[目的]探究马铃薯磺肽素基因StPSK4特征及其在马铃薯抗病性中的功能分析,为马铃薯抗病育种提供理论依据.[方法]用生物信息学技术对StPSK4进行系统分析,转录组测序分析StPSK4的组织特异性、生物胁迫和非生物胁迫处理下的表达模式,检测StPSK4过表达植株对植物先天免疫反应情况和对青枯菌的敏感性.[结果]StPSK4基因的cDNA全长457 bp,编码100个氨基酸;StPSK4含有信号肽,其高级结构多由α-螺旋和无规则卷曲组成;PSK4的C端含有磺肽素序列DYIYTQ,StPSK4与茄科作物相似性均在80％以上;StPSK4在马铃薯芽和叶柄中高表达,对非生物胁迫(高温、盐)和生物胁迫(青枯菌、疮痂病菌)等响应剧烈;构建并获得过表达StPSK4的转基因马铃薯植株;过量表达StPSK4抑制马铃薯的ROS爆发、防御标记基因表达和对青枯病的抗病性.[结论]StPSK4可以响应高温和青枯病等多种逆境胁迫,过表达StPSK4抑制马铃薯的活性氧爆发、防御标记基因表达和对青枯病的抗性,证实StPSK4抑制马铃薯的抗病功能.

1例34岁女性患者为治疗鼻炎自行间断生食黄独零余子7或8个，间隔1年后再次生食黄独零余子1个，4 d后患者出现恶心及皮肤、巩膜黄染。实验室检查：丙氨酸转氨酶（ALT）732 U/L，天冬氨酸转氨酶（AST）597 U/L，γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）204 U/L，碱性磷酸酶（ALP）202 U/L，总胆红素（TBil）203.7 μmol/L，直接胆红素（DBil）122 μmol/L。腹部磁共振检查示早期肝硬化，肝脏瞬时弹性成像示早期肝纤维化；经实验室各项检查可排除病毒性肝炎、自身免疫性肝炎、肝豆状核变性、铁代谢异常等其他原因导致的肝损伤，考虑本例患者的肝损伤与黄独零余子有关。给予异甘草酸镁注射液、多烯磷脂酰胆碱注射液、注射用还原型谷胱甘肽和注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸和熊去氧胆酸等保肝药物治疗，42 d后，患者症状基本消失，实验室检查示TBil 55.3 μmol/L，DBil 18.1 μmol/L，ALT 24 U/L，AST 25 U/L，γ-GT 44 U/L，ALP 124 U/L。

1例48岁女性患者因记忆力下降口服复方苁蓉益智胶囊1.2 g（4粒），3次/d。约20 d后，患者出现恶心，纳差，尿黄和皮肤、巩膜黄染。停用复方苁蓉益智胶囊。停药7 d后，实验室检查：丙氨酸转氨酶（ALT）1 349 U/L，天冬氨酸转氨酶（AST）827 U/L，碱性磷酸酶（ALP）156 U/L，总胆红素（TBil）213.7 μmol/L，考虑为复方苁蓉益智胶囊致肝损伤。给予还原型谷胱甘肽、复方甘草酸苷、丁二磺酸腺苷蛋氨酸、地塞米松等药物治疗。患者食欲逐渐改善，黄疸逐渐消退。治疗36 d后复查：ALT 26 U/L，AST 30U/L，ALP 86U/L，TBil 27.2 μmol/L。考虑患者的肝损伤与复方苁蓉益智胶囊中的制何首乌有关。

该研究采用同源克隆与PCR扩增方法,从马铃薯品种‘Desiree'中克隆植物磺肽素受体基因StPSKR1和StPSKR2的全长cDNA,并对其进行生物信息学分析及亚细胞定位分析,为深入研究StPSKR1和StPSKR2基因在马铃薯生长发育和生物胁迫中的作用提供理论依据.结果 发现:(1)通过同源克隆与PCR扩增获得StPSKR1和StPSKR2的全长cDNA片段,并将其克隆到pGWB5-GFP载体;测序结果显示这2个基因编码的蛋白质与数据库给定的蛋白质序列保持一致,表明成功克隆到StPSKR1和StPSKR2基因.(2) StPSKR1位于马铃薯1号染色体上,cDNA全长3 042 bp,编码1 013个氨基酸,预测蛋白相对分子质量为112.16 kD,理论等电点6.27;StPSKR2位于7号染色体,cDNA全长3 135 bp,编码1 044个氨基酸,相对分子量为114.99 kD,理论等电点6.19.(3)生物信息学分析显示,StPSKR1和StPSKR2都属于跨膜蛋白.(4)亚细胞定位结果显示,StPSKR1和StPSKR2均定位于细胞膜上.

研究鹿瓜多肽注射剂的新鲜度、高相对分子质量物质、多肽含量测定、溶血与凝聚及生物学活性等指标,为鹿瓜多肽注射剂质量标准修订提供理论参考.首先,对影响终产品新鲜度的因素包括生物胺含量、黄曲霉毒素、甜瓜子原料的酸价和过氧化值等进行考察.建立丹磺酰氯柱前衍生-HPLC法测定鹿瓜多肽注射剂中8种生物胺的含量,方法学验证结果显示该法专属性、精密度、线性关系以及回收率等均良好,适用于鹿瓜多肽注射剂中生物胺类成分的检测,样品测定结果显示个别样品中检出较高浓度的尸胺;黄曲霉毒素、甜瓜子原料的酸价和过氧化值测定结果表明:部分生产原料甜瓜子存在霉变、酸败等问题,提示含动植物源性成分的多组分生化药质量标准应在新鲜度方面加强控制.其次,改进了鹿瓜多肽注射剂质量标准中高相对分子质量物质和多肽含量测定的方法.采用Tricine-SDS-PAGE电泳法代替凝胶色谱法测定高相对分子质量物质,提高了测定的准确性;采用试剂盒法代替福林酚法测定多肽含量,该法操作简便、专属性更强,可适用于高通量样品测定.最后,对鹿瓜多肽注射剂质量标准中缺失的溶血与凝聚、生物学活性测定项目进行了研究.研究结果显示,样品均无溶血与凝聚现象;鹿瓜多肽注射剂对单核巨噬细胞THP-1具有增殖抑制作用,且所检测样品的体外抗炎效果具有一定差异.优化后的检测方法更适用于鹿瓜多肽注射剂的质量检测,并为多组分生化药质量控制奠定了基础.

中药酸枣仁是鼠李科植物酸枣〔Ziziphous jujuba Mill.Var.spinosa(Bunge)Hu.ex H.F.Chou〕的干燥成熟种子,性平,味甘、酸,具有补肝、宁心、敛汗、生津之功,是最早被列为药食同源的中药之一,酸枣仁化学成分主要包括酸枣仁皂苷、酸枣仁黄酮、酸枣仁油等.现代药理研究表明,黄酮类化合物是其主要的活性成之一,黄酮类化合物主要活性成分有斯皮诺素及6'-阿魏酰斯皮诺素,具有镇静催眠、抗抑郁、抗焦虑、抗氧化以及提高记忆力等功效的作用.①镇静催眠作用:6-羟基黄酮与γ-氨基丁酸(GABA)受体/苯二氮草卓受体有很强的亲和力,通过影响GABA的含量的方式来影响睡眠;斯皮诺素显著延长由戊巴比妥所诱导的睡眠时间,缩短睡眠潜伏期,并成剂量依赖性,研究发现其主要是通过5-羟色胺(5-HT)的调节降低小鼠脑组织内多巴胺和盐酸去甲肾上腺素(NE)含量来发挥镇静催眠作用.②抗焦虑作用:斯皮诺素通过降低海马中NE的释放,抑制海马中5-HT的合成,降低血浆β-内啡肽含量,提高血清一氧化氮浓度来发挥抗焦虑作用,表明其作用机制与增加小鼠脑内GABA量、降低N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体1含量和谷氨酸表达有关.③抗抑郁作用:酸枣仁黄酮类物质通过调控血浆糖皮质激素,进而调控NMDA受体中NR1和NR2A/2B的表达来发挥抗抑郁作用.④抗氧化作用:酸枣仁总黄酮可改善D-半乳糖诱导的氧化损伤大鼠的记忆损伤及氧化应激作用,实验结果表明其主要通过调节牛磺酸和次牛磺酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢以及丙酮酸代谢发挥抗氧化损伤作用.⑤增强学习记忆的作用:斯皮诺素显著增加了海马体中磷酸化细胞外信号调节激酶和环腺苷酸结合蛋白酶的表达水平,从而起到增强学习记忆的作用.⑥对脑神经保护作用:酸枣仁总黄酮通过激活下丘脑室旁核cAMP-PKA-CREB信号通路,抑制脑组织c-fos基因表达和神经细胞凋亡,从而发挥脑神经保护作用.酸枣仁黄酮的药理学作用广泛多样,药理作用机制复杂,对于酸枣仁黄酮单体的研究,着重在于斯皮诺素的研究,其更加深入的药理作用及其他单体成分药理活性研究仍是有待研究的热点.本文对酸枣仁中的黄酮类化学成分的药理作用进行系统性总结,以期为酸枣仁的进一步的研究和临床应用提供参考.

描述植物中基于巯基的翻译后修饰蛋白质硫巯基化及其对靶蛋白的构象、活性、稳定性和亚细胞定位的改变和细胞代谢的调节,以及硫巯基化与其他翻译后修饰亚硝基化、次磺酰化、亚磺酰化、磺酰化和谷胱甘肽化的相互作用.分析植物中硫化氢(H2 S)信号自我放大及对信号分子活性氧、一氧化氮、糖、脱落酸、乙烯和褪黑素的关键代谢酶和信号蛋白的硫巯基化修饰.总结植物中H2 S信号通过对其代谢酶的硫巯基化修饰的自我放大及H2 S通过硫巯基化与活性氧、一氧化氮、糖、脱落酸、乙烯和褪黑素信号的交互作用.展望H2 S对其他植物激素生长素、赤霉素、细胞分裂素、油菜素内脂、茉莉酸、水杨酸和独脚金内酯的关键代谢酶和其他信号蛋白的硫巯基化修饰的效应.