铁死亡是一种不同于细胞凋亡、细胞坏死的新型细胞程序性死亡方式,其机制涉及铁代谢异常所致的铁超载及脂质过氧化和活性氧生成.铁死亡与原发性骨质疏松症及继发性骨质疏松症如类固醇诱导的骨质疏松症、糖尿病性骨质疏松症和绝经后骨质疏松症的形成有关.通过铁死亡机制防治骨质疏松症的中药主要涉及中药复方如杜仲-续断药对、金天格胶囊、补骨生髓方等,以及单味中药如牛膝及中药有效成分如淫羊藿苷、天麻素、槲皮素、青蒿琥酯等.中药单体以及中药复方防治骨质疏松症可通过多靶点、多通路抑制铁死亡,目前中药在防治绝经后骨质疏松症方面较有优势.通过调节铁死亡机制而防治骨质疏松症可为未来中药防治骨质疏松症的研究提供方向.

目的 研究杜仲补天素丸对肾阴虚小鼠的影响.方法 采用灌胃复方利血平片和甲状腺片的方法制备肾阴虚模型,测定小鼠体温,痛阈值,力竭游泳时间,血清甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、环磷酸鸟苷(cGMP)、环磷酸腺苷(cAMP)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质素释放激素(CRH)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素 6(IL-6)、还原性谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平,乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性.结果 与空白组比较,模型组小鼠体质量、胸腺指数、脾脏指数、痛阈值、力竭游泳时间、血清 cGMP、GSH 水平和 LDH、SOD 活性降低(P<0.05,P<0.01),血清 T3、T4、cAMP、ACTH、CRH、IFN-γ、IL-6、MDA水平升高(P<0.05,P<0.01),肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,杜仲补天素丸组小鼠胸腺指数、脾脏指数、痛阈值、力竭游泳时间增加(P<0.05,P<0.01),血清cGMP、GSH水平和LDH、SOD活性升高(P<0.05,P<0.01),血清T3、T4、cAMP、ACTH、CRH、IFN-γ、IL-6、MDA水平(P<0.05,P<0.01)及肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低(P<0.05,P<0.01).结论 杜仲补天素丸能够改善肾阴虚小鼠的基础代谢起到抗疲劳作用,调节甲亢型肾阴虚小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴和下丘脑-垂体-甲状腺轴功能,改善免疫功能.

目的 探究基于叉头转录因子O1型(FOXO1)信号通路观察杜仲补天素对睾丸障碍大鼠生精细胞凋亡及生精功能的研究.方法 选取40只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、生精胶囊组、杜仲补天素组,每组10只,对模型组、生精胶囊组、杜仲补天素组采用热激法建立睾丸障碍大鼠模型,建模成功后,对生精胶囊组给予灌胃450 mg/kg的生精胶囊,对杜仲补天素组给予灌胃970 mg/kg的杜仲补天素,正常组、模型组同期给予灌胃同体积生理盐水,观察并记录大鼠生精功能相关指标,苏木素-伊红(HE)染色法检测大鼠睾丸组织病理形态,末端脱氧核苷酸标记(TUNEL)法检测生精细胞凋亡,实时荧光定量PCR法检测大鼠睾丸组织中凋亡相关基因表达.另外选取20只SPF级SD雄性大鼠,采用热激法建立睾丸障碍大鼠模型,建模成功随机将其分为AS1842856组(给予灌胃30 mg/kg的FOXO1信号通路抑制剂AS1842856)和AS1842856+杜仲补天素组(给予AS1842856联合杜仲补天素),免疫印迹法检测FOXO1信号通路相关蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组大鼠精子总数、精子活动率、睾丸组织中Bcl-2 mRNA水平显著降低,精子畸形率、生精细胞凋亡率以及睾丸组织中Caspase-3、Bax mRNA水平显著升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05);与模型组比较,生精胶囊组、杜仲补天素组大鼠精子总数、精子活动率、睾丸组织中Bcl-2 mRNA水平显著升高,精子畸形率、生精细胞凋亡率以及睾丸组织中Caspase-3、Bax mRNA水平显著降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05);且杜仲补天素组各指标均比生精胶囊组变化明显,差异均有统计学意义(P均＜0.05).正常组大鼠睾丸生精小管直径宽且排列密集,生精上皮较厚,生殖细胞层次和数量较多,可见精子形成;模型组大鼠生精小管直径明显缩短且排列稀疏,生精上皮明显变薄,生殖细胞数量明显减少,且未见明显精子形成;与模型组比较,生精胶囊组、杜仲补天素组大鼠症状明显改善,精子形成明显增多.正常组、模型组、生精胶囊组、杜仲补天素组、AS1842856组、AS1842856+杜仲补天素组PI3K蛋白表达为(2.45±0.14)、(1.01±0.09)、(1.48±0.10)、(1.87±0.11)、(1.86±0.11)、(2.22±0.14),AKT蛋白表达分别为(2.29±0.14)、(1.05±0.08)、(1.47±0.11)、(1.75±0.12)、(1.76±0.13)、(2.01±0.13),FOXO1 蛋白表达分别为(0.85±0.05)、(2.18±0.12)、(1.89± 0.10)、(1.61±0.10)、(1.62±0.11)、(1.02±0.10),组间比较差异均有统计学意义(F=27.360、24.320、32.350,P均＜0.001);与正常组比较,模型组大鼠睾丸组织中PI3K、AKT蛋白表达显著降低,FOXO1蛋白表达显著升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05);与模型组比较,生精胶囊组、杜仲补天素组大鼠睾丸组织中PI3K、AKT蛋白表达显著升高,FOXO1蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05);且杜仲补天素组各蛋白表达均比生精胶囊组变化明显,差异均有统计学意义(P均＜0.05);而杜仲补天素组与AS1842856组各蛋白表达比较差异均无统计学意义(P均＞0.05);与AS1842856组比较,AS1842856+杜仲补天素组大鼠睾丸组织中PI3K、AKT蛋白表达显著升高,FOXO1蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 杜仲补天素可显著抑制睾丸障碍大鼠生精细胞凋亡,改善大鼠生精功能,其机制可能与抑制FOXO1相关信号通路有关.

目的:观察定经汤加减联合达英-35治疗多囊卵巢综合征的临床疗效及预后情况.方法:将60例多囊卵巢综合征患者随机分为治疗组和对照组,每组30例.对照组患者采用口服达英-35治疗;治疗组在对照组治疗基础上加用定经汤加减治疗,具体用药为:熟地黄、女贞子、山药、茯苓、枸杞子、白芍各15g,当归、柴胡各15 g,菟丝子20 g.加减用药:月经后期加山萸肉、杜仲各15 g以滋阴补肾;排卵前期加皂角刺、石菖蒲各10 g以理气活血促排卵;黄体期加巴戟天、淫羊藿各10 g以补肾壮阳;月经前期加丹参15 g,鸡血藤30 g以活血调经;痤疮多者加浙贝母15 g;肥胖者加苍术、胆南星、法半夏各10 g.两组患者均连续治疗3个月经周期.观察两组患者治疗前后性激素水平的改变,月经恢复时间、应用B超监测患者卵巢、子宫内膜变化情况、排卵情况和复发率.结果:治疗后治疗组患者促卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone precursor,FSH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、睾酮(testosterone,T)和LH/FSH分别为(14.74±1.05)U·L-1、(14.96±3.13)U·L-1、(1.73±0.20) nmol·L-1和(1.04±0.18),与对照组(13.19±1.92)U·L-1、(18.05±3.38)U·L-1、(2.14±0.27) nmol·L-1和(1.32±0.16)比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);治疗后治疗组患者卵巢体积和窦卵细胞数目分别为(7.30±0.37) mL和(4.17±0.63)个,均低于对照组(9.45±0.42) mL和(7.64±0.69)个,差异均有统计学意义(P＜0.05);治疗后治疗组患者子宫内膜厚度为(10.02±0.18) mm,高于对照组(7.51±0.16) mm,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组患者月经恢复率、月经恢复时间、自主排卵率和复发率结果分别为96.67％、(81.46±8.20)d、90.00％和6.67％,均低于对照组的76.67％、(102.72±9.35)d、70.00％和26.67％,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:采用定经汤加减联合达英-35治疗多囊卵巢综合征患者能够显著改善性激素水平,改善卵巢功能,促进月经恢复,提高自主排卵率和降低患者复发率.

目的 采用环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)诱导的小鼠生精障碍模型,探究杜仲补天素胶囊(Duzhong ButiansuCapsule,DBC)的生殖保护作用及其机制.方法 采用昆明种小鼠ip CP(60 mg/kg)制备生精障碍模型,连续5d,第8天起ig给予DBC高、低剂量(1.388、0.694 g/kg)干预4周,给药结束后检测各组小鼠体质量、脏器指数变化,HE染色检测睾丸病理结构变化,ELISA法测定血清睾酮(T)、促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;Western blotting及免疫组化法分析睾丸组织中转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、组蛋白脱乙酰基酶2(HDAC2)与磷酸化蛋白激酶C(p-PKC)表达.结果 与模型组比较,DBC对小鼠体质量下降有极显著干预作用,能够增加睾丸、附睾及肾脏指数,改善睾丸病理形态损伤,增加精子数、提高精子活力、降低精子畸形率,提高T水平,降低LH、FSH水平,降低MDA含量,提高SOD、GSH-Px活性,提高Nrf2、HO-1、NQO1、HDAC2与p-PKC蛋白的表达水平(P＜0.05、0.01).结论 DBC能够改善CP诱导的小鼠生精障碍,其机制可能与调节氧化应激相关的Nr2航氧化作用元件(ARE)信号通路有关.

目的 研究杜仲补天素胶囊(Duzhong Butiansu Capsule,DBC)对白消安致生精功能障碍的影响.方法 Balb/c雄性小鼠腹腔注射白消安制备生精障碍模型.造模成功后,生精组给予0.8 g·kg-1生精胶囊,褪黑素组给予10 mg·kg-1褪黑素,杜仲补天素低剂量组和杜仲补天素高剂量组分别给予0.694 g·kg-1、1.388 g·kg-1杜仲补天素,共给药35 d.称量脏器,用精子分析仪检测精子活力及数目;采用流式细胞仪检测睾丸细胞周期;进行 HE 染色,观察睾丸、附睾和肝的形态学结构.同时,检测了血清促卵泡生成素(Follicle stimulating hormone, FSH)、促黄体生成素(Luteinizing hormone, LH)、睾酮(testosterone, T)、血清丙二醛(malondialdehyde, MDA)、血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、肝中谷胱甘肽(glutathione, GSH)水平.采用免疫组织化学法测定了睾丸c-kit、Caspase-3、Cleaved Caspase-3的表达水平.结果 与正常组比较,白消安模型组明显降低了精子活力及数目以及睾丸细胞单倍体、二倍体的比例(P＜0.01),且破坏睾丸、附睾和肝的组织形态;显著降低血清T(P＜0.01)水平,升高FSH、LH和氧化应激水平(P＜0.05,P＜0.01);明显降低 c-kit 的表达水平(P＜0.05),并明显升高 Caspase-3 和 Cleaved Caspase-3 的表达(P＜0.01).与模型组比较,经DBC作用后,精子活力及二倍体、四倍体比例升高(P＜0.05,P＜0.01),同时保护睾丸、附睾和肝;改善血清性激素水平及氧化应激水平;升高c-kit表达水平(P＜0.01),降低凋亡蛋白Caspase-3、Cleaved Caspase-3的表达水平(P＜0.05,P＜0.01).结论 杜仲补天素胶囊可改善白消安诱导的生精障碍,效果以低剂量为佳.

目的:研究杜仲补天素胶囊对腺嘌呤诱导的雄性大鼠生殖功能损伤的影响. 方法:80只雄性SD大鼠随机分为正常组、溶剂对照组、模型组、生精胶囊组、杜仲补天素胶囊低剂量组和高剂量组,正常组和溶剂对照组每组8只,其余每组16只.连续5周各组按10 ml/kg体重灌胃给药,正常组给予等体积生理盐水,溶剂对照组给予等体积0.5％羟甲基纤维素钠,其余各组以200 mg/kg体重腺嘌呤灌胃,生精胶囊组同时灌服生精胶囊0.560 g/kg体重,杜仲补天素低剂量、高剂量组同时分别灌服杜仲补天素0.242、0.968g/kg体重.第4周末,各组大鼠按1∶1比例与雌鼠交配,1周后处死雄鼠,取右侧附睾以检测大鼠精子浓度、活率,雌鼠继续饲养2周后处死,记录雌鼠妊娠率及仔鼠数.HE染色观察睾丸、附睾及肾脏病理结构变化;ELLSA检测血清T、E2、FSH、LH水平;生化分析血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)的含量;免疫组化检测肾脏组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达水平. 结果:正常组与溶剂对照组相比,各项指标均无显著差异(P＞0.05).与模型组相比,正常组精子活率[(54.75±3.92)％vs(25.60±4.83)％,P＜0.01]、精子浓度[(40.67±7.37)×106/ml vs (27.10±2.72)×106/ml,P＜0.01]以及受孕率(85.7％vs 43.8％,P＜0.01)均显著高于模型组;杜仲补天素胶囊低、高剂量组的精子活率[(53.50±8.83)％、(54.33±7.92)％,P＜0.01]、精子浓度[(53.00±4.55)×106/ml、(65.63±12.47)×106/ml,P＜0.01]显著升高,杜仲补天素胶囊高剂量组受孕率(54.5％,P＜0.01)显著升高.给予杜仲补天素胶囊后,各组体重、睾丸、附睾及精囊腺系数显著升高(P ＜0.05或P＜0.01),附睾、睾丸及肾脏形态结构明显恢复;血清Scr、BUN水平显著降低(P＜0.05或P＜0.01);血清T水平升高,FSH、LH水平降低(P＜0.05或P＜0.01);SOD、GSH-PX显著升高,MDA下降(P＜0.05或P＜0.01);肾脏中Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平下降,Bcl-2升高(P＜0.05或P＜0.01). 结论:杜仲补天素胶囊对腺嘌呤诱导的雄性大鼠的生殖损伤具有改善作用,可能与调节凋亡蛋白,改善机体氧化应激水平及恢复生殖激素水平紊乱有关.

目的:研究杜仲补天素胶囊对雷公藤多苷所致雄性大鼠生殖障碍的干预作用并初步探讨其作用机制.方法:雄性SD大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、模型组、生精胶囊560 mg/kg组、杜仲补天素485 mg/kg、970 mg/kg组.以雷公藤多苷(40 mg/kg)造模成功后,持续给药干预四周,雌雄合笼后,观察雌鼠受孕情况与产仔数,计算雄鼠脏器系数、测定各组性激素水平和氧化应激指标、观察睾丸组织形态变化、检测睾丸凋亡相关蛋白与雌激素受体蛋白表达的变化.结果:与正常组相比,模型组睾丸曲细精管空泡化,曲细精管内各级精细胞不同程度减少;睾丸系数、精子数量和精子活力均显著下降;受孕率与产仔数显著下降;雌二醇(E2)、睾酮(T)、卵泡雌激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量或活力显著下降,丙二醛(MDA)的含量显著上升;睾丸组织中B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)表达显著下调,Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达显著上调;睾丸中雌激素受体α和雌激素受体β(ERα、ERβ)蛋白的表达量显著上调.给药干预后与模型组相比,杜仲补天素胶囊组剂量依赖地使睾丸中曲细精管空泡化情况改善,各级精细胞再生;睾丸系数、精子数量和精子活力显著上升;受孕率与产仔数显著上升;E2、FSH、GSH-Px、SOD的含量或活力显著上升,MDA的含量显著下降;睾丸组织中Bax蛋白表达显著下调,Bcl-2蛋白表达显著上调;睾丸中ERα、ERβ蛋白的表达量显著下调.结论:杜仲补天素胶囊对雷公藤多苷所致雄性大鼠生殖障碍有一定的改善作用,可能是通过调控ERα、ERβ来调节氧化应激与凋亡水平实现的.

原发性高血压是循环系统的常见疾病和心血管疾病的重要危险因素之一.2012年18岁及以上的高血压成年人患病率为25 . 2％,心血管疾病的人数为290万,其中2 . 7亿为高血压.根据2017年美国心脏病学会/美国心脏协会指南,收缩性高血压(HTN)的患病率是基于2010年中国指南(46. 4％)的2倍,而控制率降至3. 0％.研究表明,与美国相比,中国高血压的患病率低于美国,但平均血压显著较美国偏高,而且知晓率、控制率、治疗率偏低,中国高血压负担加重可能是造成中国人脑卒中高发的原因[1-3].原发性高血压在中医属"眩晕""头痛"等范畴.《内经》认为眩晕为肝所主,且与髓海不足、邪中等多种因素有关.《素问·至真要大论》中有"诸风掉眩,皆属于肝".清代名医陈念祖在《医学从众录·眩晕》中说道:"盖风非外来之风,指厥阴风木而言,与少阳相火同居,厥阴气逆,则风生而火发,故河间以风火立论也.风生必挟木势而克土,土病则聚液而成痰,故仲景以痰饮立论,丹溪以痰火立论也.究之肾为肝母,肾主藏精,精虚则脑海空而头重,故《内经》以肾虚及髓海不足立论也.其言虚者,言其病根;其言实者,言其病象,理本一贯."同时他认为,本病为本虚标实之病.天麻钩藤饮由天麻、钩藤、石决明、山栀、黄芩、川牛膝、杜仲、益母草、桑寄生、夜交藤、朱茯神组成,具有平肝熄风、清热活血、补益肝肾之功效,为平肝降逆之良剂,临床上常用于治疗高血压、脑血管病、耳源性眩晕等属风阳上扰、肝阳上亢证.

复发性流产是指连续2次及以上发生自然流产的情况,临床就诊人数逐年增加.杜宝俊教授结合多年临床经验,从肾、肝、脾三脏辨证论治该病,以补肾为宗旨,惯用桑寄生、菟丝子、续断、杜仲、巴戟天等补肾安胎;在补肾的前提下顾护脾胃,选用山药、白术、茯苓、党参等健脾药物使先后天相互化生;运用黄芪、太子参等大补元气为前提,加当归、白芍、川芎等补血药物调和气血阴阳;同时运用西医手段监测孕妇激素水平、高凝状态、甲状腺功能等指标,并以B超检查明确胚胎发育状况,避免盲目保胎与宫外孕风险.杜教授提倡中西医结合的保胎思路,并注重通过调节情志提高疗效.