目的 研究枸杞植株不同部位中主要化学成分的整体信息和含量差异,综合评价枸杞不同部位的质量和合理应用.方法 以 3 个主产区的枸杞子、枸杞叶和地骨皮药材为研究对象,建立HPLC指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行相似度评价;结合SIMCA 14.1 软件进行主成分分析等;采用分光光度比色法测定枸杞多糖和总黄酮含量;并利用HPLC方法对甜菜碱进行含量测定.结果 枸杞不同部位化学成分的种类和含量均存在明显差异,叶和果实含有更丰富的化学成分,枸杞多糖、总黄酮和甜菜碱的含量均为枸杞叶＞枸杞子＞地骨皮.结论 枸杞叶含有更丰富的营养成分,其药理功能和营养价值可能优于枸杞子.因此,可考虑多产地开发枸杞叶作为枸杞药材来源之一,以促进枸杞资源的多途径、多层次开发利用.

枸杞(Lycium barbarum M.)为茄科枸杞属多年生木本植物,是我国重要的植物药物资源.其全身皆可为药,《本草纲目》:"春采枸杞叶,名天精草;夏采花,名长生草;秋采籽,名枸杞子;冬采根,名地骨皮",其中利用价值最高的是果实枸杞子.《中华人民共和国药典》历次版本明确规定:"入药枸杞为宁夏枸杞的成熟果实".其药用价值历史悠久,早在《神农本草经》言其"久服坚筋骨,轻身不老",中医认为枸杞性平,味甘,归肝、肾、肺经.《中华人民共和国药典》记载枸杞具有滋补肝肾、益精明目的功效,用于治疗虚劳精亏、腰膝酸痛、阳萎遗精等病症[1].传统医学中枸杞在治疗男性不育症中扮演重要角色.

研究杞荷分清饮中12种活性成分(琥珀酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、原儿茶醛、咖啡酸、5-O-阿魏酰奎宁酸、对香豆酸、荷叶碱、槲皮素、齐墩果酸、熊果酸)在正常和糖尿病模型大鼠体内的药动学差异.采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,建立超高效液相色谱-三重四极杆-线性离子阱质谱(UHPLC-QTRAP-MS/MS)方法,同时测定正常大鼠和模型大鼠分别单次灌胃给予杞荷分清饮后血浆中12种成分的含量.结果显示,所建立的分析方法对12种所测定成分线性关系良好,专属性、准确度、精密度、稳定性等方法学均符合要求.采用DAS 3.2.8软件拟合计算药动学参数结果表明,模型组中除咖啡酸、5-O-阿魏酰奎宁酸、齐墩果酸外其余9种成分半衰期时间(t1/2)相对正常组延长;隐绿原酸、对香豆酸、熊果酸、齐墩果酸药时曲线下面积(AUC0-t)模型组相对正常组增加,且平均驻留时间(MRT)延迟;正常组中槲皮素、荷叶碱出现"双峰"现象,模型组未见,提示疾病状态下药物的药动学参数出现明显差异.

目的 研究枸杞叶改善D-半乳糖致亚急性衰老小鼠学习与记忆能力的效应部位与作用机制.方法 建立D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型,制备枸杞叶不同溶剂提取部位,通过Y迷宫实验和新物体识别实验评价枸杞叶不同溶剂提取部位对模型小鼠学习与记忆能力的影响;苏木素-伊红(HE)以及尼氏(Nissl)染色观察小鼠海马区病理形态学变化;酶联免疫吸附法检测小鼠海马组织脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)、胶质细胞源性神经营养因子(Glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)的含量;试剂盒检测小鼠海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活力,丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量;TUNEL法检测小鼠脑组织海马区细胞凋亡情况;蛋白印迹法检测小鼠海马组织抗氧化蛋白Nrf2、HO-1以及凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达.结果 枸杞叶水提部位和80%醇沉上清部位显著改善模型小鼠学习与记忆能力,改善小鼠海马区组织病理损伤,增加小鼠海马区尼氏体数目,并促进神经营养因子BDNF、NGF、GDNF的表达;下调致炎因子TNF-α、IL-1β、IFN-γ的表达,上调抗炎因子IL-10表达;提升SOD活力和GSH表达,降低MDA表达;提高Nrf2、HO-1抗氧化蛋白的表达;降低Caspase-3、Caspase-9凋亡通路蛋白的表达;抑制模型小鼠脑组织海马区细胞凋亡.结论 枸杞叶水提部位和80%醇沉上清部位是枸杞叶改善D-半乳糖致亚急性衰老小鼠学习与记忆能力的效应部位,其作用途径与抑制中枢氧化应激与炎性应激导致的神经元凋亡有关.

目的 分析不同品系及不同成熟度宁夏枸杞叶中多类型资源性化学成分及抗氧化活性差异,为其资源化利用提供依据.方法 采用UPLC-TQ-MS技术对不同成熟度的果用和叶用2 种宁夏枸杞(宁杞7 号、宁杞菜1 号)叶中的黄酮类、酚酸类和生物碱类等 19 种主要化学成分进行分析测定,利用 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)及 2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力、铁离子还原能力评价其抗氧化活性.结果 叶芽和幼叶中各成分含量显著高于嫩叶和成熟叶.果用宁夏枸杞叶中芦丁含量较高,而叶用宁夏枸杞叶中槲皮素-3-O-芸香糖-7-O-葡萄糖苷和甜菜碱含量较高.所有样品均呈现良好的抗氧化性,且随着成熟度增加抗氧化活性均呈现减弱趋势.宁杞菜1 号幼叶的DPPH清除能力最高,叶芽的ABTS自由基清除能力和铁离子还原能力较强,而宁杞 7 号叶芽 3 者均较高.叶用宁夏枸杞叶的抗氧化活性较果用宁夏枸杞叶高.宁夏枸杞叶抗氧化活性与隐绿原酸、5-O-阿魏酰奎宁酸、槲皮素-3-O-芸香糖-7-O-葡萄糖苷、绿原酸、甜菜碱含量呈显著正相关.结论 不同品系不同成熟度宁夏枸杞叶所含资源性成分含量及抗氧化活性差异较大,果用和叶用宁夏枸杞叶芽与幼叶各成分含量均较高且均具有较好的抗氧化活性,具有较高的开发应用价值,叶用宁夏枸杞叶开发应用价值高于果用宁夏枸杞叶.研究结果可为不同品系及不同成熟度宁夏枸杞叶的资源化利用提供参考.

通过室内和田间对比试验,明确薄膜型叶面水分蒸发抑制剂的性能,及其对枸杞光合作用和农药相容增效作用的影响.以蒸发抑制剂和枸杞为实验材料,分别研究了抑制剂的水分蒸发抑制性能,与农药复配的相容性,并利用叶绿素荧光成像系统测定蒸发抑制剂对枸杞叶片光合作用的影响.结果表明,不同叶龄的枸杞叶片采用蒸发抑制剂处理均表现出显著的抑制水分蒸发的效果;与农药良好相容,可有效提高农药药效;对枸杞叶片的叶绿素荧光参数无显著影响.蒸发抑制剂与农药有良好的相容性,具有显著的抑制水分蒸发效果,可使田间农药减量增效.

采用苯酚-硫酸比色法、Folin-Ciocalteu比色法、A1C13显色法测定了枸杞叶、果不同溶剂提取物中活性成分的含量,采用ABTS和DPPH方法分析了枸杞叶、果提取物的抗氧化活性,采用质粒DNA方法研究了抗DNA损伤活性.结果表明:枸杞叶、果不同溶剂提取物中活性成分的含量不同.枸杞叶的抗氧化活性高于枸杞果.枸杞叶、果甲醇提取物的EC50值最低(ABTS:0.69,2.04;DPPH:0.03,0.52),乙醇提取物次之(ABTS:0.70,2.08;DPPH:0.04,0.57),水提物最高(ABTS:0.95,2.08;DPPH:0.05,0.62),说明甲醇提取物具有较强的抗氧化能力.枸杞叶甲醇提取物的DNA保护作用强于枸杞果.多酚和黄酮类化合物可能是枸杞叶、果抗氧化和抗DNA损伤活性的物质基础.本研究为枸杞资源的科学开发和综合利用提供了参考.

植物内生真菌具有产天然活性物质的潜能,亦是天然色素的来源之一,本研究从黑枸杞叶部分离筛选得到产黄色素的内生真菌RML6,经鉴定该菌为Coprinellus radians,该菌株所产黄色素在341 nm波长处有最大吸收峰.从温度、pH、光照、金属离子、氧化剂与还原剂等方面探究黑枸杞内生真菌RML6所产黄色素的稳定性.结果表明该色素在自然光下放置8h黄色素光吸收值无显著变化,但对紫外较为敏感应尽量避光存放;在pH 6～10,20～100℃下不受太大影响;金属离子中,Na+、K+、Mg2+、Cu2、Fe3对该色素有护色或增色作用,Zn2、Mn2、Ca2对色素有明显的影响;H2O2、NaHSO3对该色素有较强的破坏力;常见几种添加剂对色素无太大影响,同时蔗糖对其还具有明显的增色效应.该色素可广泛用于多个用途.

目的 比较研究我国产枸杞属7种3变种和1个培育的新品种枸杞叶中总黄酮含量及其抗氧化活性,为进一步研究枸杞叶抗氧化活性及其开发利用提供科学依据.方法 采用紫外分光光度计测定不同种枸杞叶中总黄酮含量;采用DPPH法测定各枸杞叶总黄酮的抗氧化活性;采用SPSS19.0进行单因素方差分析及相关性分析.结果 我国产枸杞属11种枸杞叶中总黄酮含量除截萼枸杞与黑果枸杞无显著差异外,其他各种枸杞叶间总黄酮存在显著差异;不同种枸杞叶总黄酮清除DPPH自由基的能力不同,即其抗氧化活性不同,且其抗氧化活性与枸杞叶中总黄酮含量呈显著相关.结论 我国产枸杞属叶中总黄酮存在显著差异,该差异由种的不同所引起,并最终影响枸杞叶中总黄酮抗氧化能力,研究结果为进一步研究枸杞叶抗氧化活性及其开发利用提供了科学依据.

枸杞属Lycium L.植物种质资源全世界约80种, 有药用记载的16种, 其中以果实入药的有8种, 以枝叶入药的有11种, 以根入药的有9种.载入《中华人民共和国药典》的仅有宁夏枸杞的果实、根皮和枸杞的根皮, 其余均作为民族药或地方习用品入药.除果实和根皮外, 枸杞叶、花均有药用记载;除作药用外, 枸杞属植物资源也是功能性食品的重要原料.本文结合课题组枸杞研究进展对该类群药用植物资源系统利用现状、潜在资源价值及其产业化前景等进行了系统整理和构建, 目的是为枸杞属药用植物资源产业链延伸和价值提升提供借鉴.