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UPLC法测定小柴胡颗粒中柴胡皂苷b1、b2
编辑人员丨3周前
目的 建立UPLC法测定小柴胡颗粒中柴胡皂苷b1、b2.方法 使用Acquity UPLC BHE C18 色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm);流动相:水-乙腈,梯度洗脱;检测波长:254 nm;体积流量:0.3 mL/min;柱温:30℃;进样量3 μL.结果 柴胡皂苷b1、b2 线性范围分别为 0.006~0.374 mg、0.003~0.214 mg,平均回收率分别为 98.97%、99.35%,RSD值分别为 1.82%、1.16%.结论 所建立方法准确、稳定,重现性好,可用于小柴胡颗粒的质量控制和评价.
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编辑人员丨3周前
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北柴胡质量控制研究
编辑人员丨1个月前
目的 对北柴胡质量进行控制.方法 分析采用Venusil XBP C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量 1.0 mL/min;柱温 35℃;检测波长210 nm.建立HPLC指纹图谱,测定柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷D、柴胡皂苷E、柴胡皂苷F、6″-O-乙酰基柴胡皂苷A 的含量,进行主成分分析.结果 12 批药材指纹图谱中有 13 个共有峰,相似度 0.970~0.995.7 种成分在各自范围内线性关系良好(R2≥0.999 8),平均加样回收率 90.75%~100.91%,RSD 1.6%~4.0%.内蒙古、山西产药材中各成分含量接近.结论 该方法精密、准确、稳定,可用于北柴胡质量评价.
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编辑人员丨1个月前
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基于TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路探讨柴胡皂苷B2对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响
编辑人员丨2024/7/27
目的 探讨柴胡皂苷B2对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响.方法 大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、依那普利(10mg/kg)组和柴胡皂苷B2低、中、高剂量组(5、10、20 mg/kg),每组12只.除假手术组外,其余5组建立单侧输尿管梗阻(UUO)模型,各组灌胃给予相应药物,每天1次,连续给药2周.全自动生化分析仪检测大鼠血清中血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平,ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-1β水平,Masson染色观察大鼠肾组织病理学变化,试剂盒检测大鼠肾组织中肾上腺髓质素(ADM)水平,免疫组化法检测大鼠肾组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、转化生长因子-β1(TGF-β1)阳性表达,Western blot法检测大鼠肾组织中TLR4、NF-κB、p-NF-κB、NLRP3蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠肾组织可见肾小管扩张,上皮细胞出现部分空泡化,肾间质内大量炎性细胞浸润、纤维细胞生成及胶原纤维沉积,血清BUN、Scr、TNF-α、IL-1β水平、肾组织TGF-β1阳性表达、TLR4、p-NF-κB/NF-κB、NLRP3蛋白表达升高(P<0.05),肾组织ADM水平、E-cadherin阳性表达降低(P<0.05);与模型组比较,柴胡皂苷B2各剂量组大鼠肾脏病变逐渐减轻,血清BUN、Scr、TNF-α、IL-1β水平,肾组织TGF-β1阳性表达,TLR4、p-NF-κB/NF-κB、NLRP3蛋白表达均降低(P<0.05),肾组织ADM水平、E-cadherin阳性表达均升高(P<0.05);与柴胡皂苷B2高剂量组比较,依那普利组上述指标无明显变化(P>0.05).结论 柴胡皂苷B2能够缓解UUO大鼠肾间质纤维化,改善肾功能和炎症反应,可能与抑制TLR4/NF-KB/NLRP3信号通路的表达有关.
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编辑人员丨2024/7/27
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消核糖浆的指纹图谱及含量测定研究
编辑人员丨2024/7/20
目的 建立消核糖浆的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并测定其中10个有效成分的含量.方法 以12批消核糖浆为对象,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法,以Athena C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm.色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)》建立消核糖浆指纹图谱并进行相似度评价.采用ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,以0.01%甲酸乙腈-0.01%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,结合高分辨质谱仪,以电喷雾离子源进行正负离子扫描,测定12批消核糖浆中各主要成分的含量.结果 12批样品共标定33个共有峰,相似度均大于0.97;确认其中10个色谱峰,分别为王不留行黄酮苷、芍药苷、阿魏酸、柚皮苷、迷迭香酸、新橙皮苷、丹酚酸B、延胡索乙素、柴胡皂苷A、柴胡皂苷D;含量测定结果显示,上述10个成分在各自的质量浓度范围内线性关系良好(R 2>0.999),其含量分别为0.35~0.64、3.15~5.61、0.11~0.17、1.68~3.17、1.59~1.90、1.15~1.64、0.78~1.48、0.11~0.26、0.06~0.13、0.33~0.61 mg/mL.结论 12批消核糖浆的主要成分相似但含量有所差异;本研究建立的HPLC指纹图谱和UPLC-MS/MS含量测定方法可用于消核糖浆的全面质量评价.
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编辑人员丨2024/7/20
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小花清风藤中三萜类成分的研究
编辑人员丨2024/3/30
目的:对小花清风藤Sabia parviflora Wall.ex Roxb.的化学成分进行研究.方法:采用硅胶柱、Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶、制备HPLC等色谱方法,对小花清风藤中的化学成分进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构.结果:从小花清风藤茎叶的醇提物中分离得到 15 个三萜类化合物,分别鉴定为:3β-羟基-Δ11,13(18)-齐墩果二烯(1)、3-氧-11α-羟基,Δ12-齐墩果烯(2)、3β-羟基-Δ9(11),12-齐墩果二烯(3)、3-氧-Δ11,13(18)-齐墩果二烯(4)、3α-羟基-齐墩果酸甲酯(5)、3-氧-Δ9(11),12-齐墩果二烯(6)、3α,21β-二羟基,Δ12-齐墩果烯(7)、2α,3α-二羟基-12-烯-28-乌苏酸(8)、马斯里酸(9)、积雪草酸(10)、2α-羟基乌苏酸(11)、23-羟基乌苏酸(12)、柴胡皂苷 b3(13)、柴胡皂苷c(14)、柴胡皂苷f(15).结论:除化合物 5 以外,其他化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物 7~15 为首次从该属植物中分离得到.
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编辑人员丨2024/3/30
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基于细胞代谢组学的柴胡皂苷b2对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用研究
编辑人员丨2024/3/16
目的 研究柴胡皂苷b2(SSb2)对皮质酮(CORT)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制.方法 ①将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),CORT(100~800 μmol·L-1孵育24h)组和SSb2(1.5625,3.125,6.25,12.5,25,50和100 μmol·L-1孵育24h)组,MTT法检测细胞存活率.②将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24h),模型组(CORT 400 μmol·L-1 孵育24h)和模型+SSb2组(SSb2 1.5625,3.125,6.25,12.5和25 μmol·L-1预处理3h,去上清,然后加入CORT 400 μmol·L-1及对应浓度SSb2共孵育24 h).MTT法检测细胞存活率,微板法检测PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率.③将细胞分为细胞对照组、模型组和模型+SSb2 12.5 μmol·L-1组,采用AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)的代谢组学技术检测PC12细胞代谢轮廓变化;比色法检测谷氨酸含量和谷氨酰胺酶活性.结果 ①与细胞对照组相比,当CORT浓度为400 μmol·L-1时,细胞存活率降低至(55±6)%(P<0.01);SSb2浓度>50 μmol·L-1时,对PC12细胞有显著的细胞毒性(P<0.01).②与细胞对照组相比,模型组细胞存活率显著降低(P<0.01),LDH释放率显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2各浓度组细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.01),LDH释放率显著降低(P<0.01).③与细胞对照组相比,模型组细胞凋亡率显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2组细胞凋亡率显著降低(P<0.05).代谢组学结果表明,SSb2能显著回调谷氨酸、肌酸、N-乙酰天冬氨酸、L-酪氨酸、柠檬酸、L-异亮氨酸、乳酸、谷氨酰胺和胆碱9个差异代谢物.对SSb2调控的关键代谢物进一步富集分析表明,SSb2主要影响5条代谢通路,即D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,酪氨酸代谢和精氨酸生物合成.与细胞对照组相比,模型组谷氨酸含量和谷氨酰胺酶活性显著降低(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2组细胞谷氨酸含量(P<0.01)和谷氨酰胺酶活性显著升高(P<0.05).结论 SSb2对CORT诱导的PC12细胞损伤具有神经保护作用,其机制与抑制细胞凋亡和调节代谢紊乱有关.
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编辑人员丨2024/3/16
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北柴胡饮片及其配方颗粒的指纹图谱建立和化学模式识别
编辑人员丨2024/2/3
采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法,依据"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)"建立北柴胡饮片和北柴胡配方颗粒的指纹图谱,并进行相似度评价,确定共有特征峰.采用SPSS 22.0和SIMCA14.1软件进行聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析,筛选影响饮片和配方颗粒质量的差异性成分.结果显示,10批北柴胡饮片有24个共有峰,相似度均不低于0.985;20批北柴胡配方颗粒有16个共有峰,相似度在0.858~0.998.共指认了 6个共有峰,分别为柴胡皂苷c(峰6)、柴胡皂苷f(峰7)、柴胡皂苷a(峰9)、柴胡皂苷d(峰18)、柴胡皂苷b2(峰28)、柴胡皂苷b1(峰29).聚类分析和主成分分析结果一致,北柴胡饮片和北柴胡配方颗粒各为一类,有16个峰的变量重要性投影(VIP)值大于1,可能是二者的差异性物质.建立的指纹图谱法简便可行、重复性好,可用于评价北柴胡饮片和北柴胡配方颗粒的质量.
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编辑人员丨2024/2/3
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酒炙对柴胡总黄酮以及皂苷类成分的影响
编辑人员丨2024/1/13
目的 比较柴胡酒炙前后的总黄酮和皂苷类成分质量分数的变化.方法 运用紫外可见分光光度法(UV-Vis法)测定生柴胡和酒柴胡饮片中总黄酮的质量分数;运用高效液相色谱法(HPLC)测定生柴胡和酒柴胡饮片中柴胡皂苷a(SSa)、柴胡皂苷b1(SSb1)、柴胡皂苷b2(SSb2)和柴胡皂苷d(SSd)的质量分数;运用单因素方差分析判断2种柴胡中总黄酮和各皂苷类成分之间差异是否有统计学意义以及差异结果.结果 柴胡酒炙后,总黄酮的质量分数升高;炮制后SSa、SSd的质量分数降低,SSb1、SSb2质量分数大大增加.结论 酒炙法可增加柴胡中总黄酮、SSb1、SSb2的质量分数,减少SSa和SSd的质量分数.
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编辑人员丨2024/1/13
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基于UPLC-Q-TOF/MS及CORT诱导的低分化PC12抑郁细胞模型的柴胡抗抑郁活性成分研究
编辑人员丨2024/1/13
目的 分析鉴定柴胡水提物中的化学成分,探究柴胡抗抑郁活性成分.方法 利用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)分析鉴定柴胡水提物中的化学成分.采用皮质酮(CORT)诱导低分化PC12抑郁细胞模型,给予柴胡单体成分预处理PC12细胞24 h,利用CCK-8试剂盒检测细胞活力;利用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞LDH释放率.结果 共鉴定出53个化学成分,主要为Ⅰ型、Ⅱ型及Ⅲ型柴胡皂苷类成分.其中,柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷E、柴胡皂苷F和6″-O-乙酰基柴胡皂苷A对柴胡代谢轮廓的贡献度最大,并可增强CORT诱导PC12细胞活力(P<0.05、P<0.01);柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷E、柴胡皂苷F可降低CORT诱导PC12细胞LDH释放率(P<0.05、P<0.01).结论 柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷E、柴胡皂苷F可能为柴胡抗抑郁的主要活性成分,为柴胡质量控制及药效物质基础研究提供依据.
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编辑人员丨2024/1/13
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柴胡皂苷b2对肝癌细胞增殖的影响及机制
编辑人员丨2023/12/30
目的 研究柴胡皂苷b2(SSb2)对肝癌细胞增殖的影响,并进一步探讨柴胡皂苷b2抑制肝细胞癌发生发展的分子机制.方法 将细胞分为空白对照组(NC)、SSb2 组、沉默信息调节因子 6(SIRT6)si-RNA 组(si-SIRT6)、si-SIRT6+SSb2组,NC组与SSb2组分别加入含阴性质粒的转染溶液,si-SIRT6组和si-SIRT6+SSb2组加入含si-SIRT6质粒的转染溶液,转染24 h后,SSb2组和si-SIRT6+SSb2组加入80 mg·L-1的SSb2,各组继续转染24 h.检测各组HepG2细胞中腺苷三磷酸(ATP)含量、细胞上清液中葡萄糖以及乳酸的含量,用蛋白质印迹法检测HepG2细胞中SIRT6、缺氧诱导因子1α(HIF1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的表达水平变化.结果 NC组、SSb2组、si-SIRT6组和si-SIRT6+SSb2 组细胞的 ATP 含量分别为(36.81±2.42)、(26.22±2.09)、(74.16±2.65)和(33.95±2.00)μmol·gprot-1,葡萄糖摄取量分别为(1.41±0.07)、(0.49±0.05)、(1.86±0.10)和(1.06±0.12)mmol·L-1,乳酸生成量分别为(7.09±0.30)、(4.13±0.25)、(11.49±0.68)和(5.76±0.27)mmol·L-1,SIRT6 蛋白相对表达水平分别为 0.29±0.06、0.70±0.06、0.06±0.03和0.17±0.04,HIF1α蛋白相对表达水平分别为0.18±0.03、0.06±0.03、0.44±0.04和0.22±0.04,GLUT1蛋白相对表达水平分别为0.63±0.05、0.30±0.09、1.34±0.12 和 0.51±0.09.上述指标,SSb2 组与 NC比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);si-SIRT6组与NC比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);si-SIRT6+SSb2组与SSb2组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 SSb2在体外可以抑制肝癌细胞的增殖,其作用可能是通过调控SIRT6介导的糖代谢通路实现的.
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编辑人员丨2023/12/30
