目的:探讨miR-758-3p在非小细胞肺癌(NSCLC)中的生物学功能及其作用机制。方法:采用脂质体法转染miR-758-3p模拟物(miR-758-3p模拟物组)、miRNA对照(对照组)、核仁纺锤体相关蛋白1(NUSAP1)过表达质粒(NUSAP1过表达组)、miR-758-3p模拟物＋NUSAP1(miR-758-3p模拟物＋NUSAP1组)至人NSCLC细胞系A549细胞中。采用CCK-8法和Transwell小室法检测A549细胞增殖、迁移和侵袭能力，结合生物信息学预测网站和双荧光素酶报告基因实验验证miR-758-3p及其靶基因的靶向关系。结果:转染24 h后，miR-758-3p模拟物组和对照组A549细胞中miR-758-3p基因的相对表达水平分别为3.02±0.16和1.00±0.08，NUSAP1基因的相对表达水平分别为0.04±0.02和1.00±0.03，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。转染72 h后，miR-758-3p模拟物组和对照组细胞的吸光度值分别为0.78±0.06和1.15±0.06，差异有统计学意义( P<0.05)。miR-758-3p模拟物组细胞的迁移数和侵袭数分别为[(119.04±11.49)个]和[(71.33±5.36)个]，均低于对照组[分别为(271.38±19.05)个和(164.30±8.11)个；均 P<0.05]。miR-758-3p模拟物转染野生型NUSAP1报告基因的荧光素酶活性(0.37±0.04)低于对照组(1.00±0.03， P<0.05)。突变型NUSAP1报告基因和对照组的荧光素酶活性分别为0.96±0.02和0.95±0.02，差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:miR-758-3p通过调控NUSAP1基因的表达抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭。

目的:探讨核仁纺锤体相关蛋白1 (NUSAP1)在肺癌中的作用及其相关机制。方法:利用小RNA干扰技术敲低肺癌细胞系A549中NUSAP1的表达。采用CCK－8、Transwell法和流式细胞术检测细胞增殖、迁移和侵袭以及细胞凋亡的情况，采用Western blot检测凋亡相关基因和AKT/mTOR信号通路相关蛋白。结果:与阴性对照组比较，敲低NUSAP1表达后，A549细胞的吸光度( A)值降低(分别为1.724±0.067和0.610±0.058， P<0.05)，细胞迁移数降低[分别为(272.464±36.232)个和(178.267±14.780)个， P<0.05]，细胞侵袭数目降低[分别为(120.585±13.235)个和(73.527±6.617)个， P<0.05]，而细胞凋亡率明显增加[分别为(3.572±0.214)%和(11.358±1.047)%， P<0.05]，抗凋亡蛋白Bcl－2表达量下降，凋亡相关蛋白Bax和active caspase3表达量上升(均 P<0.05)。同时，干扰NUSAP1表达后，A549细胞中AKT和mTOR的磷酸化水平受到显著抑制，细胞增殖相关蛋白P70表达水平降低(均 P<0.05)。 结论:敲低NUSAP1的表达，通过抑制AKT/mTOR信号通路抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，促进肿瘤细胞凋亡，进而发挥抑制肺癌的作用。

目的 探讨子宫内膜样腺癌(EA)组织核仁纺锤体相关蛋白1(NuSAP1)、线粒体融合蛋白2(MFN2)表达与临床病理特征和预后的关系.方法 选取2019年3月至2020年10月南阳市第一人民医院收治的121例EA患者作为研究对象,应用免疫组织化学染色法检测患者癌组织及其对应癌旁组织NuSAP1、MFN2阳性表达率,分析癌组织NuSAP1、MFN2阳性表达率与患者临床病理特征的关系.出院后随访3年,完成随访112例,应用Kaplan-Meier生存曲线分析NuSAP1、MFN2 阳性表达组和阴性表达组的预后差异,应用多因素COX回归分析EA患者预后的影响因素.结果 EA癌组织NuSAP1阳性表达率为72.37%,明显高于癌旁组织的35.54%,MFN2阳性表达率为38.02%,明显低于癌旁组织的80.17%,差异均有统计学意义(P<0.05);国际妇产科联盟(FIGO)临床分期Ⅱ～Ⅲ期、中低分化、有淋巴结转移、深肌层浸润癌组织中NuSAP1阳性表达率分别为88.68%、83.54%、96.15%、90.63%,明显高于FIGO临床分期Ⅰ期的60.29%、高分化的57.14%、无淋巴结转移的55.79%、浅肌层浸润癌组织的66.29%,差异均有统计学意义(P<0.05);FIGO临床分期Ⅱ～Ⅲ期、中低分化、有淋巴结转移、深肌层浸润癌组织中MFN2阳性表达率分别为18.87%、30.38%、7.69%、15.63%,明显低于FIGO临床分期Ⅰ期的52.94%、高分化的52.38%、无淋巴结转移的46.32%、浅肌层浸润癌组织的46.07%,差异均有统计学意义(P<0.05);Kaplan-Meier法分析结果显示,NuSAP1阴性表达组和MFN2 阳性表达组患者的3年生存率分别为90.00%和87.80%,明显高于NuSAP1阳性表达组的69.51%和MFN2阴性表达组的67.61%,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 EA患者组织中NuSAP1阳性表达率升高,MFN2阳性表达率降低,NuSAP1、MFN2表达水平与患者肿瘤分化、FIGO临床分期、淋巴结转移及深肌层浸润有关,且是患者死亡的危险因素,提示NuSAP1、MFN2可能参与了EA患者的疾病进展.

核仁纺锤体相关蛋白质1(nucleolar and spindle-associated protein 1,NUSAP1)是一种微管结合蛋白,参与调节有丝分裂纺锤体微管的形成.NUSAP1在多种恶性肿瘤中高度表达,并与恶性肿瘤的发生与发展密切相关,有望作为一种新的生物标志物应用于肿瘤的临床诊断、治疗及预后评估,针对NUSAP1 的靶向治疗方式可能成为治疗恶性肿瘤的新策略.本文主要对NUSAP1 的生物学特征及与恶性肿瘤的发生发展关系进行综述,旨在为肿瘤诊断及治疗提供新的研究思路.

目的 探讨食管癌组织微小核糖核酸-758-3p(miR-758-3p)、核仁纺锤体相关蛋白1(NUSAP1)表达变化及其与临床病理特征和预后的关系.方法 选择食管癌患者97例,取手术切除的食管癌组织及其癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR法检测miR-758-3p、NUSAP1 mRNA表达.通过TargetScan数据库预测miR-758-3p与NUSAP1的结合位点,分析食管癌组织miR-758-3p表达与NUSAP1 mRNA表达的关系以及二者表达与临床病理特征和预后的关系.结果 与癌旁正常组织比较,食管癌组织miR-758-3p相对表达量降低,NUSAP1 mRNA相对表达量升高(t分别为23.037、25.253,P均<0.05).经TargetScan数据库预测,NUSAP1基因3′非翻译区583～589位点处存在miR-758-3p的结合位点.Pearson相关分析显示,食管癌组织miR-758-3p表达与NUSAP1 mRNA表达呈负相关(r=-0.732,P<0.01).食管癌组织miR-758-3p、NUSAP1 mRNA表达与组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与性别、年龄、病理类型、吸烟史、饮酒史、肿瘤最大径无关(P均>0.05).以食管癌组织miR-758-3p、NUSAP1 mRNA相对表达量的均数为临界值,将患者分为miR-758-3p高表达者(≥0.64,47例)与miR-758-3p低表达者(<0.64,50例)、NUSAP1 mRNA高表达者(≥3.19,43例)与NUSAP1 mRNA低表达者(<3.19,54例).生存分析发现,miR-758-3p高表达者3年累积生存率高于其低表达者,NUSAP1 mRNA高表达者3年累积生存率低于其低表达者(Log-rank χ2分别为5.682、6.918,P均<0.05).结论 食管癌组织miR-758-3p低表达、NUSAP1 mRNA高表达,二者表达变化与组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移以及患者预后密切相关.

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中核仁纺锤体相关蛋白1(NUSAP1)的表达情况,分析其与患者临床病理特征的关系.方法 收集新鲜NSCLC肿瘤组织及癌旁组织各10例,采用实时定量PCR和Western blot分别检测NUSAP1 mRNA和蛋白的表达;另收集69例NSCLC患者手术切除的癌组织及癌旁组织,采用免疫组织化学染色检测NUSAP1的表达情况,并分析其表达与患者临床病理特征的关系.结果 NSCLC组织中NUSAP1 mRNA及蛋白表达均显著高于癌旁组织(t值分别为3.401、31.89,P值均＜0.05);NUSAP1在NSCLC组织中的高表达率为59.42％,而在癌旁组织中的高表达率为15.94％,差异有统计学意义(x2=27.77,P＜0.05);NUSAP1在NSCLC组织中高表达与患者性别、年龄、TNM分期无关,但与肿瘤大小及有无淋巴结转移有关(x2值分别为5.445、18.034,P值均＜0.05).结论 NUSAP1在NSCLC组织中呈异常高表达,可能与NSCLC的发生、发展相关.

目的 探讨核仁纺锤体相关蛋白(NUSAP1)表达与人脑多形性胶质母细胞瘤(GBM)恶性进展及临床预后间的相关性.方法 以RT-PCR和免疫组化技术分析NUSAP1在GBM手术标本的表达水平.在TCGA数据库中分析该基因表达与GBM患者分子分型、生存期的相关性.采用基因沉默技术封闭该基因在U87细胞表达,CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期变化,并行体内致瘤试验.结果 与非肿瘤对照脑组织标本相比,NUSAP1在GBM表达明显上调,生存曲线分析显示,NUSAP1高表达者生存期显著降低(P＜0.01),间质型和神经元型GBM NUSAP1表达相对低于其他两型,且显著受PTEN缺失和IDH1突变等特定基因畸变状态影响.敲除NUSAP1可抑制GBM肿瘤细胞周期G2/M进展和细胞增殖.结论 NUSAP1表达与GBM进展和预后密切相关,是一个反映GBM预后的生物标志物,并具有潜在应用价值的治疗靶标.

目的:探讨胆管癌组织中核仁纺锤体相关蛋白1(Nusap1)的表达及临床意义.方法:通过GEPIA数据库分析Nusap1 mRNA在胆管癌组织及正常胆管组织中的表达情况;用免疫组化技术检测61例配对的胆管癌及癌旁组织中Nusap1蛋白表达水平,分析其与胆管癌患者临床参数、总生存期的关系.结果:GEPIA数据库分析显示,与正常组织比较,Nusap1 mRNA在胆管癌组织中高表达(P＜0.05);免疫组化结果显示,胆管癌组织中Nusap1的阳性表达率明显高于对应癌旁组织(47.5％vs.14.8％,P＜0.01);且其表达水平与患者临床TNM分期(P=0.001)、淋巴结转移(P=0.011)及术后生存状态(P=0.010)明显有关;Kaplan-Meier生存分析显示,Nusap1蛋白阳性患者术后中位生存时间为23个月,阴性患者术后中位生存时间为45个月,前者术后生存时间明显短于后者(P=0.000).结论:Nusap1在胆管癌中高表达,并与胆管癌进展和不良预后密切相关,有望成为胆管癌的预后指标和治疗的潜在靶点.

目的:检测核仁和纺锤体相关蛋白1(NUSAP1)在膀胱尿路上皮癌中的表达及对预后评估的价值.方法:采用免疫组化方法检测NUSAP1在84例膀胱尿路上皮癌组织及10例正常膀胱上皮组织中的表达情况,并分析其表达与临床病理特征的关系;采用Western blot检测NUSAP1蛋白在T24和SV-HUC-1细胞系中的表达;采用单因素和多因素COX回归分析评价NUSAP1在膀胱尿路上皮癌中的预后价值.结果:免疫组织化学结果显示NUSAP1在膀胱尿路上皮癌中的阳性表达率为72.62％,在正常膀胱上皮组织中的阳性表达率为10.00％,差异有统计学意义(P＜0.05).NUSAP1在膀胱尿路上皮癌中的高表达与患者性别、年龄、肿瘤数目均无关(P＞0.05),而与肿瘤复发、病理分级、临床分期、转移有关(P＜0.05).NUSAP1蛋白在T24细胞系中的表达明显高于SV-HUC-1细胞系,差异有统计学意义(P＜0.05).NUSAP1表达、临床分期和转移均为膀胱尿路上皮癌的独立预测因素.此外,Kaplan-Meier曲线表明,NUSAP1阳性表达的膀胱尿路上皮癌患者无进展生存时间(PFS)明显少于NUSAP1阴性表达者.结论:NUSAP1在膀胱尿路上皮癌中呈现高表达,且与肿瘤复发、病理分级、临床分期、转移有关,NUSAP1是膀胱尿路上皮癌独立危险因素,其高表达提示预后较差,具有一定的临床价值.

探讨核仁纺锤体相关蛋白1(NUSAP1)在非小细胞肺癌中的表达及其与患者预后的关系.方法 收集非小细胞肺癌及癌旁组织标本各50例,采用实时荧光定量PCR检测NUSAP1 mRNA的表达,采用免疫组化法检测NUSAP1蛋白的表达,采用在线数据库分析NUSAP1的表达及其与非小细胞肺癌患者预后的关系.结果 肺癌组织中NUSAP1 mRNA的表达水平高于癌旁组织( P＜0.05);NUSAP1蛋白在癌组织中的表达率为58.0%(29／50),在癌旁组织中的表达率为22.0%(11／50),差异有统计学意义(P＜0.05). NUSAP1蛋白的表达与患者的年龄和性别均无关(均P＞0.05),但与肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期均有关(均P＜0.05).在线数据库分析显示,NUSAP1 mRNA的表达水平与患者的总生存时间(OS)有关(P＜0.001);与NUSAP1高表达的患者比较,低表达患者的OS较长. Kaplan?Meier plotter在线数据库分析显示,NUSAP1 mRNA的表达与患者病理分级、临床分期、性别、化疗、吸烟史和组织分型均有关(均P＜0.05).结论 NUSAP1在非小细胞肺癌组织中过表达,与肿瘤的生长发展和患者的预后有关,可作为非小细胞肺癌患者潜在的预后标志物.