目的:对自制冷冻片微型载体（Strawtop）法与麦管法冷冻保存人微量精液的冻存效果进行系统评价。方法:采用前瞻性研究分析2018年5月1日至2018年6月30日期间于同济大学附属东方医院生殖医学中心行卵胞质内单精子显微注射（ICSI）助孕治疗的患者捐献的部分精液样本，比较自制Strawtop法与麦管法冷冻人精子复苏后的冷冻复苏率、DNA碎片指数（DNA fragmentation index，DFI）、超显微结构和受精能力与胚胎发育情况。结果:Strawtop法冻存人精子的冷冻复苏率（46.8%±17.1%）显著高于麦管法（23.1%±13.7%， P=0.001）；与冷冻前（18.9%±11.6%）相比，麦管法（33.5%±15.0%）冷冻精子复苏后的DFI显著增加（ P=0.019），而Strawtop法冻融人精子的DFI（23.4%±11.7%）与冷冻前相比差异无统计学意义（ P=0.375）；Strawtop法对冷冻精子超显微结构的损伤低于麦管法；Strawtop法冻融精子、麦管法冻融精子和新鲜精子的正常受精率、卵裂率和受精后48 h（第2日）的优质胚胎率差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:Strawtop法冷冻人微量精液冷冻复苏率高于麦管法，复苏精子的损伤较小，且复苏后无需离心洗涤即可直接用于ICSI，具有较高的临床应用价值。

目的:探讨显微外科技术在外伤性睾丸破裂修复手术中的临床疗效和安全性。方法:回顾性分析2018年6月至2022年6月青岛大学附属医院收治的18例因外伤性睾丸破裂行显微镜下睾丸破裂修复术患者的临床资料，所有患者均在全身麻醉下实施阴囊探查术＋显微镜下睾丸破裂修复术。术后3个月复查阴囊彩超、VAS评分、精液分析、血清睾酮、国际勃起功能问卷(IIEF-5)、生育随访等。结果:所有患者均顺利完成显微镜下睾丸破裂修复术，术后均未出现出血、感染等并发症。随访期内均未出现睾丸附睾炎、睾丸坏死、鞘膜积液等并发症，随访期内有2例育龄期患者的配偶自然受孕并顺利妊娠。结论:显微外科技术用于外伤性睾丸破裂修复术安全有效，特别是对于有生育需求的青年男性患者，能够最大限度保留正常睾丸组织，保存男性生育力，推荐临床应用。

目的:分析自体精液保存患者支原体感染现状及其药敏试验，为临床合理用药提供参考。方法:采用横断面调查研究，分析自2013年11月至2020年3月期间于四川大学华西第二医院人类精子库进行自体精液保存的850例患者的临床资料，分析其支原体感染情况及药敏试验。据患者年龄将患者分为13~20岁、21~30岁、31~40岁、41~50岁和>50岁5个年龄段，比较其支原体感染情况；据患者婚姻状况将患者分为已婚及未婚，比较其支原体感染情况。结果:①自体精液保存患者支原体感染例数为167例，阳性率19.65%。各年龄段支原体阳性率差异有显著统计学意义（ P<0.001），其中以>50岁阳性率最高［35.29%（6/17）］，其次为31~40岁年龄段［26.23%（80/307）］，支原体感染率最低的年龄段为13~20岁［2.86%（2/70）］；已婚人群的支原体感染率［23.51%（91/387）］明显高于未婚人群［16.41%（76/463）］（ P=0.009）。②167名支原体阳性患者药敏试验结果显示，对交沙霉素敏感性最高，其次为罗红霉素、阿奇霉素、强力霉素及克拉霉素；对环丙沙星耐药性最高，其次为司帕沙星、左氧氟沙星及氧氟沙星。支原体药敏试验结果提示，对喹诺酮类抗菌药耐药性最强，且不同年份间喹诺酮类抗菌药耐药性差异有统计学意义（ P=0.001）。 结论:自体精液保存患者支原体感染率较高，已婚患者及育龄期患者支原体感染率较高 。建议支原体感染阳性患者进行自体精液保存前应治疗，转阴后再进行精子冻存，临床治疗时应根据药敏试验选择相应的抗生素，避免产生耐药反应。

目的 分析安徽省人类精子库自精保存者的特征,为人类精子库今后开展自精保存工作探索方向.方法 对2019年1月至2023年12月在安徽省人类精子库行自体精子保存人员的基本信息进行回顾性分析.结果 在此期间,安徽省人类精子库一共有424例自精保存者.从地区分布来看,93.40％(396/424)来自安徽省内,其中来自省会合肥约46.46％(197/424);自精保存者年龄范围为15～59(31.08±6.97)岁;从文化程度上来看,66.04％(280/424)的文化程度为大专及以上;职业类型上,23.11％(98/424)人员属机关事业单位或企业职员;从婚育情况看,26.89％(114/424)人员为未婚,89.39％(379/424)为未育;从自精保存原因看,67.45％(286/424)患者是因接受辅助生殖技术治疗而需要保存,15.33％(65/424)因罹患肿瘤须放化疗,其中患睾丸癌、淋巴瘤、白血病、精原细胞瘤等为主要原因;从保存使用情况看,共保存精液1 163支,目前已经有53人使用.结论 总体来看,自精保存人群较少,可利用自精保存者表现出来的特征,有针对性地面向重点人群尤其是肿瘤患者进一步加大宣传力度,让更多有精液保存需求的人群受益.

枸杞(Lycium barbarum M.)为茄科枸杞属多年生木本植物,是我国重要的植物药物资源.其全身皆可为药,《本草纲目》:"春采枸杞叶,名天精草;夏采花,名长生草;秋采籽,名枸杞子;冬采根,名地骨皮",其中利用价值最高的是果实枸杞子.《中华人民共和国药典》历次版本明确规定:"入药枸杞为宁夏枸杞的成熟果实".其药用价值历史悠久,早在《神农本草经》言其"久服坚筋骨,轻身不老",中医认为枸杞性平,味甘,归肝、肾、肺经.《中华人民共和国药典》记载枸杞具有滋补肝肾、益精明目的功效,用于治疗虚劳精亏、腰膝酸痛、阳萎遗精等病症[1].传统医学中枸杞在治疗男性不育症中扮演重要角色.

微量精子样本不仅获取难度大(睾丸/附睾穿刺手术或显微外科取精术)、数目少且质量差,采用传统的冷冻方法还容易导致精子复苏率和回收率低下.为改善微量精子的冷冻保存效果,对现有冷冻保存技术进行了多方面改进,如新研发的多种微量精子冷冻载体在提高活动精子复苏率、精子回收率和操作便利性方面取得了较大进步.抗冻蛋白、卵磷脂、纳米颗粒和抗氧化剂等精子冷冻保护剂辅助因子在一定程度上改善了精子冷冻效果.精子玻璃化冷冻保存技术逐渐展现其发展潜力.综述微量精子冷冻保存技术在冷冻载体、冷冻保护剂和冷冻方案的优化方面的研究进展.

目的 比较精液冷冻前、复苏后精子参数以及精子质膜蛋白磷脂酶C-zeta(Phospholipase C-zeta,PLCζ)表达水平的变化,探究冷冻保存对人类精子PLCζ的损伤作用.方法 选取2022 年2 月—2023 年7 月在本中心进行辅助生殖技术(Assisted reproductive technology,ART)治疗的不育男性患者30 份正常精液标本.将每份精液均分为冻前新鲜组和复苏后冷冻组.比较分析冷冻前、复苏后精子的活力(PR级),存活率和形态变化;密度梯度离心处理两组精液标本,通过免疫荧光和Western blot技术检测精子PLCζ表达水平.结果 与新鲜精子相比,冷冻保存明显降低精子的前向运动精子百分率(31.8%±5.5%)vs(59.3%±7.4%)(P<0.01),精子活动率(38.7%±4.6%)vs(69.07%±6.7%)(P<0.01)和精子存活率(48.2%±6.1%)vs(83.4%±7.2%)(P<0.01),精子正常形态率也发生改变(3.4%±0.7%)vs(12.4%±3.3%)(P<0.01),尾部卷曲的异常形态比例增多;冷冻复苏精子PLCζ荧光免疫反应减弱(33.08±9.74)vs(114.1±12.92)(P<0.01),染色为散在红色点状荧光,且特征性的染色定位缺失;Western blot实验中,精子PLCζ蛋白表达明显减弱.结论 冷冻保存不仅对精子参数有负面影响,同时对精子质膜蛋白PLCζ有损伤作用.

目的 评估精液体外保存温度及保存时长对精子线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)的影响.方法 收集健康男性精液30 份,将每份精液分成14 份,分别为即时测定(1h内)1 份、保存于4℃2 份、室温4 份、37℃4 份,立刻冻存-80℃3 份.室温和37℃保存条件下的精液分别保存2、4、8、24 h,4℃冷藏条件下分别保存1、3 d,-80℃冻存的精液分别保存1、3、7 d,达到保存时间后立刻进行精子MMP分析.结果 在室温和37℃条件下,随保存时间延长精子MMP逐渐降低,与即时测定相比,保存时间 8、24 h精子MMP显著性降低(P<0.01),在4、-80℃条件下,与即时测定相比,保存时间1、3、7 d精子MMP均显著性降低(P<0.01).结论 精液在离体后,保存条件和保存时间是影响精子线粒体功能的重要因素.在室温及 37℃条件下,精液需在 4h之内分析完毕,分析前的室内质量控制对MMP检验结果至关重要.

为提高杂交黄颡鱼[黄颡鱼Tachysurus fulvidraco(♀)×瓦氏黄颡鱼Tachysurus vachelli(♂)]的繁殖效率,文章首先对精子保存液中L-精氨酸(L-Arg)和L-亮氨酸(L-Leu)两种功能性氨基酸的添加进行了研究,以找出最适添加浓度.实验以受精率、孵化率和畸形率为评判指标.结果显示,受精率随着L-精氨酸浓度的等倍增加,呈先升后降的趋势,且均显著高于对照组(P＜0.05).其中以0.50 mmol/L的浓度组最高,而对孵化率和畸形率均无显著影响(P＞0.05).随着L-亮氨酸浓度增加,受精率和孵化率呈先升后降,畸形率呈先降后升的趋势,其中0.80 mmol/L浓度组的受精率、孵化率最高,畸形率最低,且均显著优于对照组(P＜0.05).在两种氨基酸同时添加,当L-精氨酸浓度为0.4 mmol/L,L-亮氨酸浓度为1.0 mmol/L时,受精率、孵化率和畸形率均显著优于对照组(P＜0.05).其次,研究利用计算机辅助精子分析系统(CASA)对精子活力进行检测,结果显示,0.4 mmol/L精氨酸与1.0 mmol/L亮氨酸的单独和同时添加均能显著促进精子活力(P＜0.05).最后,研究开发了一种更适合黄颡鱼人工繁殖的改良型孵化桶,受精率和孵化率显著高于传统孵化桶(P＜0.05),分别提高了 12.13％和20.76％.畸形率显著低于传统孵化桶(P＜0.05),降低了6.42％.研究建立了较高效而便捷的杂交黄颡鱼人工繁殖方法,将有助于促进新品种的推广和加速产业化发展进程.

目的 探究不同的保存方式对开封后体外受精(IVF)实验室试剂潜在胚胎毒性的影响.方法 收集2022年7-10月于广州市妇女儿童医疗中心生殖医学中心常规精液分析且各项参数正常的废弃精子标本18份.将待检测的开封后卵母细胞及胚胎处理液(G-MOPS)、洗精受精液(G-IVF)、卵裂胚培养液(G-1)、囊胚培养液(G-2)试剂每种分为3组,Ⅰ组:取1/3体积待测试剂在无菌条件下分装并用封口胶密封;Ⅱ组:取1/3体积待测试剂在无菌条件下分装不用封口胶密封;Ⅲ组:余下1/3体积待测试剂不分装用封口胶密封,每组6份标本.每种试剂的3组均于4℃保存,在开封时及开封15、30 d时,以质控合格的前一批次G-IVF为对照,所有试剂平衡过夜后进行人精子存活试验(HSMA),72 h后计算并比较精子存活指数.结果 开封时各组试剂的精子存活指数比较差异均无统计学意义(P均＞0.05),且3个时间段每组试剂精子存活指数均＞0.85.开封15d各组试剂的精子存活指数比较:G-1的 Ⅰ 组＞Ⅱ 组[(95.82±0.58)％vs.(94.38±0.64)％],4 种待测试剂 G-MOPS、G-IVF、G-1、G-2 的 Ⅰ 组＞Ⅲ组[(95.75± 0.48)％vs.(93.90±0.74)％、(97.25±0.67)％vs.(95.03±0.58)％、(95.82±0.58)％vs.(92.75±0.86)％、(93.92±0.74)％vs.(91.11±1.15)％],差异均有统计学意义(P均＜0.05).开封30d各组试剂的精子存活指数比较:G-IVF、G-1、G-2的Ⅰ 组＞Ⅱ 组[(97.00±0.61)％vs.(95.72±0.70)％、(95.05±0.81)％vs.(93.33±0.69)％、(93.45±0.67)％vs.(92.22± 0.85)％],4 种待测试剂 G-MOPS、G-IVF、G-1、G-2 的 Ⅰ 组＞Ⅲ组[(94.88±0.83)％vs.(92.90±0.62)％、(97.00±0.61)％vs.(94.18±0.58)％、(95.05±0.81)％vs.(92.10±0.61)％、(93.45±0.67)％vs.(90.32±0.51)％],差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 无论哪组试剂开封后在4℃保存30 d仍无潜在的胚胎毒性.相同时间点,开封后的试剂分装并用封口胶密封的保存效果更好.