细胞程序性死亡是一种重要的生物学过程,包括凋亡、自噬等多种方式,对于维持组织和器官的平衡至关重要.近年来,多项研究表明细胞程序性死亡的异常调控在结直肠肿瘤的发生发展中发挥重要作用.因此,揭示细胞程序性死亡在结直肠癌发生和发展中的精细调控网络对开发新的结直肠癌临床诊疗策略具有重要意义.本文就细胞程序性死亡在结直肠癌中的研究进展作一综述,以期为结直肠癌的临床诊治提供新的思路和方法.

目的:探讨不同剂量乙烯利不同作用时间下对雄性幼鼠睾丸组织的影响。方法:将45日龄健康雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠32只，采用随机数字表法随机分为对照组和低、中、高剂量乙烯利组，取同日龄健康雄性SD大鼠32只与之一对一合笼。每日分别对雌鼠进行灌胃，低、中、高剂量组分别用200、400、800 mg/kg乙烯利水溶液灌胃，对照组采用等量9 g/L盐水，仔鼠出生后，停止给母鼠灌胃，改为给雄性仔鼠灌胃。子代雄鼠于出生0日龄、14日龄、28日龄时，分别从各组采用随机数字表法随机选取12只处死。取新鲜睾丸组织行苏木精-伊红(HE)染色，光镜下观察睾丸组织形态变化。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法标记凋亡细胞，利用荧光显微镜检测睾丸生精细胞凋亡指数(AI)。结果:1.0日龄时高剂量组较中剂量组、低剂量组和对照组生精小管略增粗，生精细胞排列稍紊乱。高剂量组AI(1.00±0.06)明显高于对照组(0.41±0.03)，差异有统计学意义( P<0.01)；对照组、低剂量组与中剂量组比较差异无统计学意义( P>0.05)。2.14日龄时低、中、高剂量组较对照组生精小管明显增粗，排列疏松，生精细胞数目稀少，排列紊乱。14日龄时低剂量组(2.13±0.10)、中剂量组(2.18±0.10)、高剂量组(3.90±0.23)AI均明显高于对照组(1.00±0.02)，差异有统计学意义( F＝2 508.36， P<0.01)。中、低剂量组比较AI差异无统计学意义( P>0.05)。3.28日龄时低、中、高剂量组较对照组生精小管显著增粗，排列更疏松，生精细胞数目更少，排列严重紊乱。28日龄时低剂量组(5.52±0.13)、中剂量组(9.44±0.07)、高剂量组(14.56±0.27)AI均明显高于对照组(3.11±0.13)，差异有统计学意义( F＝10 784.69， P<0.01)。 结论:乙烯利可引起新生大鼠及幼鼠雄性睾丸生精小管增粗，生殖细胞排列紊乱，生精细胞凋亡增加和生精能力下降；且大鼠接触乙烯利时间越长，乙烯利浓度越高，睾丸组织损伤越严重。

目的:探究枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharides，LBP）对七氟烷麻醉诱导的雄性大鼠生殖毒性的作用，分析其对细胞外信号调节激酶（extracellular-signal-regulated kinase，ERK）/核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）-抗氧化反应元件（antioxidant response element，ARE）信号通路的影响。方法:取SD雄性大鼠按计算机随机生成数字法分为空白对照组、模型组、LBP低剂量组、LBP高剂量组和阳性对照组，除空白对照组外其余均以七氟烷麻醉诱导，同时腹腔注射给药，空白对照组和模型组予以等体积生理盐水，LBP低、高剂量组分别予以100 mg/kg、200 mg/kg LBP，每天1次，阳性对照组予以10 mg/kg维生素E，隔天1次，14 d后处死。计算各组大鼠睾丸与附睾的脏器指数；检测睾丸组织标志酶酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）含量；HE染色观察大鼠睾丸组织病理学；检测睾丸组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量；TUNEL染色观察大鼠睾丸组织细胞凋亡率；Western blotting检测大鼠睾丸组织内Bax、Bcl-2及ERK/Nrf2-ARE通路蛋白表达。结果:LBP低、高剂量组和阳性对照组睾丸脏器指数［（0.39±0.04）%、（0.47±0.05）%、（0.62±0.05）%］和附睾脏器指数［（0.08±0.01）%、（0.11±0.01）%、（0.14±0.02）%］均比模型组［（0.33±0.03）%，（0.05±0.01）%］高（均 P<0.001），ACP［（122.13±5.39）U/g、（115.37±4.45）U/g、（109.74±4.73）U/g］、LDH含量［（260.43±15.18）U/g、（245.17±8.13）U/g、（236.19±10.23）U/g］均比模型组［（129.98±6.17）U/g、（279.89±18.41）U/g］低（均 P<0.001），AKP含量［（224.41±11.69）U/g、（247.59±12.17）U/g、（266.74±13.78）U/g］、SOD活性［（3.11±0.12）U·mg/蛋白、（4.05±0.14）U·mg/蛋白、（4.78±0.15）U·mg/蛋白］均比模型组［（200.48±10.48）U/g、（2.02±0.09）U·mg/蛋白］高（均 P<0.001），MDA含量［（14.86±1.41）nmol·mg/蛋白、（10.39±1.22）nmol·mg/蛋白、（5.25±0.47）nmol·mg/蛋白］均较模型组［（18.36±1.99）nmol·mg/蛋白］低（均 P<0.001），睾丸细胞凋亡率均较模型组低（均 P<0.001），且呈LBP剂量依赖性（均 P<0.001）。模型组大鼠生精小管变薄，生精细胞明显减少，部分曲精管内仅残留少量精原细胞；给药后，LBP低、高剂量组和阳性对照组生精小管结构比较完整，各级生精细胞排列有序，数量增多，空泡减少。模型组大鼠睾丸组织中Bcl-2、p-ERK1/2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平较空白对照组高，Bax蛋白水平较空白对照组低（均 P<0.05）；LBP低、高剂量组Bcl-2、p-ERK1/2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平较模型组高，Bax蛋白水平较模型组低（均 P<0.05），且呈LBP剂量依赖性（ P<0.05）。 结论:LBP对七氟烷麻醉诱导的雄性大鼠生殖毒性有拮抗作用，可能与抑制ERK/Nrf2-ARE通路有关。

目的:探讨D-柠檬烯对精索静脉曲张(VC)大鼠生精功能的保护作用。方法:雄性SD大鼠40只随机分为4组，假手术组(A组)，假手术+D-柠檬烯组(B组)，VC组(C组)，VC+D柠檬烯组(D组)。C、D组行左肾静脉缩窄术建立VC大鼠模型，B、D组术后每日腹腔注射D-柠檬烯200 mg/kg，A、C组注射等量生理盐水，4周后取左侧睾丸检测。苏木精-伊红(HE)染色，观察睾丸组织形态变化；分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量；采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生精细胞凋亡指数；免疫组织化学和蛋白质印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达水平；组间比较采用 t检验。 结果:A、B组大鼠睾丸未见明显组织学变化，C组可见明显病理损伤，D组较C组损伤明显改善；C组SOD含量(0.23±0.03)显著低于A组(0.79±0.04)( t＝22.183， P<0.05)，D组SOD含量(0.51±0.03)高于C组( t＝13.123， P<0.05)，C组MDA含量(5.59±0.39)显著高于A组(1.30±0.12， t＝18.386， P<0.05)，D组MDA含量(3.89±0.20)低于C组( t＝6.734， P<0.05)；C组凋亡(32.43±3.88)明显高于A组(2.41±0.67， t＝17.045， P<0.05)，D组凋亡细胞(17.12±2.66)低于C组( t＝7.273， P<0.05)；免疫组织化学和Western blot结果显示，C组的bax和Caspase-3蛋白表达量明显高于A组(1.179±0.070、0.469±0.220比0.453±0.043、0.143±0.017， t＝15.157、20.431， P值均<0.05)，bcl-2蛋白表达量低于A组(0.476±0.021比1.148±0.084， t＝13.414， P<0.05)；D组的的bax和Caspase-3蛋白表达量明显少于C组(0.689±0.054、0.282±0.031比1.179±0.070、0.469±0.220， t＝9.540、8.442， P值均<0.05)，bcl-2表达水平明显高于C组(0.794±0.033比0.476±0.021， t＝14.222， P<0.05)。 结论:D-柠檬烯可通过抗氧化和抗凋亡作用，对精索静脉曲张大鼠生精功能起保护作用。

目的:探讨X射线胸部照射对雄性成年小鼠精子发生的影响。方法:将24只健康雄性成年C57BL/6小鼠(6~8周龄)按照随机数表法分为X射线照射组(Radiation)和假照射组(Sham)，每组12只。胸部照射面积为1.5 cm × 2 cm，剂量率3.04 Gy/min，8 Gy/d，连续照射3 d，总剂量24 Gy，于照射后第7天和第21天取材。剥离双侧睾丸，计算睾丸系数；HE染色法观察睾丸组织形态，并测量生精小管直径和生精上皮厚度；游离附睾尾中的精子用于统计精子数量；TUNEL和Western blot分别检测睾丸组织凋亡及凋亡相关蛋白水平变化，ELISA检测睾丸内干细胞因子(SCF)和胶质源性神经营养因子(GDNF)的水平。结果:与假照射组相比，照射组小鼠的睾丸和附睾组织形态结构严重破坏，生精小管直径在照射后第21天，生精小管直径减小，差异有统计学意义( t ＝ 8.93， P < 0.05)，生精上皮厚度在照射后第7天和第21天均明显减小，差异有统计学意义( t ＝ 4.24、12.77， P < 0.05)，精子数量减少，差异有统计学意义( t ＝ 4.30、2.98， P < 0.05)；生精小管内TUNEL阳性细胞数在照射后第7天和第21天显著上调( t＝ -2.73、-3.74， P < 0.05)；睾丸内Cleaved Caspase-3蛋白水平在照射后第7天和第21天也显著上调，差异有统计学意义( t ＝ -2.96、-2.46， P < 0.05)；睾丸内SCF和GDNF水平在照射后第7天无明显改变，在照射后第21天均显著上调( t ＝ -10.46、-5.42， P < 0.05)。 结论:本研究条件下X射线胸部照射可损伤雄性成年小鼠精子发生障碍，其机制可能与生精细胞凋亡增加和支持细胞分泌功能紊乱有关。

目的:观察GYY4137对大鼠精索静脉曲张(VC)生精功能损伤的保护作用。方法:选取健康成年雄性SD大鼠32只购自湖北省疾病预防控制中心，随机分为4组：假手术组、假手术＋GYY4137组、VC组及VC＋GYY4137组。假手术组、假手术＋GYY4137组仅分离而不结扎左肾静脉，VC组与VC＋GYY4137组结扎左肾静脉制备VC模型，VC＋GYY4137组、假手术＋GYY4137组术后每日腹腔注射GYY4137(10 mg/kg)。采用苏木精-伊红(HE)染色观察睾丸组织病理改变；测定睾丸组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量；采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数；免疫组织化学及蛋白质印迹法(Western blot)检测睾丸组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达。两组间比较采用 t检验。 结果:VC组可见各级生精细胞排列紊乱且广泛脱落，VC＋GYY4137组可见生精细胞排列轻度紊乱，少数腔内见脱落的生精细胞。与假手术组[(1.86±0.23) nmol/g蛋白]和假手术＋GYY4137组[(1.83±0.22) nmol/g蛋白]比较，VC组[(4.33±0.37) nmol/g蛋白]中MDA含量明显增加( t＝9.820、10.059， P<0.05)；VC＋GYY4137组[(2.38±0.27) nmol/g蛋白]与VC组比较，MDA含量显著下降( t＝-7.374， P<0.05)。VC组的SOD活性[(0.23±0.04) U/mg蛋白]与假手术组[(0.81±0.06) U/mg蛋白]和假手术＋GYY4137组[(0.82±0.07) U/mg蛋白]比较明显降低( t＝-9.757、-9.926， P<0.05)；VC组经GYY4137处理后SOD活性增加[(0.62±0.06) U/mg蛋白]( t＝9.368， P<0.05)。TUNEL结果显示假手术组及假手术＋GYY4137组[(3.89±0.45)%、(3.92±0.51)%]可见较少的睾丸生精细胞凋亡，VC组凋亡细胞明显增加[(17.26±0.98)%， P<0.05]；与VC组比较，VC＋GYY4137组生精细胞凋亡明显减少[(8.24±0.65)%， P<0.05]。免疫组织化学及Western blot结果显示Caspase-3和bax表达水平在VC组(0.41±0.04、0.59±0.06)中的表达明显高于假手术组(0.11±0.02、0.19±0.03， t＝9.650、9.097， P<0.05)和假手术＋GYY4137组(0.12±0.02、0.20±0.03， t＝9.327、8.870， P<0.05)；与VC组比较，VC＋GYY4137组(0.21±0.03、0.34±0.04)中Caspase-3和bax表达水平下降( t＝-6.928、-6.005， P<0.05)。 结论:GYY4137可减轻氧化应激水平和抑制凋亡，从而对VC睾丸生精功能发挥保护作用。

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)介导血管内皮生长因子(VEGF)在精索静脉曲张(VC)大鼠生精细胞凋亡中的作用。方法:24只SD大鼠(山西省人民医院实验动物中心)采用随机数字表法分为正常大鼠组(N组)、VC模型组(V组)、VC+HIF-1α慢病毒组(H组)和VC+荧光素酶(Luc)慢病毒组(L组)，每组6只，构建慢病毒载体沉默VC大鼠睾丸HIF-1α基因，观察各组大鼠生精小管的形态学变化；测定大鼠睾丸组织VEGF和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase-3)的表达和睾丸细胞凋亡，比较VEGF和Caspase-3蛋白在两组间的表达差异，组间比较采用 t检验。 结果:与N组比较，V组大鼠睾丸生精小管细胞，分布紊乱，生精细胞凋亡明显增多，H组生精上皮损伤程度有所改善，生精上皮排列有序，生精细胞凋亡减少；V组大鼠睾丸VEGF表达显著高于N组(0.981±0.196比0.471±0.068， t＝-4.922， P<0.01)，H组显著低于V组(0.546±0.090比0.981±0.196， t＝4.033， P<0.01)，且与N组差异无统计学意义(0.546±0.090比0.471±0.068， t＝0.924， P>0.05)。V组大鼠睾丸组织切割的Caspase-3(cleaved Caspase-3)表达水平显著高于N组(0.823±0.162比0.451±0.090， t＝-4.492， P<0.01)，H组显著低于V组(0.408±0.118比0.823±0.162， t＝4.629， P<0.0，1)，且与N组差异无统计学意义(0.408±0.118比0.823±0.162， t＝-0.267， P>0.05)。 结论:VEGF在HIF-1α介导VC大鼠睾丸细胞凋亡中具有促进作用。

目的:明确氟中毒大鼠生殖损伤状态下的氧化应激和内质网应激水平，并观察α-硫辛酸（α-LA）干预后各相关指标的变化，探讨α-LA在氟中毒大鼠生殖损伤中的作用及可能机制。方法:将40只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠采用随机数字法分为四组，分别为对照组（0.9%氯化钠）；α-LA组（100 mg/kg α-LA）；氟化钠（NaF）组（25 mg/kg NaF）；NaF和α-LA联合作用组（25 mg/kg NaF+100 mg/kg α-LA）。采用灌胃的方式染毒，染毒8周后，各组分别进行精子质量分析、睾丸氟含量测定及HE染色；TUNEL法检测睾丸组织细胞凋亡；生化法测定氧化应激相关指标；Western印迹检测睾丸组织中GRP78、PERK及CHOP的蛋白表达水平。结果:与对照组相比，NaF组的精子密度及精子存活率较低[（5.99±1.45）×10 6/ml比（10.96±1.83）×10 6/ml， P<0.01；（33.40±2.71）%比（66.41±3.33）%， P<0.01]，精子畸形率较高[（26.43±2.43）%比（11.44±1.55）%， P<0.01）]；与NaF组相比，NaF+α-LA组的精子密度及精子存活率较高[（8.47±0.82）×10 6/ml比（5.99±1.45）×10 6/ml， P<0.05；（49.97±3.51）%比（33.40±2.71）%， P<0.05]，而精子畸形率较低[（22.69±2.39）%比（26.43±2.43）%， P<0.05]。与对照组相比，NaF组的睾丸氟含量较高[（11.14±0.77）μg/g比（5.78±0.28）μg/g， P<0.01]。光学显微镜下可见NaF组的生精细胞间结构较为疏松，生精细胞和成熟精子数量减少，与α-LA联合作用后，生精细胞结构损伤有所改善，管腔脱落细胞减少。TUNEL检测发现，NaF组的凋亡指数较高[（61.32±7.14）%比（6.99±2.17）%， P<0.01]；与NaF组相比，NaF+α-LA组细胞凋亡指数较低[（45.96±5.31）%比（61.32±7.14）%， P<0.01]。氧化应激水平检测发现，与对照组相比，NaF组的丙二醛（MDA）较高[（5.46±0.30）nmol/mgprot比（3. 24±0.58）nmol/mgprot， P<0.01]，超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）较低[（6.04±0.71）U/mgprot比（7.19±0.52）U/mgprot， P<0.01；（23.67±0.99）U/mgprot比（26.91±1.67）U/mgprot， P<0.01]；与NaF组相比，NaF+α-LA组MDA较低[（4.66±0.70）nmol/mgprot比（5.46±0.30）nmol/mgprot， P<0.05]，GSH-Px较高[（25.90±1.93）U/mgprot比（23.67±0.99）U/mgprot， P<0.05]。内质网应激水平检测发现，与对照组相比，NaF组的GRP78、PERK和CHOP蛋白表达水平明显上调（0.79±0.05比0.45±0.09， P<0.01；0.71±0.04比0.40±0.05， P<0.01；0.79±0.09比0.19±0.08， P<0.01），与NaF组相比，α-LA抑制了NaF介导的GRP78和CHOP蛋白表达上调（0.46±0.06比0.79±0.05， P<0.01；0.52±0.09比0.79±0.09， P<0.01）。 结论:α-LA可通过抑制氧化-内质网应激信号通路，对氟中毒大鼠生殖损伤起到一定的保护作用。

目的:探究人绒毛膜促性腺激素辅助治疗对单侧隐睾大鼠行睾丸固定术后患、健侧睾丸生殖功能的影响。方法:使用氟他胺处理实验组孕鼠，诱导其子代雄鼠产生隐睾表型；同时使用玉米油处理对照组孕鼠。数字随机法选取15只21 d龄单侧隐睾雄鼠，分为隐睾组、手术组和手术药物组；选取5只21 d龄健康雄鼠作为对照组。对照组和隐睾组行单侧假手术操作，手术组和手术药物组行单侧睾丸固定术。术后第3天和第10天，对照组、隐睾组和手术组皮下注射1 mL生理盐水，手术药物组皮下注射50 U（1 mL）人绒毛膜促性腺激素。于大鼠60 d龄时取右心房血液、双侧睾丸、附睾标本，双侧睾丸称重记录后分别计算睾丸/体重脏器系数；检测健、患侧附睾精子数量；检测双侧睾丸组织平均曲细精管直径和平均生精上皮细胞厚度；ELISA检测血清卵泡刺激素、促黄体生成素和睾酮浓度；TUNEL法检测生殖细胞凋亡率。结果:手术药物组患侧睾丸重量较手术组明显增高[（0.63±0.13）g比（0.37±0.06）g， P<0.01]，睾丸/体重脏器系数较手术组明显增高[（2.00±0.39）‰比（1.18±0.17）‰， P<0.001]；手术药物组患侧睾丸曲细精管直径显著大于手术组[（152.1±11.5）μm比（137.2±16.2）μm， P<0.001）]，生精细胞厚度显著大于手术组[（40.1±8.4）μm比（32.9±6.6）μm， P<0.001]；隐睾组、手术组和手术药物组患侧睾丸生殖细胞凋亡率差异无统计学意义（ P>0.05）。手术组、手术药物组血清卵泡刺激素、促黄体生成素和睾酮浓度差异无统计学意义（ P>0.05）。四组大鼠的健侧睾丸重量、睾丸/体重脏器系数、曲细精管直径、生精细胞厚度、生殖细胞凋亡率、附睾精子数量差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:人绒毛膜促性腺激素辅助治疗在一定程度上可以改善氟他胺诱导的单侧隐睾大鼠行睾丸固定术后患侧睾丸的生殖功能，对健侧睾丸生殖功能影响较小。

有关高龄育子和少子化的现状表明,男性生殖功能衰减带来不育风险的防治问题日益突出.男性生殖功能衰减与下丘脑-垂体-性腺轴、氧自由基、血睾屏障、生精细胞凋亡等因素有密切关系.中医认为,肾藏精,主生殖,生殖功能衰减与肾之阴阳失衡密切相关,运用补肾法可治疗肾虚导致的生殖功能衰减.补肾类方药通过系统调节下丘脑-垂体-性腺轴的功能,可显著延缓生殖功能的衰退;补肾类方药可清除体内过多的氧自由基,保护细胞免受氧化损伤;补肾类方药可通过维持血睾屏障而改善生精功能,并能调控生精细胞的凋亡.通过补肾改善肾虚所致生殖功能衰减的代表性方剂有五子衍宗丸、肾气丸、右归丸、六味地黄丸、左归丸及龟鹿二仙膏.这些方剂并非只针对单一机制产生效果,而是通过多途径、多环节、多靶点发挥治疗作用,综合调节机体内环境,以达到改善男性生殖功能的目的.中医补肾疗法在男性生殖功能衰减的治疗中发挥着不可替代的作用.深入研究其作用机制,可更好地指导临床实践,为改善男性生殖功能衰减提供理论依据.