目的 建立呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)融合前F蛋白(prefusion F protein,pre-F)三聚体定量检测方法,并对其进行方法学验证和初步应用.方法 选取RSV pre-F三聚体特异性抗体AM14 作为捕获抗体,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的RSV pre-F特异性抗体D25 作为检测抗体,通过方阵滴定法确定捕获抗体和检测抗体的最佳浓度,对封闭液进行优化,建立双抗体夹心ELISA.分别对该方法的专属性、准确度、精密度和耐用性进行验证,并应用于RSV亚单位疫苗工艺开发中pre-F三聚体的定量检测.结果 该方法确定的捕获抗体AM14 包被浓度为 1.25 μg/mL,检测抗体D25 浓度为0.50 μg/mL,封闭液为1%牛血清白蛋白(bo-vine serum albumin,BSA).方法验证结果显示,线性范围为 1.50～24.00 ng/mL,标准曲线R2>0.99,最低检测限可达1.33 ng/mL;该方法专属性良好,仅与RSV pre-F三聚体反应;准确度和精密度验证结果显示回收率为 87.41%～117.03%,变异系数(coefficient of variation,CV)为 5.47%～14.07%;检测抗体孵育时间及显色时间在一定范围内波动时,回收率在 87.65%～106.45%,证明该方法耐用性优良;该方法可应用于RSV pre-F发酵和纯化等样品的检测.结论 成功建立并验证RSV pre-F三聚体定量检测方法,该方法专属性强,准确度、精密度、耐用性均优良,可应用于RSV疫苗工艺开发中pre-F三聚体的定量检测,无需Octet或者Biacore等精密仪器,具有操作简单、定量准确、成本低、便于推广应用等优点.

目的:探讨CD163在颅内动脉瘤组织和患者血液中表达特征及其作为颅内动脉瘤早期临床筛查指标的可行性。方法:选择新疆医科大学第一附属医院神经外二科自2021年1月至2023年11月收治的28例颅内动脉瘤患者（颅内动脉瘤组），另外选择同期健康管理中心的28例健康体检者作为对照组。收集颅内动脉瘤组中行颅内动脉瘤夹闭手术患者的8份囊性动脉瘤组织和12份颞浅动脉组织样本，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测动脉瘤组织、颞浅动脉组织中 CD163 mRNA的表达。采用RT-qPCR检测2组受试者血液中 CD163 mRNA的表达。按随机数字表法选取7例颅内动脉瘤患者、7例对照组受试者，采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测其血浆中CD163蛋白的含量。采用多因素Logistic回归分析颅内动脉瘤发生的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血液中 CD163 mRNA表达、血浆中CD163蛋白含量对颅内动脉瘤的诊断价值。 结果:颅内动脉瘤组织中 CD163 mRNA表达水平高于颞浅动脉组织（41.870±20.355 vs. 6.080±5.444），差异有统计学意义（ P<0.05）。颅内动脉瘤组患者血液中 CD163 mRNA表达水平高于对照组[1.969（1.124，2.318） vs. 1.124（0.933，1.379）]，差异有统计学意义（ P<0.05）。破裂颅内动脉瘤组、未破裂颅内动脉瘤组、对照组受试者血液中 CD163 mRNA的表达逐渐下降，差异均有统计学意义（ P<0.05）。女性、男性颅内动脉瘤患者血液中 CD163 mRNA的表达差异无统计学意义（ P>0.05）；ELISA检测显示，颅内动脉瘤组患者血浆中CD163蛋白含量高于对照组[（10.537±1.879） ng/L vs. （8.598±0.885） ng/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示年龄（ OR=0.844，95% CI：0.750~0.951， P=0.005）、血液中 CD163 mRNA的表达（ OR=0.111，95% CI：0.024~0.506， P=0.004）是颅内动脉瘤发生的独立影响因素。ROC曲线分析结果显示，血液中 CD163 mRNA的表达诊断颅内动脉瘤的AUC为0.759（95% CI：0.618~0.890， P=0.002）。血浆中CD163蛋白含量诊断颅内动脉瘤的AUC为0.864（95% CI：0.610~1.000， P=0.035）。 结论:颅内动脉瘤组织及患者血液中 CD163 mRNA、患者血浆中CD163蛋白的表达较高。血液中 CD163 mRNA的表达是颅内动脉瘤发生的独立危险因素，血浆中CD163蛋白可作为筛选颅内动脉瘤的分子标记物。

目的:设计基于磁示踪技术、用于结直肠肿瘤标记定位的磁体，通过动物实验验证其可行性和安全性。方法:用于结直肠肿瘤标记定位的磁体包括示踪磁体和寻踪磁体两部分，均为圆环状钕铁硼磁体。以8只健康Beagle犬为动物模型，结肠镜下假定结直肠不同部位为肿瘤位置，利用内镜下软组织夹将示踪磁体送至假定的肿瘤附近，并钳夹固定于肿瘤附近的肠壁。24 h后行腹腔镜手术，经主操作孔置入寻踪磁体于待切除的结直肠附近，寻踪磁体与示踪磁体相吸，从而完成腹腔镜下手术时对肿瘤位置的定位和识别。结果:成功设计并加工了示踪磁体与寻踪磁体，均采用N45烧结钕铁硼加工而成，表面镍镀层，示踪磁体与寻踪磁体在零距离时的吸力为16 N。8只Beagle犬均顺利接受结肠镜下示踪磁体的留置，24 h后均未出现示踪磁体脱落、移位等。腹腔镜下置入寻踪磁体后，两个磁体迅速精准相吸，顺利完成对肿瘤所在部位的定位，术中未出现任何副损伤。结论:基于磁示踪技术的结肠镜联合腹腔镜结直肠肿瘤定位操作简单、定位准确、安全可行。

目的:了解中国乳腺癌新辅助治疗的现状，为未来乳腺癌的诊疗规范改进提供参考依据。方法:2018年7月到2018年9月对110家乳腺癌年手术量超过200例的医院进行问卷调查，内容包括新辅助治疗患者的肿瘤分期和分子分型、治疗方案、疗效评估及相关手术操作的开展等。结果:110家医院均已开展乳腺癌的新辅助治疗，2017年共行新辅助治疗14 550例，占手术治疗乳腺癌患者的17.0%。行新辅助治疗的乳腺癌患者中Ⅱ期患者占比<30%的医院有81家；Ⅲ期患者占比>50%的医院有84家。新辅助治疗患者中，雌激素受体(ER)阳性人表皮生长因子受体2(HER-2)阴性3 550例(24.4%)，HER-2阳性6 024例(41.4%)，三阴性4 991例(34.3%)。影响新辅助治疗开展的主要原因是"患者对延迟手术存在顾虑"和"患者通过新辅助治疗后的保乳意愿不强"。53.6%的医院最常用的新辅助治疗方案为蒽环类药物续贯紫杉类药物，42.7%的医院首选蒽环类药物联合紫杉类药物。对于HER-2阳性患者，80.9%的医院会推荐含靶向治疗的新辅助治疗方案。37.3%的医院将MRI用于新辅助治疗疗效评估的使用率在20%以下，而42.7%的医院在50%以上。将反复划线、纹身及金属夹植入分别作为新辅助治疗患者肿瘤原发灶及淋巴结首选标记方法的医院分别占60.0%、29.1%和10.9%。87.3%的医院新辅助治疗后患者保乳率低于20%。结论:乳腺癌的新辅助治疗已在中国大部分医院开展，然而新辅助治疗在可手术乳腺癌中的占比仍然偏低。乳腺癌通过新辅助治疗以完成手术降阶梯的观念未得到广泛推广，新辅助治疗疗效评价手段有待进一步规范。

目的:探讨宣白承气汤加味结合西医常规疗法对急性脑梗死昏迷患者促醒作用的影响。方法:将符合入选标准的2019年3月-2020年1月淮北市中医医院急性脑梗死昏迷患者72例，按随机数字表分为2组，每组36例。对照组采用西医常规疗法治疗，治疗组在对照组基础上结合宣白承气汤加味鼻饲给药。2组均治疗7 d。采用美国国立卫生研究院卒中量表（National Institutes of Health Stroke Scale, NIHSS）评估神经功能缺损程度，采用全面无反应性量表（Full Outline of Unresponsiveness Scale, FOUR）评估意识障碍程度，行头颅CT三维重建识别并标记水肿区域，采用双抗夹心ELISA法测定血清高敏C反应蛋白（hs-CRP)、同型半胱氨酸（Hcy )、内皮素-1(ET-1)水平，观察治疗期间的不良反应，评价临床疗效。结果:治疗组总有效率为100% (36/36)、对照组为86.1%(35/36) ，2组比较差异有统计学意义( Z＝-0.242 ， P＝0.015)。治疗组治疗后第3、7天NIHSS评分低于对照组( t值分别为26.567、17.982， P值均<0.001) ；治疗组治疗后3 d( t＝15.235、14.892、18.452、11.232、16.235)、治疗后7 d ( t＝19.568、16.232、10.356、9.546、11.098)睁眼反应、运动反应、脑干反射、呼吸节律评分及总分均高于对照组( P <0.01)。治疗组治疗后血清hs-CRP、Hcy、ET-1水平及脑水肿CT阈值均低于对照组( t值分别为22.352、17.789、11.908、19.652， P值均<0.001)。2组治疗过程中未见药物不良反应。 结论:宣白承气汤加味结合西医常规疗法可改善急性脑梗死昏迷患者的神经功能，促进觉醒，作用机制可能与降低hs-CRP、Hcy、ET-1水平，改善微循环、减轻脑水肿有关。

回顾性分析2016年10月至2019年7月浙江省人民医院收治的因内镜黏膜下剥离术(ESD)术后未达治愈标准而行补救性完全腹腔镜胃癌根治术5例患者的临床资料。5例ESD患者中有2例病灶切除不完整，2例病灶完整切除、病理切缘阳性，1例病灶剥除过程中发现胃外血管搏动，切除部分病灶后终止手术。手术方式：1例行根治性全胃切除术，4例行远端胃癌根治术，均无中转开腹。术后病理检查结果：1例肿瘤侵犯固有肌层，1例肿瘤侵犯黏膜肌层，1例肿瘤位于黏膜层内，2例为重度异型增生，术后均未发现淋巴结转移。患者均无手术相关并发症。腹腔镜补救性胃癌根治性切除术是非治愈性ESD后一种安全有效、微创的补救治疗方式。ESD治疗后未达治愈标准患者的病灶小，术中定位困难。术前用钛夹标记＋CT重建准确定位有助于精准行胃癌根治性切除。

影像学技术引导的可视化经皮穿刺乳腺组织定位标记夹（乳腺Marker）置入，主要用于乳腺癌病灶及腋窝转移淋巴结的精准标记定位，迄今国内外尚缺乏临床应用指南可循。中华医学会外科学分会乳腺外科学组基于临床实践总结和文献复习，对乳腺Marker的临床应用指征、关键置入操作流程与评估、并发症预防与处理等提出建议，以期推动乳腺Marker的安全和规范应用。

目的:探讨应用3D打印技术辅助设计游离皮瓣修复虎口挛缩松解术后软组织缺损的临床疗效。方法:2018年3月至2023年6月,苏州瑞华骨科医院手外科收治10例虎口挛缩患者,其中男6例,女4例,平均年龄34.4（16～52）岁。损伤原因：重物碾压伤6例,机器绞伤3例,滚筒挤压伤1例。虎口角为(20.5±4.5)°,虎口宽度为(2.2±0.2) cm。术前通过手持3D扫描仪获得健侧虎口的三维立体图像,应用Mimics软件虚拟手术辅助设计系统的镜像技术和体表标志切口线，先于患侧画出实际切口线，根据体表标记于健侧画出对应的切口线，扫描健侧后再镜像出患侧虎口开大后的图像，再3D打印出模型。皮瓣宽度小于4.0 cm（6例）采用小腿穿支皮瓣修复,其中腓浅动脉穿支皮瓣5例,腓肠内侧动脉穿支皮瓣1例；宽度大于4.0 cm（4例）采用股前外侧穿支皮瓣(ALTPF)修复。切取皮瓣的面积3.7 cm×2.5 cm～16.0 cm×9.0 cm,皮瓣供区均直接缝合。术后采用医用高分子夹板固定拇指于外展、对掌位2周,并定期来院门诊随访,观察皮瓣的成活情况和拇指的感觉、功能恢复情况。结果:术中10例皮瓣均按术前设计切取,切取顺利,切取的皮瓣符合虎口创面。术后10例皮瓣均顺利成活,外形满意,术后随访5～24个月,平均11个月,患侧虎口外形明显改善,2例皮瓣恢复保护性感觉,其余8例皮瓣TPD为8～14 mm,虎口角为(85.2±3.5)°,虎口宽度为(5.8±0.6) cm,拇对掌、对指及内收、外展活动良好,皮瓣供区瘢痕轻微。结论:应用3D打印技术可准确设计皮瓣修复虎口挛缩松解术后软组织缺损创面,个性化选择合适的游离皮瓣,能恢复良好的虎口外形及功能。

患者女性，74岁，身高150 cm，体质指数为20.89 kg/m 2。因“间断腹泻1年”于当地医院行肠镜检查发现直肠肿物，并在结肠镜下行内镜下黏膜切除术，术后病理提示直肠腺癌。直肠指诊：胸膝位，2点钟方向距肛缘约4 cm可触及2枚止血夹。患者及家属具有强烈保肛意愿，同意接受机器人经肛微创手术（robotic transanal minimally invasive surgery，robotic TaMIS）术，并签署手术同意书。手术方法：右侧卧位，硬性直肠镜检查确定病变位置，碘伏消毒直肠腔。扩肛至4指，置入自制肛门微创操作平台，置入机器人专用Trocar，连接CO 2建立气腔，维持气腔压力在8~12 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）。将Da Vinci机器人置于患者左侧，连接机器人镜头、1号臂、2号臂。另置入一12 mm Trocar以供助手使用。应用单极电剪刀沿肿瘤周边0.5~1 cm标记切除范围。从肿瘤一侧垂直切开黏膜，直至见到直肠壁外组织，完整切除病变。3-0可吸收线连续缝合创面。手术顺利，手术总用时约80 min，其中手术平台的建立与机器人连接过程（Docking）用时60 min，手术操作20 min，术中出血5 ml，经肛门取出肿瘤组织并将其固定在带有指示的纸板上，做好切缘（上、下、左、右）的定位标记。麻醉清醒后患者即下床活动并进食流质饮食，术后恢复顺利，无腹痛、腹胀，无盆腔、肛周感染、腹腔出血、肠梗阻等并发症，术后第2天出院。术后病理：（直肠癌内镜切除术后）结直肠黏膜组织，局部急、慢性炎性细胞浸润，肉芽肿组织增生，固有层小血管增生、扩张及充血、淤血，未见明确残存肿瘤。目前已完成术后第1周、第2周、第4周的电话随访，患者无便血、排粪困难或排粪次数增多等。

目的:探索胃食管结合部腺癌(AEG)术前放疗，胃充盈状态与肿瘤分次内动度和分次间动度的关系。方法:前瞻性纳入2018—2019年间行全新辅助治疗的10例局部晚期AEG患者，均于治疗前在胃镜下标记肿瘤上下界，共获20枚钛夹。全部患者均在定位及治疗期间行空腹和充盈两种状态下的4DCT扫描，每次扫描均由系统自动重建出0%～90%呼吸时相的10套图像，每个患者可获得100套图像。结果:胃充盈状态并不显著影响肿瘤近胸端的分次内动度与分次间动度，而在肿瘤远胸端，空腹状态下头脚方向的分次间动度较充盈状态下更大[(6.22±4.67) mm∶(4.13±3.68) mm， P＝0.013]。为保证AEG的近胸端在放疗期间90%的CTV累积剂量接受95%处方剂量，口服300 ml半流质后胃充盈状态下建议左右、腹背、头脚方向分别外放9、8.5、12.1 mm。另纳入有近胸端钛夹的6例AEG术前放疗患者作为验证组，显示治疗期间93%的钛夹在外扩范围内。 结论:对于AEG的术前放疗，也可考虑定量充盈胃的方式完成放疗。