目的:探讨低强度聚集超声(LIFU)对小鼠神经病理性疼痛(NP)的疗效，以及对星形胶质细胞活化和促炎细胞因子表达的影响。方法:选择36只雄性C57BL/6J小鼠，并按随机数字的方法分为假手术(Sham)组、模型(CCI)组和治疗(CCI+LIFU)组，各组12只。采用坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)的方法建立NP模型。CCI+LIFU组于术后第7 d给予前扣带回皮层(ACC)LIFU治疗，分别于术前和术后3，6，12，18，24，27 d测量各组小鼠患侧机械性缩爪反射阈值(MWT)，采用HE染色观察ACC脑区的病理形态学变化，采用Western Blot和免疫荧光检测ACC脑区水通道蛋白4 (AQP4)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达水平，采用酶联免疫吸附测定法检测ACC脑区促炎细胞因子IL-1β和TNF-α表达水平。结果:与Sham组相比，CCI组小鼠于术后第3 d机械痛阈出现降低且维持到术后第27 d(均 P<0.05)；与CCI组相比，CCI+LIFU组小鼠机械痛阈于术后第24 d出现升高，并在术后第24和第27 d显著高于CCI组(均 P<0.05)；LIFU刺激未对ACC脑区产生明显的病理改变；Western Blot和免疫荧光显示周围神经损伤后，ACC脑区AQP4和GFAP表达上调(均 P<0.05)，而经LIFU治疗后ACC脑区AQP4和GFAP表达下调(均 P<0.05)；酶联免疫吸附测定显示周围神经损伤后，ACC脑区促炎细胞因子IL-1β和TNF-α表达量上调(均 P<0.05)，而经LIFU治疗后IL-1β和TNF-α的表达量下调(均 P<0.05)。 结论:LIFU可有效缓解由CCI诱导的小鼠机械性痛敏症状，其机制可能与抑制星形胶质细胞的活化及神经炎症反应相关。

目的:探讨大鼠背根神经节(DRG)持续受压(CCD)后DRG中膜联蛋白A2(ANXA2)的表达及分布规律。方法:成年雄性Wistar大鼠102只按随机数字表法分为对照组(24只)、CCD模型后7 d组(30只)、CCD模型后14 d组(24只)及CCD模型后28 d组(24只)。后3组大鼠采用"U"形棒制备CCD模型。采用机械痛刺激仪和热痛刺激仪测量各组大鼠的机械缩足反射阈值(MWT)和热辐射缩爪反应潜伏期(TWL)。采用Western blotting和免疫荧光染色检测各组大鼠DRG中ANXA2蛋白的表达。采用免疫荧光双标染色检测CCD模型后7 d组大鼠DRG中ANXA2和神经元标志物微管蛋白β3(TUBB3)的表达。结果:与对照组比较，CCD模型后7 d组、CCD模型后14 d组大鼠的MWT与TWL均明显下降，差异均有统计学意义( P<0.05)。Western blotting检测显示，与对照组比较，CCD模型后7 d组大鼠DRG中ANXA2蛋白的表达升高，差异有统计学意义( P<0.05)。免疫荧光染色检测显示CCD模型后7 d组大鼠DRG中ANXA2的免疫反应性较对照组增强。免疫荧光双标染色检测显示CCD模型后7 d组大鼠DRG中ANXA2主要表达于神经元的细胞膜中。 结论:CCD模型大鼠的机械痛阈与热痛阈下降，受压侧DRG内ANXA2蛋白表达上调及免疫反应性增强，ANXA2可能参与CCD后神经病理性疼痛的发生发展。

目的:研究右美托咪定和NLRP3炎性小体在臂丛神经损伤后神经病理性疼痛中的作用。方法:取成年SD大鼠54只，随机分为3组，假手术组(Sham)、臂丛神经损伤疼痛组(NP)、臂丛神经损伤疼痛+右美托咪定注射组(Dex)。建立SD大鼠左侧全臂丛神经根性撕脱大鼠模型。术前及术后3、5、7和14 d检测各组50%机械缩爪阈值和冷缩爪评分。于术后7 d取材，采用RT-PCR检测各组NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平，采用Western blot法和免疫组化检测NLRP3、Caspase-1蛋白表达及分布，采用ELISA法检测IL-1β、IL-18蛋白表达。结果:NP组和Dex组疼痛行为较Sham组明显，NP组较Dex组疼痛行为明显，差异有统计学意义( P<0.05)。术后7 d，与Sham组相比，NP组和Dex组NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA表达量显著增高( P<0.05)；与NP组相比，Dex组NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA表达量显著减少( P<0.05)。蛋白检测结果与mRNA结果一致。 结论:右美托咪定可通过抑制NLRP3炎性小体以缓解臂丛神经损伤后神经病理性疼痛。

目的 探讨小鼠内侧前额叶皮质(mPFC)-丘脑室旁核(PVT)通路的投射神经元的性质及调控该通路对生理痛和急性痛的影响.方法 谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠3只,用于形态学追踪实验,C57小鼠27只,用于行为学观察实验.将霍乱毒素B亚基(CTB)注入GAD67-GFP转基因小鼠的PVT内,观察向PVT投射的mPFC神经元的性质,使用化学遗传学方法调控mPFC-PVT通路,观察其对小鼠机械痛、热痛、冷痛以及辣椒素诱导的急性炎性痛的影响.结果 mPFC内CTB标记神经元主要分布于Ⅴ层和Ⅵ层,且与GAD67-GFP不共标;化学遗传学方法激活mPFC-PVT通路可显著降低小鼠的机械痛阈值(P＜0.0001),缩小热痛潜伏期(P＜0.001),对冷痛无明显的影响;抑制此通路则可显著提高动物的机械性痛阈(P＜0.05);辣椒素诱导急性炎性痛模型下激活此通路引起小鼠舔爪时间增加(P＜0.05).结论 mPFC-PVT通路为非γ-氨基丁酸(GABA)能的神经通路,激活该通路可促进小鼠的机械痛、热痛和急性炎性痛反应.

目的:筛选小鼠腹外侧眶额皮质(vlOFC)参与疼痛调节的生物学标记物.方法:雄性C57BL/6J小鼠于左后足底注射完全弗氏佐剂(CFA)诱导慢性炎性痛.通过测定缩足阈值(PWT)和缩足潜伏期(PWL)检测痛敏变化.行为学测试之后取小鼠vlOFC新鲜组织进行转录组测序.运用生物信息学方法筛选差异表达基因(DEGs),并进行生物学功能和通路富集分析.结果:与PBS组小鼠相比,CFA组小鼠左后足机械痛阈值和热痛导致的缩爪潜伏期均显著降低(P＜0.001).两组小鼠vlOFC的DEGs为497个,其中上调143个,下调354个.基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGGs)分析显示:慢性炎性痛模型小鼠,vlOFC的DEGs主要表现在有机阳离子转运、神经递质转运、胞质钙离子浓度的调节等生物过程;与G蛋白偶联受体(GPCRs)、神经肽相关以及铵转运等分子功能相关;DEGs主要集中于神经活性配体-受体相互作用、细胞因子-细胞因子受体相互作用、cAMP信号通路.Reactome功能富集分析显示,参与富集的DEGs数量最多且校正后P值最低的通路为GPCRs配体结合.结论:vlOFC中的离子转运、神经递质转运与结合、GPCRs相关活动参与了慢性炎性痛的调节.

目的:设计一种无人机自主抓取仿生机械手,以实现无人机在飞行过程中精准抓取物体.方法:该机械手利用红外感应技术抓取物体,由外壳、支撑架、旋转齿轮、中央转轴、中央绕线盘、尼龙线(3根)、旋转电动机(2个)、扭簧(3个)、机械爪(3个)、机械爪固定装置(3个)、红外感应装置和Arduino开发板等组成.其中外壳采用聚乳酸材料进行3D打印,支撑架、旋转齿轮、中央转轴、中央绕线盘、机械爪采用光敏树脂进行3D打印,机械爪打印完成后再用橡胶材料浇注形成弹性结构;Arduino开发板采用OpenCM9.0控制器,可对红外感应装置和旋转电动机进行供电与控制.结果:经测试,该机械手能够实现张开与闭合操作,且可以在0.11-0.15 s完成张开—感应—启动—抓取的过程.结论:该机械手质量轻、负载低、抓取效率高,可满足无人机自主抓取物体的需求.

目的 探讨电针(EA)在急性痛风性关节炎大鼠模型通过调控瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)对疼痛反应的影响.方法 60只SPF级雄性SD大鼠分为4组,即对照组、模型组、假EA治疗组和EA治疗组,每组15只.通过向大鼠的脚踝注射尿酸钠以建立痛风模型.EA治疗组分别在模型建立后第8、24和48 h进行EA治疗.假EA治疗组将针头皮下插入穴位,但没有放电.对照组和模型组不接受治疗.分别对各组大鼠的持续疼痛评分、机械性疼痛、热痛觉过敏进行测定,采用western blot分析大鼠外周背根神经节与中枢脊髓背角中TRPV1和相关下游分子的表达.结果 与假EA治疗组相比,在8、24和48 h时间点,EA治疗组显著降低了痛风大鼠的持续疼痛评分(P＜0.05),同时显著增加了 50％爪退缩阈值(PWT)和爪退缩潜伏期(P＜0.05).无论在背根神经节与中枢脊髓背角,与对照组相比,模型组TRPV1和相关的下游蛋白激酶(S100B、GFAP和RAGE)水平表达均显著提高(P＜0.05).EA治疗显著降低了 TRPV1和相关的下游蛋白激酶(S100B、GFAP和RAGE)的过表达(P＜0.05),而假EA治疗并没有改变这一观察结果.结论 EA在急性痛风性关节炎大鼠模型中可有效缓解疼痛反应,其主要通过TRPV1及其下游蛋白激酶S100B、GFAP和RAGE受体介导镇痛作用.

目的 探讨蒙医温针缓解大鼠脊髓损伤后坐骨神经痛的意义.方法 选择SPF级健康3月龄雄性Wistar大鼠,随机分为5组,正常对照组(Normal组,n=15),假手术组(Sham组,n=20),脊髓钝性损伤模型组(CNP组,n=30),STAT3 siRNA注射组(n=30),蒙医温针治疗组(n=30).蒙医温针治疗组取鼠膝眼穴(髌韧带两侧凹陷处),髋穴(臀下横纹的中点)用特制银针治疗,比较各组大鼠行为学评分结果,统计蒙医温针治疗及鞘内注射STAT3 siRNA后大鼠行为学影响.结果 CNP组大鼠造模后28 d时BBB评分高于造模后1、7、14、21 d时(P＜0.05),CNP组大鼠造模后第3天开始后肢热缩足持续时间短于Sham组和Normal组(P=0.032).CNP组鼠术后第3天,后肢机械缩爪阈值低于Sham组和Normal组(P=0.021).蒙医温针组及STAT3 siRNA组大鼠TWD时间与Normal组、Sham组和空载病毒组相比显著降低(P＜0.01),MWT显著升高(P＜0.01),BBB评分显著升高(P＜0.01),蒙医温针治疗后,造模后第7天、第14天和第28天脊髓STAT3表达均显著降低(P＜0.01),蒙医温针组及STAT3 siRNA组STAT3 mRNA表达显著低于Normal组、Sham组和空载病毒组(P＜0.01).结论 小胶质细胞内STAT3信号转导通路的激活可能为脊髓损伤后中枢性坐骨神经痛的发病机制之一,蒙医温针治疗可能通过阻断脊髓背角小胶质细胞内STAT信号转导通路活性发挥临床作用.

目的 探讨黄芩苷通过抑制Toll样受体(TLR)2/髓样分化因子(MyD88)/核转录因子(NF)-κB信号通路减轻带状疱疹后遗神经痛(PHN)大鼠神经炎症的机制.方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、黄芩苷低剂量(30 mg/kg)组、黄芩苷高剂量(60 mg/kg)组、黄芩苷高剂量+空载质粒组、黄芩苷高剂量+TLR2 过表达组,每组 10 只,模型组和给药组通过腹腔注射树脂毒素(RTX)诱导建立PHN模型,对照组腹腔注射等剂量含 10%Tween 80 及 10%乙醇的生理盐水,采用黄芩苷和质粒分组处理大鼠后,检测大鼠疼痛症状,比较自发缩足反射次数、缩爪阈值、热敏潜伏期;采用TUNEL法检测脊髓神经细胞凋亡率;采用免疫组织化学染色检测各组脊髓组织炎性细胞浸润,比较脊髓组织淋巴细胞功能相关抗原(LFA)-1 阳性细胞比例;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脊髓组织及血清炎症因子前列腺素(PGE)2、白细胞介素(IL)-18、环氧化酶(COX)-2水平;采用免疫印迹法检测各组脊髓组织TLR2/MyD88/NF-κB通路相关蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组缩爪阈值显著降低,热敏潜伏期、自发缩足反射次数、脊髓神经细胞凋亡率、LFA-1 阳性细胞比例、脊髓组织及血清PGE2、IL-18、COX-2 水平、脊髓组织TLR2、MyD88 蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65 显著升高(均P<0.05).与模型组比较,黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组、黄芩苷高剂量+空载质粒组缩爪阈值均显著升高,热敏潜伏期、自发缩足反射次数、脊髓神经细胞凋亡率、LFA-1阳性细胞比例、脊髓组织及血清PGE2、IL-18、COX-2水平、脊髓组织TLR2、MyD88 蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65 均显著降低(均P<0.05);黄芩苷高剂量组缩爪阈值相比黄芩苷低剂量组显著升高,热敏潜伏期、自发缩足反射次数、脊髓神经细胞凋亡率、LFA-1阳性细胞比例、脊髓组织及血清PGE2、IL-18、COX-2水平、脊髓组织TLR2、MyD88 蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65 显著降低(均P<0.05).与黄芩苷高剂量组比较,黄芩苷高剂量+空载质粒组各指标无明显变化(P>0.05);黄芩苷高剂量+TLR2 过表达组缩爪阈值显著降低,热敏潜伏期、自发缩足反射次数、脊髓神经细胞凋亡率、LFA-1阳性细胞比例、脊髓组织及血清PGE2、IL-18、COX-2水平、脊髓组织TLR2、MyD88 蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65 显著升高(均P<0.05).结论 黄芩苷可通过抑制TLR2/MyD88/NF-κB信号通路从而降低炎症因子产生释放,进而阻止PHN大鼠神经炎症,抑制脊髓神经细胞凋亡及炎性细胞浸润,最终改善大鼠长时程自发痛、机械性痛觉超敏反应与热痛觉减退症状.

目的:从背根节(DRG)神经元水平说明内脏病变与相应体表穴位敏化产生的神经生物学机制.方法:皮肤伊文思蓝(EB)外渗实验:BALB/c小鼠随机分为对照组和结肠炎组,每组4只.2,4,6-三硝基苯磺酸直结肠灌注7 d制备结肠炎模型.采用尾静脉注射EB检测体表神经源性炎性反应,观察渗出点的位置及面积.痛行为实验:C57BL/6J小鼠随机分为对照组和结肠炎组,每组8只,造模方法同上,观察下背部和足部Von Frey丝机械刺激诱发的回避或缩足反应次数.小鼠在体DRG钙成像实验:Pirt-GCaMP6s转基因小鼠随机分为对照组和结肠炎组,每组12只,造模方法同上,暴露腰(L)6或L4 DRG,在共聚焦荧光显微镜下观察神经元对直结肠扩张刺激(CRD)、下背部或后爪机械刺激的反应.结果:与对照组比较,结肠炎组小鼠下背部及后爪神经源性炎性EB渗出较多(P<0.05);同时结肠炎组小鼠下背部、后爪对机械刺激的回避或缩足反应次数增加(P<0.01,P<0.05);CRD 60 mm Hg诱发内脏痛引起的L6 DRG神经元激活数量占总数的百分比均较对照组显著增加(P<0.01),其中中型神经元数量增加更为明显(P<0.01).与对照组相比,结肠炎组小鼠L6 DRG神经元对下背部毛刷刺激反应荧光强度增加(P<0.001),不同直径神经元的荧光强度均增强(P<0.01,P<0.001,P<0.05).于小鼠后爪施加毛刷、钳夹压力刺激,均引起与结肠不同水平的L4 DRG神经元反应总体数量百分比较对照组显著增加(P<0.01,P<0.05).结论:结肠炎可以引起同节段和近节段体表穴位敏化,同时DRG神经元激活数量和反应性增加.其中与直结肠同水平的L6 DRG神经元表现为神经元激活数量百分比和钙荧光信号强度增加,而与内脏邻近水平的L4 DRG神经元表现为激活数量百分比增加,提示可能存在不同的外周神经元敏化机制.