模型中的肿瘤组织对TMZ的敏感性低于GBM肿瘤类组织。

目的:观察糖尿病视网膜病变（DR）患者血浆外泌体、微囊泡（MV）、血浆和玻璃体中炎症相关蛋白S100A8的表达，并于糖尿病大鼠模型中进行验证，初步探讨其在DR发生和发展中的作用。方法:病例对照研究和基础研究。2018年9月至2019年12月于天津医科大学眼科医院就诊的2型糖尿病患者、住院行玻璃体切割手术患者以及同期健康体检者共计73名纳入研究。其中，采集血浆32名，收集玻璃体液41名，并据此分为血浆样本研究队列和玻璃体样本研究队列。将受试者分为未发生眼底改变的单纯糖尿病组（DM组）、非增生型DR组（NPDR组）和增生型DR组（PDR组）；健康体检者作为正常对照组（NC组）。玻璃体样本研究队列中对照组为黄斑前膜或黄斑裂孔患者玻璃体液。超速离心法分离血浆外泌体和MV。采用透射电子显微镜、纳米粒度分析仪、蛋白质免疫印迹法（Western blot）鉴定外泌体和MV。采用酶联免疫吸附试验法测定S100A8质量浓度。18只健康雄性Brown Norway大鼠经随机数字表法分为正常对照组和糖尿病组，每只9只。糖尿病组大鼠经链脲佐菌素诱导建立糖尿病模型。建模后5个月采用免疫组织化学染色、Western blot检测正常对照组、糖尿病组大鼠视网膜S100A8的表达情况。两组间计量数据比较采用 t检验；多组计量数据比较采用单因素方差分析。 结果:血浆中成功分离得到具有各自特征的外泌体和MV。PDR组患者血浆外泌体和玻璃体S100A8浓度均高于NPDR组、DM组、NC组，差异有统计学意义（ P=0.039、0.020、0.002、0.002， P<0.000、<0.000 ）。血浆样本队列研究4个组受试者血浆、血浆MV的S100A8质量浓度总体比较，差异无统计学意义（ F=0.283、0.015 ， P=0.836、0.996 ）。免疫组织化学染色结果显示，糖尿病组大鼠视网膜神经节细胞、双极细胞、视锥视杆细胞和血管内皮细胞均表达S100A8蛋白。与正常对照组大鼠比较，糖尿病组大鼠视网膜组织中S100A8表达水平升高，差异有统计学意义（ t=8.028， P=0.001 ）。 结论:循环外泌体中S100A8蛋白水平随2型糖尿病患者DR严重程度明显增高。S100A8可能是DR炎症环境的影响因素，是潜在的抗炎治疗靶点。

目的:探讨听神经瘤手术患者面神经功能预后的影响因素并构建预测模型。方法:回顾性分析2018年6月至2020年3月于中南大学湘雅医院神经外科行经乙状窦后入路手术的129例听神经瘤患者的临床资料。采用House-Brackmann(H-B)评分系统评估患者术前、术后即刻和术后6个月的面神经功能，采用logistic回归分析探讨术后即刻和6个月的面神经功能预后的影响因素，并构建术后面神经功能预后的数学预测模型。结果:多因素logistic回归分析结果表明，肿瘤的大小、术前面神经功能分级、TFIAC分级、年龄以及有无后组脑神经相关症状与术后即刻面神经功能的恢复程度可能有关(均 P<0.10)；纳入上述影响因素建立术后即刻面神经功能的预测模型，其训练集和测试集的受试者工作特征曲线的曲线下面积分别为0.830、0.713，预测精度分别为77%、71%。纳入影响术后6个月面神经功能恢复程度的logistic回归分析结果中有统计学意义( P<0.05)的因素(包括年龄、肿瘤的大小、术前面神经功能分级、有无小脑或后组脑神经相关症状)以及Samii分级，建立术后6个月的面神经功能预后预测模型，其训练集和测试集的受试者工作特征曲线的曲线下面积分别为0.861、0.894，预测精度分别为77%、78%。 结论:基于多因素logistic回归分析结果建立的听神经瘤经乙状窦后入路手术后即刻和6个月面神经功能预测模型有较高的预测精度，对临床个体化制定治疗方案具有一定的指导意义。

目的:探讨采用 趾或第2足趾末节急诊游离移植再造拇、手指末节缺损的临床效果。 方法:自2015年8月至2020年7月我院诊治拇、手指末节缺损患者11例11指，根据患者拇、手指末节缺损部位、面积设计 趾或第2足趾末节游离移植修饰性末节再造。患者均采用趾固有动脉-指固有动脉、趾背静脉-指背静脉、趾腹静脉-指腹静脉吻合重建血液循环，趾固有神经-指固有神经缝合修复感觉。 结果:末节再造11指均存活。其中1指术后12 h出现静脉危象，予伤口拆线、局部应用罂粟碱后好转。术后随访6个月至2年，再造末节外观美观，指腹两点分辨觉为4~6mm，再造指末节功能满意。足趾供区对行走功能无影响。结论:采用 趾或第2足趾趾尖游离移植再造拇、手指末节缺损是一种较为理想的方法。

目的:总结枕下乙状窦后入路手术切除前庭神经鞘瘤的术后短期和长期面神经功能情况及面神经保护经验，并分析其影响因素。方法:收集2013年1月至2018年2月在复旦大学附属华山医院由颅底外科小组行显微镜下枕下乙状窦后入路手术的前庭神经鞘瘤患者的临床资料，共纳入308例，其中男性132例、女性176例，年龄17~79岁，平均年龄47.9岁。记录患者临床表现、影像学表现、术中所见及术后面神经功能随访结果。使用SPSS 23.0统计软件，对短期及长期面神经功能及影响其恢复的变量进行单因素和多因素分析。结果:304例肿瘤完全切除，4例近全切除；306例面神经解剖保留，2例面神经离断，术中均予行神经吻合一期重建。300例成功随访，8例失访。随访时间1~60个月（平均52.0个月）。术后2周内面神经功能良好［House-Brackmann（HB）分级Ⅰ~Ⅱ级］96例，功能不良（HB分级Ⅲ~Ⅵ级）212例；术后1年随访共295例，其中198例面神经功能良好，97例功能不良；术后3年随访共294例，其中面神经功能良好者219例，功能不良75例；随访到术后5年者共189例，其中面神经功能良好者155例，功能不良者34例。逻辑回归分析显示，影响术后短期面神经功能的相关因素有肿瘤直径（ P=0.011）和术末面神经刺激阈值（ P<0.001）；影响术后长期面神经功能的相关因素包括肿瘤直径（ P=0.005）、术末面神经刺激阈值（ P=0.005）及面神经康复训练等。 结论:肿瘤直径是与术后面神经功能相关的独立因素，肿瘤越大术后面神经功能更差；术中电生理监测的肌电图微小电流刺激（刺激阈值≤0.05 mA）可以预测短期和长期的面神经功能预后；系统的面部康复训练能有效促进手术后面神经功能的恢复。

骨窗技术是指在病变表面完整的骨板上进行切割以形成骨窗和游离骨块，从而获得手术入路，并在手术最后阶段将脱位的骨块重新放置到原位的手术方法。在显微根尖手术中应用此技术有改善手术视野和可操作性、减少术后骨缺损、促进病变区域骨愈合、维持颌骨轮廓完整性等优势。在手术过程中，准确定位和制备骨窗是进行后续操作的重要前提，但在术区位置靠后或病变表面骨皮质厚而完整等情况下完成此步骤较困难，同时游离骨块复位后能否稳定在原位也与手术预后密切相关，数字化导航技术和骨腔填塞材料的辅助应用可能有助于改进骨窗技术，为疑难病例患牙的保留提供更多可能。

目的:探讨应用可降解高纯度镁金属螺钉固定旋股外侧动脉横支大转子骨瓣治疗中青年股骨头缺血性坏死的疗效。方法:2017年2月-2019年2月，大连大学附属中山医院骨科共收治12例（15髋）股骨头缺血性坏死患者，年龄30~53岁，按国际骨循环研究协会（ARCO）制订的股骨头坏死分期为Ⅱ b 2髋,Ⅱ c 4髋,Ⅲ a 1髋,Ⅲ b 5髋,Ⅲ c 2髋,Ⅳ 1髋。选取旋股外侧动脉横支大转子骨瓣对坏死区域进行填充，应用可降解高纯度镁金属螺钉对移植骨瓣进行固定。术后3、6、12个月定期来院门诊复诊随访，之后每年复诊一次，对比患者术前及术后影像学评价影像学疗效，术后12和24个月时进行Harris评分及疼痛视觉模拟（VAS）评分。术前、术后评分采用Friedman检验进行比较， P<0.05为差异有统计学意义。 结果:12例（15髋）患者随访时间24~36个月。术后12个月及24个月Harris评分分别为87（86,92）分和90（87,92）分，均较术前[59（52,74）分]显著升高，差异有统计学意义（分别为 Z=-3.743, Z=-4.473, P<0.05）；术后12个月与24个月Harris评分比较差异无统计学意义（ Z=-0.730, P>0.05）。术后12个月及24个月VAS评分为3(2,3)分及2（1,3）分，均较术前[6（5,6）分]显著降低，差异有统计学意义（分别 Z=-3.560, Z=-4.656， P<0.05）；术后12个月与术后24个月VAS评分比较差异无统计学意义（ Z=-1.095, P>0.05）。X线和CT检查示骨瓣愈合良好，完成了对骨坏死区域的修复,13髋股骨头外形良好,2髋出现进一步塌陷。末次随访时无患者行关节置换手术。 结论:应用可降解高纯度镁金属螺钉固定旋股外侧动脉橫支大转子骨瓣，可保证骨瓣在植入部位的愈合，避免骨瓣移位及脱落。该方法为中青年股骨头缺血性坏死保头治疗的一种新的治疗选择。

目的:探讨保留足趾的自体复合第2足趾关节移植治疗手指关节炎的临床疗效。方法:2016年2月至2018年6月，共收治创伤性手指关节炎9例，其中男7例，女2例；年龄19~ 53岁，平均31.7岁；示指3例，中指6例；掌指关节（MP）关节炎4例，近侧指骨间关节（PIP）关节炎5例；均为创伤后继发的手指关节炎。采用游离带血供的自体复合第2足趾跖趾或趾骨间关节移植进行治疗，同时将受区废弃关节（7例）或切取自体髂骨移植（2例）修复供区骨缺损保留足趾长度，供区创面均直接关闭。术后观察手指和足趾骨折愈合情况、外形、移植关节活动度（ROM）、术后供区愈合情况和行走功能及相关并发症。结果:本组术后9例移植关节全部成活，1例足部供区行髂骨植骨微型钢板固定，术后1周伤口不愈合，考虑为内固定物排异反应，予拆除钢板改克氏针交叉固定，2周后创口顺利愈合。术后随访6~ 30个月，平均16.3个月。手指骨折平均愈合时间7~ 10周，平均8.3周，手指外观及功能良好。移植后的MP活动度为50°～75°，平均65.3°,PIP活动度为10°～85°，平均60.6°。根据中华医学会手外科学分会上肢部分功能评定试用标准评价手指功能：优5例，良3例，可1例，优良率为88.9%。足趾骨折平均愈合时间9~ 12周，平均10.2周，所有患者足趾外形良好，行走功能正常。2例取髂骨患者供区仅残留一条线形瘢痕，无疼痛、麻木等不适。结论:游离带血供的自体复合第2足趾关节移植治疗手指关节炎，同时应用受区废弃关节或切取自体髂骨移植修复供区骨缺损保留足趾，不仅能恢复手指关节的正常结构，使关节具有良好的功能，而且能保留足趾外形与功能，减少供区损伤，具有良好的治疗效果。

目的:回顾高压注射伤的临床治疗经过，分析总结诊治经验，为优化高压注射伤诊治提供依据。方法:自2018年1月至2020年10月，我院共收治高压注射伤患者13例。统计患者一般资料、手术方案及药物治疗方案。术后随访依据英国医学研究院神经外伤学会(MCRR)的感觉神经功能检查与评定标准评价感觉恢复情况，依据手指总活动度评价法评价运动恢复情况。结果:术后所有患者均获得随访，时间为3~12个月，平均4.2个月。感觉功能评价结果：S 2 2例，S 3 2例，S 3+ 5例，S 4 4例；运动功能评价结果：优8例，良5例。 结论:高压注射伤是一种严重的手部创伤，受伤后多遗留感觉及运动障碍。治疗效果与注射物的性质及剂量、手术清创的时机及策略、抗感染方案等多种因素有关，需制定个体化治疗策略。

目的:应用超声生物显微镜(UBM)技术探索大鼠颈动脉球囊损伤模型的血管重构特征，通过超声与病理特征对照，探讨UBM检测颈动脉损伤动物模型的应用价值。方法:采用Fogarty(2F)球囊导管对22只10周龄SD大鼠(雄性、雌性各11只)建立颈动脉球囊损伤模型，左侧颈总动脉(common carotid artery，CCA)为损伤侧，右侧为对照侧。在损伤术前和术后7 d、14 d，对大鼠双侧CCA进行观察，UBM测量CCA内中膜厚度、内径、外径、管腔面积、血管面积，测量CCA收缩期峰值流速、舒张末期流速，计算血管阻力指数、剪切力等血流动力学参数。术后14 d处死动物取双侧CCA，横断面HE染色获取病理结构学数据。比较不同时间点大鼠颈动脉结构及血流动力学差异，比较损伤侧与对照侧动脉结构学差异。以Spearman相关分析与线性回归分析检验术后14 d超声与病理测值的相关性。结果:①与术前相比，手术后14 d超声显示大鼠颈动脉内中膜厚度明显增加，内径变细，血管内剪切力增加(均 P<0.05)。HE染色显示，雄性大鼠的内中膜厚度、新生内膜面积大于雌性大鼠(均 P<0.001)。②大鼠颈动脉球囊损伤术后，管腔面积减小，但CCA均发生了代偿性的正性重构，血管面积增大。③大鼠CCA内中膜厚度、内径、外径、血管面积的超声测值与病理测值相关性良好( rs＝0.819、0.965、0.896、0.955，均 P<0.001)，但血管面积的超声测值显著大于病理测值，差异有统计学意义( P＝0.006)。 结论:UBM成像能清晰显示雄性与雌性大鼠CCA，并准确测量血管结构学数据，与病理相关性好；同时可测量血管血流动力学参数，为动脉损伤后血管重构的研究奠定了方法学基础。